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PMA-PCR方法进行水稻细菌性条斑病菌细胞活性检测的建立与初步应用

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植物病理学报 2023年第5期53卷 944-949页

作者：于贵戌赵玉强姜培田艳丽胡白石南京农业大学植物保护学院南京210095 农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室南京210095 江苏省中国科学院植物研究所(南京中山植物园) 南京210014 全国农业技术推广服务中心北京100125

水稻细菌性条斑病是危害水稻的重要细菌病害。本文利用叠氮溴化丙锭(propidium monoazide, PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分水稻细菌性条斑病菌死活细胞的分子检测方法。结果表明,当样品中PMA质量浓度为5μg·mL-1,避光条件... 详细信息

水稻细菌性条斑病是危害水稻的重要细菌病害。本文利用叠氮溴化丙锭(propidium monoazide, PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分水稻细菌性条斑病菌死活细胞的分子检测方法。结果表明,当样品中PMA质量浓度为5μg·mL-1,避光条件下,孵育5 min,曝光20 min, PMA可有效抑制死亡菌体细胞中的DNA扩增;且对活菌DNA的扩增无影响;最低的检测浓度为2×104CFU·mL-1。本试验建立的PMA-PCR方法能够有效的区分水稻细菌性条斑病菌死活细胞,避免了假阳性结果的产生。

关键词：水稻细菌性条斑病叠氮溴化丙锭活菌

基于LWD随钻自然伽马测井数据的砂岩铀矿储层三维储量预测方法研究

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原子能科学技术 2021年第S2期55卷 373-379页

作者：李召坤杨睿胡柏石杜志明赵利信核工业北京化工冶金研究院北京101149

目前砂岩铀矿单元储量计算主要基于4口勘探井的测井资料,数据量小,预测精度较低。为提高单元储量计算过程中的基础数据量,提高砂岩铀矿单元储量的计算精度,本文将水平井自然伽马值通过图版校准消除井径和泥浆影响后,利用公式转化为定量... 详细信息

目前砂岩铀矿单元储量计算主要基于4口勘探井的测井资料,数据量小,预测精度较低。为提高单元储量计算过程中的基础数据量,提高砂岩铀矿单元储量的计算精度,本文将水平井自然伽马值通过图版校准消除井径和泥浆影响后,利用公式转化为定量伽马值,并与常规直井定量伽马测井数据相结合,通过双线性插值的方法计算节点品位和厚度,以此为基础计算单元储量。利用此方法对新疆某地浸水平井井场的铀矿储量分布进行了预测,结果显示,采用本文所述方法计算单元储量可消除低放射性地层对储量预测的影响,计算结果较常规4点式单元储量预测方法修正了17.64%。以上结果表明,该方法对单元内铀资源储量分布刻画更精细,储量计算精度更高。

关键词：储量预测定量伽马自然伽马双线性插值铀矿水平井

江苏句容地区薄壳山核桃褐斑病病原的分离与鉴定

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植物病理学报 2023年第3期53卷 514-517页

作者：赵玉强卓可儿郭云朱倩丽朱灿灿田艳丽胡白石江苏省中国科学院植物研究所(南京中山植物园) 南京210014 南京农业大学植物保护学院南京210095 农作物生物灭灾综合治理教育部重点实验室南京210095

薄壳山核桃[Carya illinoinensis(Wangenh.)***]又称美国山核桃,是绿化的优选树种,其果实又称碧根果是世界著名的干果之一。薄壳山核桃原产于美国和墨西哥北部,因其较高的经济价值已被引种到全球20多个国家和地区[1-2]。江苏是我国薄壳... 详细信息

薄壳山核桃[Carya illinoinensis(Wangenh.)***]又称美国山核桃,是绿化的优选树种,其果实又称碧根果是世界著名的干果之一。薄壳山核桃原产于美国和墨西哥北部,因其较高的经济价值已被引种到全球20多个国家和地区[1-2]。江苏是我国薄壳山核桃引种较早的省份之一[3],江苏句容拥有万亩薄壳山核桃基地,发展势头良好。随着薄壳山核桃种植面积的扩大,病虫害问题突显,褐斑病在江苏句容相继发生,导致叶斑,果腐,落果,经济损失严重。

