检索结果-南通市图书馆

卵形鲳鲹MHC Ⅱα及MHC Ⅱβ组织特异性表达分析

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海南大学学报（自然科学版） 2018年第2期36卷 101-109页

作者：张小其孙云周永灿曹贞洁海南省南海海洋资源利用国家重点实验室海南大学海南海口570228 海南大学海洋学院海南海口570228

为了从蛋白水平和mRNA水平上比较和分析MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况,本研究构建了重组载体p ET32a(+)/M-Ⅱα和p ET32a(+)/M-Ⅱβ来诱导其表达,并制备了多克隆抗体,而且通过qRT-PCR技术分析了MHC Ⅱ类基因在... 详细信息

为了从蛋白水平和mRNA水平上比较和分析MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况,本研究构建了重组载体p ET32a(+)/M-Ⅱα和p ET32a(+)/M-Ⅱβ来诱导其表达,并制备了多克隆抗体,而且通过qRT-PCR技术分析了MHC Ⅱ类基因在卵形鲳鲹正常组织中的表达.结果显示,本研究成功表达了卵形鲳鲹MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因的融合蛋白,并制备出了效价高和特异性强的多克隆抗体;在利用Western Blot技术分析MHC Ⅱα或MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中对蛋白的表达情况时,均检测到一条大小约70k Da的疑似MHC Ⅱαβ二聚体的单一条带,且该MHC Ⅱαβ二聚体在脾脏、头肾、肠道、鳃中的表达量较高,而在胃、心、脑、肝中的表达量稍低.qRT-PCR的分析结果一致表明,MHC Ⅱ类基因广泛分布在不同组织中,尤其在与免疫相关的组织(脾脏、头肾、肠道、鳃)中,其具有较高表达量.

关键词：卵形鲳鲹 MHC Ⅱ类分子原核表达多克隆抗体组织表达

哈维氏弧菌vgrG基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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海南大学学报（自然科学版） 2023年第1期41卷 30-37页

作者：要欣平周永灿孙云曹贞洁海南大学海南省南海海洋资源利用国家重点实验室海南海口570228 海南大学海南省热带水生生物技术重点实验室海南海口570228

VI型分泌系统(T6SS)是革兰氏阴性菌特有的一种多功能分泌系统,它与致病菌的致病性密切相关;而vgrG则是T6SS系统的结构蛋白之一,它与T6SS的功能直接相关.为了获得哈维氏弧菌vgrG基因的外源重组蛋白及制备其多克隆抗体,本研究以哈维氏弧菌... 详细信息

VI型分泌系统(T6SS)是革兰氏阴性菌特有的一种多功能分泌系统,它与致病菌的致病性密切相关;而vgrG则是T6SS系统的结构蛋白之一,它与T6SS的功能直接相关.为了获得哈维氏弧菌vgrG基因的外源重组蛋白及制备其多克隆抗体,本研究以哈维氏弧菌QT520菌株的DNA为模板,在扩增获得vgrG基因后,构建了原核表达载体pET32a-vgrG并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达.结果显示,在16℃和1mmol·L^(-1)IPTG诱导20 h的条件下,可诱导重组蛋白rvgrG大量表达,条带大小与预期的分子量(88 kDa)一致;通过Ni^(2+)亲和层析柱对融合蛋白rvgrG进行纯化,获得了纯度较高的目的蛋白rvgrG;将rvgrG重组蛋白通过腹腔注入小鼠体内后观察其毒性,结果显示rvgrG对小鼠无毒害作用;进一步用纯化蛋白rvgrG制备多克隆抗体,经ELISA检测,vgrG多克隆抗体的效价高达1∶320000;蛋白免疫印迹(Western blot)检测表明,本实验所制备的vgrG多克隆抗体特异性强,可为后续进行vgrG蛋白的致病性及致病机制研究提供良好的实验材料.

关键词：哈维氏弧菌 vgrG 原核表达多克隆抗体

中华绒螯蟹“蟹黄”与“蟹膏”的营养成分比较分析

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水产科学 2017年第2期36卷 178-182页

作者：曹振杰付春鹏周嗣泉王茂剑李娴王慧山东省淡水渔业研究院山东济南250013 潍坊科技学院山东寿光262700 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

本试验对中华绒螯蟹"蟹黄"与"蟹膏"的粗蛋白、氨基酸、粗脂肪、脂肪酸、卵磷脂和维生素等营养成分进行了测定分析。试验结果表明,蟹黄与蟹膏中的粗蛋白质含量为29.79%和9.64%,蟹黄显著高于蟹膏(P0.05),不饱和脂肪酸含量丰富,蟹黄高于蟹... 详细信息

