检索结果-南通市图书馆

逆转录病毒介导p16基因转移引起K562白血病细胞系的增殖抑制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2000年第2期8卷 114-117页

作者：武莎莎曹国栋陈德喜潘秀英王申五北京医科大学人民医院血液病研究所北京100044 北京医科大学人民医院中心实验室北京100044

为探讨p16基因对白血病细胞增殖的影响,为白血病发生机理的研究和p16的基因治疗提供实验依据,我们构建了p16的逆转录病毒载体pLMSN,新型双嗜性包装细胞PT67和单嗜性包装细胞ψ包装后,体外转导p16基因缺失的K562细胞.用RT-PCR与荧光免疫... 详细信息

为探讨p16基因对白血病细胞增殖的影响,为白血病发生机理的研究和p16的基因治疗提供实验依据,我们构建了p16的逆转录病毒载体pLMSN,新型双嗜性包装细胞PT67和单嗜性包装细胞ψ包装后,体外转导p16基因缺失的K562细胞.用RT-PCR与荧光免疫法检测外源性P16蛋白的表达,流式细胞术测定细胞周期,活细胞计数观察细胞增殖情况,进行软琼脂集落形成实验.结果表明,转导后K562-p16细胞中可检测到P16蛋白的表达,细胞生长曲线显示细胞增殖明显减慢,G0-G1细胞数增多,RB蛋白去磷酸化,细胞在软琼脂中形成集落能力下降.以上结果提示p16编码序列体外可以抑制白血病细胞的增殖,抑制作用是通过Rb抑制途径实现的.逆转录病毒介导的p16基因转移对白血病的基因治疗具有一定意义.

关键词：肿瘤抑制基因 p16 逆转录病毒白血病细胞系

HIV-1膜蛋白gp120V3环的神经毒性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

首都医科大学学报 2014年第1期35卷 87-91页

作者：张志丽陈兵刚姜太一乔录新吴昊陈德喜张玉林首都医科大学附属北京佑安医院感染中心北京100069 山东省滨州市中心医院感染内科山东滨州251700 北京市肝病研究所北京100069

目的体外观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)膜蛋白gp120 V3环的神经毒性。方法通过小鼠大脑皮质原代神经细胞培养条件下TUNEL检测和培养上清乳酸脱氢酶释放试验,结合抗微管蛋白-2(microtubule associated p... 详细信息

目的体外观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)膜蛋白gp120 V3环的神经毒性。方法通过小鼠大脑皮质原代神经细胞培养条件下TUNEL检测和培养上清乳酸脱氢酶释放试验,结合抗微管蛋白-2(microtubule associated protein-2,MAP-2)免疫荧光试验,观察人重组gp120蛋白神经毒性,并通过蛋白印迹法初步探讨其与凋亡调控蛋白bax与bcl-2的关系。结果重组人gp120 V3环多肽可诱导神经元凋亡和抑制神经突起形成,并呈浓度依赖性。gp120 V3环诱导神经细胞凋亡与抑制bcl-2表达有关。结论 HIV-1膜蛋白gp120 V3环具有神经毒性。

关键词：膜蛋白gp120 神经毒性 V3环凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

自噬与乙型肝炎病毒复制的关系

临床荟萃 2015年第2期30卷 210-213页

作者：王安娜封晓昆闫晓东石英陈德喜首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所北京100069 山东省肿瘤医院普外科山东济南250117

目的探究自噬与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制之间的相互关系。方法利用HepG2细胞,转染绿色荧光标记的微管相关蛋白轻链3(GFP-LC3),分别在正常和饥饿条件下培养,另共转染HBV WT和GFP-LC3,正常条件培养,免疫荧光观察细胞自噬... 详细信息

