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Preparation of an anti-diethylstilbestrol monoclonal antibody and development of an indirect competitive ELISA to detect diethylstilbestrol in biological samples

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Chinese Science Bulletin 2011年第8期56卷 749-754页

作者： LI WeiHua MENG Meng HE FangYang WAN YuPing XUE HuYin LIU Wei YIN WeiWei XU Jing feng caiwei WANG ShanLiang LU Xiao LIU JinTing XI RiMo School of Chemistry and Chemical Engineering Shandong University Jinan 250100 China College of Pharmacy and Tianjin key Laboratory of Molecular Drug Research Nankai University Tianjin 300071 China Beijing Wanger Biotechnology Co. Ltd. Beijing 102206 China Central Laboratory of Shandong Academy of Agricultural Sciences Jinan 250100 China

Based on the preparation of an anti-diethylstilbestrol(DES) monoclonal antibody,a simple and convenient indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) method for DES detection has been *** monoclonal antibody demonstrated high sensitivity to DES with an IC50 value of 275 pg mL-1 and detection limit(LOD) of 90 pg *** specificity of the assay was studied by measuring cross-reactivity of the antibody with structurally related compounds of ethinyl estradiol(<7%),estrone(<0.1%),estriol(<0.1%),and diethylstilbestrol benzoate(<0.1%).Chicken,fish,shrimp,urine and bile spiked with different concentration of DES were detected by the developed method,and the recovery rates were greater than 79.5%.Intra-and inter-assay variations were about 6%.This method exhibited high stability with a coefficient of variation less than 10% in buffer and in real *** LODs in fish/shrimp,liver,feed and urine spiked with DES were 600,600,4800 and 600 pg mL-1,*** results confirmed that the antibody to DES was successfully produced and could be used to establish ELISA methods for DES detection in food producing animals.

关键词： ELISA检测方法单克隆抗体己烯雌酚生物样品竞争间接酶联免疫吸附试验 DES

Preparation of a Salmonella LAMP Detection Kit

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Agricultural Biotechnology 2019年第6期8卷 97-99,103页

作者： Yuping WAN Xiaosheng WU Yu ZHANG Meihong DU Zhaoqin WANG caiwei feng Zhengmiao ZHAO Fangyang HE Beijing Kwinbon Biotechnology Co. Ltd.Beijing 102206China Beijing Engineering Technology Research Center of Food Safety Immune Rapid Detection Beijing 102206China Beijing center for physical&chemical analysis Beijing 100089China

[Objectives] This study was conducted to establish a method for rapid detection of Salmonella at the grassroots level, and a corresponding product was developed. [Methods] By analyzing the invA gene of Salmonella, two pairs of efficient, rapid and specific amplification primers were designed and screened for the six conserved domains of the gene, and the LAMP detection kit for Salmonella based on this method was produced. [Results] The method is simple, sensitive, rapid and specific. The minimum detection concentration is 10~2-10~3 CFU/ml. [Conclusions] It can be used in the self-inspection of food production enterprises and the on-site sampling inspection and rapid detection of large quantities of samples by grassroots food safety inspection and supervision departments.

关键词： LAMP Salmonella Rapid detection

三唑磷单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

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中国酿造 2016年第6期35卷 165-169页

作者：冯才伟何方洋黄健贾芳芳李行北京勤邦生物技术有限公司北京102206 北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心北京102206 北京市优质农产品产销服务站北京100101

通过三唑磷与乙酰氯反应,得到三唑磷半抗原,通过免疫动物得到抗三唑磷单克隆抗体,将其应用于能够检测蔬菜中三唑磷残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒,结果表明：该试剂盒对结球甘蓝中三唑磷的检测限为49.6 μg/kg,IC50为6.9 μg... 详细信息

通过三唑磷与乙酰氯反应,得到三唑磷半抗原,通过免疫动物得到抗三唑磷单克隆抗体,将其应用于能够检测蔬菜中三唑磷残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒,结果表明：该试剂盒对结球甘蓝中三唑磷的检测限为49.6 μg/kg,IC50为6.9 μg/L,加样回收率为70.0％～93.5％,三唑磷标准曲线线性范围为1～81 μ,g/L,批内、批间的相对标准偏差（RSD）＜ 10％,三唑磷单克隆抗体与毒死蜱、对硫磷的交叉反应率分别为2.3％,3.8％.4℃条件该试剂盒下能够保存12个月,稳定性较好.

关键词：三唑磷单克隆抗体 ELISA试剂盒

利巴韦林单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

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中国酿造 2016年第11期35卷 167-171页

作者：陈敏崔海峰冯才伟贾芳芳杨春艳武汉中粮肉食品有限公司湖北武汉430200 北京勤邦生物技术有限公司北京102206 北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心北京102206

首先合成出利巴韦林半抗原，通过免疫动物得到抗利巴韦林单克隆抗体，制备利巴韦林残留酶联免疫检测试剂盒，用于检测鸡肉、猪肉中利巴韦林残留量。结果表明：该试剂盒对鸡肉、猪肉的检测限分别为4．88μg/kg、4．42μg／kg，半抑制浓度... 详细信息

首先合成出利巴韦林半抗原，通过免疫动物得到抗利巴韦林单克隆抗体，制备利巴韦林残留酶联免疫检测试剂盒，用于检测鸡肉、猪肉中利巴韦林残留量。结果表明：该试剂盒对鸡肉、猪肉的检测限分别为4．88μg/kg、4．42μg／kg，半抑制浓度（IC50）为7．9μg／L，回收率为80％105％，试剂盒的标准曲线线性范围为0～81μg/L，批内、批间的相对标准标准偏差（RSD）均〈10％。4℃下能够保存12个月，稳定性较好。

