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Graphene oxide and molecular beacons-based multiplexed DNA detection by synchronous fluorescence analysis

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Science China Chemistry 2013年第3期56卷 380-386页

作者： xiang dongshan ZHENG AiHua LUO Ming JI XingHu HE ZhiKe Key Laboratory of Analytical Chemistry for Biology and Medicine(Ministry of Education) College of Chemistry and Molecular Sciences Wuhan University

We have developed a multiplexed DNA detection method based on graphene oxide(GO) and molecular beacons(MBs) by synchronous fluorescence analysis,demonstrated it by an oligonucleotide sequence of wild-type HBV(T1) and a reverse-transcription oligonucleotide sequence of the RNA fragment of HIV(T2) as a model *** the absence of targets DNA,FAM-tagged free MB probes(P HBV) and ROX-tagged free MB probes(P HIV) are adsorbed on GO via-interactions between DNA nucleobases and nucleosides,and the-rich GO brings the fluorophores of MB and GO into close *** then,the fluorescence of fluorophores is quenched by *** in the presence of targets DNA,P HBV and P HIV hybridize with their targets DNA resulting in the formation of double-stranded DNA(dsDNA),causing the separation of P HBV and P HIV from the surface of GO and the recovery of the fluorescence of fluorophores(FAM and ROX) *** simultaneous detection of T1 and T2 can be realized by measuring fluorescence signals of FAM and ROX,*** the optimum conditions,the fluorescence intensities of two dyes all exhibit good linear dependence on their target DNA concentration in the range of 5×10-11-5×10-9 *** detection limit of T1 is 3×10-11 M(3),and that of T2 is 2×10-11 *** with other methods for DNA detection based on GO,the proposed method has some advantages including higher selectivity and shorter analytical time.

关键词： multiplexed DNA molecular beacons synchronous fluorescence analysis graphene oxide

菜用紫云英中硒赋存形态及含硒有机化合物提取工艺研究

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湖北民族大学学报（自然科学版） 2024年第2期42卷 151-157页

作者：王小红王晨谷祥勇马威向东山翟琨硒资源研究与生物应用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学硒科学与产业研究院湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

针对现蕾前菜用紫云英中硒的赋存形态不明确及含硒有机化合物的提取工艺不成熟的问题,以氢氧化钠溶液作为提取溶剂,研究了硒在菜用紫云英中的赋存形态。以有机硒提取率为指标,采用响应面分析法,考察了提取富硒菜用紫云英粉末中有机硒化... 详细信息

针对现蕾前菜用紫云英中硒的赋存形态不明确及含硒有机化合物的提取工艺不成熟的问题,以氢氧化钠溶液作为提取溶剂,研究了硒在菜用紫云英中的赋存形态。以有机硒提取率为指标,采用响应面分析法,考察了提取富硒菜用紫云英粉末中有机硒化合物的影响因素,并优化了主要含硒有机化合物的提取工艺。实验表明,紫云英中有机硒含量占总硒的92.49%,其中碱溶蛋白硒占总硒的69.45%;有机硒的最佳提取工艺条件是:氢氧化钠溶液的摩尔浓度为0.15 mol/L,氢氧化钠溶液用量为样品体积的20倍,提取时间为2 h,提取次数为2次。结果说明,紫云英中的硒以有机结合态为主,有机结合态硒在碱性溶液中提取效果最好,在对紫云英中有机硒进行提取时,主要应考虑提取溶液的酸碱性、提取溶液的用量、提取时间及提取次数等因素。该结果可为菜用紫云英的进一步开发利用提供科学依据。

