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鸭圆环病毒和鹅圆环病毒三引物鉴别检测方法的建立

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福建农业学报 2023年第1期38卷 7-11页

作者：王梦鸽黄瑜傅秋玲程龙飞万春和刘荣昌陈红梅江南松梁齐章施少华林建生傅光华福建农林大学动物科学学院福建福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省禽病防治重点实验室福建福州350013

【目的】建立一种可同时检测并鉴别鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的PCR方法。【方法】根据已发布的鸭圆环病毒和鹅圆环病毒基因组分子特征设计3条引物,应用3条引物建立了一种在一个反应管中可检测并鉴别鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的三引物PCR方... 详细信息

【目的】建立一种可同时检测并鉴别鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的PCR方法。【方法】根据已发布的鸭圆环病毒和鹅圆环病毒基因组分子特征设计3条引物,应用3条引物建立了一种在一个反应管中可检测并鉴别鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的三引物PCR方法。【结果】该方法可特异性扩增鸭圆环病毒和鹅圆环病毒,并根据扩增片段大小鉴别病毒种类,检测最低限分别为110、80 pg·μL^(-1)。应用该方法对临床疑似病例样品进行检测,其结果与用2种病毒对应的单病毒PCR检测方法一致。【结论】建立的三引物PCR方法特异性强,敏感性高,丰富了水禽圆环病毒病的临床病例的诊断及流行病学监测的技术手段。

关键词：鸭圆环病毒鹅圆环病毒三引物PCR 检测方法

禽源多杀性巴氏杆菌耐药性分析及氟苯尼考耐药基因floR分布

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畜牧与兽医 2019年第3期51卷 93-96页

作者：陈红梅程龙飞邓辉刘荣昌傅光华施少华万春和傅秋玲郑庆礼白丁平黄小红黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福建福州350013 福建农林大学中西兽医结合与动物保健福建省高校重点实验室福建福州350002

为了解禽源多杀性巴氏杆菌的药物敏感性及氟苯尼考的耐药基因的分布特征,采用琼脂二倍稀释法,对分离自福建、广东和江西等南方数省部分地区113株禽源多杀性巴氏杆菌进行9种抗生素的耐药性分析,并应用PCR方法检测氟苯尼考耐药基因floR的... 详细信息

为了解禽源多杀性巴氏杆菌的药物敏感性及氟苯尼考的耐药基因的分布特征,采用琼脂二倍稀释法,对分离自福建、广东和江西等南方数省部分地区113株禽源多杀性巴氏杆菌进行9种抗生素的耐药性分析,并应用PCR方法检测氟苯尼考耐药基因floR的分布情况。结果显示:上述菌株对四环素表现高水平耐药,耐药率为65.49%(74/113);对链霉素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、氟苯尼考、卡那霉素与恩诺沙星表现中等水平耐药,耐药率分别是43.36%(49/113)、39.82%(45/113)、27.43%(31/113)、25.66%(29/113)与24.78%(28/113);对氨苄西林、头孢噻呋与头孢克洛较为敏感,耐药率分别为4.42%(5/113),2.65%(3/113)与1.77%(2/113);其中52.21%(59/113)菌株能耐受3类及3类以上的抗菌药物;氟苯尼考耐药基因floR的检出率为64.04%(72/113),且所有氟苯尼考耐药菌株均含有floR基因。结论:113株禽源多杀性巴氏杆菌存在多重耐药现象,且floR耐药基因较为流行。本研究结果为上述地区针对禽源多杀性巴氏杆菌临床用药提供科学依据。

关键词：多杀性巴氏杆菌耐药性耐药基因 floR基因

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血清11型鸭疫里默氏菌的分离鉴定

中国农学通报 2012年第5期28卷 23-27页

作者：杨晓辉程龙飞陈红梅施少华傅光华万春和黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013 江西农业大学动物科学学院南昌330045 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福州350013

从同一发病鸭场间隔4天分离到两株鸭疫里默氏菌(RA1156和RA1157),为比较它们的差异。采用平板凝集试验和琼扩试验鉴定血清型,纸片法测定耐药性,动物试验测定致病性。结果显示:两株鸭疫里默氏菌的血清型相同,均为11型;对樱桃谷鸭的致病... 详细信息

从同一发病鸭场间隔4天分离到两株鸭疫里默氏菌(RA1156和RA1157),为比较它们的差异。采用平板凝集试验和琼扩试验鉴定血清型,纸片法测定耐药性,动物试验测定致病性。结果显示:两株鸭疫里默氏菌的血清型相同,均为11型;对樱桃谷鸭的致病性相同;对大多数药物的敏感性相同,RA1156对庆大霉素和青霉素敏感,而RA1157对庆大霉素和青霉素耐药。结果确认了11型鸭疫里默氏菌在福建的存在,增添了福建省鸭疫里默氏菌的流行病学资料;与实验室人工诱导相比,体内的鸭疫里默氏菌更容易产生耐药性。

