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拟南芥/本生烟远缘嫁接体中移动性mRNA分子检测

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北方园艺 2020年第16期 22-28页

作者：邓竹英梁大成长江大学湖北省主要粮食作物产业化协同创新中心湖北荆州434025 长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心/湖北省涝渍灾害与湿地农业重点实验室湖北荆州434025

以拟南芥和本生烟草为试材,采用微嫁接技术和转录组测序的方法,研究了拟南芥/本生烟烟草远缘嫁接体中可移动的mRNA分子,以期进一步了解根茎间的信息交流机制。结果表明:在本生烟砧木中检测出824个向下移动的拟南芥mRNA分子,挑选其中30... 详细信息

以拟南芥和本生烟草为试材,采用微嫁接技术和转录组测序的方法,研究了拟南芥/本生烟烟草远缘嫁接体中可移动的mRNA分子,以期进一步了解根茎间的信息交流机制。结果表明:在本生烟砧木中检测出824个向下移动的拟南芥mRNA分子,挑选其中30个高丰度的拟南芥mRNA靶分子进行RT-PCR扩增验证,未发现可以移动的mRNA分子。进一步验证其中psbW和RBCS1A基因均未发生移动。利用克隆测序,检测出AT1G26630(elF5A2)的序列来自于本生烟草,而非接穗部分移动而来。深度测序得到的可移动mRNAs并未能够被RT-PCR技术所验证,上述结果表明mRNA可能并非担当根茎间长距离运输的角色。

关键词：拟南芥本生烟草远缘嫁接转录组测序 mRNA分子移动

基于sfGFP系统的嫁接体接口处的细胞质融合检测

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华北农学报 2022年第4期37卷 151-157页

作者：李冬怡邓竹英梁大成湖北省主要粮食作物产业化协同创新中心湖北荆州434025 长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心湖北省涝渍灾害与湿地农业重点实验室湖北荆州434025

为了探究接穗和砧木间的细胞如何相互作用而形成功能性嫁接体,利用自组装拆分的超折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)系统来监测嫁接体接口处的细胞质融合发生事件。通过花侵染转化得到在细胞质中单独表达sfGFP1-10和mCherry-11的转基因拟南芥植... 详细信息

为了探究接穗和砧木间的细胞如何相互作用而形成功能性嫁接体,利用自组装拆分的超折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)系统来监测嫁接体接口处的细胞质融合发生事件。通过花侵染转化得到在细胞质中单独表达sfGFP1-10和mCherry-11的转基因拟南芥植株以及通过叶盘法转化得到在细胞质中单独表达sfGFP1-10和mCherry-11的转基因烟草植株。T1转基因拟南芥和T1转基因烟草在含相应抗生素的培养基中生长,培养8 d后选取生长健壮的幼苗用于嫁接,构建远缘嫁接体(At-1-10/Nb-11)、自体嫁接体(At-1-10/At-11、Nb-1-10/Nb-11)以及对照嫁接体(At-11/Nb-11、At-11/At-11、Nb-11/Nb-11)。嫁接后第4天,利用激光共聚焦显微镜观察接口处GFP信号并统计嫁接体接口处的GFP荧光强度。结果显示:在嫁接后第4天,远缘嫁接体和自体嫁接体接口处均监测到GFP信号,且远缘嫁接体的GFP荧光强度显著高于自体嫁接。在细胞质中单独表达sfGFP1-10和mCherry-11的转基因拟南芥未嫁接幼苗、细胞质中单独表达sfGFP1-10和mCherry-11的转基因烟草未嫁接幼苗以及对照嫁接体中均未检测到GFP信号。结果表明:嫁接体接口处细胞质在嫁接后第4天已经发生融合,拆分的sfGFP片段在砧穗的连接下重组并发出荧光,定位于细胞质中,且远缘嫁接体和自体嫁接体在细胞质融合上存在差异;自组装拆分的sfGFP系统可用于检测嫁接体接口处细胞质的融合,为研究嫁接体接口处细胞学事件发生提供了新的视角。

关键词：拟南芥本生烟草远缘嫁接体愈合机制 sfGFP系统

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抗白血病药普纳替尼合成路线改进

中国医药工业杂志 2018年第3期49卷 301-304页

作者：李艳萍梁大成王瑞彬佛山科学技术学院口腔医学院(医药工程学院) 广东佛山528000 中山大学化学学院广东广州510275 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院) 广东佛山528300

对抗白血病新药普纳替尼(1)的合成工艺进行改进。以3-溴咪唑并[1,2-b]哒嗪(3)为起始原料,采用"一锅法"经与三甲基硅基乙炔的Sonogashira偶联、脱保护基、与3-碘-4-甲基-N-[4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(9)的第... 详细信息

