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Frontiers in Biology 2009年第2期4卷 217-221页

作者： bizeng mao Bowei HE Zaiming CHEN Bingliang WANG Huifeng PAN Debao LI College of Agriculture and Biotechnology Zhejiang UniversityHangzhou 310029China Agricultural Department of Zhejiang Province Hangzhou 310020China

We developed an efficient plant regeneration protocol for rapidly propagating Atractylodes macrocephala Koidz,an important traditional Chinese medicinal plant,via shoot *** multiplication was induced on Murashige-Skoog(MS)medium supplemented with various concentrations of N-phenyl-N-1,2,3-thidiazol-5-ylurea(TDZ),6-benzylaminopurine(BA)andα-naphthaleneacetic acid(NAA).Rooting was induced on half-strength MS medium supplemented with NAA and indolebutyric acid(IBA).The maximum mean number of shoots(5.61)was obtained from a single explant by the combined effect of 1.08μmol/L NAA and 2.25μmol/L *** longest roots and a minimum number of roots were produced when they were cultured in a medium without plant growth *** shortest roots and the largest number of roots were observed in the medium supplemented with 2.7μmol/L NAA.

关键词： Chinese traditional medicinal plant Atractylodes macrocephala Koidz multiple shoot plant regeneration

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植物病毒脱毒技术进展与展望

分子植物育种 2019年第23期17卷 7861-7870页

作者：颜克如毛碧增浙江大学生物技术研究所

植物病毒病是制约作物产量和品质的主要因素之一,是严格的寄生生物,它完全通过寄主植物细胞完成自身的复制,植物一旦感染病毒就无法通过化学方法得到根本的控制。在生产上,无病毒繁殖材料是控制植物病毒病传播的重要途径。目前,对感染... 详细信息

植物病毒病是制约作物产量和品质的主要因素之一,是严格的寄生生物,它完全通过寄主植物细胞完成自身的复制,植物一旦感染病毒就无法通过化学方法得到根本的控制。在生产上,无病毒繁殖材料是控制植物病毒病传播的重要途径。目前,对感染病毒的植株进行脱毒处理是一种有效的防控措施,本研究阐述了茎尖培养、热处理结合茎尖培养、超低温处理、化学处理和基因编辑技术等脱毒技术,并分析了不同方法的脱毒效果及所适合脱除的植物病毒种类,同时对今后的植物脱毒研究方向进行展望。

关键词：植物病毒脱毒技术展望

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立枯丝核菌毒素的研究进展

核农学报 2020年第10期34卷 2219-2225页

作者：徐琴琴陈卫良毛碧增浙江大学农业与生物技术学院浙江杭州310058 农业部作物病虫分子生物学重点实验室浙江杭州310058

立枯丝核菌(Rhizoctonia solani kühn)寄主范围广且腐生性强,主要危害禾本科、茄科、豆科和十字花科等43科260多种植物,造成水稻、玉米和马铃薯等作物产量严重减少以及品质下降。目前种质库中尚未发现高水平的抗源,因此无法借助转基因... 详细信息

立枯丝核菌(Rhizoctonia solani kühn)寄主范围广且腐生性强,主要危害禾本科、茄科、豆科和十字花科等43科260多种植物,造成水稻、玉米和马铃薯等作物产量严重减少以及品质下降。目前种质库中尚未发现高水平的抗源,因此无法借助转基因手段培育抗立枯丝核菌的新材料。立枯丝核菌致病因子主要为毒素和细胞壁降解酶,基于病原菌和植物互作关系,本文着重阐述了立枯丝核菌毒素提取工艺的发展、成分鉴定、生物活性及致病机理,旨在为进一步深入研究立枯丝核菌及其相关病害的有效防治提供一定的理论依据。

关键词：立枯丝核菌毒素生物活性致病机理

生物技术在草莓健康种苗培育及种质改良方面的研究进展

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热带作物学报 2011年第8期32卷 1584-1589页

作者：陆广欣冯利毛碧增浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029

综述近年来国内外生物技术在草莓育种研究中的主要进展,包括草莓的组织培养、诱变育种、体细胞变异筛选、原生质体培育及遗传转化等多个方面。探讨生物技术在草莓育种中存在的问题及今后的发展方向。

关键词：生物技术草莓健康种苗种质改良

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温郁金根茎腐烂病的病原鉴定

浙江农业学报 2024年第5期36卷 1086-1093页

作者：李亚妮陈卫良毛碧增浙江大学生物技术研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室浙江省作物病虫生物学重点实验室浙江杭州310058 浙江大学新农村发展研究院浙江杭州310058

