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Memory stem T cells generated by Wnt signaling from blood of human renal clear cell carcinoma patients

Cancer Biology & Medicine 2019年第1期16卷 109-120页

作者： cihui yan Jingjing Chang Xinmiao Song Fan yan Wenwen Yu yang An Feng Wei Lili yang Xiubao Ren Department of Immunology Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital National Clinical Research Center for Cancer Key Laboratory of Cancer Prevention and TherapyTianjin Tianjin's Clinical Research Center for Cancer Department of Electromyogram 3rd Affiliated Hospital of Hebei Medical University

Objective: Memory stem T cells(Tscm) have attracted attention because of their enhanced self-renewal, multipotent capacity, and anti-tumor capacities. However, little is known about Tscm in patients with renal clear cell carcinoma(RCC) and the role of Wnt signaling in these cells. We evaluated Tscm from RCC patients concerning their activation of Wnt signaling in vitro and explored the mechanism of preferential survival.Methods: Flow cytometry identified surface markers and cytokines produced from accumulated Tscm in the presence of the glycogen synthase kinase beta inhibitor TWS119. Apoptosis was evaluated after induction using tumor necrosis factor-alpha.Immunofluorescence and Western blot analyses were used to investigate the activation of the nuclear factor-kappa B(NF-КB)pathway.Results: RCC patients had a similar percentage of CD4^+ and CD8^+ Tscm as healthy donors. Activation of Wnt signaling by TWS119 resulted in the accumulation of Tscm in activated T cells, but reversal of differentiated T cells to Tscm was not achieved.Preferential survival of Tscm was associated with increased anti-apoptotic ability mediated downstream of the NF-КB activation pathway.Conclusions: The finding that Tscm can accumulate by Wnt signaling in vitro in blood from RCC patients will help in devising new cancer therapy strategies of Tscm-based adoptive immunotherapy, such as dendritic cell-stimulated Tscm, and T cell receptor or chimeric antigen receptor-engineered Tscm.

关键词： Memory stem T cell TWS119 Wnt signaling apoptosis renal clear cell carcinoma

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胃窦癌组织中LAG-3 FGL1 MHC-Ⅱ的表达与预后的关系

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中国肿瘤临床 2024年第2期51卷 64-69页

作者：戚颖黄子祺别鸿宇颜次慧任秀宝天津医科大学肿瘤医院生物技术研究室国家恶性肿瘤临床医学研究中心天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津市300060

目的:探索新型免疫检查点淋巴细胞激活基因3(lymphocyte-activation gene 3,LAG-3)、纤维蛋白原样蛋白1(fibrinogenlike protein 1,FGL1)、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡ,MHC-Ⅱ)在胃窦癌(gastric antral cancer,GAC)中的表达情况与预后的相关性。方法:收集2012年1月至2014年12月于天津医科大学肿瘤医院诊断为GAC的67例患者病理标本,分别进行石蜡切片制作,采用免疫组织化学法检测LAG-3、FGL1、MHC-Ⅱ三个指标的表达情况,并用统计学方法分析组间差异。采用Kaplan-Meier法评估LAG-3、FGL1、MHC-Ⅱ的表达水平与GAC患者预后之间的关系并绘制生存曲线。结果:GAC患者中,肿瘤大小0.05)。结论:GAC患者LAG-3、MHC-Ⅱ在不同区域的表达量存在差异,GAC患者LAG-3及其配体在免疫细胞的表达对预后产生积极影响,提示免疫细胞中LAG-3/MHC-Ⅱ可以作为GAC患者预后标志物,为临床个体化免疫治疗提供新的依据。

关键词：胃窦癌淋巴细胞激活基因3 纤维蛋白原样蛋白1 主要组织相容性复合体Ⅱ类分子生存预后

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过继性T细胞治疗在非小细胞肺癌中的研究进展

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中国肿瘤临床 2022年第17期49卷 908-912页

作者：颜次慧任秀宝天津医科大学肿瘤医院生物技术研究室国家恶性肿瘤临床医学研究中心天津市“肿瘤防治”重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津市300060

T细胞是获得性抗肿瘤免疫的重要细胞亚群,但肿瘤组织中的T细胞数量少,且处于免疫抑制甚至耗竭状态,这是导致肿瘤免疫逃逸和免疫检查点抑制剂等抗肿瘤免疫治疗效果不佳的重要原因。过继性T细胞治疗主要包括肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltr... 详细信息

