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利拉鲁肽诱导骨髓间充质干细胞定向分化及移植治疗1型糖尿病大鼠的研究

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中华糖尿病杂志 2014年第3期6卷 172-177页

作者：邵珠林徐向进陈频黄梁浒温代芬解放军南京军区福州总医院内分泌科 350025 解放军南京军区福州总医院干细胞治疗中心 350025

目的体外研究利拉鲁肽诱导骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）,并在体内进一步观察IPCs移植对1型糖尿病（T1DM）大鼠的治疗作用.方法（1）体外采用密度梯度离心联合差壁培养法分离、纯化大鼠BM-MSCs,进一步分... 详细信息

目的体外研究利拉鲁肽诱导骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）,并在体内进一步观察IPCs移植对1型糖尿病（T1DM）大鼠的治疗作用.方法（1）体外采用密度梯度离心联合差壁培养法分离、纯化大鼠BM-MSCs,进一步分为未诱导组、高糖＋尼克酰胺诱导组、胰高血糖素样肽1（GLP-1）诱导组和利拉鲁肽诱导组；（2）倒置显微镜下观察各组细胞形态变化,双硫腙染色鉴定诱导后细胞,荧光定量PCR检测巢蛋白（nestin）、胰十二指肠同源盒1（PDX-1）、葡萄糖转运蛋白2（Glut-2）、葡萄糖激酶（GK）、胰岛素和胰高血糖素等基因,细胞免疫荧光检测胰岛素和胰高血糖素等蛋白；（3）将180 ～ 220 g的30只雄性SD大鼠以60 mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素制备T1DM模型,造模成功后按随机数字表法分为对照组（T1DM组,n=8）、未诱导的BM-MSCs移植组（BM-MSCs组,n=9）和经利拉鲁肽诱导的BM-MSCs移植组（LIRA＋ BM-MSCs组,n=9）,给予相应干预8周,待血糖基本稳定后,选取4只正常、同龄、雄性SD大鼠作为对照,行腹腔注射的葡萄糖耐量试验（IPGTT）进一步观察移植后细胞对高糖刺激的反应性.结果（1）利拉鲁肽诱导后BM-MSCs形态逐渐变圆,呈明显的聚集性生长状态,双硫腙染色为阳性；与高糖＋尼克酰胺诱导组比较,利拉鲁肽诱导组细胞nestin mRnA表达下调（0.003 8±0.000 4比0.007 5±0.003 0,P＜0.05）,胰岛素（0.000 20±0.000 03比0.000 08±0.000 02）和胰高血糖素（0.001 1±0.0004比0.000 7±0.000 1）等mRnA表达上调（F=7.26、10.06、4.92,均P＜0.05）,PDX-1、Glut-2、GK mRnA表达亦上调；利拉鲁肽诱导组和GLP-1诱导组细胞胰岛素或胰高血糖素蛋白表达均呈阳性.（2）体内实验示,与T1DM组比较,LIRA＋ BM-MSCs组和BM-MSCs组大鼠8周末血糖均明显降低[分别为（28.0±1.2）、（8.9±1.1）、（14.5±0.9）mmol/L,F=719.61,均P＜0.05]；IPGTT提示移植IPCs后的大鼠血糖在30 min时升至峰值,150 min时降至空腹水平,血糖变化曲线与正常组类似.结论体外利拉鲁肽可以在一定程度上促进BM-MSCs分化成为IPCs,且移植后的IPCs能够在体内进一步发挥降糖作用.

关键词：糖尿病,1型利拉鲁肽骨髓间充质干细胞诱导分化胰岛素分泌细胞

利拉鲁肽联合骨髓间充质干细胞介导胃肠激素对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠模型糖代谢的影响

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中华内分泌代谢杂志 2015年第3期31卷 277-281页

作者：陈频邵珠林徐向进黄梁浒温代芬黄勤第二军医大学附属长海医院内分泌科上海200433 南京军区福州总医院内分泌科

目的探讨利拉鲁肽（liraglutide）与骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，***）联合治疗对1型糖尿病（T1DM）大鼠模型糖代谢的影响。方法以60mg／kg剂量腹腔注射链脲佐菌素制备T1DM大鼠模型，随后按随机数字表法分为（1... 详细信息

目的探讨利拉鲁肽（liraglutide）与骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，***）联合治疗对1型糖尿病（T1DM）大鼠模型糖代谢的影响。方法以60mg／kg剂量腹腔注射链脲佐菌素制备T1DM大鼠模型，随后按随机数字表法分为（1）T1DM组（n=10）、（2）BM—MSCs治疗组（n=10）、（3）利拉鲁肽治疗组（LIRA，n=10）、（4）利拉鲁肽联合BM-MSCs治疗组（LIRA＋***，n=10），给予相应干预8周。测定各组大鼠随机血糖、HbA。24h尿量和24h尿蛋白；采用ELISA法检测血清胰岛素、c肽、胰升糖素、胃泌素、胆囊收缩素和胰升糖素样肽1（GLP-1）等激素水平：免疫组化测定胰腺组织中胰岛素和胰升糖素的表达。结果8周后，LIRA＋***组大鼠血糖、HbA1C、24h尿量和24h尿蛋白较其他3组均明显降低（P〈0．05）；分别与TIDM组和BM—MSCs组比较，LIRA＋BM—MSCs组血清胰岛素、c肽、胃泌素、胆囊收缩素和GLP-1水平均明显升高，胰升糖素水平降低（均P〈0．05）；与LIRA组比较，LIRA＋BM—MSCs组血清胰岛素、C肽、胃泌素和胆囊收缩素水平均明显升高（P〈0．05），胰升糖素和GLP-1水平无差异（P〉0．05）；相关分析发现，血清胰岛素水平分别与胃泌素（r=0．544，P〈0．01）、胆囊收缩素（r=0．710，P〈0．01）和GLP-1（r=0．669，P〈0．01）水平呈正相关，与胰升糖素水平呈负相关（r=-0．506，P〈0．01），胰升糖素与胃泌素（r=-0．364，P〈0．05）、胆囊收缩素（r=-0．433，P〈O．01）和GLP-1（r=-0．591，P〈0．01）呈负相关；免疫组化显示，LIRA＋***组大鼠胰腺组织胰岛素的阳性面积比例较其他3组均明显升高，胰升糖素比例降低（均P〈0．05）。结论利拉鲁肽联合骨髓间充质干细胞可能比两者单独治疗能够更好地介导胃肠激素分泌而改善TIDM大鼠的糖代谢。