在浙江省瑞安市陶山镇温郁金主产区,部分田块温郁金发生大规模倒伏、地下根茎严重腐烂。为明确引起该病害的病原物,利用LB培养基和TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)培养基从温郁金腐烂根茎中分离获得细菌菌株JF1,采用灌根法、芽侵染法和根... 详细信息

在浙江省瑞安市陶山镇温郁金主产区,部分田块温郁金发生大规模倒伏、地下根茎严重腐烂。为明确引起该病害的病原物,利用LB培养基和TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)培养基从温郁金腐烂根茎中分离获得细菌菌株JF1,采用灌根法、芽侵染法和根茎侵染法确定该菌株对温郁金的致病性。通过形态学特征观察、生理生化测定、多基因序列(16S rDNA、rpoB、gyrB)系统发育分析,明确引起田间温郁金根茎腐烂的病原菌为桑肠杆菌(Enterobacter mori)。

关键词：温郁金根茎腐烂病原鉴定桑肠杆菌

防控温郁金细菌性枯萎病的生物有机肥研制与应用

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浙江农业学报 2023年第3期35卷 630-638页

作者：冯林周铨陈卫良毛碧增浙江大学生物技术研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室浙江省作物病虫生物学重点实验室浙江杭州310058

茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的温郁金(Curcuma wenyujin *** et ***)细菌性枯萎病是目前温郁金种植中的毁灭性病害。本文利用2株高效拮抗菌Paenibacillus jamila ZJU-C612-3和Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C612-4研制生物有机肥,并进行田间防治效果试验。温室盆栽试验结果显示,施生物有机肥的温郁金发病率下降了60百分点;田间试验显示,每667 m 2施200 kg生物有机肥作为基肥的田块中,健康根茎的发病率降低17.66百分点,且植株生长健壮。此外,施生物有机肥能缓解温郁金的连作障碍,在5 a连作田块施该肥后,在病害高发期的7月和8月,连作根茎的发病率分别下降9.43百分点和19.75百分点。研究结果可为今后防治温郁金细菌性枯萎病的专用生物有机肥的产业化开发提供依据。

关键词：温郁金茄科劳尔氏菌生物有机肥细菌性枯萎病发病率

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甘薯病毒病害(SPVD)的分子生物学研究进展

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核农学报 2020年第1期34卷 71-77页

作者：孙钟毓龚莺赵琳石江毛碧增浙江大学生物技术研究所浙江杭州310058 农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室浙江杭州310021 杭州市农业科学研究院浙江杭州310021

甘薯病毒病害(SPVD)是最主要的甘薯病毒病害之一,研究表明甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)共同侵染形成SPVD。本文综述了SPFMV和SPCSV这2种病毒的生物学特性、检测方法、基因组结构与遗传变异等方面的研究进展,为阐... 详细信息

甘薯病毒病害(SPVD)是最主要的甘薯病毒病害之一,研究表明甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)共同侵染形成SPVD。本文综述了SPFMV和SPCSV这2种病毒的生物学特性、检测方法、基因组结构与遗传变异等方面的研究进展,为阐明多种病毒混合侵染机制和防控措施提供了一定的理论依据。

关键词：甘薯病毒病甘薯羽状斑驳病毒甘薯褪绿矮化病毒沉默抑制蛋白综合防控

蘑菇菌糠复配生物基质对番茄营养生长及光合作用的影响

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核农学报 2015年第9期29卷 1821-1827页

作者：毛碧增贺满桥陈丽闽陈再鸣浙江大学生物技术研究所浙江杭州310058 浙江大学蔬菜研究所浙江杭州310058

为有效地利用菌糠,实现自然资源的可循环利用,以蘑菇菌糠、草炭和珍珠岩为材料,按照不同比例复配,通过基质理化性质、幼苗生长等指标,分析了各复配基质在番茄栽培中的应用效果。结果表明,蘑菇菌糠经过2次淋洗,可以显著降低EC值。24 d和3... 详细信息

