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Constructing recombinant replication-defective adenoviral vectors that express glucose transporter-1 through in vitro ligation

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Neural Regeneration Research 2008年第4期3卷 456-460页

作者： fangcheng Li Junliang Li Ranyi Liu Xinke Xu Kaichang Yuan Zhonghua Wu Department of Neurosurgery Second Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University Guangzhou 510120 Guangdong Province China Central Laboratory for Prevention and Treatment of Tumor Sun Yat-sen University Guangzhou 510006 Guangdong Province China

BACKGROUND： We constructed a homologous recombination bacterial method based on the pAdEasy system, a widely used system, for generating recombinant adenoviral vectors that express glucose transporter- 1 （GLUT 1） in rats, OBJECTIVE： This study was designed to investigate the feasibility of generating recombinant replication-defective adenoviral vectors that express GLUT1 in rats by in vitro ligation based on the Adeno-X^TM system. DESIGN： An in vitro cell-based experiment. SETTING： This study was performed at the Linbaixin Medical Research Center of the Second Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University and Central Laboratory for Prevention and Treatment of Tumor, Sun Yat-sen University between January and August 2004. MATERIALS： Male, adult, Sprague Dawley rats were used to extract total RNA from brain tissue. E. coli DH5 a and human embryonic kidney 293 cells （heK293 cells） used in the present study were cryo-preserved by the Second Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University. Rabbit anti-rat GLUT1 polyclonal antibody （Chemicon, U.S.A.） and primers （Shanghai Boya Bioengineering Co., Ltd） were also used. METHODS： E1/E3-deleted replication-defective adenoviral vectors were used. Using in vitro ligation, the target gene was first sub-cloned into a shuttle vector plasmid to obtain the fragment containing target gene expression cassettes by enzyme digestion. Subsequently, the fragment was co-transformed with linearized adenoviral backbone vector into the E. coli strain. The recombinant adenoviral plasmid was transfected into heK293 cells to assembly recombinant adenoviral vectors with replication capabilities. The procedure was repeated several times for recombinant adenoviral vectors amplification. MAIN OUTCOME MEASURES： Efficiency of recombinant adenoviral vectors to express the target gene was measured by gene and protein expression through polymerase chain reaction and Western Blot assays, respectively. RESULTS： Results demonstrated that recombinant adenoviral

关键词： glucose transporter-1 cloning recombinant adenoviral vector

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The determination of poly-malic-acid in the fermentation broth of ***

The determination of poly-malic-acid in the fermentation bro...

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2017年浙江省微生物学会青年论坛——微生物与健康专题研讨会

作者： fangcheng Qiu Danfeng Zhou Peilian Wei School of Biological and Chemical Engineering Zhejiang University of Science and Technology Zhejiang Provincial Key Laboratory for Chemical and Biological Processing Technology of Farm Products

Poly-malic-acid(PMLA) is a water-soluble polymer formed by the interaction of malic acid *** its unique properties,including high water solubility,biocompatibility and biodegradability,PMA has attracted increasing attention in the biomedical,cosmetics,and food packaging *** can be produced by chemical synthesis and microbial *** fermentation with Aureobasidium pullulans has been the research focus in recent *** amount of PMLA can not be determined directly,it be detected by measure the amount of malic acid after *** for the determination of malic acid,HPLC and spectrophotometric method are usually *** is not widely used because of the requirement of high-cost instruments,and spectrophotometric method is usually not accurate or even can’t be used because of the disturbance of the colored substances produced in the fermentation broth of *** our study a new method for determining of PLMA was established,which is to precipitate the PMLA by ethanol to eliminate the disturbance of colored substance in the broth and then determined by spectrophotometric *** results showed PLMA can be precipitated almost completely with a volume ratio of 1:2.8(broth:ethanol),which was hydrolyzed and determined by spectrophotometric method,the results were very similar with that of *** method can be used to determine the amount of PLMA in fermentation broth of *** of HPLC.