目的探究自噬与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制之间的相互关系。方法利用HepG2细胞,转染绿色荧光标记的微管相关蛋白轻链3(GFP-LC3),分别在正常和饥饿条件下培养,另共转染HBV WT和GFP-LC3,正常条件培养,免疫荧光观察细胞自噬;分别转染1.3mer HBV野生型质粒(HBV WT)与HBV突变型(HBV X-)质粒,正常和饥饿两种条件下培养,蛋白印迹检测自噬相关蛋白LC3和乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)的表达;细胞转染HBV WT后,分别正常条件培养(对照组),无血清饥饿培养(饥饿组),加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)培养(3-MA组),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)的含量。结果转染HBV WT质粒的细胞内自噬荧光颗粒较对照组明显增加发生自噬的细胞比例分别为13%和2%;饥饿组HBsAg含量(1.856±1.415)较对照组(1.531±0.944)升高,HBeAg含量(0.533±0.391)较对照组(0.334±0.110)升高,差异具有统计学意义(P<0.05);自噬抑制剂组HBsAg含量(1.184±0.759)较饥饿组(1.856±1.415)降低,HBeAg含量(0.306±0.130)较饥饿组(0.533±0.391)降低(P<0.05);蛋白印迹显示,转染HBV WT质粒的细胞中LC3蛋白表达较HBV X-组增高,且在饥饿条件下,HBc蛋白的表达增高。结论乙型肝炎病毒可诱导细胞自噬的发生,且自噬可促进乙型肝炎病毒的复制。

关键词：肝炎病毒,乙型自噬病毒复制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

核苷类似物对小鼠中枢神经线粒体毒性研究

北京医学 2014年第9期36卷 744-747,F0002页

作者：郭向华闫丽宋凤丽乔录新陈德喜张玉林首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所 100069 首都医科大学附属北京佑安医院教育处 100069 首都医科大学附属北京佑安医院感染中心 100069

目的探讨长期使用核苷类似物是否产生中枢神经元线粒体损伤。方法取7周龄Balb/C小鼠40只,分为4组,每组10只。实验组每天分别喂饲司它夫定(D4T)50 mg/kg、齐多夫定(AZT)100 mg/kg和拉米夫定(3TC)50 mg/kg,每周5 d,连续16周;对照组喂服双... 详细信息

目的探讨长期使用核苷类似物是否产生中枢神经元线粒体损伤。方法取7周龄Balb/C小鼠40只,分为4组,每组10只。实验组每天分别喂饲司它夫定(D4T)50 mg/kg、齐多夫定(AZT)100 mg/kg和拉米夫定(3TC)50 mg/kg,每周5 d,连续16周;对照组喂服双蒸水。通过激光单细胞捕获技术抓取小鼠大脑皮层神经元,每组200个细胞,通过实时定量PCR观察线粒体DNA(mtDNA)含量变化。结果 COXⅡ基因扩增显示,喂饲核苷类似物可明显减低小鼠大脑皮层神经元mtDNA拷贝数,其中D4T组减少至对照组的(22.2±3.2)%,AZT组减少至对照组的(53.6±7.1)%,3TC组减少至对照组的(34.6±8.2)%。同时,与对照组相比,ND4基因扩增显示,mtDNA主环拷贝数明显减低,D4T、AZT、3TC组分别为对照组的(25.2±7.3)%、(46.3±9.1)%和(42.3±7.4)%。与对照组比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。但是,3组ND1基因扩增显示,mtDNA小环拷贝数依次为对照组的(67.7±5.2)%、(53.5±9.2)%和(94.4±8.3)%。AZT与对照组比较,mtDNA小环拷贝数明显降低(P﹤0.05),其他两组与对照组比较则无明显变化。结论长期使用核苷类似物可产生小鼠神经元mtDNA损伤,且以主环缺失为主。

关键词：线粒体毒性神经毒性核苷类似物

沉默免疫负调控基因技术修饰的树突状细胞治疗原发性肝癌后T淋巴亚群分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胃肠病学和肝病学杂志 2017年第11期26卷 1218-1221页

作者：徐献毅任锋陈德喜李宁谢棒祥朴正福南京医科大学免疫学系江苏南京211166 首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所

目的探究使用沉默免疫负调控基因(iAPA)细胞疗法对原发性肝癌术后患者T淋巴细胞亚群的变化。方法选取南京医科大学附属医院12例原发性肝癌手术切除后患者,男7例,女5例,年龄37~73岁。术前用血细胞分离机采集外周血单个核细胞悬液60 ml,... 详细信息

