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Effect of Viral Antigen Levels on the Serological Response and Efficiency of the Binary Ethylenimine-Inactivated Bluetongue Virus Serotype-16 Vaccine

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World Journal of Vaccines 2016年第4期6卷 47-63页

作者： Le Li Haisheng Miao defang liao Meiling Kou Lin Gao Huachun Li Yunnan Veterinary and Animal Science Institute Kunming China

Bluetongue (BT) is a serious hemorrhagic disease of ruminants caused by bluetongue virus (BTV). Inactive BTV vaccines have been successful in field trials in some areas, and inactivated vaccines are considered safer. However, information about the effect of the viral antigen level on the serological response and efficiency of the inactive BTV-16 vaccine is lacking. In the present study, the serological response and efficiency of the viral antigen concentration in the binary ethylenimine-inactivated Chinese BTV serotype-16 vaccine were investigated. The viral antigens in the viral suspension (VS) were quantified using a modified BTV AC-ELISA method. Four batches of vaccine containing 1, 5, 10, and 50 μg/ml of viral antigen were generated from the VS. Four groups of naive Chinese sheep were vaccinated with the different vaccine batches, and the serological response and vaccine efficiency were investigated before and after challenge infection. The vaccines containing 10 and 50 μg/ml of viral antigen induced significant ELISA and neutralizing antibody titers 14 days after vaccination, whereas the vaccines containing 1 and 5 μg/ml of viral antigen did not have these effects. A booster immunization at 21 days enhanced all groups’ antibody titers;however, the increased titer was related to the viral antigen level. In contrast to the serological response, the viral antigen level of the vaccines did not have a significant effect on the vaccine efficiency. With the exception of one sheep from the 5 μg/ml viral antigen group, all vaccinated sheep from the four antigen level groups showed strong resistance to infection based on their clinical symptoms, rectal temperatures and viremia. Collectively, these data suggested that viral antigen levels from 1 to 50 μg/ml had a significant effect on the serological response of the animals but a limited effect on the vaccine efficiency. The BTV-16 vaccine containing 1 μg/ml of viral antigen was sufficient to achieve high efficiency, but

关键词： Blue-Tongue Virus Serotype-16 Binary Ethylenimine-Inactivated Vaccine Viral Antigen Level Antibody Efficiency

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1100kV变压器套管抗震性能

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高电压技术 2017年第6期43卷 2033-2041页

作者：马国梁廖德芳何畅谢强同济大学建筑工程系上海200092

为评估某型号1 100 kV变压器陶瓷套管的抗震性能,对该型套管进行了有限元分析和振动台试验。有限元分析和振动台试验得到了套管的自振频率和振型以及套管在地震波激励下的加速度、应变和位移响应。有限元分析基本预测了套管的动力特性... 详细信息

为评估某型号1 100 kV变压器陶瓷套管的抗震性能,对该型套管进行了有限元分析和振动台试验。有限元分析和振动台试验得到了套管的自振频率和振型以及套管在地震波激励下的加速度、应变和位移响应。有限元分析基本预测了套管的动力特性和地震响应。结果表明:该型特高压变压器瓷套管前3阶的模态频率都在地震动的主要频率影响范围内,套管的振型为弯曲变形,阻尼比仅为0.009 8;在单向幅值为0.5g(g为重力加速度)的地震激励下,套管没有出现结构性破坏;套管的加速度响应以第1和2阶模态振动响应为主;套管空气侧瓷套底部的变截面处的抗拉正应变达432με(ε为应变),根部抗拉正应变为120με;套管顶部和底部的位移响应分别达92mm和12 mm;套管法兰处的弯曲刚度发生了较大变化,法兰处的抗弯刚度仅为相邻瓷套抗弯刚度的1/7。

关键词：特高压变压器瓷套管有限元分析振动台试验地震响应抗震性能

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登革病毒及其所致疾病的研究概况

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云南畜牧兽医 2005年第3期 14-15页

作者：廖德芳云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224

登革病毒所致疾病包括登革热、登革出血热及登革休克综合征,是全球分布最广、发病最多的一种虫媒传染病,近年发病呈上升趋势,严重威胁人类健康。文章概述了登革热病原学、流行病学、发病机制、临床表现、诊断进展、治疗、预防和控制等。

