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Rationally designed mariner vectors for functional genomic analysis of Actinobacillus pleuropneumoniae and other Pasteurellaceae species by transposon-directed insertion-site sequencing (TraDIS)

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Animal Diseases 2021年第4期1卷 249-261页

作者： janine T.Bossé Yanwen Li Leon G.Leanse Liqing Zhou Roy R.Chaudhuri Sarah E.Peters jinhong Wang Gareth A.Maglennon Matthew T.G.Holden duncan j.maskell Alexander W.Tucker Brendan W.Wren Andrew N.Rycroft Paul R.Langford on behalf of the BRaDPT consortium Section of Paediatric Infectious Disease Department of Infectious DiseaseImperial College LondonSt.Mary’s CampusLondonUK Wellman Center for Photomedicine Harvard Medical SchoolBostonUSA The Applied Diagnostic Research and Evaluation Unit St George’s University of LondonLondonUK Department of Veterinary Medicine University of CambridgeCambridgeUK Department of Molecular Biology and Biotechnology University of SheffieldSheffieldUK Department of Pathology and Pathogen Biology The Royal Veterinary CollegeHatfieldUK The Wellcome Trust Sanger Institute CambridgeUK School of Medicine University of St AndrewsSt AndrewsUK The University of Melbourne ParkvilleVictoriaAustralia s Faculty of Infectious&Tropical Diseases London School of Hygiene&Tropical MedicineLondonUK

Comprehensive identification of conditionally essential genes requires efficient tools for generating high-density transposon libraries that, ideally, can be analysed using next-generation sequencing methods such as Transposon Directed Insertion-site Sequencing (TraDIS). The Himar1 (mariner) transposon is ideal for generating near-saturating mutant libraries, especially in AT-rich chromosomes, as the requirement for integration is a TA dinucleotide, and this transposon has been used for mutagenesis of a wide variety of bacteria. However, plasmids for mariner delivery do not necessarily work well in all bacteria. In particular, there are limited tools for functional genomic analysis of Pasteurellaceae species of major veterinary importance, such as swine and cattle pathogens, Actinobacillus pleuropneumoniae and Pasteurella multocida, respectively. Here, we developed plasmids, pTsodCPC9 and pTlacPC9 (differing only in the promoter driving expression of the transposase gene), that allow delivery of mariner into both these pathogens, but which should also be applicable to a wider range of bacteria. Using the pTlacPC9 vector, we have generated, for the first time, saturating mariner mutant libraries in both A. pleuropneumoniae and P. multocida that showed a near random distribution of insertions around the respective chromosomes as detected by TraDIS. A preliminary screen of 5000 mutants each identified 8 and 14 genes, respectively, that are required for growth under anaerobic conditions. Future high-throughput screening of the generated libraries will facilitate identification of mutants required for growth under different conditions, including in vivo, highlighting key virulence factors and pathways that can be exploited for development of novel therapeutics and vaccines.

关键词： Mariner Transposon TraDIS Pasteurellaceae Actinobacillus pleuropneumoniae Pasteurella multocida

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急性下消化道出血

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英国医学杂志中文版 2010年第2期13卷 121-123页

作者： Andrew j Edwards Giles F maskell 张体江(译) 龚启勇(校) Royal Cornwall Hospital Truro TR1 3LJ 四川大学华西医院影像医学中心放射科

老年女性，81岁，因经直肠大量流血12小时入院，患者有缺血性心脏病，曾作冠状动脉支架置入，并有慢性阻塞性肺部疾病史。一直服用阿司匹林但未服用其他抗凝药，无其他任何相关病史。

关键词：急性下消化道出血冠状动脉支架置入缺血性心脏病肺部疾病史慢性阻塞性老年女性阿司匹林相关病史

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E605防治吹绵介壳虫之初步报告

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昆虫学报 1954年第1期 99-102页

作者：张宗炳北京大学

Boyce氏首先试用了E605在防治介壳虫之试验中,而获得良好之结果,渠所试验之对象为不同种类之介壳虫十余种,其中包括有吹绵介壳虫,其所用之药为25％之可湿性粉,加水稀释至.03至.05％之浓度(本试验中所用浓度即以此为根据)。对於各种不同... 详细信息

Boyce氏首先试用了E605在防治介壳虫之试验中,而获得良好之结果,渠所试验之对象为不同种类之介壳虫十余种,其中包括有吹绵介壳虫,其所用之药为25％之可湿性粉,加水稀释至.03至.05％之浓度(本试验中所用浓度即以此为根据)。对於各种不同之介壳虫,在各种不同之地区、气候及季节所用量大有出入。根据某些学者

关键词： E605 柑橘

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