关键词：鸭疫里默氏菌分离鉴定血清型平板凝集试验试验测定庆大霉素耐药性致病性

榆林市定边县农产品区域公用品牌建设现状与对策

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农业工程 2022年第1期12卷 154-157页

作者：江凤香郭春河郇宇苏丹西安培华学院陕西西安710125 陕西中信蓝海集团有限公司陕西西安710000

加强农产品区域公用品牌建设能够提升农产品竞争力,增加农产品溢价空间,促进品牌农业发展,也是实施乡村振兴战略的重要措施。分析了陕西省榆林市定边县农产品区域公用品牌建设现状及存在的问题,提出了定边县农产品区域公用品牌建设的对... 详细信息

加强农产品区域公用品牌建设能够提升农产品竞争力,增加农产品溢价空间,促进品牌农业发展,也是实施乡村振兴战略的重要措施。分析了陕西省榆林市定边县农产品区域公用品牌建设现状及存在的问题,提出了定边县农产品区域公用品牌建设的对策,包括构建溯源体系、建立品牌识别体系、搭建品牌推广体系和建立品牌维护与监督体系,推动定边县特色农产品发展。

关键词：农产品区域公用品牌溯源体系品牌识别乡村振兴定边县

引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的新发病毒——C型禽偏肺病毒

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福建农业学报 2023年第12期38卷 1387-1394页

作者：傅秋玲江南松梁齐章刘荣昌万春和程龙飞陈红梅林琳焦文龙吴胜会江斌郑小兰林建生傅光华黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室/福建省畜禽疫病防控产业技术创新研究院福建福州350013

【目的】明确引起种(蛋)鸭特征性输卵管积液和产蛋下降的新发疫病[俗称种(蛋)鸭输卵管积液综合征]的病原。【方法】对自闽粤赣浙皖桂等地产蛋率较高的部分鸭群表现以输卵管内乳糜性积液、黏膜出血水肿增厚及不同程度产蛋下降为特征的病(... 详细信息

【目的】明确引起种(蛋)鸭特征性输卵管积液和产蛋下降的新发疫病[俗称种(蛋)鸭输卵管积液综合征]的病原。【方法】对自闽粤赣浙皖桂等地产蛋率较高的部分鸭群表现以输卵管内乳糜性积液、黏膜出血水肿增厚及不同程度产蛋下降为特征的病(死)麻鸭、樱桃谷种鸭和种番鸭中采集的样品(输卵管积液、输卵管黏膜、卵巢和肝脾脏器),开展鸭已知病原核酸监测、病原分离鉴定和开产麻鸭人工感染试验。【结果】细菌分离显示,输卵管积液里未分离到细菌,排除细菌感染引起;经病毒核酸监测,只有C型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup C,aMPV/C)阳性,未检测到其他引起禽产蛋异常的病毒;以aMPV/C单一阳性的样品经鸭胚进行病毒分离与传代,发现接种鸭胚未见死亡,但胚体表面稍水肿和出血、肝脏出血;对第5代鸭胚液进行RT-PCR检测,结果显示a MPV/C分离阳性率为72.2%;对获得的4株分离株(JX2126、FJ2228、FJ2375和GD2381株)的基因片段进行测序和序列分析发现,该片段与最早报道的番鸭a MPV/C法国分离株(Muscovy duck/1999/99178/France)同源性最高,为96.1%,而与A、B、D型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup A,B,D,aMPV/A,B,D)分离株的同源性仅分别为67.8%~68.7%、66.1%~66.8%和71.4%,与人偏肺病毒(Human metapneumoviurs,hMPV)分离株的同源性为67.7%~68.3%;遗传进化分析表明,以上4株分离株与a MPV/C处于同一进化分支上,而与其他亚型aMPV和hMPV亲缘关系较远;经开产麻鸭人工感染试验,成功复制出与自然感染病例相同的临床病症,并能回收到病毒。【结论】明确引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的病原为C型禽偏肺病毒。本研究为该病的快速准确诊断和精准防控提供科学依据。

关键词：种(蛋)鸭输卵管积液综合征产蛋下降输卵管积液 C型禽偏肺病毒分离与鉴定

梅兰芳早期演出班社的影响——以喜连成、双庆班、玉成班为例

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北方工业大学学报 2023年第5期35卷 107-115,122页

作者：俞丽伟梅兰芳纪念馆北京100035

梅兰芳作为职业演员,其演出生涯的一生均浸润在演出团体中,但这个重要的群体往往被忽视,鲜少有相关阐述,这就是演出班社。晚清至民国时期,梅兰芳先入喜连成,后搭双庆班,再后搭玉成班、春合社、桐馨社等班社,再自组崇林社、承华社。演出... 详细信息