关键词：登革病毒登革热登革出血热登革休克综合征传染病

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1100kV气体绝缘开关设备瓷套管抗震性能振动台试验研究

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高电压技术 2016年第8期42卷 2596-2604页

作者：谢强马国梁何畅廖德芳朱墨翟同济大学建筑工程系上海200092

为评估某型号1 100 k V特高压(UHV)气体绝缘开关设备(GIS)瓷套管的抗震性能,将其连同支撑筒和支架一起安装在振动台上,开展了特高压气体绝缘开关设备瓷套管模拟地震的振动台试验。试验采用符合特高压标准反应谱的人工波激励该瓷套管,并... 详细信息

为评估某型号1 100 k V特高压(UHV)气体绝缘开关设备(GIS)瓷套管的抗震性能,将其连同支撑筒和支架一起安装在振动台上,开展了特高压气体绝缘开关设备瓷套管模拟地震的振动台试验。试验采用符合特高压标准反应谱的人工波激励该瓷套管,并在试验前后用白噪声对其进行激振,获得了在白噪声和人工波激励下套管关键部位的加速度、应变和位移响应。结果表明:在峰值加速度为0.4g(g表示重力加速度)的人工波作用下,套管没有出现机械性破坏;该型号特高压瓷套管的基本振型为弯曲变形,阻尼比为0.004;支架和支撑筒对套管的加速度放大效应达1.64;从结构抗震的角度,在幅值为0.4g的单向人工波作用下,瓷套管的安全系数为3.0。

关键词：特高压气体绝缘开关设备瓷套管振动台试验地震响应放大系数抗震性能

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Full genome sequence of the first bluetongue virus serotype 21（BTV-21） isolated from China:evidence for genetic reassortment between BTV-21 and bluetongue virus serotype 16（BTV-16）

Full genome sequence of the first bluetongue virus serotype ...

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第六次学术研讨会

作者： Shaomin Qin Heng Yang Yixuan Zhang Zhanhong Li Jun Lin Lin Gao defang liao Yingying Cao Pengfei Ren Huachun Li Jianmin Wu Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology Guangxi Veterinary Research Institute

蓝舌病（Bluetongue,BT）是由蓝舌病毒（bluetongue virus,BTV）引起反刍动物的一种非接触性虫媒病毒病。该病主要侵害绵羊,能导致绵羊出现严重的临床症状和死亡。蓝舌病毒是一种分节段的双链RNA病毒,其基因组由10个不同大小的片段组成...

蓝舌病（Bluetongue,BT）是由蓝舌病毒（bluetongue virus,BTV）引起反刍动物的一种非接触性虫媒病毒病。该病主要侵害绵羊,能导致绵羊出现严重的临床症状和死亡。蓝舌病毒是一种分节段的双链RNA病毒,其基因组由10个不同大小的片段组成,这种基因组结构使不同血清型的BTV野毒株和疫苗株在同时感染同一动物时容易发生基因重组现象。本研究于2015年,在广西的监控牛群中分离到一株BTV-21型（命名为5149E）,并进行了全基因组测序,这是在我国第一次分离并全基因测序了BTV-21型。序列分析显示,BTV分离株5149E的基因组片段6可能来源于一株日本的BTV-16型毒株,说明该分离株已经发生了基因重组。本研究结果为更进一步了解BTV的起源和流行病学提供了重要的数据支撑。

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±800 kV特高压直流穿墙套管抗震性能研究

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智能电网 2017年第3期5卷 239-244页

作者：廖德芳卓然谢强中国能源建设集团广东省电力设计研究院有限公司广东省广州市510663 南方电网科学研究院广东省广州市510663 同济大学建筑工程系上海市杨浦区200092

为评估某工程800 kV特高压直流复合穿墙套管的抗震性能,在有限元软件ABAQUS中建立复合穿墙套管和全钢阀厅的整体模型,并通过计算获得了复合穿墙套管设备在地震作用下的加速度、应力和位移响应。研究发现:穿墙套管底部的阀厅结构对地面... 详细信息

为评估某工程800 kV特高压直流复合穿墙套管的抗震性能,在有限元软件ABAQUS中建立复合穿墙套管和全钢阀厅的整体模型,并通过计算获得了复合穿墙套管设备在地震作用下的加速度、应力和位移响应。研究发现:穿墙套管底部的阀厅结构对地面运动的加速度峰值有一定的放大作用,放大系数在1.5~3.0之间。复合穿墙套管在0.4 g加速度峰值的地震波作用下其根部应力处于容许应力范围内,但套管顶部的位移达到86~96.7 mm。对于复合穿墙套管设备,应结合支撑结构阀厅的放大作用及复合套管的应力和位移响应综合判定其抗震性能。