关键词：薄壳山核桃病虫害问题褐斑病江苏句容果腐美国山核桃墨西哥北部落果

薄壳山核桃疮痂病菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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植物保护 2023年第3期49卷 193-198页

作者：赵玉强卓可儿郭云朱灿灿王行军陆小美田艳丽胡白石江苏省中国科学院植物研究所(南京中山植物园) 南京210014 南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室南京210095 安徽凤阳县植保站滁州233100 常州果美农业科技有限公司常州213245

疮痂病是薄壳山核桃上最具毁灭性的病害,带菌植物材料是传播疮痂病的重要来源。准确、灵敏、快速的检测方法可为该病害流行规律调查和防控提供有力的依据。本文通过比较薄壳山核桃疮痂病菌Venturia effusa及其近似种之间的ITS序列差异,... 详细信息

疮痂病是薄壳山核桃上最具毁灭性的病害,带菌植物材料是传播疮痂病的重要来源。准确、灵敏、快速的检测方法可为该病害流行规律调查和防控提供有力的依据。本文通过比较薄壳山核桃疮痂病菌Venturia effusa及其近似种之间的ITS序列差异,设计了特异性引物和TaqMan探针,建立了薄壳山核桃疮痂病菌的荧光定量PCR检测方法。特异性检测结果表明,该方法可以检测不同地区的薄壳山核桃疮痂病菌菌株,而对其近似种以及薄壳山核桃上的其他真菌均没有信号。本研究建立的检测方法对薄壳山核桃疮痂病菌DNA的最低检测限可达0.5 pg/μL。该方法用于田间样品检测时,检测时间仅需1 h,远快于常规的分离培养法。本研究建立的基于TaqMan探针的荧光定量PCR检测方法为薄壳山核桃疮痂病菌的快速检测和监测提供了有力工具。

关键词：薄壳山核桃疮痂病菌荧光定量PCR TaqMan探针快速检测

梨火疫病菌(Erwinia amylovora)双精氨酸运输系统基因(tatC)的功能分析

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农业生物技术学报 2011年第6期19卷 1081-1088页

作者：于洋洋刘倩倩徐恩丽胡白石南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室

梨火疫病菌(Erwinia amylovora)可引起梨、苹果等蔷薇科植物的火疫病。双精氨酸运输系统(Tat)与致病相关蛋白的转运有特定的联系。本研究在梨火疫病菌全基因组中发现了同源基因,通过同源重组的方法,构建了梨火疫病菌的tatC基因突变体以... 详细信息

梨火疫病菌(Erwinia amylovora)可引起梨、苹果等蔷薇科植物的火疫病。双精氨酸运输系统(Tat)与致病相关蛋白的转运有特定的联系。本研究在梨火疫病菌全基因组中发现了同源基因,通过同源重组的方法,构建了梨火疫病菌的tatC基因突变体以及互补子。研究结果表明,tatC基因影响着梨火疫病菌的致病性、胞外多糖、鞭毛运动、游动性、趋化性、生长情况等多种生物学特性。然而,EaΔtatC仍能引起烟草过敏性反应,并且在胞外纤维素和生物膜的生成方面与野生型菌株相比没有明显差异。说明梨火疫病菌tatC基因对病菌的生长、游动性以及致病性方面具有关键作用。

关键词：梨火疫病菌 tatC基因致病性生物学特性

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重金属汞单克隆抗体的制备及鉴定

高技术通讯 2008年第5期18卷 531-536页

作者：杨凤丽朱晓霞胡白石徐丽娜娄旸刘凤权南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点实验室南京210095

通过双功能螯合剂（异硫氰基-苯甲基-乙二胺四乙酸，ITCBE）使汞离子与载体蛋白（匙孔血蓝蛋白，KLH）偶联，获得了免疫抗原KLH-ITCBE-Hg（II）。以该抗原免疫BALB／C小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，杂交瘤细胞用ELISA方法... 详细信息