关键词：菜用紫云英有机硒蛋白硒赋存形态响应面原子荧光光谱法提取工艺

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苯酚-硫酸比色法测定竹节参水溶多糖的含量

江苏农业科学 2010年第4期38卷 279-280页

作者：向东山湖北民族学院化学与环境工程学院湖北恩施445000

采用苯酚-硫酸比色法，测定竹节参水溶多糖的含量。以标准葡萄糖为对照，在486nm处测定吸光度。当多糖含量为5～100μg／mL时，质量浓度与吸光度呈明显线性关系。在此范围内，建立竹节参多糖质量浓度（μg／mL）和吸光度之间的回归方程... 详细信息

采用苯酚-硫酸比色法，测定竹节参水溶多糖的含量。以标准葡萄糖为对照，在486nm处测定吸光度。当多糖含量为5～100μg／mL时，质量浓度与吸光度呈明显线性关系。在此范围内，建立竹节参多糖质量浓度（μg／mL）和吸光度之间的回归方程为Y=116．72x＋0．1787（1-2=0．9996），加样回收率为99．77％，RSD值为1．16％。

关键词：竹节参多糖苯酚-硫酸法吸光度

利用无标记分子信标及核酸染料TOTO-3检测转基因食品

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食品科学 2015年第2期36卷 174-178页

作者：向东山生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北民族学院化学与环境工程学院湖北恩施445000

利用无标记的分子信标,结合核酸染料TOTO-3,采用同步荧光分析法,建立一种高灵敏、高选择性的花椰菜花叶病毒Ca MV 35S启动子核酸片段(目标DNA)的定量检测方法。在优化条件下,目标DNA浓度为2×10-10~200×10-10 mol/L之间时,TOTO-3的荧... 详细信息

利用无标记的分子信标,结合核酸染料TOTO-3,采用同步荧光分析法,建立一种高灵敏、高选择性的花椰菜花叶病毒Ca MV 35S启动子核酸片段(目标DNA)的定量检测方法。在优化条件下,目标DNA浓度为2×10-10~200×10-10 mol/L之间时,TOTO-3的荧光强度(?I)与目标DNA浓度(C)之间具有良好的线性关系,其拟合的回归方程为?I=2.022 2 C+18.411 1。方法检出限(3σ)为1×10-10 mol/L。该方法重复性好、灵敏度高、选择性好、检出限低。利用该方法,结合不对称聚合酶链式反应技术,实现了对转基因食品的检测。

关键词：无标记分子信标 TOTO-3 荧光转基因食品检测

基于正交旋转组合设计的藤茶总黄酮提取工艺优化研究

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中国酿造 2010年第2期29卷 116-119页

作者：向东山湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000

采用四因子二次正交旋转组合设计,利用超声提取法研究了提取温度、提取时间、提取次数及料液比4个因素对藤茶总黄酮得率的影响,并用DPS9.50分析软件建立4个因素对黄酮得率的数学模型。结果表明,所得回归方程达到极显著水平,无失拟因素... 详细信息

采用四因子二次正交旋转组合设计,利用超声提取法研究了提取温度、提取时间、提取次数及料液比4个因素对藤茶总黄酮得率的影响,并用DPS9.50分析软件建立4个因素对黄酮得率的数学模型。结果表明,所得回归方程达到极显著水平,无失拟因素存在。各因子对黄酮得率的影响由大到小的顺序依次为:提取次数>提取温度>料液比>提取时间。最优化的提取工艺条件为:提取温度90℃,提取时间30min,提取次数3次,料液比为1∶25。

关键词：藤茶总黄酮二次正交旋转组合设计数学模型

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竹节人参中氨基酸含量及组成分析

中国酿造 2009年第5期28卷 157-158页

作者：向东山湖北省生物资源保护与利用重点实验室湖北民族学院生物技术研究所湖北恩施445000

以竹节人参根为原料,采用氨基酸自动分析仪对样品各种氨基酸的含量进行检测,并对其组成进行比较与分析。结果表明,竹节人参中总氨基酸含量较高,各种人体必需氨基酸种类齐全,且比例均衡。在各种人体必需氨基酸中,第一限制氨基酸为蛋氨酸... 详细信息