关键词：特高压复合穿墙套管地震响应抗震性能

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蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立和比较研究

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云南农业大学学报（自然科学版） 2014年第1期29卷 58-62页

作者：苗海生李乐廖德芳杨永钦李华春云南省畜牧兽医科学院云南昆明650224

为建立一种检测成本低、操作简便的蓝舌病血清抗体监测方法,本研究通过制备群特异性的蓝舌病多克隆检测抗体和优化抗原固定技术,建立了蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法。通过对150份牛羊已知阴性血清的检测确定该检测方法的cut-off值为... 详细信息

为建立一种检测成本低、操作简便的蓝舌病血清抗体监测方法,本研究通过制备群特异性的蓝舌病多克隆检测抗体和优化抗原固定技术,建立了蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法。通过对150份牛羊已知阴性血清的检测确定该检测方法的cut-off值为40%;对58份已知阳性血清样品同时进行中和实验和C-ELISA检测,检测结果经SPSS软件进行t检测统计分析,Sig.(双侧)=0.651,相关性0.912,相关性显著。对24个BTV血清型阳性血清,2份牛BVD阳性血清,2份羊口蹄疫阳性血清,2份羊痘阳性血清进行检测。结果表明,24个BTV血清型阳性血清为阳性,其他血清全部为阴性。对150份已知阴性血清和55份已知阳性血清用中和试验、美国VMRD公司试剂盒和本方法分别进行检测。结果表明,本检测方法与中和试验检测结果符合率达100%,进口试剂盒符合率为96.7%。

关键词：蓝舌病多克隆抗体 blue-tongue-virus (BTV) competition ELISA (C-ELISA)

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云南江城蓝舌病病毒16型毒株分离鉴定及其L2基因序列分析

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中国畜牧兽医 2018年第11期45卷 3192-3202页

作者：寇美玲苗海生李乐李楠廖德芳李华春云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224

为了解近年来云南江城县蓝舌病病毒16型(Bluetongue virus type 16,BTV-16)毒株的流行情况及其L2基因与国外流行株的遗传进化关系,本研究将江城县送检的300份牛肝素钠抗凝血提取红细胞后静脉接种10日龄鸡胚,将收集的鸡胚肝脏捣碎离心,... 详细信息

为了解近年来云南江城县蓝舌病病毒16型(Bluetongue virus type 16,BTV-16)毒株的流行情况及其L2基因与国外流行株的遗传进化关系,本研究将江城县送检的300份牛肝素钠抗凝血提取红细胞后静脉接种10日龄鸡胚,将收集的鸡胚肝脏捣碎离心,上清液接种于C6/36和BHK21细胞传代。针对出现细胞病变的样品,应用群特异性VP7片段引物进行RT-PCR检测,应用BTV-16 L2基因特异性引物对检测出的BTV核酸阳性样品进行RT-PCR扩增和测序,采用DNAStar和Mega 6.0软件对获得的L2基因编码区序列进行核苷酸、氨基酸同源性比对及遗传进化分析,同时利用BTV-16标准阳性血清对分离到的病毒进行中和试验鉴定。结果显示,江城县发现30个可致细胞病变的样品,其中17个样品经RT-PCR初步确认为BTV;经L2基因序列分析和中和试验鉴定,确定其中6株为BTV-16型毒株;核苷酸、氨基酸同源性比对分析结果显示,6个毒株核苷酸和氨基酸同源性分别在93.4%～98.0%和94.2%～99.1%之间;遗传进化分析发现,其中5株与2001—2008年日本及1982—2011年印度分离的BTV-16毒株亲缘关系较近;1株与1985—1990年日本分离的BTV-16毒株亲缘关系较近。本研究发现,云南江城县BTV-16毒株呈现新旧毒株交叉持续流行态势,但在自然进化中遗传变异不大,有一定的稳定性,本研究在分子水平阐明了云南江城县地方流行BTV-16 L2基因间的遗传和差异,为进一步开展BTV分子流行病学及检测研究提供科学依据。