通过双功能螯合剂（异硫氰基-苯甲基-乙二胺四乙酸，ITCBE）使汞离子与载体蛋白（匙孔血蓝蛋白，KLH）偶联，获得了免疫抗原KLH-ITCBE-Hg（II）。以该抗原免疫BALB／C小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，杂交瘤细胞用ELISA方法筛选及有限稀释法亚克隆化，获得了5株可稳定分泌抗汞单克隆抗体的杂交瘤细胞株（E／H9、E／B2、1／F11、1／H7和B／B11）。杂交瘤细胞染色体数目在97—104之间，所分泌的抗体均为IgM、k型，其中杂交瘤细胞株E／H9、1／F11和B／B11细胞培养上清液效价分别达1：640、1：320、1：160，腹水效价分别达1：6400、1：3200、1：6400。B／B11的亲和常数为2．981×10^8L／mol，特异性试验表明：B／B11与其它金属离子的交叉反应率均小于2％，具有较高的特异性。高亲合力和高特异性的抗汞单克隆抗体在该研究中的成功制备，为建立农产品和环境中重金属汞的快速免疫检测方法奠定了基础。

关键词：汞单克隆抗体 ELISA

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朗伍德王莲腐霉叶腐病及病原鉴定

植物保护 2010年第5期36卷 183-185页

作者：窦剑田艳丽陈玉林汤诗杰胡白石江苏省中科院植物研究所(南京中山植物园) 南京210014 南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室南京210095

2009年,南京中山植物园王莲育苗池中的朗伍德王莲(Victoria‘Longwood Hybrid’)发生了叶片腐烂病。按照柯赫氏法则对其进行了病原物的分离、纯化和致病性测定,并对菌株进行了形态学和分子生物学鉴定。从发病部位稳定分离到形态一致的... 详细信息

2009年,南京中山植物园王莲育苗池中的朗伍德王莲(Victoria‘Longwood Hybrid’)发生了叶片腐烂病。按照柯赫氏法则对其进行了病原物的分离、纯化和致病性测定,并对菌株进行了形态学和分子生物学鉴定。从发病部位稳定分离到形态一致的低等真菌;致病性测定结果表明,回接后发病株产生与自然侵染相同的症状,并重新分离到相同菌株。通过病原菌形态特征和核糖体rDNA ITS序列分析,病株分离物被鉴定为旋柄腐霉(Pythium helicoides)。这是国内外首次报道在王莲上分离出旋柄腐霉并证明其为王莲的致病菌。该病害被定名为王莲腐霉叶腐病。

关键词：王莲叶腐病旋柄腐霉病原鉴定

The luxS Gene Is Involved in AI-2 Production,Pathogenicity,and Some Phenotypes in Erwinia amylovora

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The luxS Gene Is Involved in AI-2 Production,Pathogenicity,a...

The Acyl-Homoserine Lactone (AHL)-Type Quorum Sensing System affects Growth rate,cell Motility and Virulence in Acidovorax avenae ***

第二届全国生物入侵学术研讨会

作者： Yan Gao,Junxian Song,baishi hu,Lei Zhang,Qianqian Liu,Fengquan Liu (College of Plant Protection,Key Laboratory of Monitoring and Management of Plant Diseases and Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)

Erwinia amylovora causes fire blight of apple,pear,and other members of the Rosaceae *** enzyme LuxS catalyzes the last step in the production of autoinducer-2(AI-2),a molecule implicated with quorum sensing in many bacterial *** is now well recognized that LuxS also plays a central role in sulfur metabolism and in the activated methyl cycle,which is responsible for the generation of S-adenosyl-L-methionine.A research paper has reported that luxS is not involved with quorum sensing in ***,but in our study,*** strain NCPPB1665(Ea1665) produced luxS dependent extracellular AI-2 ***,the maximal AI-2 activity occurred during late-exponential and early-stationary growth phases and diminished during the stationary phase. The luxS mutant of Ea1665 was constructed,and the phenotypes of a defined luxS mutant have been *** of luxS in Ea1665 impaired motility,extracellular polysaccharide(EPS) production,and tolerance for hydrogen peroxide,and reduced virulence on pear leaves.

关键词： Erwinia amylovora quorum sensing AI-2 virulence

来源： cnki会议评论

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The Acyl-Homoserine Lactone (AHL)-Type Quorum Sensing System...