关键词：利巴韦林半抗原制备酶联免疫法

饲料中硝基呋喃类药物免疫胶体金检测试纸条的研制

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饲料工业 2012年第23期33卷 35-38页

作者：何方洋冯才伟孙震赵正苗何丽霞北京勤邦生物技术有限公司北京102206

试验研究建立了一种基于免疫胶体金技术的硝基呋喃类药物快速检测方法。该方法对饲料中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因的最低检测限分别达到5、3、2、2μg/kg,对饲料样本检测的假阳性率为2%,假阴性率为0,可以应用于饲料样本中... 详细信息

试验研究建立了一种基于免疫胶体金技术的硝基呋喃类药物快速检测方法。该方法对饲料中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因的最低检测限分别达到5、3、2、2μg/kg,对饲料样本检测的假阳性率为2%,假阴性率为0,可以应用于饲料样本中硝基呋喃类药物的快速检测和现场筛查。

关键词：呋喃唑酮呋喃它酮呋喃西林呋喃妥因检测胶体金试纸条

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一种快速检测呕吐毒素的胶体金试纸条

中国酿造 2013年第11期32卷 91-93页

作者：李萌冯才伟贾芳芳冯静扶胜武汉中粮肉食品有限公司湖北武汉430200 北京勤邦生物技术有限公司北京102206

利用胶体金免疫层析法,研制了一种能够快速检测黄豆中呕吐毒素含量的试纸条。通过试验,胶体金试纸条对呕吐毒素的检测限是1μg/g,对玉米赤霉烯酮毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲毒素A等无交叉反应,假阳性率和假阴性率均为0,检测时间为10min。... 详细信息

利用胶体金免疫层析法,研制了一种能够快速检测黄豆中呕吐毒素含量的试纸条。通过试验,胶体金试纸条对呕吐毒素的检测限是1μg/g,对玉米赤霉烯酮毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲毒素A等无交叉反应,假阳性率和假阴性率均为0,检测时间为10min。试纸条能够准确、可靠、简便、快速地检测黄豆中残留的呕吐毒素,适合大量样品的现场检测。

关键词：呕吐毒素胶体金试纸条黄豆快速检测

检测动物组织中金刚烷胺残留的酶联免疫试剂盒的研制

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畜牧与兽医 2016年第11期48卷 27-31页

作者：冯才伟黄健王兆芹乔健崔廷婷吴国娟中国农业大学动物医学院北京100094 北京勤邦生物技术有限公司北京102206 北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心北京102206 北京市优质农产品产销服务站北京100101 北京农学院动物科学技术学院北京102206

通过对金刚烷胺分子结构进行改造,制备得到了金刚烷胺半抗原及人工抗原,免疫动物,制备特异性单克隆抗体。在筛选金刚烷胺单克隆抗体的基础上,建立酶联免疫检测方法,并研制出检测动物组织中金刚烷胺残留的试剂盒。该试剂盒工作范围为0.5... 详细信息

通过对金刚烷胺分子结构进行改造,制备得到了金刚烷胺半抗原及人工抗原,免疫动物,制备特异性单克隆抗体。在筛选金刚烷胺单克隆抗体的基础上,建立酶联免疫检测方法,并研制出检测动物组织中金刚烷胺残留的试剂盒。该试剂盒工作范围为0.5～40.5μg/L,线性回归方程为y=-2.069x＋0.493,IC_（50）为2.1μg/L,相关系数R2为0.998;试剂盒检测限为0.25μg/kg,金刚烷胺回收率在82.5%～91.0%,批内、批间变异系数均小于10%;与阿莫西林、苯唑西林、头孢噻呋三种类似结构药物均无交叉反应。该试剂盒灵敏度高、检测限低、特异性强、操作简便,可广泛用于动物组织中金刚烷胺残留量的测定。

关键词：金刚烷胺酶联免疫试剂盒动物组织

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β-激动剂类兽药残留检测技术研究进展

饲料工业 2013年第3期34卷 56-59页

作者：万宇平凌莉高东微冯才伟赵涛刘中勇北京望尔生物技术有限公司北京102206 广东检验检疫技术中心广东广州510623 番禺出入境检验检疫局广东广州511400 湛江出入境检验检疫局广东湛江524022

文中介绍了β-激动剂类兽药的特性、残留危害以及目前国内外主要的检测方法和技术,包括高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱质谱联用法、毛细管电泳技术、免疫分析技术以及生物传感分析法,并对此类药物残留分析前景进行了展望。

关键词：克伦特罗沙丁胺醇检测

基于胶体金免疫层析技术的赤霉素快筛试纸条的研制

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食品科技 2020年第2期45卷 348-352页

作者：崔廷婷吴小胜冯才伟马玉华曹东山何方洋北京勤邦生物技术有限公司北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心北京102206 北京望尔生物技术有限公司北京102206

研制快速检测豆芽中赤霉素的快筛试纸条。采用免疫层析技术,以胶体金为标记物制备赤霉素单克隆抗体-胶体金偶联物,以竞争抑制模式制备赤霉素胶体金免疫层析试纸条。该试纸条对豆芽中赤霉素的检测限为100 μg/kg,灵敏度为98%,特异性为97%... 详细信息

研制快速检测豆芽中赤霉素的快筛试纸条。采用免疫层析技术,以胶体金为标记物制备赤霉素单克隆抗体-胶体金偶联物,以竞争抑制模式制备赤霉素胶体金免疫层析试纸条。该试纸条对豆芽中赤霉素的检测限为100 μg/kg,灵敏度为98%,特异性为97%,假阴性率为2%,假阳性率为3%。该方法操作简便,具有较高的灵敏度和特异性,可广泛应用于豆芽中赤霉素残留的现场筛查和检测。

关键词：赤霉素胶体金免疫层析技术试纸条