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猪肺炎支原体和猪鼻支原体TaqMan双重荧光pcR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2024年第2期45卷 11-16页

作者：周颖赵硕覃国喜梁龙华肖婷陈忠伟卢冰霞秦毅斌林昌华张胜斌段群棚胡庭俊何颖广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001 广西农垦永新畜牧集团金光公司广西南宁530042 广西农垦永新畜牧集团西江公司广西贵港537100

为建立一种可快捷鉴别检测猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的方法,针对Mhp的183基因和Mhr的p37基因保守片段,分别设计合成引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立一种可同时检测Mhp和Mhr的TaqMan双重荧光pcR方法,并评价其特异性、敏感... 详细信息

为建立一种可快捷鉴别检测猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的方法,针对Mhp的183基因和Mhr的p37基因保守片段,分别设计合成引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立一种可同时检测Mhp和Mhr的TaqMan双重荧光pcR方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果表明,该方法特异性强,检测其他常见猪呼吸系统病原不发生交叉反应;对标准品pMD18-T-Mhp-183、pMD18-T-Mhr-p37的最低检测限分别达45.2 copies/μl和29.7 copies/μl,比普通pcR检测灵敏度提高10^(3)~10^(4)倍;该方法检测结果的批内与批间变异系数均小于2%。用该方法检测145份广西自治区内临床样品,从中检出82份Mhp和9份Mhr阳性样品。该方法可用于临床样品快速检测及实验室Mhp和Mhr的鉴定,可为Mhp和Mhr在猪群中的早期监测提供技术支持。

关键词：猪肺炎支原体猪鼻支原体 TaqMan荧光定量pcR

miR-373-3p在糖尿病视网膜病变血清中的表达及靶向VEGFA抑制视网膜微血管内皮细胞增殖

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解放军医学杂志 2024年

作者：贾佳张林昌张海霞天津市第五中心医院/北京大学滨海医院眼科

目的探讨miR-373-3p在糖尿病视网膜病变（DR）患者血清中的表达及调控血管内皮生长因子A(VEGFA)在高糖（HG）处理的人视网膜微血管内皮细胞（HRMEc）中的作用与机制。方法采集2021年2月—2022年2月在天津市第五中心医院就诊的DR患者及... 详细信息

目的探讨miR-373-3p在糖尿病视网膜病变（DR）患者血清中的表达及调控血管内皮生长因子A(VEGFA)在高糖（HG）处理的人视网膜微血管内皮细胞（HRMEc）中的作用与机制。方法采集2021年2月—2022年2月在天津市第五中心医院就诊的DR患者及非DR患者的血清，qRT-pcR检测miR-373-3p和VEGFAm RNA表达情况。采用HG处理HRMEc构建体外DR模型。将HRMEc分为对照组（5 mmol/l葡萄糖和25 mmol/l甘露醇处理）、HG组（30 mmol/l葡萄糖处理）、HG+miR-373-3p模拟物阴性对照（miR-con）组（转染miR-con后30 mmol/l葡萄糖处理）、HG+miR-373-3p模拟物（miR-373-3p）组（转染miR-373-3p后30mmol/l葡萄糖处理）、HG+miR-373-3p+vector组（转染miR-373-3p和vector后30 mmol/l的葡萄糖处理）和HG+miR-373-3p+VEGFA组（转染miR-373-3p和VEGFA后30 mmol/l葡萄糖处理）。采用qRT-pcR和Westernblotting分析各组转染效率。采用ccK-8法、免疫荧光、Transwell实验、血管形成实验和Western blotting评估HRMEc的增殖、迁移及血管生成能力。采用双荧光素酶测定miR-373-3p与VEGFA之间的关系。结果与非DR患者比较，DR患者血清中miR-373-3p表达降低（ppc中miR-373-3p表达明显降低（ppp模拟物可明显抑制HG对HRMEc增殖、迁移和血管生成的促进作用（pp可靶向调控VEGFA的表达（pp上调对HG诱导的HRMEc增殖、迁移和血管生成能力的抑制作用（pp在DR患者血清中低表达，其可能通过靶向VEGFA抑制HG诱导的HRMEc功能障碍。

