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采食高淀粉高油日粮奶牛的泌乳性能、乳成分变化及乳腺差异表达基因筛选

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华南农业大学学报 2024年第1期45卷 31-41页

作者：吴柯韩印如李斌刘肃然贾坤毕研亮刘德武郭勇庆华南农业大学动物科学学院广东广州510642 华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国农业科学院饲料研究所北京100081

【目的】研究高淀粉高油日粮对奶牛泌乳性能和乳腺组织转录组的影响,探索乳脂下降综合征(Milk fat depression,MFD)的分子机制。【方法】选用8头荷斯坦泌乳奶牛,随机分为对照组和处理组(4头/组),采用2×2反转试验设计,分为2期,每期23 d... 详细信息

【目的】研究高淀粉高油日粮对奶牛泌乳性能和乳腺组织转录组的影响,探索乳脂下降综合征(Milk fat depression,MFD)的分子机制。【方法】选用8头荷斯坦泌乳奶牛,随机分为对照组和处理组(4头/组),采用2×2反转试验设计,分为2期,每期23 d,期间2组对调。每期的前16 d,对照组奶牛饲喂低淀粉低油的基础饲粮,对照组日粮的泌乳净能为6.78 MJ/kg;处理组奶牛在基础饲粮基础上添加266 g/kg(DM基础)细粉碎玉米和46 g/kg(DM基础)大豆油;后7 d 2组奶牛均喂基础饲粮,处理组日粮的泌乳净能为7.66 MJ/kg。分别于每期的第1、4、7、10、13、16、19和22天测定产奶量和乳成分,第16天采集乳腺组织用于检测转录本的变化。【结果】与对照组相比,处理组第13、16天奶牛的干物质采食量和产奶量显著降低(P<0.05);饲喂高淀粉高油饲粮7 d后乳脂率开始降低,其中,第10、13、16和19天的乳脂率和乳脂产量显著降低(P<0.05);第13、16和19天的乳蛋白、乳糖和非脂固形物含量显著提高(P<0.05)。在奶牛乳腺对照组和处理组中共检测到235个显著差异表达的基因,其中,64个上调、171个下调。GO分析表明,差异表达基因主要与炎症反应、α−氨基酸代谢、有机氮化合物代谢、细胞发育、脂质生物合成和脂肪细胞分化等相关;KEGG分析表明,差异表达基因主要与轴突导向、NF-κB信号通路、钙信号通路等相关。结合差异表达基因与泌乳性能的相关性分析,本研究筛选出了部分与脂质调控相关的基因作为研究奶牛MFD状态下脂质代谢的候选基因,包括在乳腺中下调表达的FGFR4、VDR、HTR2B、CCL21和TYRP1。【结论】高淀粉高油饲粮饲喂奶牛降低了干物质采食量、产奶量和乳脂率,提高了乳蛋白、乳糖和非脂固形物含量,下调了奶牛乳腺中脂肪酸合成相关基因的表达。本研究为科学配制日粮和研究MFD的分子机制研究提供了数据参考。

关键词：高淀粉高油奶牛乳腺转录组泌乳性能差异表达基因

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乳酸菌和纤维素酶对马蹄渣和玉米蛋白粉混合青贮饲料品质及体外瘤胃发酵特性的影响

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动物营养学报 2024年第5期36卷 3340-3351页

作者：赵超陈琼李越郭勇庆刘德武孙宝丽华南农业大学动物科学学院广州510642

本试验旨在评价不同添加剂对马蹄渣和玉米蛋白粉混合青贮饲料发酵品质、化学成分、微生物数量和体外瘤胃发酵特性的影响。将马蹄渣和玉米蛋白粉按照76∶24的比例混合均匀作为青贮原料,在青贮时分别进行如下处理:1)不添加乳酸菌和纤维素... 详细信息