对抗白血病新药普纳替尼(1)的合成工艺进行改进。以3-溴咪唑并[1,2-b]哒嗪(3)为起始原料,采用"一锅法"经与三甲基硅基乙炔的Sonogashira偶联、脱保护基、与3-碘-4-甲基-N-[4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(9)的第二次Sonogashira偶联得终产物1。关键中间体9的合成,以3-三氟甲基-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-苯胺(6)与3-碘-4-甲基苯甲酸(7)在EDCI/HOBt/Et3N催化下直接缩合,代替文献使用二氯亚砜酰化后再缩合的两步反应。改进后的路线反应条件温和,操作简便,减少了昂贵的钯催化剂的用量,反应总收率由44.5%提高至80%(以3计)。

关键词：普纳替尼抗白血病 “一锅法” 工艺优化

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藜麦嫁接体中嫁接口部位的导管分子形态分析

分子植物育种 2022年第7期20卷 2384-2389页

作者：刘小芳曾誉吴辉艳梁大成长江大学湖北省主要粮食作物产业化协同创新中心湿地生态与农业利用教育部工程研究中心湖北省涝渍灾害与湿地农业重点实验室荆州434025

本研究旨在探讨藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)同源嫁接体在嫁接界面附近的导管分子形态特征变化。为此,本研究用扫描电子显微镜观察了两个藜麦品种(‘白藜’和‘红藜’)嫁接16 d后嫁接接口、砧木和接穗的导管分子形态特征变化。结果... 详细信息

本研究旨在探讨藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)同源嫁接体在嫁接界面附近的导管分子形态特征变化。为此,本研究用扫描电子显微镜观察了两个藜麦品种(‘白藜’和‘红藜’)嫁接16 d后嫁接接口、砧木和接穗的导管分子形态特征变化。结果表明:嫁接口的导管分子形态各异,导管形态类型包括梯纹、网纹和孔纹等成熟短导管分子;接穗和砧木的导管分子与同时期未嫁接的对照相比,长度明显缩短,分别缩短43.31%和48.15%,直径明显变窄,分别变窄9.81%和13.04%,长度和直径的比值明显变小,分别减小37.06%和40.88%。综上所述,嫁接导致藜麦嫁接体导管分子产生一系列变化,这样的变化可能会降低空穴和栓塞的形成,从而提高导管分子的水分运输效率。

关键词：藜麦嫁接扫描电子显微镜导管分子

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生长素调控水稻生长发育的研究进展

中国稻米 2024年第1期30卷 1-9,25页

作者：喻梓轩刘新勇张健梁大成长江大学农学院湖北荆州434025 中国水稻研究所/水稻生物育种全国重点实验室杭州310006

生长素(auxin,IAA)是一种重要的植物生长激素,普遍存在于各种植物和藻类中,其参与组织分化、器官发生、形态建成、向性反应和顶端优势等生理过程以及对复杂环境适应过程。目前双子叶植物拟南芥中生长素调控生长发育的机制已经基本清楚,... 详细信息

生长素(auxin,IAA)是一种重要的植物生长激素,普遍存在于各种植物和藻类中,其参与组织分化、器官发生、形态建成、向性反应和顶端优势等生理过程以及对复杂环境适应过程。目前双子叶植物拟南芥中生长素调控生长发育的机制已经基本清楚,但是生长素怎样在单子叶植物水稻中行使功能,仍有很多未解之谜。本文综述了近20年国内外关于生长素调控单子叶植物水稻根、茎、叶、花和籽粒生长发育的细胞学和生理机制,重点归纳整理了生长素相关基因对水稻生长发育的分子调控机制,展望了未来水稻中依靠生长素途径精准合成运输生长素的调控,以及利用生长素突变体表型变异的开发前景。

关键词：生长素水稻器官突变体表型精准调控

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基于MS2蛋白系统的可移动性RNA鉴定方法

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华北农学报 2021年第4期36卷 31-36页

作者：李陆萍邓竹英汪志鹏梁大成湖北省主要粮食作物产业化协同创新中心湖北荆州434025 长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心湖北省涝渍灾害与湿地农业重点实验室湖北荆州434025

为了方便快速地鉴定RNA的移动性,研究RNA参与植物生长发育以及生理响应过程的胞间运输机制,减少试验成本,将含有24个茎环串联重复的RNA结构(SL24)连入双元载体pUbiK成功构建了表达载体pSL24UbiK,再利用同源重组的方法将可移动性RNA FT... 详细信息