关键词： miR-373-3p 糖尿病视网膜病变血管内皮生长因子A 高糖人视网膜微血管内皮细胞

耦合cO_(2)脱气的岩溶地热水结垢趋势定量分析

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地学前缘 2024年第3期31卷 402-409页

作者：吕良华王水江苏省环境科学研究院江苏省环境工程重点实验室江苏南京210036 南京水利科学研究院江苏南京210029 江苏省土壤与地下水污染防控工程研究中心江苏南京210036

岩溶地热系统是最具开发潜力的水热型地热系统之一,在水热型地热资源利用中,地热水结垢(尤其是井下结垢)是目前面临的最普遍、最重要的问题之一,制约着地热水资源可持续利用。针对岩溶地热水结垢趋势分析方法存在的不足,在重点考虑cO_(2... 详细信息

岩溶地热系统是最具开发潜力的水热型地热系统之一,在水热型地热资源利用中,地热水结垢(尤其是井下结垢)是目前面临的最普遍、最重要的问题之一,制约着地热水资源可持续利用。针对岩溶地热水结垢趋势分析方法存在的不足,在重点考虑cO_(2)脱气这一重要过程对结垢趋势影响的基础上,利用化学热力学模拟技术构建了一种耦合cO_(2)脱气过程的结垢趋势定量分析的改进方法,并将其应用于南京汤山岩溶地热区。结果表明汤山地区地热水不具有发生SiO 2结垢的趋势;在井口有发生碳酸盐结垢趋势,主要成分为cacO_(3);井筒中下部有发生不同程度的硫酸盐结垢趋势,主要成分为caSO_(4),SrSO_(4),BaSO_(4)。本研究在改进结垢趋势分析方法不足的同时,为防垢除垢工作提供了理论基础和方法指导,可有力促进地热水资源的可持续利用。

关键词：岩溶地热水可持续利用结垢趋势分析 cO_(2)脱气地球化学模拟汤山

lncRNA TUG1靶向调节miR-31-5p对急性胰腺炎小鼠炎症反应的影响

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中国免疫学杂志 2024年第5期40卷 1048-1054页

作者：林昌永王海波朱千三温州市中医院外科温州325000

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(Ap)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(Mpc-83),用脂多糖(lpS,10μg/ml)和雨蛙素(caerulein,100 nmol/l)处理3 h,建立Ap模型。实验分为对照组(control组)... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(Ap)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(Mpc-83),用脂多糖(lpS,10μg/ml)和雨蛙素(caerulein,100 nmol/l)处理3 h,建立Ap模型。实验分为对照组(control组)、Ap组、Ap+sh-Nc组、Ap+sh-TUG1组、Ap+sh-TUG1+inhibitor-Nc组、Ap+sh-TUG1+miR-31-5p inhibitor组。实时荧光定量pcR(qRT-pcR)检测细胞中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;ccK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ElISA检测细胞上清液中Il-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TUG1和miR-31-5p之间的靶向关系。构建Ap小鼠模型,给予相应的干预后,qRT-pcR检测胰腺组织中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;试剂盒检测血清中炎症因子Il-1β、TNF-α含量和淀粉酶(AMY)和脂肪酶(lipase)活性;HE染色观察胰腺组织病理学变化;TUNEl检测胰腺组织中细胞凋亡。结果:在caerulein和lpS共同处理的Mpc-83细胞中lncRNA TUG1水平、细胞凋亡率、Il-1β和TNF-α水平升高,miR-31-5p水平、细胞活力降低(均plncRNA TUG1可上调miR-31-5p,增加细胞活力,降低Il-1β和TNF-α水平,抑制细胞凋亡(均pp表达可减弱敲低lncRNA TUG1对细胞炎症反应的抑制作用。miR-31-5p是lncRNA TUG1的直接靶标。在体内敲低lncRNA TUG1表达可上调Ap小鼠胰腺组织中miR-31-5p表达,降低Il-1β、TNF-α水平,减少细胞凋亡,改善胰腺组织损伤。结论:敲低lncRNA TUG1可能通过上调miR-31-5p表达水平,抑制炎症反应,改善Ap。

关键词：长链非编码RNA牛磺酸上调基因1 急性胰腺炎腺泡细胞炎症 miR-31-5p

增材制造高性能微通道换热器模块化单元传热与压损实验

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工程热物理学报 2024年第1期45卷 186-193页