目的探究使用沉默免疫负调控基因(iAPA)细胞疗法对原发性肝癌术后患者T淋巴细胞亚群的变化。方法选取南京医科大学附属医院12例原发性肝癌手术切除后患者,男7例,女5例,年龄37~73岁。术前用血细胞分离机采集外周血单个核细胞悬液60 ml,贴壁分离培养树突状细胞(DC),iAPA因子(含抑制SOCS1的siRNA等)转染DC。第7天将成熟的DC回输至患者体内。患者治疗两个疗程后,采用流式细胞术检测治疗前后外周血T淋巴细胞亚群。结果患者一般情况普遍得到明显改善。外周血T淋巴细胞亚群检测结果表明:CD3^+T淋巴细胞高于治疗前,CD3^+CD4^+T+CD3^+CD8^+T淋巴细胞比例之和高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 iAPA-DC疗法可以改善原发性肝癌免疫抑制状态,提高T淋巴细胞抗肿瘤效应,是有效的生物细胞技术之一。

关键词：免疫负调控基因树突状细胞原发性肝癌 T淋巴细胞亚群

脑脊液来源人类免疫缺陷病毒tat真核表达载体的构建及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京医学 2014年第6期36卷 433-435,F0003页

作者：刘利锋乔录新李庆李莉李威吴昊陈德喜首都医科大学附属北京佑安医院艾滋病研究北京市重点实验室 100069 首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所 100069

目的探讨脑脊液来源人类免疫缺陷病毒(HIV)tat真核表达载体的构建,并研究TAT蛋白在真核细胞的表达。方法从脑脊液中扩增出HIV tat基因,构建pcDNA-tat真核表达载体,所构建载体经酶切和测序鉴定。将构建的表达载体转染293T细胞系,通过免... 详细信息

目的探讨脑脊液来源人类免疫缺陷病毒(HIV)tat真核表达载体的构建,并研究TAT蛋白在真核细胞的表达。方法从脑脊液中扩增出HIV tat基因,构建pcDNA-tat真核表达载体,所构建载体经酶切和测序鉴定。将构建的表达载体转染293T细胞系,通过免疫荧光检测TAT蛋白的表达。结果成功扩增tat基因,酶切和测序结果证实正确构建了表达载体pcDNA-tat,免疫荧光证实所构建载体能在293T细胞中有效表达HIV TAT目的蛋白。结论成功构建真核表达载体pcDNA-tat,为了解HIV在中枢神经系统的潜伏机制奠定实验基础。

关键词：脑脊液人类免疫缺陷病毒 tat基因载体构建鉴定

3种国产PD-1抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌的药物经济学评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医院药学杂志 2024年第12期44卷 1363-1370页

作者：陈永邦杨晨谢又佳杨宁卢丽清郭德喜吕亚娟谢菲万宁中国人民解放军南部战区总医院临床药学科广东广州510010 广州医科大学附属第一医院药学部广东广州510120 中国人民解放军南部战区总医院肿瘤科广东广州510010 广州中医药大学药学院广东广州510006 南方医科大学药学院广东广州510515

目的:基于真实世界研究数据,探讨使用卡瑞利珠单抗、信迪利单抗和特瑞普利单抗治疗局部晚期及晚期的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的经济性。方法:回顾性纳入2019年3月至2023年2月在南部战区总医院使用卡瑞利珠单抗... 详细信息

目的:基于真实世界研究数据,探讨使用卡瑞利珠单抗、信迪利单抗和特瑞普利单抗治疗局部晚期及晚期的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的经济性。方法:回顾性纳入2019年3月至2023年2月在南部战区总医院使用卡瑞利珠单抗、信迪利单抗和特瑞普利单抗治疗局部晚期及晚期的NSCLC患者共149例,通过逆概率处理加权(inverse probabil⁃ity of treatment weighting,IPTW)方法消除组间混杂因素。基于IPTW处理后3组患者的无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)与不良反应发生率建立分区生存模型来评价3种国产PD-1抑制剂用于治疗局部晚期及晚期NSCLC的成本效果,计算增量成本效果比。结果:进行IPTW处理后的3组患者mPFS(8.20个月vs.14.80个月vs.14.80个月)与mOS(未到达vs.22.70月vs.未到达)未见差异。任一药物发生率大于5%且等级≥3级的不良反应包括:贫血、白细胞计数减少、中性粒细胞计数减少和血小板计数减少。相比信迪利单抗,卡瑞利珠单抗和特瑞普利单抗分别增加了0.50和1.00个QALY临床获益,为增加1个QALY的临床获益需要额外投入的成本分为495151.83和440095.05元,而特瑞普利单抗相比卡瑞利珠单抗每增加1个QALY的获益需投入384563.57元,无论意愿支付值阈值设定为3倍全国人均GDP(257000元/QALY)还是3倍广东省人均GDP(305400元/QALY),相比信迪利单抗,使用卡瑞利珠单抗或是特瑞普利单抗治疗是不具有经济性的,且特瑞普利单抗对比卡瑞利珠单抗也不具备成本效果优势。结论:3种国产PD-1抑制剂中,信迪利单抗最具经济性的,其次是卡瑞利珠单抗,特瑞普利单抗再次之。