以竹节人参根为原料,采用氨基酸自动分析仪对样品各种氨基酸的含量进行检测,并对其组成进行比较与分析。结果表明,竹节人参中总氨基酸含量较高,各种人体必需氨基酸种类齐全,且比例均衡。在各种人体必需氨基酸中,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸。

关键词：竹节人参氨基酸含量组成

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分子信标的构建及其应用研究进展

应用化学 2014年第1期31卷 11-19页

作者：向东山翟琨湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室恩施445000 湖北民族学院化学与环境工程学院恩施445000

分子信标(molecular beacon,MB)是一种寡聚核苷酸荧光探针,其具有灵敏度高、特异性强、操作简单以及不必与未反应的探针分离即可实时检测等优点,在分子生物学和基因组学及分子医学等领域具有十分重要的应用价值。本文介绍了近年来出现... 详细信息

分子信标(molecular beacon,MB)是一种寡聚核苷酸荧光探针,其具有灵敏度高、特异性强、操作简单以及不必与未反应的探针分离即可实时检测等优点,在分子生物学和基因组学及分子医学等领域具有十分重要的应用价值。本文介绍了近年来出现的各种新型分子信标的结构及工作原理,概述了分子信标技术在生命科学领域中的应用,展望了分子信标技术的发展趋势。

关键词：分子信标构建生化分析应用

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富硒玉米籽粒中含硒蛋白质提取工艺的研究

中国粮油学报 2008年第2期23卷 48-51页

作者：向东山翟琨湖北省生物资源保护与利用重点实验室、湖北民族学院生物技术研究所恩施445000 湖北民族学院化学与环境工程学院恩施445000

采用单因素试验及L9（3^4）正交试验，以含硒蛋白质及硒得率为指标，研究了影响富硒玉米籽粒中含硒蛋白质提取的因素，得到含硒蛋白质提取的最佳生产工艺条件。最佳工艺条件为：氢氧化钠浓度0．05mol／L、用量为样品体积20倍、提取时间2... 详细信息

采用单因素试验及L9（3^4）正交试验，以含硒蛋白质及硒得率为指标，研究了影响富硒玉米籽粒中含硒蛋白质提取的因素，得到含硒蛋白质提取的最佳生产工艺条件。最佳工艺条件为：氢氧化钠浓度0．05mol／L、用量为样品体积20倍、提取时间2h、超声波破碎时间5 min。

关键词：玉米籽粒硒单因素递变正交试验工艺条件

基于Hoechst33258荧光染料检测单链DNA的方法研究

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化学学报 2011年第12期69卷 1450-1456页

作者：曾国平向东山何治柯湖北第二师范学院武汉430205 武汉大学化学与分子科学学院生物医学分析化学教育部重点实验室武汉430072

根据Hoechst与ssDNA作用时不产生荧光或荧光很弱,而与dsDNA作用时荧光增强的原理,将待测ssDNA与互补ssDNA杂交形成dsDNA,实现Hoechst染料对ssDNA的检测.文中研究了不同序列、不同长度、互补链及碱基错配链等杂交产物与Hoechst染料作用... 详细信息

根据Hoechst与ssDNA作用时不产生荧光或荧光很弱,而与dsDNA作用时荧光增强的原理,将待测ssDNA与互补ssDNA杂交形成dsDNA,实现Hoechst染料对ssDNA的检测.文中研究了不同序列、不同长度、互补链及碱基错配链等杂交产物与Hoechst染料作用的荧光强度的变化规律.同时以H1N1禽流感病毒DNA特定序列为例建立了定量检测ssDNA的新方法.线性范围为5.6×10-10～3.0×10-8 mol/L,线性关系:y=24.005x+0.4858,R2=0.9967,检出限为4.8×10-10 mol/L.该方法具有操作简单,检测快速,灵敏度高和选择性好等优点.

关键词：荧光染料Hoechst ssDNA 杂交荧光光谱定量分析