本试验对中华绒螯蟹"蟹黄"与"蟹膏"的粗蛋白、氨基酸、粗脂肪、脂肪酸、卵磷脂和维生素等营养成分进行了测定分析。试验结果表明,蟹黄与蟹膏中的粗蛋白质含量为29.79%和9.64%,蟹黄显著高于蟹膏(P0.05),不饱和脂肪酸含量丰富,蟹黄高于蟹膏,差异不显著(P>0.05);蟹黄中卵磷脂、维生素A、D、E的含量均显著高于蟹膏(P<0.05)。试验表明,蟹黄比蟹膏具有更高的营养与食用价值。

关键词：中华绒螯蟹蟹黄蟹膏营养成分

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山东省淡水鱼类资源现状研究

农学学报 2013年第7期3卷 44-51页

作者：曹振杰李娴童春董俊王兰明山东省淡水水产研究所/山东省淡水水产遗传育种重点实验室济南250013

为进行环保部山东省生物多样性评价试点工作,对山东内陆水系的淡水鱼类资源进行了调查和采集,共采集到野生鱼类153种,分别隶属于15个目31个科,其中鲤形目2科79种,占51.6%,在山东淡水鱼资源中占优势。对所调查的120个县级单元内淡水鱼类... 详细信息

为进行环保部山东省生物多样性评价试点工作,对山东内陆水系的淡水鱼类资源进行了调查和采集,共采集到野生鱼类153种,分别隶属于15个目31个科,其中鲤形目2科79种,占51.6%,在山东淡水鱼资源中占优势。对所调查的120个县级单元内淡水鱼类分布的区域性进行了分析,提出了保护建议。

关键词：淡水鱼类资源调查山东省

不同病原性相关分子模式对大黄鱼头肾巨噬细胞免疫功能的影响

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热带生物学报 2020年第3期11卷 274-280页

作者：刘肖岑周永灿曹贞洁孙云海南大学海南省南海海洋资源利用国家重点实验室/海南省热带水生生物技术重点实验室海口570228 海南大学海洋学院水产养殖系海口570228

为研究不同病原性相关分子模式(PAMP)对大黄鱼头肾巨噬细胞免疫功能的影响,本研究分别将脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、肽聚糖(peptidoglycan,PGN)、脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)、胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)与提取的大黄鱼头肾巨噬细胞进行孵育,测定大黄鱼头肾巨噬细胞的呼吸爆发活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、溶菌酶(LZM)活性和免疫相关细胞炎症因子(TNFα,IL1β,IL8,IL10,CXCL9,MYD88,TLR3和TLR8)的表达情况。结果显示:(1)LPS,PGN,LTA,MDP均能显著提高大黄鱼头肾巨噬细胞的呼吸爆发活性和LZM活性,同时显著降低SOD和CAT两种抗氧化酶的活性;(2)在LPS和LTA刺激下,8种免疫相关细胞炎症因子TNFα,IL1β,IL8,IL10,CXCL9,MYD88,TLR3和TLR8均呈显著性上调趋势;在PGN和MDP刺激下,除IL8,CXCL9外,其余6种免疫相关细胞炎症因子均显著性上调。结果表明,4种病原相关分子模式LPS,PGN,LTA,MDP均能显著影响大黄鱼头肾巨噬细胞的非特异性免疫应答能力和免疫相关细胞炎症因子的表达。

关键词：大黄鱼巨噬细胞病原相关分子模式非特异性免疫细胞因子

鸭坦布苏病毒prM蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定

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畜牧与兽医 2024年第1期56卷 98-106页

作者：刘亚林梁真洁杨兴淼曹瑞兵南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)膜前体蛋白(prM)的单克隆抗体,将原核表达的重组prM蛋白配伍佐剂免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA筛选,获得2株能稳定分泌抗DTMUV prM蛋白单克隆抗... 详细信息

为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)膜前体蛋白(prM)的单克隆抗体,将原核表达的重组prM蛋白配伍佐剂免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA筛选,获得2株能稳定分泌抗DTMUV prM蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3H4和5C10。2株杂交瘤细胞均能稳定分泌抗体,制备的腹水抗体效价分别为1∶51200和1∶102400。亚型鉴定结果显示,3H4和5C10单克隆抗体的重链均属于IgG2b,轻链均为Kappa型。Western blot和间接免疫荧光试验结果显示,这2株单克隆抗体均能与BHK-21细胞中感染的DTMUV发生特异性反应,而与同属的日本脑炎病毒无交叉反应。微量病毒空斑减少中和试验结果表明,这2株单克隆抗体均具有中和活性。进一步原核表达prM蛋白不同截短体,发现2株单抗针对不同表位,均位于prM蛋白的pr片段上。本研究制备的单克隆抗体3H4和5C10为快速检测DTMUV感染和研究prM蛋白的结构与功能奠定了基础。

