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聚丙烯酰胺凝胶电泳中流感病毒RNA的硝酸银染色法

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中国医学科学院学报 1985年第1期7卷 61-63页

作者：田淑芳范瑞涟龚新昌叶志平杨冬荣中国医学科学院病毒学研究所中国医学科学院病毒学研究所北京

随着病毒分子生物学,遗传学技术的发展,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)已广泛应用于核酸、蛋白的分析。以往在核酸、蛋白带的显影时多用同位素标记自显影及溴化乙锭(EB)等染色[1～3]。前者受试验条件限制较难推广;后者灵敏度较低,微量核酸或... 详细信息

随着病毒分子生物学,遗传学技术的发展,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)已广泛应用于核酸、蛋白的分析。以往在核酸、蛋白带的显影时多用同位素标记自显影及溴化乙锭(EB)等染色[1～3]。前者受试验条件限制较难推广;后者灵敏度较低,微量核酸或蛋白难以显色。1981年Sammon等[4]将细胞多肽经PAGE后用考马士兰、(85)~S标记的放射自显影及硝酸银进行了显色比较,发现硝酸银显色的敏感性比考马士兰明显地高。随后Follott等将硝酸银染色法用于Rotavirus RNA基因分析。但至今尚未见硝

关键词：硝酸银染色凝胶胶体流感病毒病毒核酸 RNA

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流感病毒基因组及其转录

生物化学与生物物理进展 1980年第6期7卷 9-15页

作者：尹明标龚新昌董永坤中国医学科学院病毒研究所

甲型流感病毒的特点是其表面抗原经常发生变化。1931年首先从猪分离出流感病毒;接着也从人体分离出;以后每隔10—15年就出现新的亚型,在人群中广泛流行。流行期间,病毒经常发生变异,这给疫苗研究带来很大困难。甲型流感病毒的不同毒株之... 详细信息

甲型流感病毒的特点是其表面抗原经常发生变化。1931年首先从猪分离出流感病毒;接着也从人体分离出;以后每隔10—15年就出现新的亚型,在人群中广泛流行。流行期间,病毒经常发生变异,这给疫苗研究带来很大困难。甲型流感病毒的不同毒株之间,重组率非常高。灭活病毒经两次或多次感染之后,可以恢复感染

关键词：流感病毒宿主细胞凝胶电泳丙烯酸胺鸡瘟病毒病毒株 RNA 基因组染色体组

流行性感冒病毒血凝素亚单位疫苗在小鼠体内免疫效果观察

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病毒学报 1986年第2期 134-139页

作者：田淑芳,龚新昌,王秀平中国预防医学科学院病毒学研究所中国预防医学科学院病毒学研究所中国预防医学科学院病毒学研究所

流感病毒表面抗原——血凝素(HA)亚单位,在人工合成的胞壁酰二肽(MDP)佐剂配合下,注射小白鼠所产生的免疫效果与常用的Al(OH)3及福氏佐剂相似。含MDP佐剂的流感病毒HA亚单位疫苗腹腔注射小白鼠,能产生与福尔马林灭活的流感疫苗相似的免... 详细信息

流感病毒表面抗原——血凝素(HA)亚单位,在人工合成的胞壁酰二肽(MDP)佐剂配合下,注射小白鼠所产生的免疫效果与常用的Al(OH)3及福氏佐剂相似。含MDP佐剂的流感病毒HA亚单位疫苗腹腔注射小白鼠,能产生与福尔马林灭活的流感疫苗相似的免疫反应,而皮下注射,前者的免疫效果比后者明显为佳。

关键词：流感病毒亚单位疫苗佐剂

用尿素—聚丙稀酰胺凝胶电泳法显示人甲型流感病毒的基因组图谱

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中国医学科学院学报 1981年第2期3卷 76-81页

作者：尹明标董永坤夏丽娟王金利柳元元龚新昌范瑞莲朱既明中国医学科学院病毒学研究所中国医学科学院病毒学研究所北京

用聚乙二醇沉淀,结合 Sephadex G-200 凝胶层析,获得高纯度的人甲型流感病毒,且回收率较高,用蛋白酶-SDS-酚法拍提的RNA,经尿素—聚丙烯酰胺凝胶电泳及吖啶橙荧光染色,显示出8 个不同的基因片段。125I标记的流感病毒RNA,经上述电泳后进... 详细信息

用聚乙二醇沉淀,结合 Sephadex G-200 凝胶层析,获得高纯度的人甲型流感病毒,且回收率较高,用蛋白酶-SDS-酚法拍提的RNA,经尿素—聚丙烯酰胺凝胶电泳及吖啶橙荧光染色,显示出8 个不同的基因片段。125I标记的流感病毒RNA,经上述电泳后进行放射性扫描,结果相若。以吖啶橙荧光染色法显示流感病毒基因图,样品用量小,出结果时间快,为制备流感病毒单个基因、深入研究该病毒的遗传变异提供了一个较为简便的方法。

关键词：流感病毒 RNA 紫外吸收丙烯酞胺凝胶电泳血凝滴度鸡红细胞尿素氮化物基因组图谱

流感病毒表面抗原血凝素基因在枯草杆菌中的克隆和表达

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生物工程进展 1990年第4期10卷 21-25页

作者：章银梅杨月琴朱小荣汤懋竑龚新昌张珍皮国华中国科学院遗传所中国预防医学科学院病毒所

前言流行性感冒仍然是全世界最严重的流行病之一。其病原主要是甲型流感病毒,分为甲_1、甲_2、甲_3三个亚型。当前流行的是甲_1和甲_3型。能有效预防流感的措施是用疫苗免疫。血凝素(HA)是流感病毒表面最重要的抗原,能诱导产生流感病... 详细信息