T细胞是获得性抗肿瘤免疫的重要细胞亚群,但肿瘤组织中的T细胞数量少,且处于免疫抑制甚至耗竭状态,这是导致肿瘤免疫逃逸和免疫检查点抑制剂等抗肿瘤免疫治疗效果不佳的重要原因。过继性T细胞治疗主要包括肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltrating lymphocytes,TILs)、嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)、T细胞受体工程化T细胞(T-cell receptor engineering T cell,TCR-T)治疗,其通过体外筛选扩增富集肿瘤特异性T细胞或通过基因改造赋予T细胞新的抗原特异性(CAR-T、TCR-T),有效克服了肿瘤浸润T细胞不足的缺陷。虽然过继性T细胞治疗在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的研究起步较晚,但已显示治疗的安全可行性和初步抗肿瘤效果,值得进一步深入研究。本文将对TILs、CART、TCR-T的原理、培养方法、生物学特征以及在NSCLC治疗中的研究进展进行综述,以期为优化临床研究设计和开展新型NSCLC免疫治疗提供新思路。

关键词：过继性T细胞非小细胞肺癌肿瘤浸润淋巴细胞嵌合抗原受体T细胞 T细胞受体工程化T细胞

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TCR组库检测方法及应用的研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第10期29卷 956-961页

作者：周健(综述) 任秀宝颜次慧(审阅) 天津医科大学肿瘤医院生物技术研究室生物治疗科国家肿瘤临床医学研究中心天津市“肿瘤防治”重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津300070

近年来以T细胞为基础的肿瘤免疫治疗发展迅速,但仅对部分肿瘤患者有效,因此亟待探索有效的检测方法和预测指标。T细胞受体(TCR)是T细胞抗原识别的关键分子。T细胞在胸腺成熟过程中经历了TCR基因重排,形成了TCR高度多样性,体内所有TCR类... 详细信息

近年来以T细胞为基础的肿瘤免疫治疗发展迅速,但仅对部分肿瘤患者有效,因此亟待探索有效的检测方法和预测指标。T细胞受体(TCR)是T细胞抗原识别的关键分子。T细胞在胸腺成熟过程中经历了TCR基因重排,形成了TCR高度多样性,体内所有TCR类型与数量组成TCR组库。借助免疫组库测序技术可得到特定时期肿瘤患者TCR组库的信息,如TCR多样性、克隆性等特点,为个体化肿瘤免疫治疗方案的选择以及疗效预测提供了新线索。二代测序技术和单细胞测序技术的发展极大地扩展了TCR组库研究的深度与广度,极大地促进其在肿瘤免疫治疗领域的应用。本文通过对TCR组库测序应用领域、测序方法及其统计学评估指标进行综述,展示了TCR组库检测作为新型生物标志物来预测及评估患者预后的潜能,为个体精准化肿瘤免疫治疗提供新策略。

关键词： T细胞受体 T细胞受体组库单细胞测序免疫检查点肿瘤免疫

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免疫检查点在肿瘤放疗中的应用进展

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中华放射医学与防护杂志 2016年第10期36卷 785-789页

作者：颜次慧宋新苗任秀宝天津医科大学肿瘤医院免疫室国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室 300060

放射治疗诱导DNA损伤与细胞死亡,并且通过改变肿瘤表型、肿瘤微环境,参与内源性免疫反应的调节.免疫检查点信号途径在抗微生物免疫反应中参与维持自身耐受,限制组织损伤,但其在抗肿瘤免疫中抑制细胞毒T细胞活化与功能,增强免疫抑制细胞... 详细信息

放射治疗诱导DNA损伤与细胞死亡,并且通过改变肿瘤表型、肿瘤微环境,参与内源性免疫反应的调节.免疫检查点信号途径在抗微生物免疫反应中参与维持自身耐受,限制组织损伤,但其在抗肿瘤免疫中抑制细胞毒T细胞活化与功能,增强免疫抑制细胞作用,导致免疫逃逸.阻断免疫检查点信号能够恢复抗肿瘤免疫,延缓肿瘤进程.近年来,放疗与免疫治疗联合应用已成为基础与临床研究的热点.在此就放疗对机体免疫系统的作用、免疫检查点的负性调控机制以及放疗联合阻断免疫检查点用于肿瘤治疗的研究进展进行总结,以期为拓展肿瘤综合治疗提供新思路.