本试验旨在评价不同添加剂对马蹄渣和玉米蛋白粉混合青贮饲料发酵品质、化学成分、微生物数量和体外瘤胃发酵特性的影响。将马蹄渣和玉米蛋白粉按照76∶24的比例混合均匀作为青贮原料,在青贮时分别进行如下处理:1)不添加乳酸菌和纤维素酶(CON组);2)添加1×108CFU/g乳酸菌(LAB组);3)添加50 U/g纤维素酶(CE_(50)组);4)添加100 U/g纤维素酶(CE100组);5)添加1×108CFU/g乳酸菌+50 U/g纤维素酶(LAB+CE50组);6)添加1×108CFU/g乳酸菌+100 U/g纤维素酶(LAB+CE_(100)组)。每组设3个重复,每个重复设2个平行。混合青贮60 d后打开青贮袋取样进行分析。结果显示:在化学成分方面,与CON组相比,青贮时组合添加乳酸菌和纤维素酶可以显著降低混合青贮饲料的中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性洗涤木质素(ADL)、纤维素、半纤维素含量(P<0.05),同时显著提高粗蛋白质(CP)含量(P<0.05),其中以LAB+CE100组最高。发酵品质方面,LAB、LAB+CE50以及LAB+CE100组混合青贮饲料的pH及氨态氮(NH3-N)含量与CON组相比显著降低(P<0.05),同时乳酸和乙酸含量与CON组相比显著升高(P<0.05),且以LAB+CE100组最高;单独添加乳酸菌或组合添加乳酸菌与纤维素酶均可显著提高混合青贮饲料中乳酸菌的数量(P<0.05),并降低不良细菌数量或抑制不良细菌的增殖。在体外产气方面,随着发酵时间的延长,各组的产气量不断升高,其中LAB+CE100组的产气速率、48 h产气量最高。在体外瘤胃发酵参数方面,各组发酵液pH均在6.56~6.84,且与发酵时间呈负相关趋势;各添加剂组发酵液中总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、丁酸含量与CON组相比均显著增加(P<0.05);添加乳酸菌的各添加剂组发酵液中乙酸/丙酸比值与CON组相比显著降低(P<0.05)。由此可见,组合添加乳酸菌和纤维素酶可改善马蹄渣和玉米蛋白粉混合青贮饲料的品质和体外瘤胃发酵特性,其中以添加1×108CFU/g乳酸菌+100 U/g纤维素酶的效果最好。

关键词：乳酸菌纤维素酶马蹄渣玉米蛋白粉混合青贮

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饲喂青贮黄梁木代替青贮玉米川中黑山羊肝转录组的表达分析

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畜牧兽医学报 2024年第1期55卷 232-244页

作者：张德安杨若渚刘杰刘德武邓铭柳广斌孙宝丽郭勇庆李耀坤华南农业大学动物科学学院广州510642 华南农业大学畜禽育种国家地方联合工程研究中心广州510642 华南农业大学广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室广州510642

旨在分析饲喂青贮黄梁木替代50%青贮玉米的川中黑山羊肝转录组测序中差异表达的mRNA、lncRNA及其靶基因,挖掘饲喂青贮黄梁木影响川中黑山羊肝代谢的关键基因,从而探究青贮黄粱木的饲喂效果。试验共选取6只雄性健康川中黑山羊[5月龄,平... 详细信息

旨在分析饲喂青贮黄梁木替代50%青贮玉米的川中黑山羊肝转录组测序中差异表达的mRNA、lncRNA及其靶基因,挖掘饲喂青贮黄梁木影响川中黑山羊肝代谢的关键基因,从而探究青贮黄粱木的饲喂效果。试验共选取6只雄性健康川中黑山羊[5月龄,平均体重(21.07±4.05)kg]并随机分为两组,试验组为青贮黄梁木替代50%青贮玉米组,对照组为青贮玉米组。试验期间采用全混合日粮(TMR)进行饲喂。于试验期的最后1 d对山羊进行屠宰并取其肝,提取肝组织的RNA,构建文库后使用高通量测序技术进行转录组测序,以P<0.05为阈值筛选出差异mRNA和lncRNA,进行生物学功能富集分析并构建靶向关系网络。再从差异表达lncRNA和mRNA中各随机选择3个基因,采用RT-qPCR进行验证分析。结果表明,共发现差异表达的mRNA有1696个,其中943个上调,753个下调;差异表达lncRNA共有33个,其中22个上调,11个下调。结合差异表达lncRNA的靶基因与差异表达mRNA的交集基因的富集分析发现,NDUFA10、NDUFB11、NDUFS 5参与肝功能相关的信号通路,如多糖代谢过程、葡聚糖分解代谢过程、纤维素分解代谢等。结合lncRNA靶基因预测发现,GSTA3、GSTA 4基因参与肝功能相关的信号通路如药物代谢-细胞色素P450及细胞色素P450对异源物质的代谢等代谢通路。本研究发现,在饲喂青贮黄梁木川中黑山羊的肝组织中,NDUFA10、NDUFB11、NDUFS 5以及GSTA3、GSTA 4等可能从营养物质代谢和毒素代谢等方面影响肝功能。

关键词：青贮黄粱木川中黑山羊肝 lncRNA mRNA

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河北滦南滨海湿地土壤重金属污染特征及评价

海洋技术学报 2024年第1期43卷 55-62页

作者：王久良刘朋飞刘德武李跃河北省地质矿产勘查开发局第五地质大队河北唐山063000 河北省海洋地质环境调查中心河北唐山063000

滨海湿地作为一种具有多种功能和蕴含丰富资源的生态系统,是人类重要的生存环境之一。湿地土壤重金属污染问题是当前湿地科学领域内的热点话题。为研究河北省滦南滨海湿地重金属污染特征,本文利用单因子指数法、内梅罗综合污染指数法和... 详细信息