为了方便快速地鉴定RNA的移动性,研究RNA参与植物生长发育以及生理响应过程的胞间运输机制,减少试验成本,将含有24个茎环串联重复的RNA结构(SL24)连入双元载体pUbiK成功构建了表达载体pSL24UbiK,再利用同源重组的方法将可移动性RNA FT和不可移动性RNA GUS片段分别连入表达载体pSL24UbiK成功构建了重组载体pSL24UbiK-FT、pSL24UbiK-GUS。利用农杆菌介导法,将pSL24UbiK-FT、pSL24UbiK-GUS分别与p1390-35S-MS2FD-GFP共同在烟草叶片中瞬时表达。在Ubiquitin启动子驱动下,SL24和目标RNA形成融合片段。MS2/SL24系统的另一组分MS2蛋白与绿色荧光蛋白融合形成MS2-GFP,噬菌体外壳蛋白MS2可识别SL24 RNA结构,在共聚焦显微镜下观察烟草叶片中GFP的细胞定位情况。结果显示,可移动RNA FT在细胞质附近显示出点状信号,不可移动RNA GUS在细胞质附近没有检测到荧光信号,只在细胞核位置有荧光信号的出现。结果表明,利用该系统将目标RNA连接到表达载体pSL24UbiK上,通过与p1390-35S-MS2FD-GFP共侵染烟草叶片,在共聚焦显微镜下观察GFP的细胞定位情况就能够确定RNA在细胞内是否可以移动,为研究RNA的移动性提供了新的技术方法。

关键词：可移动性RNA SL24 MS2 MS2-GFP

利用固定化酵母细胞生产1,6-二磷酸果糖的研究

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生物工程学报 1997年第3期13卷 331-333页

作者：阎浩林周大成苏昕梁丽莉沈阳药科大学制药系

利用固定化酵母细胞生产１，６二磷酸果糖的研究阎浩林周大成苏昕梁丽莉（沈阳药科大学制药系沈阳１１００１５）目前对１，６二磷酸果糖（简称ＦＤＰ）生产基本采用Ｌｅｉｓｏｌａ［１］等人在１９７４年提出的以酵母菌为转化媒... 详细信息

利用固定化酵母细胞生产１，６二磷酸果糖的研究阎浩林周大成苏昕梁丽莉（沈阳药科大学制药系沈阳１１００１５）目前对１，６二磷酸果糖（简称ＦＤＰ）生产基本采用Ｌｅｉｓｏｌａ［１］等人在１９７４年提出的以酵母菌为转化媒体，以蔗糖、磷酸盐为底物的酶促磷酸...

关键词：二磷酸果糖酵母细胞固定化细胞发酵发生

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船舶车钟操纵主机模拟装置的研制

船电技术 2015年第10期35卷 67-69,73页

作者：张少明梁达成潘龙江广东交通职业技术学院广州510800 广东高校船舶自动化集成技术开发中心广州510800

介绍了船舶车钟操纵主机模拟装置的硬件组成,工作模式,控制程序及监控界面组态。

关键词：船舶车钟 PLC 人机界面

基于非靶向代谢组学分析酿酒酵母甲酸胁迫的响应和耐受性机制

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食品科学 2022年第17期43卷 95-104页

作者：曾令杰丰丕雪黄锦翔梁大呈佀再勇龙秀锋伍时华易弋广西科技大学生物与化学工程学院广西糖资源绿色加工重点实验室广西柳州545006

采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MC)的非靶向代谢组学,探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)响应甲酸胁迫的代谢机制。主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计结果表明,甲酸处理后酿酒酵... 详细信息

采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MC)的非靶向代谢组学,探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)响应甲酸胁迫的代谢机制。主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计结果表明,甲酸处理后酿酒酵母中发生显著变化(P<0.05)、变量投影重要性值超过1的差异代谢物共226种,主要为L-色氨酸、L-谷氨酰胺、5-羟基吲哚乙酸、吲哚乙醛、L-苯丙氨酸、L-谷氨酸、氧化型谷胱甘肽、5’-磷酸核糖基-N-甲酰甘氨酰胺。差异代谢通路分析表明,甲酸胁迫可能导致酵母细胞内活性氧积累诱导氧化应激、ATP过度消耗,这可能是抑制酵母细胞生长的主要原因。而胞内芳香族氨基酸的含量增加,部分氨基酸和核苷酸的合成代谢减慢可能是通过降低能量消耗而实现的自我保护,从而有助于提高酵母细胞对甲酸的耐受性。实验为进一步研究提高细胞酸类抑制物的耐受性方法提供了科学理论参考。

关键词：酿酒酵母甲酸胁迫非靶向代谢组学

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