关键词：放射治疗免疫检查点细胞毒T淋巴细胞抗原-4 程序性死亡蛋白-1

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骨桥蛋白预测早期非小细胞肺癌患者预后的意义

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肿瘤防治研究 2015年第4期42卷 340-344页

作者：吕梦果颜次慧宋新苗曹水天津医科大学肿瘤医院免疫室国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津市"肿瘤防治"重点实验室天津300060 天津医科大学肿瘤医院生物治疗科天津300060

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达和预后意义。方法采用免疫组织化学法检测84例非小细胞肺癌组织中OPN表达情况,利用χ2检验和Kaplan-Meier生存曲线分析OPN表达与临床病理... 详细信息

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达和预后意义。方法采用免疫组织化学法检测84例非小细胞肺癌组织中OPN表达情况,利用χ2检验和Kaplan-Meier生存曲线分析OPN表达与临床病理相关因素及患者术后总生存时间(overall survival,OS)、无疾病生存时间(disease-free survival,DFS)的关系。结果 84例非小细胞肺癌组织中OPN阳性表达率为83.3%(70/84)。在早期患者中,OPN阴性表达组DFS和OS长于OPN阳性组(χ2=9.722,P=0.019;χ2=6.064,P=0.014)。而晚期患者OPN阴性表达组DFS和OS与阳性组间比较差异无统计学意义。结论非小细胞肺癌组织中存在OPN表达,OPN可能成为预测早期NSCLC患者预后的参考指标。

关键词：骨桥蛋白非小细胞肺癌免疫组织化学预后

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全国日语研究生人才培养体系的构建及其质量影响因素分析——以基于全国日语研究生的调查问卷为例

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日语教育与日本学 2019年第1期 101-110页

作者：许慈惠蔡妍上海外国语大学日本文化经济学院福建师范大学外国语学院

研究生人才培养体系主要由研究生、导师、行政管理层三方的硬因素和软因素构成。生源质量、课程设置与师资力量、行政管理能力与办学资源等是硬因素;研究生的学习动机与学习态度、导师的指导动机与态度、行政管理层的管理动机与态度等... 详细信息

研究生人才培养体系主要由研究生、导师、行政管理层三方的硬因素和软因素构成。生源质量、课程设置与师资力量、行政管理能力与办学资源等是硬因素;研究生的学习动机与学习态度、导师的指导动机与态度、行政管理层的管理动机与态度等是软因素。相对于硬因素,软因素更关乎个人品德、更具生命力,经过主观努力短期内可以有效改善,因而也更重要。而它的核心要数其三方各自的责任心。唯有各自树立起责任心,积极努力,才可能从根本上改变研究生人才培养的现状问题,实现人才培养的目标。

关键词：研究生人才培养体系软因素硬因素责任心

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基于生物信息学分析的肝细胞癌预后相关基因的筛选

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中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第4期26卷 431-439页

作者：孙厚芳颜次慧吴磊李百会杨莉莉天津医科大学肿瘤医院生物技术研究室国家肿瘤临床医学研究中心天津市“肿瘤防治”重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津300060

目的:利用生物信息学方法筛选出肝细胞癌(HCC)组织与正常肝组织之间差异表达基因(DEG),从转录组层面分析这些候选基因参与HCC发生发展的内在机制及其与HCC患者预后相关基因的临床意义。方法:分别从基因表达数据库(GEO)及人类癌症基因组... 详细信息

目的:利用生物信息学方法筛选出肝细胞癌(HCC)组织与正常肝组织之间差异表达基因(DEG),从转录组层面分析这些候选基因参与HCC发生发展的内在机制及其与HCC患者预后相关基因的临床意义。方法:分别从基因表达数据库(GEO)及人类癌症基因组图谱(TCGA)网站中下载GSE45267、GSE64041、GSE84402和TCGA中的基因表达谱,R软件和Bioconductor安装包用于筛选HCC组织与癌旁组织之间DEG,然后对这些DEG进行基因本体(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析、蛋白质相互作用(PPI)网络分析及生存分析。结果:共筛选出46个上调基因和154个下调基因,GO富集分析显示,这些DEG主要与细胞分裂、增殖、周期调控、氧化还原过程及某些代谢途径密切相关;KEGG通路分析显示DEG主要与色氨酸、视黄醇等代谢途径及P53通路有关。在TCGA数据集中,6个上调的中枢基因CCNA2、CDK1、DLGAP5、KIF20A、KPNA2、MELK的过表达被认为与HCC患者预后呈明显负相关(均P<0.01)。结论:筛选出的一组与预后负相关的中枢上调基因对HCC诊断和治疗的临床研究可能具有潜在的指导价值。

