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miR-25 modulates triacylglycerol and lipid accumulation in goat mammary epithelial cells by repressing PGC-1beta

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2018年第4期9卷 868-877页

作者： Liuan Ma Huiling Qiu Zhi Chen Li Li Yan Zeng Jun Luo deming gou Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering College of Life Sciences and OceanographyShenzhen UniversityShenzhen 518060GuangdongChina Biomedical Engineering Health and Environmental EngineeringShenzhen Technology UniversityShenzhen 518000GuangdongChina Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture College of Animal Science and TechnologyNorthwest A&F UniversityYangling 712100ShaanxiChina

Background: The goat(Caprahircus) is one of the most important livestock animals. Goat milk fat is an important component in the nutritional quality of goat milk. Growing evidence points to the critical roles of microRNAs(miRNAs) in lipid ***: Using a highly sensitive method of S-poly(T) plus for miRNAs detection, we analyze the expression patterns of 715 miRNAs in goat mammary gland tissues at different stages of lactation. We observed that miR-25 expression had an inverse relationship with milk production. Overexpression of miR-25 significantly repressed triacylglycerol synthesis and lipid droplet accumulation. To explore the regulatory mechanism of miR-25 in milk lipid metabolism,we analyzed its putative target genes with bioinformatics analysis followed by 3′-UTR assays. Peroxisome proliferative activated receptor gamma coactivator 1 beta(PGC-1 beta), a key regulator of lipogenics was identified as a direct target of miR-25 with three specific sites within its 3′-UTR. In addition, miR-25 mimics in goat mammary epithelial cells reduced the expressions of genes involved in lipid ***: Taken together, our results show miR-25 is potentially involved in lipid metabolism and we reveal the function of the miR-25/PGC-1 beta regulatory axis during lactation.

关键词： Goat mammary epithelial cells Lipid miR-25 PGC-1beta Triacylglycerol

A direct real-time polymerase chain reaction assay for rapid high-throughput detection of highly pathogenic North American porcine reproductive and respiratory syndrome virus in China without RNA purification

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2015年第1期6卷 22-28页

作者： Kang Kang Keli Yang Jiasheng Zhong Yongxiang Tian Limin Zhang Jianxin Zhai Li Zhang Changxu Song Christine Yuan gou Jun Luo deming gou College of Animal Science and Technology Northwest A&F University College of Life Sciences Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic EngineeringShenzhen University Hubei Key Laboratory of Animal Embryo and Molecular Breeding Institute of Animal Husbandry and VeterinaryHubei Academy of Agricultural Sciences Shenzhen Ao Dong Inspection and Testing Technology Co .Ltd Veterinary Medicine Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences Northwestern University

Background： Porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）, and particularly its highly pathogenic genotype （HP-PRRSV）, have caused massive economic losses to the global swine industry. Results： To rapidly identify HP-PRRSV, we developed a direct reaL-time reverse transcription polymerase chain reaction method （dRT-PCR） that could detect the virus from serum specimen without the need of RNA purification Our dRT-PCR assay can be completed in 1.5 h from when a sample is received to obtaining a result. Additionally, the sensitivity of dRT-PCR matched that of conventional reverse transcription PCR （cRT-PCR） that used purified RNA The lowest detection limit of HP-PRRSV was 6.3 TCIDs0 using dRT-PCR. We applied dRT-PCR assay to 144 field samples and the results showed strong consistency with those obtained by cRT-PCR. Moreover, the dRT-PCR method was able to tolerate 5-20% （v/v） serum. Conclusions： Our dRT-PCR assay allows for easier, faster, more cost-effective and higher throughput detection of HP-PRRSV compared with cRT-PCR methods. To the best of our knowledge, this is the first report to describe a real-time RT-PCR assay capable of detecting PRRSV in crude serum samples without the requirement for purifying RNA. We believe our approach has a great potential for application to other RNA viruses.

关键词： Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Real-time RT-PCR

An improved Tet-on system in micro RNA overexpression and CRISPR/Cas9-mediated gene editing

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2019年第4期10卷 1089-1100页

作者： Kang Kang Lian Huang Qing Li Xiaoyun Liao Quanjin Dang Yi Yang Jun Luo Yan Zeng Li Li deming gou Department of Biochemistry and Molecular Biology Carson International Cancer CenterShenzhen University Health Sciences CenterShenzhenGuangdong 518060People’s Republic of China Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture College of Animal Science and TechnologyNorthwest A&F UniversityYanglingShaanxi 712100People’s Republic of China Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering College of Life Sciences and OceanographyShenzhen UniversityXueyuan Ave 1066ShenzhenGuangdong 518060People’s Republic of China

Background: Tetracycline(Tet)-regulated expression system has become a widely applied tool to control gene activity. This study aimed to improve the Tet-on system with superior regulatory ***: By comprehensively comparing factors of transactivators, Tet-responsive elements(TREs), orientations of induced expression cassette, and promoters controlling the transactivator, we developed an optimal Tet-on system with enhanced inducible efficiency and lower leakiness. With the system, we successfully performed effective inducible and reversible expression of micro RNA, and presented a more precise and easily reproducible fine-tuning for confirming the target of a mi RNA. Finally, the system was applied in CRISPR/Cas9-mediated knockout of nuclear factor of activated T cells-5(NFAT5), a protective transcription factor in cellular ***: This study established an improved Tet-on system for powerful and stringent gene regulation in functional genetic studies.