滨海湿地作为一种具有多种功能和蕴含丰富资源的生态系统,是人类重要的生存环境之一。湿地土壤重金属污染问题是当前湿地科学领域内的热点话题。为研究河北省滦南滨海湿地重金属污染特征,本文利用单因子指数法、内梅罗综合污染指数法和地累积指数法对重金属污染状况进行评价。结果表明:铜(Cu)、锌(Zn)、铬(Cr)、铅(Pb)、镉(Cd)的单因子质量指数均小于1.0,说明研究区重金属含量小于土壤背景值,土壤未受到污染。内梅罗综合指数法Cu、Zn、Cr、Pb、Cd指数均小于0.7,表明滦南湿地土壤重金属污染水平处于未污染。湿地各区域重金属地累积指数为无污染或较轻污染,其中Pb污染为较轻污染,监测点主要与人类活动有关。利用地累积指数分析认为Pb在湿地北区为轻度污染水平,经调查发现该区域主要为居民点,人类活动频繁,其他重金属均无污染。河北滦南滨河湿地土壤未受到重金属污染,湿地土壤环境较好。

关键词：滨海湿地重金属污染特征评价

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MLTS-LS算法在矿浆细度检测中的应用

有色金属（选矿部分） 2024年第6期 116-123页

作者：曾常熙刘德武罗显芝刘太岸江西铜业集团德兴铜矿江西上饶334200

针对传统矿浆细度检测的离线筛分法效率低且不能及时反馈至上层磨矿系统的问题,为开发出细度自动检测技术,提出一种曲面拟合算法,即:基于最小二乘法改进的移动最小截平方法(MLTS-LS,Moving Least Trimmed Square-Least Square)对矿浆细... 详细信息

针对传统矿浆细度检测的离线筛分法效率低且不能及时反馈至上层磨矿系统的问题,为开发出细度自动检测技术,提出一种曲面拟合算法,即:基于最小二乘法改进的移动最小截平方法(MLTS-LS,Moving Least Trimmed Square-Least Square)对矿浆细度数据进行曲面拟合,以达到快速检测矿浆细度的目的。首先,通过细度检测试验采集矿浆细度三维离散数据;其次,计算分析“Nearest”、“Linear”、“Cubic”、“V4”和传统的最小二乘法的曲面拟合评价指标,提出一种改进的插值算法;最后,将“MLTS-LS”算法应用于矿浆细度三维离散数据的拟合。结果显示,“MLTS-LS”算法的和方差值与均方差值明显小于其他算法,且其确定系数值与校正决定系数值均接近于1,表明“MLTS-LS”算法对矿浆细度三维离散数据的拟合效果较好。

关键词： MLTS-LS算法曲面拟合细度检测

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复杂性肛瘘的中西医结合诊疗体会一例

基层中医药 2024年第3期3卷 1-5页

作者：薛晓梦刘德武龙景乾贵州中医药大学贵州贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003 不详

肛瘘是肛管直肠与皮肤之间形成的一种慢性炎症的异常通道,是一种较为难处理的肛肠良性疾病,若放之不管,不积极处理可能导致其有恶变的风险。目前来说,手术治疗是治疗该病的首要选择,但其中配合中药特色挂线治疗,缓慢切割,逐步愈合,再配... 详细信息

肛瘘是肛管直肠与皮肤之间形成的一种慢性炎症的异常通道,是一种较为难处理的肛肠良性疾病,若放之不管,不积极处理可能导致其有恶变的风险。目前来说,手术治疗是治疗该病的首要选择,但其中配合中药特色挂线治疗,缓慢切割,逐步愈合,再配合术后中药熏洗与涂擦,能极大程度提高肛瘘的治愈率。因此,对于反复发作的复杂性肛瘘,找到其内口位置及其瘘道进而行手术治疗是至关重要的,且术后中药熏洗联合中药药膏进行换药也是促进伤口快速愈合的必不可少的一步。

关键词：复杂性肛瘘挂线生肌玉红膏

雄激素受体抑制剂恩杂鲁胺对山羊卵泡颗粒细胞增殖凋亡的影响

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畜牧兽医学报 2024年第5期55卷 2022-2031页

作者：董书餐毛帅翔伍翠莹李耀坤孙宝丽郭勇庆邓铭刘德武柳广斌华南农业大学动物科学学院广州510642

旨在通过使用恩杂鲁胺探究雄激素受体(AR)对山羊卵泡颗粒细胞增殖凋亡的影响。本研究首先对山羊卵泡颗粒细胞进行体外分离培养,然后利用显微镜观察和CCK8探究颗粒细胞的恩杂鲁胺适合培养浓度;之后将试验分为3个组,即空白对照组(不做处理... 详细信息