作者：吕玥萱肖克华饶宇上海交通大学机械与动力工程学院上海200240

面向微型燃气轮机能效提升迫切需求,针对其回热循环工况设计了一款适合应用增材制造技术加工的高性能微通道回热器。结合逆流式换热器的基础研究与金属增材制造的特点,设计了模块化的波纹板微通道换热器单元,采用激光选区熔融技术(SlM)... 详细信息

面向微型燃气轮机能效提升迫切需求,针对其回热循环工况设计了一款适合应用增材制造技术加工的高性能微通道回热器。结合逆流式换热器的基础研究与金属增材制造的特点,设计了模块化的波纹板微通道换热器单元,采用激光选区熔融技术(SlM)完成不锈钢样机加工,并使用自行搭建的实验系统对其进行了性能测试。样件具有52个高度为0.7 mm的换热微通道,紧凑度超过1700 m^(2)/m^(3)。实验测试表明,该增材制造换热器在相对压损小于2%的条件下,平均Nu数相比传统方式加工的平板原表面换热器可提升88.9%,其关键性能参数在现有紧凑式换热器中具有先进性。

关键词：微通道换热器增材制造稳态试验传热压损

基于非恒定渐变流-急变流方程的变流量畦灌数值模型

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农业机械学报 2024年第4期55卷 251-261页

作者：刘凯华李江吕玉平缴锡云郭维华顾哲河海大学水文水资源学院南京210098 河海大学农业科学与工程学院南京210098 扬州大学水利科学与工程学院扬州225009

传统畦灌模型多是基于非恒定渐变流方程建立的,在模拟变流量畦灌水流运动时的精度难以保障。本文综合分析了变流量畦灌过程中田面水流的运动状况,将其按照边界条件的不同划分为恒定流量进水阶段、变流量进水阶段、畦首消退阶段、田面消... 详细信息

传统畦灌模型多是基于非恒定渐变流方程建立的,在模拟变流量畦灌水流运动时的精度难以保障。本文综合分析了变流量畦灌过程中田面水流的运动状况,将其按照边界条件的不同划分为恒定流量进水阶段、变流量进水阶段、畦首消退阶段、田面消退第1阶段、田面消退第2阶段等5个阶段,基于非恒定渐变流方程和非恒定急变流方程构建了适用于变流量畦灌系统的渐变流-急变流数值模型,通过2组恒定流量畦灌、4组变流量畦灌的田间试验以及2组文献资料中的畦灌试验数据对模型进行了验证。结果表明,渐变流-急变流畦灌模型模拟值与现场实测结果吻合较好,模拟推进时间决定系数R^(2)均大于0.96、模拟消退时间R^(2)大于0.90。与目前常用的WinSRFR模型相比,渐变流-急变流畦灌数值模型在模拟恒定流量畦灌方面具有相似的精度,且在模拟变流量畦灌方面精度更高。渐变流-急变流畦灌模型可以较精准地模拟变流量畦灌的水流运动状况,可为分析变流量畦灌系统、优化变流量畦灌方案提供支撑。

关键词：畦灌变流量数值模拟非恒定急变流推进消退过程

藜麦与黑大麦复合谷物发酵富集多酚和黄酮工艺优化及其生物有效性研究

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食品工业科技 2024年第6期45卷 150-160页

作者：江慧斌聂攀吕玮宋立华上海交通大学农业与生物学院上海200240 河北省科技创新服务中心河北石家庄050011

为有效富集藜麦和黑大麦中多酚和黄酮的含量并提高其生物有效性。本研究以多酚和黄酮为响应值,在单因素实验的基础上,通过响应面试验优化植物乳杆菌发酵藜麦和黑大麦复合谷物的工艺条件;通过体外模拟胃肠消化实验,明确复合谷物发酵对酚... 详细信息