关键词：肝细胞癌生物信息分析预后相关基因基因本体分析京都基因与基因组百科全书分析蛋白质相互作用网络

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MCP-1／CCR2轴促进脐带间充质干细胞向肺癌组织归巢

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中国肿瘤生物治疗杂志 2016年第1期23卷 17-23页

作者：宋新苗颜次慧吕梦果于文文张新伟任秀宝天津医科大学肿瘤医院免疫室国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤免疫与生物治疗重点实验室天津300060 天津医科大学肿瘤医院生物治疗科天津300060

目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoatractant protein-1,MCP-1)/趋化因子(C-C模体)受体2[chemokine(C-C motif)receptor 2,CCR2)轴在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)向肺癌归巢中的作用。方法:采用组织块培养法从健康新生儿脐带组织中分离HUMSCs并鉴定,构建BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型。体外应用Transwell趋化实验、体内应用IVIS Xenogen动物活体成像系统检测HUMSCs是否向肺癌归巢,ELISA法检测肺癌细胞A549培养上清中MCP-1分泌水平,转染shRNA敲低肺癌细胞内MCP-1的表达和用抑制剂RS504393抑制HUMSCs细胞表面的MCP-1受体CCR2后,体内外检测HUMSCs向肺癌归巢能力的改变。结果:成功分离得到HUMSCs并完成鉴定,成功建立BALB/c裸鼠皮下肺癌移植瘤模型。HUMSCs在体内外均能向肺癌归巢(P<0.01),肺癌细胞高表达MCP-1。成功构建稳定低表达MCP-1的肺癌A549细胞系,与对照组相比,shRNA1和shRNA2敲低组趋化HUMSCs的数目明显减少[(80.0±33.0)、(94.0±16.0)vs(167.0±41.0)个,均P<0.05],抑制HUMSCs细胞表面MCP-1受体CCR2后,体内外均显著抑制HUMSCs向肺癌的趋化能力(P<0.05)。结论:MCP-1/CCR2轴促进HUMSCs向肺癌归巢。

关键词：间充质干细胞单核细胞趋化蛋白-1 趋化因子(C-C模式)受体2 肺癌归巢

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人脐带来源间充质干细胞向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第6期24卷 595-600页

作者：范冬梅张子祥赵英新杨铭张砚君颜次慧蒋媛吕军强中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学基础医学院天津300070

目的:观察人脐带来源的间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cell,HUMSC)向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化。方法:二步法体外诱导HUMSC向肝细胞分化,通过Real-time PCR和Western blotting检测不同时间点HUMSC中肝细胞特异性基因甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)及白蛋白(albumin,ALB)mRNA和蛋白水平的变化;Transwell实验观察HUMSC在HepG2肝癌细胞条件培养基作用下的趋化现象;采用皮下-原位移植的方法建立BALB/c裸鼠的HepG2肝癌细胞原位移植瘤模型,利用慢病毒感染的方法将HUMSC标记CMV或AFP启动子驱动的f Luc,制备成MSC.CMVLuc或MSC.AFPLuc,并将其注射入荷瘤肝组织,IVIS成像系统观察MSC.CMVLuc向肿瘤部位的迁移归巢及MSC.AFPLuc在肝癌微环境中向肝细胞分化。结果:HUMSC在体外诱导培养过程中出现细胞形态学变化证明其向肝细胞分化,同时诱导培养后AFP、ALB mRNA和蛋白的表达明显升高(均P<0.05);HUMSC向HepG2肝癌细胞的趋化呈瘤细胞密度依赖性(P<0.01);MSC.CMVLuc注射后2 d迁移并聚集于肝脏,注射后5 d肝脏内发光信号进一步增强;MSC.AFPLuc肝内注射后24 h已向肝细胞分化,注射第7天AFP启动子活性最强,注射第9天活性消失。结论:在小鼠体内外证明了HUMSC具有向肝脏归巢及分化的能力,为今后MSC应用于肝癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。

关键词：间充质干细胞肝癌归巢分化

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