旨在通过使用恩杂鲁胺探究雄激素受体(AR)对山羊卵泡颗粒细胞增殖凋亡的影响。本研究首先对山羊卵泡颗粒细胞进行体外分离培养,然后利用显微镜观察和CCK8探究颗粒细胞的恩杂鲁胺适合培养浓度;之后将试验分为3个组,即空白对照组(不做处理)、阴性对照组(DMSO处理)和试验组(恩杂鲁胺处理),每个组均设置3个重复;然后利用EDU检测颗粒细胞的增殖情况,使用Caspase3活性与细胞凋亡检测试剂盒检测颗粒细胞的凋亡情况,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测颗粒细胞增殖凋亡相关基因和蛋白的表达情况。结果表明,AR抑制剂恩杂鲁胺能够显著地抑制颗粒细胞的增殖和降低颗粒细胞中CCND1、PCNA和MKI67基因的mRNA水平,并且还能够显著抑制CCND1、PCNA和β-catenin蛋白的表达;此外,恩杂鲁胺还能够促进山羊卵泡颗粒细胞的凋亡,显著提高山羊卵泡颗粒细胞中BAX和BCL2的mRNA水平,但不影响BAX和BCL2的蛋白表达,另外恩杂鲁胺虽然没有影响CASP3基因的mRNA水平但能够提高Caspase 3的活性。这些结果表明,恩杂鲁胺抑制AR活性后能够影响颗粒细胞中β-catenin、PCNA、CCND1、Caspase 3等的表达,参与调控颗粒细胞的增殖凋亡。

关键词：山羊颗粒细胞 AR 恩杂鲁胺增殖凋亡

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基于网络药理学探讨芪榆三黄膏治疗肛肠术后创面愈合不良的作用机制

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云南中医药大学学报 2024年第2期47卷 55-62页

作者：卢鑫刘德武龙景乾蔡猛彭景贵州中医药大学贵州贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003

目的基于网络药理学探讨芪榆三黄膏治疗肛肠术后创面愈合不良的作用机制。方法采用中医药系统药理学数据库(TCMSP)对芪榆三黄膏的活性成分进行筛选,并利用Swiss Target Prediction数据库预测其活性成分的潜在靶点;使用Genecards数据库... 详细信息

目的基于网络药理学探讨芪榆三黄膏治疗肛肠术后创面愈合不良的作用机制。方法采用中医药系统药理学数据库(TCMSP)对芪榆三黄膏的活性成分进行筛选,并利用Swiss Target Prediction数据库预测其活性成分的潜在靶点;使用Genecards数据库、Disgenet数据库和OMIM数据库检索肛肠病术后创面愈合不良的相关靶点;通过STRING数据库构建药物与疾病交集靶点的蛋白互作网络(PPI),获得芪榆三黄膏治疗肛肠病术后创面愈合不良的关键靶标;运用DAVID数据库对关键靶标进行基因本体论(GO)功能与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,并搭建疾病-通路-靶点-成分-药物网络。结果筛选得到芪榆三黄膏的药效成分91个、药物靶点154个、肛肠术后创面愈合不良靶点679个,最终得到药物-疾病关键靶点26个,富集分析后获得175个GO功能项目和68条KEGG信号通路。结论芪榆三黄膏的活性成分可经PI3K-Akt、IL-17、MAPK、AGE-RAGE等通路,作用于TNF、IL-2、AKT1、EGFR、GSK3B等靶点,来发挥抑制炎症反应、促进血管再生、调控细胞增殖和凋亡等作用。

关键词：网络药理学芪榆三黄膏肛肠术后创面愈合不良

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奶牛蹄病发病原因及防治措施研究进展

中国畜禽种业 2024年第7期20卷 114-123页

作者：吴雨谦邓铭刘德武刘建营郭建超郭勇庆华南农业大学动物科学学院广东广州510642 广东省种畜禽质量检测中心广东广州510665 广东省农业技术推广中心广东广州510145

当前我国畜牧行业呈现出规模化、集约化养殖模式发展趋势,蹄病作为奶牛三大疾病之一,危害我国奶牛业健康发展。该文通过整理分析,回顾了近年来关于奶牛蹄病的相关研究,归纳分析不同蹄病的发病原因和临床症状,提出从环境管理、饲料营养... 详细信息

当前我国畜牧行业呈现出规模化、集约化养殖模式发展趋势,蹄病作为奶牛三大疾病之一,危害我国奶牛业健康发展。该文通过整理分析,回顾了近年来关于奶牛蹄病的相关研究,归纳分析不同蹄病的发病原因和临床症状,提出从环境管理、饲料营养、遗传育种等方面进行综合防治,以期为我国奶牛业健康发展提供参考。

关键词：奶牛蹄病防治措施