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Poly(D,L-lactic-co-glycolic acid)-based artesunate nanoparticles:formulation,antimalarial and toxicity assessments

Journal of Zhejiang University-Science b(biomedicine & biotechnology) 2017年第11期18卷 977-985页

作者： kabiru DAUDA Zulaikha bUSARI Olajumoke MORENIkEJI Funmilayo AFOLAyAN Oyetunde OyEyEMI Jairam MEENA Debasis SAHU Amulya pand A Department of Zoology University of IbadanIbadan 200284Nigeria Department of basic Sciences(biology Programme) Babcock Universityllishan-Remo 121103Nigeria Product Development Cell National Institute of ImmunologyAruna Asaf Ali MargNew Delhi 110067India

Objective： The aim of this study was to formulate polymer-based artesunate nanoparticles for malaria treatment. Methods： Artesunate was loaded with poly（D,L-lactic-co-glycolic acid）（PLGA） by solvent evaporation from an oil-in-water single emulsion. Nanoparticles were characterized by X-ray diffraction and differential scanning calo- rimetry analyses. In vivo antimalarial studies at 4 mg/kg were performed on Swiss male albino mice infected with Plasmodium berghei. Hematological and hepatic toxicity assays were performed. In vitro cytotoxicity of free and en- capsulated artesunate （Art-PLGA） to cell line RAW 264.7 was determined at concentrations of 7.8-1000 pg/ml. Re- sults： The particle size of the formulated drug was （329.3±21.7） nm and the entrapment efficiency was （38.4±10.1）%. Art-PLGA nanoparticles showed higher parasite suppression （62.6%） compared to free artesunate （58.2%, P〈0.05）. Platelet counts were significantly higher in controls （305 000.00±148 492.40） than in mice treated with free artesunate （139 500.00±20 506.10） or Art-PLGA （163 500.00±3535.53）（P〈0.05）. There was no sign of hepatic toxicity following use of the tested drugs. The half maximal inhibitory concentration （IC50） of Art-PLGA （468.0 pg/ml） was significantly higher （P〈0.05） than that of free artesunate （7.3 pg/ml） in the in vitro cytotoxicity assay. Conclusions： A simple treatment of PLGA-entrapped artesunate nanoparticles with dual advantages of low toxicity and better antiplasmodial efficacy has been developed.

关键词： Poly(D,L-lacUc-co-glycolic acid) (PLGA) Artesunate-PLGA delivery system Antiplasmodial Toxicity

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溶藻弧菌Hy9901 vscH基因克隆及生物信息学分析

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广东海洋大学学报 2018年第4期38卷 85-91页

作者：梁彩凤庞欢瑛刘建勇广东海洋大学水产学院广东湛江524088

【目的】克隆溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)Hy9901 vscH基因,并分析其序列结构。【方法】参照Gen bank上的溶藻弧菌全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌Hy9901株的Ⅲ型输出蛋白yop R核心家族蛋白vscH基因全长,用生物信息... 详细信息

【目的】克隆溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)Hy9901 vscH基因,并分析其序列结构。【方法】参照Gen bank上的溶藻弧菌全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌Hy9901株的Ⅲ型输出蛋白yop R核心家族蛋白vscH基因全长,用生物信息学手段分析VscH序列,构建VscH系统进化树及亚基三维结构模型。【结果】vscH基因序列全长636 bp,编码211个氨基酸,推导的蛋白分子质量为24.09 ku。经预测,VscH不存在信号肽与跨膜区;含有2个ASN-糖基化位点,14个磷酸化位点,2个N-豆蔻酰化位点,2个内质网靶向序列及2个微体C-末端靶信号位点;有1个主要功能域,T3SS_needle_reg(第71-211氨基酸);α-螺旋占66.35%,无规则卷曲占23.22%,延伸链占5.69%,β-折叠占4.74%;可能的b细胞抗原优势表位,分别是第20~23,25~28,37~40,48~51和109~112区段。溶藻弧菌VscH系统进化树与弧菌(Vibrio)聚为一簇。VscH亚基三维结构模型与鼠疫耶尔森菌毒力因子yop R蛋白的编码基因ysc H相似。

关键词：溶藻弧菌 vscH基因基因克隆生物信息学分析

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溶藻弧菌二氢硫辛酰胺脱氢酶基因克隆及其生物信息学分析

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广东海洋大学学报 2014年第1期34卷 1-8页

作者：庞欢瑛陈立明蔡佳汤菊芬王蓓吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 仲恺农业工程学院广东广州510225

根据溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)的基因序列设计1对特异性引物。PCR扩增结果显示,DLD(Genbank登录号AGk62253)全长1 428 bp,共编码475个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子质量约为50.998 ku,等电点为5.51。细胞定位、SignalP 4.0、TMHMM Server 2.0和Softberry-Psite预测结果显示,DLD位于细胞质中,在第29至30个氨基酸之间存在信号肽,不存在跨膜区,氨基酸序列含有1个Asn-糖基化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、6个酪蛋白激酶II磷酸化位点等多个活性位点。系统进化树结果显示,溶藻弧菌DLD与副溶血弧菌(***)聚为一簇。用kyte-Doolittle亲水性参数、karplus-Schulz柔韧性参数、Emini表面可及性参数和Jameson-Wolf抗原性参数分别预测,DLD可能的b细胞抗原优势表位分别是第5~10、106~110、120~125、158~163和175~180区段。利用SWISS-MODEL软件,模拟DLD亚基三维结构模型,结果显示其与大肠杆菌(Escherichia coli)DLD蛋白有相似构型。kegg分析发现,其涉及糖酵解和糖异生等9条信号通路。从生物信息学角度验证了DLD作为弧菌共同抗原的可行性。

关键词：溶藻弧菌基因克隆二氢硫辛酰胺脱氢酶生物信息学分析

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