关键词：卡瑞利珠单抗信迪利单抗特瑞普利单抗非小细胞肺癌分区生存模型成本效果分析

农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2005年第4期3卷 543-549页

作者：吕彦王平荣孙业盈董春林陈德西邓晓建烟台大学化学生物理工学院烟台264005 四川农业大学水稻研究所成都611130

随着生物技术的发展,水稻基因工程育种在水稻育种中发挥着越来越重要的作用。在诸多的转基因方法中,农杆菌作为一种天然的植物基因转化系统,以其独特优点而倍受重视。本文概述了农杆菌介导转化水稻的原理,农杆菌介导转化水稻的优点并且... 详细信息

随着生物技术的发展,水稻基因工程育种在水稻育种中发挥着越来越重要的作用。在诸多的转基因方法中,农杆菌作为一种天然的植物基因转化系统,以其独特优点而倍受重视。本文概述了农杆菌介导转化水稻的原理,农杆菌介导转化水稻的优点并且介绍了农杆菌菌株、受体材料和培养基成分的不同对农杆菌介导转化水稻的影响。另外对农杆菌介导遗传转化在水稻抗虫基因工程育种、抗病基因工程育种、抗逆基因工程育种、优质基因工程育种、耐除草剂基因工程育种及提高水稻光合效率和延缓衰老方面的研究进展进行了综述。最后对农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中存在的问题和发展前景做了简要说明。

关键词：基因工程育种遗传转化农杆菌介导转化应用基因转化系统转基因方法培养基成分生物技术水稻育种受体材料研究进展延缓衰老光合效率耐除草剂发展前景抗虫抗病抗逆优质

合并中枢神经系统机会性感染患者的中枢HIV-1载量和变异性增高

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

首都医科大学学报 2014年第1期35卷 81-86页

作者：刘远志陈兵刚丁渭乔录新赵青霞吴昊陈德喜张玉林首都医科大学附属北京佑安医院感染中心北京100069 山东省滨州市中心医院感染内科山东滨州251700 北京市肝病研究所北京100069 河南省传染病医院感染科郑州450015

目的探讨合并中枢神经系统机会性感染患者的中枢人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)病毒学特征。方法 40例输血感染HIV-1且处于艾滋病期人群,其中24例合并中枢神经系统机会性感染者(实验组),16例不合并中枢神经... 详细信息

目的探讨合并中枢神经系统机会性感染患者的中枢人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)病毒学特征。方法 40例输血感染HIV-1且处于艾滋病期人群,其中24例合并中枢神经系统机会性感染者(实验组),16例不合并中枢神经系统机会性感染者(对照组)。所有患者都进行外周血和脑脊液(cerebro-spinal fluid,CSF)病毒载量检测,并通过多重反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法对中枢HIV-1包膜蛋白C2-V5区进行扩增测序和序列分析。结果两组患者间血浆HIV-1病毒载量差异无统计学意义,但实验组脑脊液HIV-1病毒载量明显增高;两组患者间CD4小计数差异无统计学意义;实验组和对照组血浆与脑脊液病毒载量,以及脑脊液病毒载量与CD4计数均无明显线性相关性;针对中枢HIV-1包膜蛋白C2-V5区序列分析显示,实验组中枢HIV-1病毒变异性明显增加。结论合并中枢神经系统机会性感染患者的中枢HIV-1载量和病毒变异性增高。

关键词：艾滋病中枢神经系统 HIV-1 机会性感染病毒载量变异性