为有效地利用菌糠,实现自然资源的可循环利用,以蘑菇菌糠、草炭和珍珠岩为材料,按照不同比例复配,通过基质理化性质、幼苗生长等指标,分析了各复配基质在番茄栽培中的应用效果。结果表明,蘑菇菌糠经过2次淋洗,可以显著降低EC值。24 d和34 d时,T6复配基质上番茄株高显著(P<0.05)高于对照(CK)和其他处理,复配基质对茎粗的影响与株高类似,移栽于T5、T9、T10和CK上的番茄茎粗均显著(P<0.05)高于其他处理,而T5、T9、T10与CK之间无显著差异。T5、T6、T9和T10复配基质番茄植株的净光合速率(Pn)显著(P<0.05)高于其他处理,T5、T6和T9番茄干物质根冠比显著高于其他处理,完全可以满足番茄壮苗的培育。本研究表明在番茄生产中蘑菇菌糠可以代替一定比例的草炭,为菌糠多样化开发设施园艺基质,且有效降低基质的生产成本提供了一定的技术依据。

关键词：蘑菇菌糠复配基质草炭番茄

^(60)Co-γ射线辐射草莓红颊诱变选育新品系的研究

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核农学报 2018年第8期32卷 1457-1465页

作者：张亚惠周历萍王淑珍毛碧增杭州市农业科学研究院浙江杭州310024 浙江大学农业与生物技术学院浙江杭州310058

为丰富草莓育种方法,以红颊草莓为试验材料,进行辐射诱变并结合组织培养复合育种技术的探索。采用不同辐照剂量^(60)Co-γ射线处理红颊草莓叶片愈伤组织,定向筛选获得优质诱变系2010-30。对红颊和诱变系2010-30的农艺性状、营养品质、... 详细信息

为丰富草莓育种方法,以红颊草莓为试验材料,进行辐射诱变并结合组织培养复合育种技术的探索。采用不同辐照剂量^(60)Co-γ射线处理红颊草莓叶片愈伤组织,定向筛选获得优质诱变系2010-30。对红颊和诱变系2010-30的农艺性状、营养品质、柱头可授性、花药活力等指标进行测定,比较分析红颊和诱变系2010-30各指标的差异性。结果表明,^(60)Co-γ射线辐照的最佳剂量为20 Gy;诱变系2010-30的Vc含量为0.663 mg·g-1、可溶性固形物含量为11.65%、硬度为571.71 g,均高于红颊;诱变系2010-30的柱头可授性强于红颊,且花粉败育率明显低于红颊。通过^(60)Co-γ射线辐射获得的诱变系2010-30可作为草莓育种的新种质资源,并可作为新品系在生产中推广应用。本研究结果为增加草莓遗传变异、创造新的种质材料、选育新品种(系)以及辐射诱变结合组织培养复合育种技术的研究提供了技术参考和理论依据。

关键词：草莓辐射农艺性状营养品质花器官

利用菊花B病毒外壳蛋白特异片段进行多克隆抗体的制备与分析

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核农学报 2022年第12期36卷 2358-2365页

作者：王玮杜雪洁陈卫良陈正贤毛碧增浙江大学生物技术研究所/农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室/浙江省作物病虫生物学重点实验室浙江杭州310058

菊花B病毒(CVB)是乙型线状病毒科(Betaflexiviridae)麝香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)成员,在浙江杭白菊基地普遍存在。为了能够特异、快速、简便检测CVB,利用SWISS-MODEL分析CVB外壳蛋白(CP)的三维结构,选择暴露在CVB CP三维空间结构外... 详细信息

菊花B病毒(CVB)是乙型线状病毒科(Betaflexiviridae)麝香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)成员,在浙江杭白菊基地普遍存在。为了能够特异、快速、简便检测CVB,利用SWISS-MODEL分析CVB外壳蛋白(CP)的三维结构,选择暴露在CVB CP三维空间结构外部的片段,片段之间使用连接肽串联以提高柔性,重复4个片段,根据大肠杆菌密码子的偏爱性将其相应的DNA序列进行优化,将合成的特异DNA序列连接表达载体pET-28a(+),转化至Escherichia coli BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导和Ni-NTA重力柱层析获得了纯化后大小约为14 kDa的融合蛋白;将其作为抗原免疫家兔制备抗血清,纯化获得相应抗体;对获得的抗血清和抗体进行酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白免疫印迹(WB)检测。间接ELISA检测结果表明,512000倍稀释的抗血清可检测到1μg抗原。纯化后最终得到浓度为15 mg·mL的抗体,WB检测结果,1∶1000稀释后的抗体可检测500 pg抗原,且能够特异性结合CVB CP蛋白。本研究制备的多克隆抗体为检测CVB提供了便利,也为后续CVB检测试纸条的开发提供了技术支撑。

关键词：菊花菊花B病毒外壳蛋白原核表达多克隆抗体

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