为有效富集藜麦和黑大麦中多酚和黄酮的含量并提高其生物有效性。本研究以多酚和黄酮为响应值,在单因素实验的基础上,通过响应面试验优化植物乳杆菌发酵藜麦和黑大麦复合谷物的工艺条件;通过体外模拟胃肠消化实验,明确复合谷物发酵对酚类物质的释放、生物有效性及抗氧化活性的影响。结果表明,藜麦-黑大麦复合谷物发酵富集多酚和黄酮的最优工艺条件为:原料比(藜麦:黑大麦)1:2.4(g/g)、料液比1:8.9(g/ml)、接种量2.0%、发酵时间36.7 h,发酵温度30℃。在该条件下,复合发酵谷物组中多酚和黄酮的含量分别为364.90和264.36 mg/100 g,显著高于未发酵复合谷物以及单独发酵藜麦或黑大麦组(ppp<0.05)。本研究表明,复合发酵藜麦和黑大麦较单一谷物发酵更有利于多酚和黄酮的富集,可在一定程度上改善发酵谷物中酚类物质的生物有效性,并提高谷物的抗氧化活性。

关键词：藜麦黑大麦植物乳杆菌多酚黄酮体外胃肠消化

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输电铁塔装配式基础抗剪键连接的剪切性能

浙江大学学报（工学版） 2024年第6期58卷 1153-1160页

作者：吕庆胡嘉飞麻坚华献宏徐刚浙江大学建筑工程学院浙江杭州310058 金华电力设计院有限公司浙江金华321000 国网浙江省电力有限公司金华供电公司浙江金华321000

预制构件连接方法及其界面剪切性能影响整个输电铁塔装配式基础的受力和变形.针对螺栓连接易松动、变形大之类的问题,提出采用高强灌浆料灌注成形的十字形抗剪键作为输电铁塔装配式基础连接方案.采用室内剪切试验和数值模拟,研究该抗剪... 详细信息

预制构件连接方法及其界面剪切性能影响整个输电铁塔装配式基础的受力和变形.针对螺栓连接易松动、变形大之类的问题,提出采用高强灌浆料灌注成形的十字形抗剪键作为输电铁塔装配式基础连接方案.采用室内剪切试验和数值模拟,研究该抗剪键连接的剪切性能,并与常用的螺栓连接进行对比分析.结果表明:十字形抗剪键剪切破坏模式为剪断型脆性破坏,破坏形态表现为以抗剪键为中心向外略有扩展成菱形.和螺栓连接相比,抗剪键连接的剪切强度略低,但剪切刚度显著提高.浇筑过程中灌浆料外溢对界面抗剪强度有提高作用.抗剪键的抗剪性能与灌浆料强度正相关,但提高灌浆料强度对抗剪性能提升并不明显.抗剪键深度对抗剪性能有影响,但在抗剪键深度超过20 mm后,抗剪键的抗剪性能不再提高.根据剪切试验和数值模拟结果,建议十字形抗剪键设计为长200 mm、宽20 mm、深20 mm.

关键词：输电铁塔装配式基础十字形抗剪键剪切性能剪切试验

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基于位置动力学的线缆运动过程仿真方法

机械工程学报 2024年第6期60卷 21-31,57页

作者：杨炜烽刘检华吕乃静马江涛北京理工大学机械与车辆学院北京100081 北京邮电大学现代邮政学院(自动化学院) 北京100876

针对虚拟环境下活动线缆的运动仿真问题,提出一种基于位置动力学的线缆运动过程仿真方法。该方法首先建立离散cosserat杆模型描述线缆位姿和变形,并构建约束函数来限制线缆变形和避免线缆发生干涉。随后基于位置动力学进行线缆运动仿真... 详细信息

针对虚拟环境下活动线缆的运动仿真问题,提出一种基于位置动力学的线缆运动过程仿真方法。该方法首先建立离散cosserat杆模型描述线缆位姿和变形,并构建约束函数来限制线缆变形和避免线缆发生干涉。随后基于位置动力学进行线缆运动仿真:在每轮位姿求解时,先结合受力与速度预估离散点位置,然后修正离散线缆位姿以满足约束要求,并更新离散点的位置与速度,重复进行上述步骤完成运动过程仿真。最后建立了系列验证实例,对线缆的拉伸、弯曲和扭转变形以及碰撞的响应进行了仿真,并分析比较了不同材料线缆的变形结果,验证了该线缆运动仿真算法的良好计算速度和仿真真实性。

关键词：活动线缆弹性细杆理论运动仿真位置动力学碰撞响应