关键词：胰升糖素样肽1 糖尿病 1型骨髓间充质干细胞免疫调节胃肠道激素

动态脑电图评估在胶质瘤相关癫痫患者术后减停抗癫痫药物中的价值

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陆军军医大学学报 2022年第7期44卷 718-723页

作者：梁新宜但炜姜代分练欢李欣谢延风石全红詹彦重庆医科大学附属第一医院神经外科重庆400016

目的探讨术前有胶质瘤相关癫痫(glioma related epilepsy,GRE)病史的患者术后停药前动态脑电图(ambulatory electroencephalogram,AEEG)异常是否与癫痫复发相关。方法回顾性分析本院2014年1月至2020年6月68例行手术治疗且长期随访的GRE... 详细信息

目的探讨术前有胶质瘤相关癫痫(glioma related epilepsy,GRE)病史的患者术后停药前动态脑电图(ambulatory electroencephalogram,AEEG)异常是否与癫痫复发相关。方法回顾性分析本院2014年1月至2020年6月68例行手术治疗且长期随访的GRE患者AEEG及临床资料,根据停用抗癫痫药后是否出现癫痫复发,将病例分为发作组(停药后癫痫复发)和对照组(停药后无癫痫发作),分析两组棘尖波及阵发性慢波事件(paroxysmal slow wave events,PSWEs)出现率、数量差异。通过回顾性分析停药前AEEG显示有痫性放电的47例患者临床资料,探讨影响其癫痫预后的因素。结果(1)发作组31例患者停药前AEEG中有痫性放电者29例(93.5%),有PSWEs者11例(35.5%),对照组37例患者停药前AEEG中有痫性放电者18例(48.6%),有PSWEs者5例(13.5%)。发作组与对照组之间棘尖波及PSWEs出现率差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)发作组棘尖波及慢波数量明显高于对照组,发作组主要以中大量棘尖波(25/29,86.2%)及大量阵发性慢波(8/11,72.7%)为主,对照组主要以少量棘尖波(14/18,77.8%)及少中量阵发性慢波(4/5,80.0%)为主。(3)伴有AEEG痫性放电时,肿瘤切除程度及肿瘤累及皮层与癫痫预后有关(P<0.05)。结论当肿瘤为次全切除或肿瘤累及皮质,同时停药前AEEG显示中量、大量棘尖波及PSWEs时,需考虑减缓停药,延长患者无发作间隔时间以降低癫痫复发风险。

关键词：胶质瘤癫痫动态脑电图抗癫痫药物减停

脐带间充质干细胞不同模式干预对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的作用比较

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2016年第1期6卷 36-41页

作者：陈频黄山徐向进黄梁浒邵珠林温代芬南京军区福州总医院内分泌科福州350025 福建医科大学分子生物学系福州350005

目的对比脐带间充质干细胞(UCMSC)不同模式干预对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛细胞凋亡的作用及其与TLR4/nF-κB炎症通路的关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(nC组)、T2DM组、UCMSC A组和UCMSC B组,每组8只,予相应干预8周:UCMSC以尾静脉输... 详细信息

目的对比脐带间充质干细胞(UCMSC)不同模式干预对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛细胞凋亡的作用及其与TLR4/nF-κB炎症通路的关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(nC组)、T2DM组、UCMSC A组和UCMSC B组,每组8只,予相应干预8周:UCMSC以尾静脉输注方式干预,其中UCMSC A组采用单次大量模式(细胞数20×106个);UCMSC B组采用多次足量序贯模式(每次细胞数5×106个,每两周干预1次共4次)。定期检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(InS)、C肽(C-P);观察胰腺组织形态变化;TUnEL法检测胰岛细胞凋亡;Western blot法检测胰腺组织TLR4、nF-κB及IL-6蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果治疗8周末,与T2DM组比较,UCMSC A组和UCMSC B组大鼠FBG均呈明显下降,其中UCMSC B组明显低于UCMSC A组[(20.0±3.5)比(13.1±1.7)、(7.2±2.2)],PnS和C-P水平呈不同程度增高;T2DM组大鼠胰腺组织形态紊乱,仅见少量胰岛细胞团存在,而两个治疗组大鼠胰腺组织形态呈不同程度改善;与T2DM组比较,两个治疗组大鼠胰岛细胞凋亡指数明显降低,以UCMSC B组为甚;与T2DM组比较,两个治疗组大鼠胰腺组织TLR4、nF-κB及IL-6蛋白表达降低,以UCMSC B组为甚,分别为(1.58±0.43)比(1.15±0.27)、(0.96±0.20),(1.06±0.22)比(0.80±0.15)、(0.62±0.10),(0.91±0.10)比(0.77±0.09)、(0.60±0.16),均PnF-κB炎症通路抑制胰岛β细胞凋亡相关。

关键词：糖尿病,2型脐带间充质干细胞胰岛细胞凋亡