梅兰芳作为职业演员,其演出生涯的一生均浸润在演出团体中,但这个重要的群体往往被忽视,鲜少有相关阐述,这就是演出班社。晚清至民国时期,梅兰芳先入喜连成,后搭双庆班,再后搭玉成班、春合社、桐馨社等班社,再自组崇林社、承华社。演出班社是戏曲演员重要的艺术场域和职业机构,梅兰芳与其水乳交融,特别是早期演出班社喜连成、双庆班、玉成班对梅兰芳产生了极为深远的影响,班社的发展直接推动了梅兰芳戏曲艺术的提升,梅兰芳携手经验丰富的舞台合作伙伴,推出众多叫好又叫座的演出剧目,充分体现出戏曲一棵菜的精神。梅兰芳与班社的合作与创新也推动了当时戏曲艺术的繁荣。

关键词：演出班社梅兰芳喜连成双庆班玉成班

鹅圆环病毒TB Green实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

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福建畜牧兽医 2022年第4期44卷 26-30页

作者：赵敏李家玉黄瑜万春和福建农林大学生命科学学院福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福州350013

鹅圆环病毒主要感染宿主的淋巴细胞,导致其免疫功能下降,造成继发感染和共感染。为建立鹅圆环病毒分子检测方法,本研究根据NCBI数据库中GoCV基因特征,设计特异性引物,建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法。结果显示,建立检测GoCV... 详细信息

鹅圆环病毒主要感染宿主的淋巴细胞,导致其免疫功能下降,造成继发感染和共感染。为建立鹅圆环病毒分子检测方法,本研究根据NCBI数据库中GoCV基因特征,设计特异性引物,建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法。结果显示,建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法,灵敏度高,最低检测限为54.10拷贝/μL;特异性好,与水禽常见传染病病原均无交叉反应,扩增产物的熔解曲线仅GoCV出现1个特异性单峰,Tm值为(84.46±0.09)℃;重复性好,组内和组间重复试验变异系数分别为0.26%~0.55%和0.23%~0.87%。利用建立的TB Green实时荧光定量PCR方法和常规PCR方法同时对64份临床样品进行GoCV感染的检测,结果显示,常规PCR方法检出阳性样品15份,阳性率为23.44%;TB Green实时荧光定量PCR方法检出阳性样品18份,阳性率28.13%,且15份PCR阳性样品经TB Green实时荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%。本研究为后续开展GoCV感染的分子流行病学调查和致病机理研究提供技术支撑。

关键词：鹅圆环病毒 TB Green 实时荧光定量PCR方法

氨苄青霉素与鸭疫里默氏菌噬菌体协同作用的研究

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中国动物传染病学报 2022年第4期30卷 48-53页

作者：程龙飞刘荣昌陈红梅万春和傅光华施少华傅秋玲黄瑜福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建省禽病防治重点实验室福州350013

为研究氨苄青霉素(AMP)和鸭疫里默氏菌噬菌体的协同作用,在亚MIC浓度AMP下,测定噬菌体RAP15对鸭疫里默氏菌RAf63生长的影响、RAP15形成的噬菌斑大小、增殖效果、不同噬菌体株对RAf63的裂解情况。动物试验比较噬菌体、AMP、二者合用对RA... 详细信息

为研究氨苄青霉素(AMP)和鸭疫里默氏菌噬菌体的协同作用,在亚MIC浓度AMP下,测定噬菌体RAP15对鸭疫里默氏菌RAf63生长的影响、RAP15形成的噬菌斑大小、增殖效果、不同噬菌体株对RAf63的裂解情况。动物试验比较噬菌体、AMP、二者合用对RAf63攻击的治疗效果。结果,亚MIC浓度的AMP下,RAP15对RAf63生长的抑制作用提高了4倍、RAP15噬菌斑的大小没有发生变化、RAP15培养后子代噬菌体增加,部分噬菌体株表现出裂解RAf63的能力。RAf63人工感染番鸭后,AMP和RAP15联合治疗组,比单用其中任何一种的效果都更好。研究表明,在体外抑制鸭疫里默氏菌的生长或体内治疗其感染,AMP和噬菌体都具有协同作用。该研究为应用AMP和噬菌体联合制剂来防控传染性浆膜炎提供了理论依据。

关键词：鸭疫里默氏菌噬菌体氨苄青霉素协同作用

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鹅圆环病毒研究进展

福建畜牧兽医 2021年第4期43卷 12-14页

作者：赵敏李家玉何海斌黄瑜万春和福建农林大学生命科学学院福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福州350013 龙岩学院/预防兽医学与生物技术福建省高校重点实验室福建龙岩364012

鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)属于圆环病毒科圆环病毒属成员,鹅群感染后可造成法氏囊、脾和胸腺淋巴细胞减少,从而易继发多种条件性病原二次感染,危害极大。本文从鹅圆环病毒的流行病学特点、基因组特征、致病性及诊断方法等方面... 详细信息

鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)属于圆环病毒科圆环病毒属成员,鹅群感染后可造成法氏囊、脾和胸腺淋巴细胞减少,从而易继发多种条件性病原二次感染,危害极大。本文从鹅圆环病毒的流行病学特点、基因组特征、致病性及诊断方法等方面进行综述。

关键词：鹅圆环病毒流行病学基因组诊断方法研究进展