关键词： CRISPR/Cas9 Doxycycline microRNA NFAT5 Tetracycline

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浅埋暗挖隧道管棚变形监测及受力机制分析

岩石力学与工程学报 2007年第6期26卷 1258-1264页

作者：苟德明阳军生张戈长沙理工大学桥梁与结构工程学院湖南长沙410076 中南大学土木建筑学院湖南长沙410075

在土江冲隧道进口段采用应变计对管棚纵向变形进行监测,根据现场测试结果分析管棚在隧道开挖过程中的受力特性,讨论管棚的作用机制。对管棚的刚性固定端Winkler弹性地基梁模型进行改进,建立浅埋暗挖隧道管棚受力的弹性固定端双参数弹性... 详细信息

在土江冲隧道进口段采用应变计对管棚纵向变形进行监测,根据现场测试结果分析管棚在隧道开挖过程中的受力特性,讨论管棚的作用机制。对管棚的刚性固定端Winkler弹性地基梁模型进行改进,建立浅埋暗挖隧道管棚受力的弹性固定端双参数弹性地基梁模型,推导出管棚的扰度方程及应力、应变计算公式,提出求解方法。将弹性固定端双参数弹性地基梁模型应用于土江冲隧道管棚作用机制的分析,计算结果与实测结果吻合较好,说明采用弹性固定端双参数弹性地基梁模型分析管棚受力特征是可行的。

关键词：隧道工程浅埋隧道管棚变形监测受力机制

偏压隧道抗滑桩回填反压失效原因分析及处治措施

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中国科技信息 2010年第6期 55-58页

作者：苟德明邓少军贵州省交通规划勘察设计研究院

在某软弱围岩偏压隧道中采用抗滑桩回填反压作为抗偏压措施,但在隧道施工过程中因洞内坍塌引起仰坡滑移开裂及支护结构变形破坏,本文分析了抗滑桩回填反压失效原因,并结合现场实际情况采用了相应的处治措施,使隧道施工顺利进行,为类似... 详细信息

在某软弱围岩偏压隧道中采用抗滑桩回填反压作为抗偏压措施,但在隧道施工过程中因洞内坍塌引起仰坡滑移开裂及支护结构变形破坏,本文分析了抗滑桩回填反压失效原因,并结合现场实际情况采用了相应的处治措施,使隧道施工顺利进行,为类似工程总结了经验和教训。

关键词：偏压隧道软弱围岩抗滑桩回填反压失效

高速公路路堤下暗挖隧洞施工引起的路基沉降实例分析

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现代隧道技术 2010年第1期47卷 60-65,71页

作者：苟德明龚尔民阳军生贵州省交通规划勘察设计研究院贵州550001 中南大学土木建筑学院长沙410075

在高速公路路堤下进行暗挖隧洞施工将不可避免地对围岩产生扰动,从而引起地层位移和路基沉降,过大的路基沉降将影响高速公路的正常运营,因此分析和控制路基沉降是高速公路路堤下隧洞设计与施工的难点和重点。以黔东火电厂排洪及供水隧... 详细信息

在高速公路路堤下进行暗挖隧洞施工将不可避免地对围岩产生扰动,从而引起地层位移和路基沉降,过大的路基沉降将影响高速公路的正常运营,因此分析和控制路基沉降是高速公路路堤下隧洞设计与施工的难点和重点。以黔东火电厂排洪及供水隧洞为实例,采用FLAC3D软件分析了隧洞施工对高速公路路基沉降的影响特点。计算结果表明,加强超前支护是控制地层位移和路基沉降的有效手段,采用大管棚及超前小导管注浆技术能有效控制路基沉降并保证高速公路正常运营。在隧洞施工过程中对路基沉降进行了详细监测,监测结果表明隧洞开挖对高速公路路基有一定扰动,但对高速公路正常运营基本无影响。