关键词：鸭坦布苏病毒 prM蛋白原核表达单克隆抗体 B细胞表位

维普期刊数据库博看期刊

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宜昌伍家岗长江大桥桥塔上横梁施工分析

施工技术（中英文） 2021年第22期50卷 69-71页

作者：石广曹振杰方小林何承林中建三局集团有限公司湖北武汉430064 中建三局第三建设工程有限责任公司湖北武汉430074

介绍伍家岗长江大桥北岸桥塔上横梁施工方案,上横梁与塔柱异步施工,上横梁分2层浇筑,并在第2层浇筑前张拉部分预应力筋。采用有限元软件对上横梁整个施工过程进行模拟分析,结果表明,上横梁混凝土分层浇筑时混凝土应力满足规范要求,且可... 详细信息

介绍伍家岗长江大桥北岸桥塔上横梁施工方案,上横梁与塔柱异步施工,上横梁分2层浇筑,并在第2层浇筑前张拉部分预应力筋。采用有限元软件对上横梁整个施工过程进行模拟分析,结果表明,上横梁混凝土分层浇筑时混凝土应力满足规范要求,且可有效减小现浇托架所受的荷载;张拉部分预应力筋可进一步减小混凝土应力。

关键词：桥梁工程悬索桥上横梁异步施工有限元分析

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山东省生物多样性县域分布

生态科学 2014年第5期33卷 1012-1016页

作者：田贵全宗雪梅孟祥亮张学杰耿德江曹振杰山东省环境监测中心站济南250101 山东师范大学生命科学学院济南250014 山东省野生动植物保护站济南250014 山东省淡水水产研究所济南250013

生物多样性保护是继气候变化之后又一全球环境热点,并已上升为国家战略。摸清生物多样性区域分布状况是生物多样性保护的一项基础工作。以县级行政区域为单元,全面、系统地调查了山东省生态系统类型、野生高等动物、野生维管束植物、植... 详细信息

生物多样性保护是继气候变化之后又一全球环境热点,并已上升为国家战略。摸清生物多样性区域分布状况是生物多样性保护的一项基础工作。以县级行政区域为单元,全面、系统地调查了山东省生态系统类型、野生高等动物、野生维管束植物、植被垂直层谱、特有物种、受威胁物种、外来入侵物种的种类及其县域分布状况,并发现了王锦蛇(Elaphe carinata)、乌梢蛇(Zaocys dhumnades)、北滑蜥(Scincella septentrionalis)等山东省新记录种,建立了山东省各县域的物种名录和生物多样性数据库,讨论了生物多样性县域分布格局。

关键词：生物多样性县域分布山东省

癫痫患者对自身疾病的认知情况及生活质量调查

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中国实用神经疾病杂志 2014年第5期17卷 39-40页

作者：李德生周秀丽王芳曹辰杰中国人民解放军总医院内科临床部神经内科北京100853 北京市朝阳医院京西院区神经内科北京100043

目的调查癫痫患者的生活质量,并探讨其对自身疾病的认知情况。方法选取我院2012-01—2013-01收治的癫痫患者100例,将其作为观察组,另征集100例经过各项体检的健康志愿者作为对照组。2组均进行R’SPM评分测试以及QOLIE-31评分测试,通过... 详细信息

目的调查癫痫患者的生活质量,并探讨其对自身疾病的认知情况。方法选取我院2012-01—2013-01收治的癫痫患者100例,将其作为观察组,另征集100例经过各项体检的健康志愿者作为对照组。2组均进行R’SPM评分测试以及QOLIE-31评分测试,通过评分判断癫痫患者认知功能障碍情况及其对患者生活质量的影响程度。记录并分析评分结果。结果观察组患者认知功能缺陷占36%,明显高于对照组,中等水平患者占45%,明显低于对照组;观察组患者A、B、C、D、E各项评分均明显低于对照组,QOLIE-31评分(53.7±13.2),明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫患者认知能力平均评分较低,认知功能呈不同程度下降,生活质量下降,需引起临床重视。

关键词： QOLIE-31评分认知情况生活质量调查 R' SPM评分