关键词： Aureobasidium pullulans Poly-malic-acid Spectrophotometric method Determination

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Discovery of seismites in Upper Sinian stratiform lead-zinc deposits in Dadu River valley, Sichuan, China: Implication for ore genesis

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Science China Earth Sciences 2006年第11期49卷 1135-1146页

作者： LIN fangcheng1,2 & PAN Guitang2 1. Geoscience College, Chengdu University of Technology, Chengdu 610059, China 2. Chengdu Institute of Geology and Mineral Resources, Chengdu 610082, China 1. Geoscience College Chengdu University of Technology Chengdu 610059 China 2. Chengdu Institute of Geology and Mineral Resources Chengdu 610082 China

A number of lead-zinc sulphide deposits have been discovered in recent years in dolo- mitic rocks of the Upper Sinian Dengying Formation in the Dadu River valley region, Sichuan Province, China. The lead-zinc mineralization is closely associated with a black siliceous exhalite that has been traced over 50 km of strike. This makes Dadu River valley the most extensive stratiform non-ferrous sulphide horizon having been discovered to date in China. In a previous study by the first author (LIN), these deposits were recognised as belonging to the broad spectrum of lead-zinc sedimentary exhala- tive (SEDEX) deposits. In this paper, seismites and seismogenetic structures occurring in close association with the Dadu River valley mineralized zone are described. The close spatial and temporal relationship between the seismites and mineralization provides strong evidence for the hypothesis that the lead-zinc SEDEX deposits formed in direct response to earthquake activities around the Sinian-Cambrian boundary. The earthquakes are postulated to be an effective dynamic mechanism for triggering the upward migration of deep circulating ore fluids along synsedimentary growth faults and their exhalation onto the sea-floor to form the extensive deposits of stratiform lead-zinc sulphide ore.

关键词： seismites, earthquake, lead-zinc deposit, hydrothermal exhalation, Upper Sinian Dengying Age.

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黄河某水电站坝前岸坡倾倒变形体的工程地质特性及削坡治理方案研究

黄河某水电站坝前岸坡倾倒变形体的工程地质特性及削坡治理方案研...

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作者：方程成都理工大学

学位级别：硕士

本文根据现场地质调查、平硐岩体力学编录实测数据,论证了岸坡花岗岩岩体的“硬脆性”特征和“板裂”结构是控制岸坡变形的基本因素。岸坡变形之所以复杂的主要原因是以脆性花岗岩为特定岩性条件的“脆性折断型”倾倒变形。变形破坏的... 详细信息

本文根据现场地质调查、平硐岩体力学编录实测数据,论证了岸坡花岗岩岩体的“硬脆性”特征和“板裂”结构是控制岸坡变形的基本因素。岸坡变形之所以复杂的主要原因是以脆性花岗岩为特定岩性条件的“脆性折断型”倾倒变形。变形破坏的本质是近直立的脆性“板状”岩体,在重力弯矩作用下产生的”结构性倾倒-局部折断”特征。坡体内并不存在统一的滑移面,岩体破坏形式将以深度有限(30-50m)的浅层极强倾倒-折断岩体的崩滑破坏为主。这种模式能统一地解释为什么坡体表层已经发生了数十米的变形,还没有发生滑动失稳破坏以及坡体变形随深度增加迅速衰减的现象。岸坡岩体变形破裂现象的复杂形式、力学机理与岩体倾倒变形的强烈程度密切相关。对于“板裂化”花岗岩这类特殊岩体,岩层倾角变化、最大拉张变形、卸荷变形、风化程度、波速指标以及节理密度等六项指标能够较客观地反映岩体倾倒变形强烈程度和岩体质量,可将其作为“硬脆性”倾倒变形岩体的工程分类指标,据此建立该类岩体的工程分类标准。基于当前蓄水位2448m工况条件的数值计算显示,岸坡岩体变形破坏的主要形式是向坡外侧的倾倒变形,变形随深度增加迅速衰减,边坡前缘局部岩体发生塌滑破坏,计算结果与普遍发生的浅表层局部倾倒-解体-塌滑现象完全吻合。水库水位抬升至正常蓄水位高程2452m后,岩体变形破坏的基本形式将不会发生改变,即岩体变形破坏的基本形式仍然是倾倒变形,倾倒变形将进一步加剧,但没有发生整体滑移破坏的迹象。进一步的迭代计算显示,坡体的变形将随着时间而趋于收敛直至停止发展。基于上述研究成果,有关的设计及研究单位提出了两种不同思路的削坡治理方案,方案一主要是通过挖除极强倾倒(A类)和强倾倒上段(B1类)这两类潜在的不稳定岩体、适当降低坡度来达到治理目的;方案二则是通过挖除岸坡上部主体部分,以卸载并减小重力弯矩的方式来达到治理目的。数值分析成果显示,由于方案二对坡体下部A和B1类岩体处理不当,所以虽然挖方量较大但治理效果并不理想。鉴于问题难度和分歧极大,变形体深部的边界条件还需进一步查明,论文仅就削坡治理方案的合理性进行了探讨,其它方面的研究工作还在深入进行。

关键词：花岗岩板裂结构倾倒变形工程分类削坡

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Research on Human Body Recognition and Position Measurement Based on AdaBoost and RGB-D

Research on Human Body Recognition and Position Measurement ...