前言流行性感冒仍然是全世界最严重的流行病之一。其病原主要是甲型流感病毒,分为甲_1、甲_2、甲_3三个亚型。当前流行的是甲_1和甲_3型。能有效预防流感的措施是用疫苗免疫。血凝素(HA)是流感病毒表面最重要的抗原,能诱导产生流感病毒中和抗体。从纯化的流感病毒颗粒中提取的血凝素,其免疫性与灭活的流感疫苗相似,但作为亚单位疫苗使用,因生产成本过高,并未广泛推广。

关键词：流感病毒抗原血凝素基因克隆

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脊髓灰质炎Ⅲ型病毒RNAT1-寡核苷酸指纹图谱的比较

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病毒学报 1985年第3期4卷 224-228页

作者：顾方舟王树惠孙月英范瑞莲龚新昌中国医学科学院基础医学研究所中国预防医学中心病毒学研究所

制备了4株(京6和昆1、4、14)Polio 3型野毒株的RNA T1-寡核苷酸图谱,并与中Ⅱ2疫苗株的图谱做了比较。与中Ⅲ 2株图谱相比,京6和昆4株分别有5个和14个点不同,而昆1和昆14株则完全不同。这表明;Polio 3型病毒RNAT1-寡核苷酸图谱为区分Pol... 详细信息

制备了4株(京6和昆1、4、14)Polio 3型野毒株的RNA T1-寡核苷酸图谱,并与中Ⅱ2疫苗株的图谱做了比较。与中Ⅲ 2株图谱相比,京6和昆4株分别有5个和14个点不同,而昆1和昆14株则完全不同。这表明;Polio 3型病毒RNAT1-寡核苷酸图谱为区分Polio 3型野毒株和疫苗相关株,提供了较可靠的依据。

关键词：脊髓灰质炎病毒 T1-寡核苷酸图谱

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甲型流感病毒H1和H2之间的抗原关系

中国科学 1980年第3期 300-306页

作者：刘庚起龚新昌朱既明任贵方范瑞莲阮薇琴中国医学科学院病毒学研究所

应用已经证明其纯度的纯化病毒株和鸡及地鼠两种免疫血清.用血凝抑制、单扩溶血,株特异性补体结合和中和试验等方法,证明甲型流感病毒H1N1末期的变种（Dutch/56）和H2N2之间确实存在血清学交叉反应.这种交叉反应用早期H1N1变种不能测出.... 详细信息

应用已经证明其纯度的纯化病毒株和鸡及地鼠两种免疫血清.用血凝抑制、单扩溶血,株特异性补体结合和中和试验等方法,证明甲型流感病毒H1N1末期的变种（Dutch/56）和H2N2之间确实存在血清学交叉反应.这种交叉反应用早期H1N1变种不能测出.自1957—1966年分离的H2N2变种与末期H1N1变种都有血清学交叉,但交叉反应滴度逐渐下降.至1967年末分离的最后的H2H2变种则完全消失.以单特异性免疫血清或以重组株制备的抗原进行分析,结果表明末期H1N1和H2N2的血凝素之间存在着抗原关系,而它们的神经氨酸酶则完全不同.对以上的抗原关系,结合H1N1末期病毒感染后恢复的病人对H2N2有部分保护的流行病学观察.以及H2N2病毒起源的重组理论.进行了讨论.

关键词：病毒株免疫血清 H1 H2 中和试验甲型流感病毒溶血试验抗原

不同阶段乙型流行性感冒病毒核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳图

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病毒学报 1985年第4期 331-333页

作者：田淑芳,龚新昌,范瑞莲,杨冬荣,王秀平,张珍中国预防医学中心病毒学研究所中国预防医学中心病毒学研究所中国预防医学中心病毒学研究所中国预防医学中心病毒学研究所中国预防医学中心病毒学研究所中国预防医学中心病毒学研究所

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),比较了7株不同阶段乙型流感病毒代表株的核酸电泳迁移率,发现不同阶段毒株的PAGE基因图是不同的。这种差别与乙型流感病毒血清学的结果基本相符。

关键词：乙型流行性感冒病毒核糖核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳

抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及快速检测试剂盒的制备

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病毒学报 1992年第3期 289-289页

作者：陆虹皮国华龚新昌张静张珍中国预防医学科学院病毒学研究所中国预防医学科学院病毒学研究所北京

乙型肝炎病毒(HBV)是乙型肝炎的病原体,在我国感染率很高。检测血清中的e抗原(HBeAg)和和抗-HBe,在临床诊断、预后、母婴垂直传播的观察方面均具有重要意义,极须研制质量稳定、特异和敏感的快速诊断试剂。由於HBeAg的分子量小,免疫原性... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)是乙型肝炎的病原体,在我国感染率很高。检测血清中的e抗原(HBeAg)和和抗-HBe,在临床诊断、预后、母婴垂直传播的观察方面均具有重要意义,极须研制质量稳定、特异和敏感的快速诊断试剂。由於HBeAg的分子量小,免疫原性差,且与血清球蛋白及白蛋白有非特异性结合,不易将其分离以制备抗体,故我们采用SDS和2-ME两种变性剂,将大肠杆菌高效表达的基因工程HBcAg转变成HBeAg,转变后HBeAg的ELISA滴度可达1600以上,而HBcAg则不能测出。用此抗原免疫

关键词： HBeAg 血清试剂抗原瘤细胞株单克隆抗体