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Tetracycline-inducible protein expression in pancreatic cancer cells: Effects of CapG overexpression

World Journal of Gastroenterology 2011年第15期17卷 1947-1960页

作者： Sarah Tonack Sabina Patel Mehdi Jalali Taoufik Nedjadi Rosalind E Jenkins christopher goldring John Neoptolemos Eithne Costello Liverpool CR-UK Centre Department of Molecular and Therapeutic Cancer MedicineUniversity of Liverpool Liverpool L69 3GA United Kingdom MRC Centre forDrug Safety Science Department of Pharmacology and Therapeutics School of Biomedical Sciences University of Liverpool L69 3GA United Kingdom National Institute for Health Research Pancreatic Biomedical Research Unit Liverpool L69 3GA United Kingdom

AIM: To establish stable tetracycline-inducible pancreatic cancer cell lines. METHODS: Suit-2, MiaPaca-2, and Panc-1 cells were transfected with a second generation reverse tetracycline-controlled transactivator protein (rtTA2S-M2), under the control of either a cytomegalovirus (CMV) or a chicken β-actin promoter, and the resulting clones were ***: Use of the chicken (β-actin) promoter proved superior for both the production and maintenance of doxycycline-inducible cell lines. The system proved versatile, enabling transient inducible expression of a variety of genes, including GST-P, CYP2E1, S100A6, and the actin capping protein, CapG. To determine the physiological utility of this system in pancreatic cancer cells, stable inducible CapG expressors were established. Overexpressed CapG was localised to the cytoplasm and the nuclear membrane, but was not observed in the nucleus. High CapG levels were associated with enhanced motility, but not with changes to the cell cycle, or cellular proliferation. In CapG-overexpressing cells, the levels and phosphorylation status of other actin-moduating proteins (Cofilin and Ezrin/Radixin) were not altered. However, preliminary analyses suggest that the levels of other cellular proteins, such as ornithine aminotransferase and enolase, are altered upon CapG induction. CONCLUSION: We have generated pancreatic-cancer derived cell lines in which gene expression is fully controllable.

关键词： Pancreatic cancer cells Tetracycline-inducible CapG Suit-2 Panc-1 MiaPaCa-2

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银杏叶提取物及其主要成分抗氧化作用的比较(英文)

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中药材 2009年第5期32卷 736-740页

作者：刘晓平栾佳杰 christopher E.P.goldring 皖南医学院药学系安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院安徽芜湖241001 英国利物浦大学药理系

目的:比较银杏叶提取物(EGb)及其主要成分(银杏黄酮,银杏帖内酯)的抗氧化作用。方法:用EGb、银杏黄酮和银杏帖内酯作用于细胞,Western-blot检测其对抗氧化酶GCLC的诱导作用;用相应的功能检测法测定EGb、银杏黄酮和银杏帖内酯在体外直接... 详细信息

目的:比较银杏叶提取物(EGb)及其主要成分(银杏黄酮,银杏帖内酯)的抗氧化作用。方法:用EGb、银杏黄酮和银杏帖内酯作用于细胞,Western-blot检测其对抗氧化酶GCLC的诱导作用;用相应的功能检测法测定EGb、银杏黄酮和银杏帖内酯在体外直接清除超氧阴离子及羟自由基、抑制大鼠红细胞溶血及大鼠肝组织的脂质过氧化的作用。结果:EGb和银杏黄酮可诱导抗氧化酶GCLC的表达,并能直接清除超氧阴离子及羟自由基、抑制大鼠红细胞溶血及大鼠肝组织的脂质过氧化,而银杏帖内酯无明显的抗氧化作用。EGb的这些抗氧化作用均强于银杏黄酮。结论:EGb抗氧化作用强于银杏黄酮,而银杏帖内酯没有明显的抗氧化作用。

关键词：银杏叶提取物银杏黄酮银杏帖内酯抗氧化作用

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银杏叶提取物双重抗氧化作用的研究(英文)

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中成药 2009年第7期31卷 1004-1009页

作者：刘晓平栾佳杰 christopher E.P.goldring 皖南医学院药学系安徽芜湖241001 皖南医学院附属弋矶山医院安徽芜湖241001 英国利物浦大学药理系

目的:抗氧化物质一般通过诱导抗氧化酶的表达或直接与自由基发生反应这两种方式发挥作用,银杏叶提取物(EGb)的抗氧化作用是通过哪种途径值得研究。在本研究中,我们在体外对两种途径进行了测试。方法:EGb作用于细胞,用Western-blot检测... 详细信息

目的:抗氧化物质一般通过诱导抗氧化酶的表达或直接与自由基发生反应这两种方式发挥作用,银杏叶提取物(EGb)的抗氧化作用是通过哪种途径值得研究。在本研究中,我们在体外对两种途径进行了测试。方法:EGb作用于细胞,用Western-blot检测其对抗氧化酶GST-P1和GCLC的诱导作用;用相应的功能检测法测定EGb在体外直接清除超氧阴离子及羟自由基、抑制大鼠红细胞溶血及大鼠肝组织的脂质过氧化的作用。结果:EGb可诱导抗氧化酶GST-P1和GCLC的表达,并能直接清除超氧阴离子及羟自由基、抑制大鼠红细胞溶血及大鼠肝组织的脂质过氧化。结论:EGb具有诱导抗氧化酶表达及直接清除自由基的双重抗氧化作用。

关键词：银杏叶提取物抗氧化自由基

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