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第三十九届中国控制会议

作者： Zhuozhu Jian fangcheng Zhu Lingxuan Tang Harbin Institute of Technology（Shenzhen）

Recognition, detection and localization of the human body have been playing an important role in the development of robotics and interaction between machines and humans. But the speed and accuracy of target recognition and positioning are still not satisfying. To accurately identify the target body and measure the distance, a Haar-like classifier based on the AdaBoost algorithm can be used combining with an RGB-D camera to finish the task. The main process of this method is that after the Haar-like classifier has effectively recognized the target human body, we use the method of color segmentation to further extract the contour of the target body, and then maps the contour to the depth map and perform weighted summing with the depth map. The experimental results show that this method has high accuracy and strong practicability.

关键词： Human recognition position measurement the Haar-like classifier RGB-D camera

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综合物探技术在煤炭矿井水文地质中的应用研究

综合物探技术在煤炭矿井水文地质中的应用研究

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作者：方程成都理工大学

学位级别：硕士

我国国民经济和社会发展的主要能源是煤炭,在煤炭的开采过程中时常发生安全生产事故,其严重地威胁着矿工的生命安全。发生煤矿安全事故的原因不仅由开采地面的自然地质灾害而引起,而且还包括矿井下各类灾害所带来的影响。在煤炭生产中,... 详细信息

我国国民经济和社会发展的主要能源是煤炭,在煤炭的开采过程中时常发生安全生产事故,其严重地威胁着矿工的生命安全。发生煤矿安全事故的原因不仅由开采地面的自然地质灾害而引起,而且还包括矿井下各类灾害所带来的影响。在煤炭生产中,危害程度较严重的水害是矿井生产中仅次于瓦斯的第二大灾害。采空积水区问题的普遍性已经引起了各国的高度重视,现在许多建设工程都需要进行地质灾害评估,其中对于采空积水区的评估是极其重要的。运用地球物理法来探测矿井采空积水区是一种极其普遍的手段,同时也取得了一定的效果,瞬变电磁法和探地雷达法也在其中。然而,不同的探测方法具有各自不同的优点和不足。在探测过程中单一的物探方法可能会存在诸多问题,如方法本身的限制性和其方法的多解性,再加上受到地电干扰、地面情况、探测仪精度和探测深度等原因的影响,从而导致原始数据和处理结果的准确性和可靠性不高。对于地球物理勘探技术而言,结合两种或是两种以上的综合物探方法进行探测是很有必要的,这样可以各显其能、取长补短,为后续的工作提供了不可替代的保障。因具有受地形影响小、探测效率高、对低阻体反应明显等优点,瞬变电磁法常常被用于探测矿井采空区及其富水情况;但是此法只能利用视电阻率数据作为参考,并且在技术上存在一定盲区效应,可通过探地雷达法弥补这一缺失的信息,这样对矿井内部的异常特征予以确认。本文就对地球物理勘探方法在煤炭矿井水文地质中的应用进行了研究,结合煤矿勘探资料,详细分析了瞬变电磁法和探地雷达法在探测矿井采空积水区中的应用。不同地球物理方法的特色各不相同,通过发挥其各自的优势,达到了实现“一深一浅”的探测目的,使数据资料更加完整、准确,为矿区的勘探提供了依据。最后总结了取得的成果和存在的不足,为针对在煤炭矿井中实施地球物理勘探法提出相应建议。

关键词：瞬变电磁法探地雷达法矿井水文地质

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铸辗复合成形法兰坯高温变形行为及加工图

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机械工程学报 2016年第4期52卷 45-53页

作者：秦芳诚李永堂太原科技大学材料科学与工程学院太原030024

环件铸辗复合成形工艺具有缩短工艺流程、高效和节能节材等优点,研究铸态环坯在铸辗复合成形工艺下的高温变形行为,揭示其组织演变机理,是实现材料在该成形工艺中成形与成性的关键。在不同变形条件下对砂型铸造和离心铸造Q235B法兰坯进... 详细信息