关键词：高速公路路堤隧洞施工地层位移路基沉降

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贵州公路隧道洞内排水系统改进与应用实践

公路交通技术 2024年第4期40卷 59-66,75页

作者：苟德明吴铭芳贵州省交通规划勘察设计研究院股份有限公司贵阳550082

针对贵州早期建设的公路隧道洞内排水系统不合理,导致隧道排水不畅、渗漏水病害频发等问题,采用回顾分析方法,对不同时期贵州公路隧道的洞内排水系统特点进行了探讨和总结。结果表明:1)早期的“圆形中心排水沟+Ω形路侧边沟”排水系统... 详细信息

针对贵州早期建设的公路隧道洞内排水系统不合理,导致隧道排水不畅、渗漏水病害频发等问题,采用回顾分析方法,对不同时期贵州公路隧道的洞内排水系统特点进行了探讨和总结。结果表明:1)早期的“圆形中心排水沟+Ω形路侧边沟”排水系统中心水沟断面小,预制安装施工易出现接头错位、纵坡起伏等缺陷,Ω形路侧边沟易发生碾压破损;2)首次改进的“矩形中心排水沟+U形路侧边沟”排水系统加大了中心水沟断面,现浇施工能保证中心水沟断面和坡度顺直,改善了中心沟的排水能力,U形路侧边沟能避免被车轮碾压破损,但该排水系统仍存在横向排水路径较长、易发生淤堵、不便于检查维修及渗漏水病害处治等不足;3)再次改进的“三沟排水+梯形路侧边沟”排水系统缩短了横向排水路径,降低了横向导水管淤堵风险,增设的路侧排水暗沟能有效汇集围岩地下水,便于隧道渗漏水病害处治,更适合贵州地形地质复杂、降雨丰富、地下水易结晶等建设条件;4)在隧道排水系统改进和实践基础上,提出的可维护性排水系统设计构想增加了排水管和中心排水沟的可维护性,可为后续公路隧道的建设提供指导和借鉴。

关键词：公路隧道排水系统改进与应用可维护性

高速公路隧道下伏小煤窑采空区洞内注浆处治技术

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林业工程学报 2018年第5期3卷 142-149页

作者：苟德明田娇李佳佳张永兴贵州省交通规划勘察设计研究院股份有限公司贵阳550082 南京林业大学南京210037

高速公路隧道下伏小煤窑采空区对衬砌结构稳定影响较大,给隧道施工带来较大风险与潜在危害,按现行技术细则要求对下伏采空区处治范围大、费用高、施工难。笔者以鱼洞Ⅰ号隧道为实例,根据下伏小煤窑采空区规模和特点提出隧道开挖后洞内... 详细信息

高速公路隧道下伏小煤窑采空区对衬砌结构稳定影响较大,给隧道施工带来较大风险与潜在危害,按现行技术细则要求对下伏采空区处治范围大、费用高、施工难。笔者以鱼洞Ⅰ号隧道为实例,根据下伏小煤窑采空区规模和特点提出隧道开挖后洞内注浆进行处治措施,通过洞内物探、钻探等手段探明采空区具体位置,采用数值模拟对洞内注浆处治效果进行分析,通过工程实践保证了隧道施工及结构安全。结果表明:隧道下伏采空区对隧道围岩及衬砌结构稳定性影响较大,使得隧道围岩及支护结构最大竖向位移分别达到-0.223 8 m和+0.312 2 m,隧道底板与采空区顶板之间的围岩大部分处于塑性变形状态;现行隧道下伏采空区稳定性评价及处治范围偏于保守,地表注浆处治费用高、难度大;隧道洞内注浆处治下伏小煤窑采空区具有较好效果,隧道结构变形处于可接受范围,可保证隧道施工及结构安全。对于无序开采、资料匮乏、回采率低等隧道下伏小煤窑采空区,采取洞内注浆措施进行处治,可显著减小采空区处治费用及施工难度,为类似工程建设提供参考和借鉴。

关键词：高速公路隧道小煤窑下伏采空区洞内注浆

去乙酰化酶SIRT1在血管衰老中的作用机制研究进展

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老年医学与保健 2020年第6期26卷 901-904页

作者：王玉娜苟德明宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 深圳大学生命与海洋科学学院广东深圳518060

衰老是指生物个体的正常生理功能出现衰退的过程[1],体内表现为多种组织器官的退行性变化,血管衰老是引起人体器官和组织衰老的重要病理生理基础,是众多老年病的主要发病机制,动脉粥样硬化、心力衰竭和高血压等老年人易发病都由血管衰... 详细信息

衰老是指生物个体的正常生理功能出现衰退的过程[1],体内表现为多种组织器官的退行性变化,血管衰老是引起人体器官和组织衰老的重要病理生理基础,是众多老年病的主要发病机制,动脉粥样硬化、心力衰竭和高血压等老年人易发病都由血管衰老导致。

关键词：退行性变化血管衰老主要发病机制动脉粥样硬化生物个体作用机制研究心力衰竭老年病