关键词：蓝舌病病毒(BTV) 病毒分离 L 2基因序列分析

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同源血浆及血清中蓝舌病病毒抗体ELISA检测结果比较

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中国动物检疫 2020年第11期37卷 91-95,111页

作者：段莹亮李占鸿廖德芳李乐云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224

为简化动物血液样品中蓝舌病病毒(BTV)检测及研究方法,采用2种酶联免疫吸附试验(ELISA),对采自云南省德宏州芒市一家肉牛养殖场的30对牛同源血浆及血清样品进行BTV总抗体及VP7抗体检测。BTV总抗体ELISA检测结果显示,同源血浆与血清之间... 详细信息

为简化动物血液样品中蓝舌病病毒(BTV)检测及研究方法,采用2种酶联免疫吸附试验(ELISA),对采自云南省德宏州芒市一家肉牛养殖场的30对牛同源血浆及血清样品进行BTV总抗体及VP7抗体检测。BTV总抗体ELISA检测结果显示,同源血浆与血清之间的阳/阴性结果一致率为100%,ΔPI在±5%以内的样品占87%;VP7抗体ELISA检测结果显示,同源血浆与血清之间的阳/阴性结果一致率为93%,ΔOD在±0.05范围内的样品占87%。结果表明:利用ELISA检测动物血样中BTV抗体时,血浆样品可替代血清样品;血浆样品的溶血程度不影响检测结果,但粗制血浆中的非溶解性杂质可能影响检测结果,需要使用离心除杂后的血浆样品。

关键词：蓝舌病病毒血浆血清酶联免疫吸附试验

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一株新型云南牛环状病毒的分离鉴定

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微生物学报 2021年第7期61卷 1957-1970页

作者：杨振兴李占鸿廖德芳高翔胡忠燕谢佳芮李华春杨恒云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 景洪市动物疫病预防控制中心云南景洪666100

【目的】为加深云南省动物虫媒病毒多样性的认知。【方法】在云南省景洪市设立哨兵牛,定期采血接种细胞进行虫媒病毒的分离;通过RT-PCR、电镜观察与基因组琼脂糖凝胶电泳对分离病毒进行初步鉴定;扩增分离病毒的基因节段2(Seg-2)与基因节... 详细信息

【目的】为加深云南省动物虫媒病毒多样性的认知。【方法】在云南省景洪市设立哨兵牛,定期采血接种细胞进行虫媒病毒的分离;通过RT-PCR、电镜观察与基因组琼脂糖凝胶电泳对分离病毒进行初步鉴定;扩增分离病毒的基因节段2(Seg-2)与基因节段3(Seg-3)全长序列进行分析与系统发生树的构建,明确病毒的分类地位;通过qRT-PCR与血清中和试验对病毒在动物上的感染进行回溯分析。【结果】2019年7月,从哨兵牛上采集的血液中分离到1株可在BHK-21细胞上引起细胞病变的病毒;电镜下观察,病毒粒子呈球形,直径约70 nm;琼脂糖凝胶电泳显示病毒基因组由双链RNA组成,呈现“3-3-3”的带型特征。分离毒株的Seg-2编码环状病毒属病毒保守的T2蛋白,与Mobuck virus具有最近的亲缘关系,核酸与氨基酸序列相似度分别为72.8%与84.0%;分离毒株的Seg-3编码决定环状病毒属病毒血清型的OC1蛋白,与Mobuck virus的核酸与氨基酸序列相似度仅为60.2%与56.5%;在T2与OC1蛋白构建的系统发生树上,分离毒株形成独立于Mobuck virus的进化分支。对哨兵牛血液中的病毒核酸与血清中和抗体回溯分析结果显示,从病毒感染哨兵动物至监测期结束的17周内,动物血液中均可检测到病毒核酸;动物感染病毒1周后,开始产生特异性中和抗体,随后上升至最高水平(抗体效价1:226),至监测期结束,中和抗体仍维持在较高水平(抗体效价1:113)。【结论】本研究首次报道了1种新型Mobuck virus在云南省哨兵牛上的分离与感染特性。研究结果丰富了对我国环状病毒属病毒的认知,为开展病毒的诊断、流行病学与致病性研究奠定了基础。

关键词：环状病毒属病毒 Mobuck 病毒病毒分离与鉴定进化分析感染动态分析

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