环件铸辗复合成形工艺具有缩短工艺流程、高效和节能节材等优点,研究铸态环坯在铸辗复合成形工艺下的高温变形行为,揭示其组织演变机理,是实现材料在该成形工艺中成形与成性的关键。在不同变形条件下对砂型铸造和离心铸造Q235B法兰坯进行高温压缩试验,分析其流变应力的变化,推导出二者的本构方程。综合变形温度和应变速率对材料微观结构与性能的影响,建立基于动态材料模型的加工图。试验结果表明:二者的流变应力随着应变速率的增加和变形温度的降低而增大。离心铸造法兰坯的流变应力较低,动态再结晶易于发生,且功耗效率值及其变化幅度都要大于砂型铸造,表明了其显微组织变化剧烈,演变更加充分。结合二者的热加工图及其识别出的典型区域显微组织,获得了适合该法兰坯辗扩工艺的热力参数范围,离心铸造可为法兰坯铸辗复合成形工艺提供高质量的铸坯。

关键词：铸辗复合成形加工图离心铸造微观组织辗扩参数

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基于技术性贸易壁垒的农产品贸易结构分析

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农业经济问题 2007年第8期28卷 99-103页

作者：宇方成华中农业大学经济管理学院武汉430070

入世以来,我国农产品出口频频遭遇国外以质量、卫生和技术标准为借口的技术性贸易壁垒,出口规模受到制约,贸易损失很大。本文基于最新调查资料,在全面系统分析技术性贸易壁垒对我国农产品贸易的总体影响和结构影响的基础上,从政府与企... 详细信息

入世以来,我国农产品出口频频遭遇国外以质量、卫生和技术标准为借口的技术性贸易壁垒,出口规模受到制约,贸易损失很大。本文基于最新调查资料,在全面系统分析技术性贸易壁垒对我国农产品贸易的总体影响和结构影响的基础上,从政府与企业两个层面提出了我国应对农产品技术性贸易壁垒的政策建议。

关键词：技术性贸易壁垒农产品贸易贸易结构

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国家治理与社会成长:城市社区治理的中国情景

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南京社会科学 2019年第8期 55-63页

作者：袁方成华中师范大学政治与国际关系学院华中师范大学湖北经济与社会发展研究院

城市社区是国家治理与社会发展的基点。改革以来,城市社区的发展变化巨大,治理实践成就斐然。以治理现代化作为观察主线,我国的城市社区经历了从转型、建设到治理的阶段性主题变迁,反映了国家权力从收缩回归、扩张下沉转向嵌入渗透的实... 详细信息

城市社区是国家治理与社会发展的基点。改革以来,城市社区的发展变化巨大,治理实践成就斐然。以治理现代化作为观察主线,我国的城市社区经历了从转型、建设到治理的阶段性主题变迁,反映了国家权力从收缩回归、扩张下沉转向嵌入渗透的实践轨迹,社会从组织赋权、要素成长和主体能力提升的过程中得到全面的成长,国家与社会从改革之初的相互调适、逐步分化而迈向相互建构并整体转型,共同完善治理现代化的新格局。

关键词：国家治理社会城市社区

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铸辗成形大口径25Mn钢环件微织构及力学性能

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机械工程学报 2016年第8期52卷 112-118页

作者：秦芳诚李永堂太原科技大学材料科学与工程学院太原030024

根据铸辗复合成形工艺对大口径25Mn钢环件进行离心铸造和热辗扩工业试验以及对其调质处理,运用金相显微镜、扫描电镜和电子背散射衍射技术分析组织与织构,并采用拉伸与冲击试验等手段检测其力学性能。结果表明,辗扩件外形尺寸精确,组织... 详细信息

根据铸辗复合成形工艺对大口径25Mn钢环件进行离心铸造和热辗扩工业试验以及对其调质处理,运用金相显微镜、扫描电镜和电子背散射衍射技术分析组织与织构,并采用拉伸与冲击试验等手段检测其力学性能。结果表明,辗扩件外形尺寸精确,组织相对均匀,个别区域伴有不规则晶粒;微观织构组态主要为沿着//ND取向线分布的黄铜R织构{111}和取向密度为6.0的高斯织构{110},力学性能较好,但塑性稍微偏低;揭示拉伸和冲击断裂机理为解理与韧窝共存形式。调质后回火析出弥散分布的细小碳化物颗粒,晶粒更加细小均匀,大角度晶界所占比例为3/4;揭示织构演化表现为高斯织构沿着?-取向线逐渐向旋转立方织构{110}聚集转变,塑性性能得到明显提高,呈现典型的韧窝断裂。研究揭示通过离心铸造25Mn钢环坯直接热辗扩成形大口径环件是切实可行的,达到了环件成形/成性的双重目的。

关键词：铸辗成形 25Mn钢环件离心铸造热辗扩织构

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