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心房肌细胞外泌体miR-130在房颤发病中的作用机制

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实用医学杂志 2022年第14期38卷 1766-1772页

作者：黄江伟江鑫蒋长荣龚慧琴齐明旭南华大学附属南华医院心血管内科湖南衡阳421002 南华大学附属南华医院急诊科湖南衡阳421002

目的探讨小鼠心房肌细胞外泌体miR⁃130在房颤(AF)发病中的作用机制。方法用miR⁃130 shRNA慢病毒(sh⁃miR⁃130)或对照(sh⁃Crtl)转染小鼠心房肌细胞,然后进行AngⅡ处理。从处理过的心房肌细胞中分离出外泌体,与THP⁃1巨噬细胞共培养。进行... 详细信息

目的探讨小鼠心房肌细胞外泌体miR⁃130在房颤(AF)发病中的作用机制。方法用miR⁃130 shRNA慢病毒(sh⁃miR⁃130)或对照(sh⁃Crtl)转染小鼠心房肌细胞,然后进行AngⅡ处理。从处理过的心房肌细胞中分离出外泌体,与THP⁃1巨噬细胞共培养。进行流式细胞术以检查CD86和CD163阳性巨噬细胞的百分比。此外,通过构建横向主动脉弓缩窄术(TAC)小鼠模型,将sh⁃miR⁃130注射到小鼠体内以敲低miR⁃130表达,进一步研究miR⁃130在体内心脏纤维化过程和巨噬细胞极化中的作用。结果AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体(AngⅡ⁃Exo)中miR⁃130表达上调。AngⅡ⁃Exo通过转移miR⁃130诱导巨噬细胞向M1极化。在有或没有sh⁃Ctrl对照处理的TAC小鼠中miR⁃130的水平显著升高,并且注射sh⁃miR⁃130的TAC小鼠的miR⁃130水平显著降低。sh⁃miR⁃130明显改善了TAC小鼠心脏的结构并减小了心肌大小、纤维化水平。此外,sh⁃miR⁃130处理后TAC小鼠左心房组织中iNOS^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著降低,和CD163^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著增加。结论在AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体中miR⁃130的表达水平升高,并且外泌体通过转移miR⁃130促进了M1巨噬细胞极化。

关键词：小鼠心房肌细胞外泌体 miR-130 房颤巨噬细胞极化

内毒素对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和LDLR表达的影响

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内毒素对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和LDLR表达的影响

作者：龚慧琴南华大学

学位级别：硕士

目的以THP-1源性巨噬细胞为研究对象，经内毒素处理后，观察细胞水平PCSK9、LDLR的变化及其规律，以便了解PCSK9是否介导内毒素在动脉粥样硬化发展中起作用。方法用不同浓度的内毒素(0,0.1,1,10,100μg/ml)处理经160nmol/L佛波酯诱... 详细信息

目的以THP-1源性巨噬细胞为研究对象，经内毒素处理后，观察细胞水平PCSK9、LDLR的变化及其规律，以便了解PCSK9是否介导内毒素在动脉粥样硬化发展中起作用。方法用不同浓度的内毒素(0,0.1,1,10,100μg/ml)处理经160nmol/L佛波酯诱导贴壁的THP-1源性巨噬细胞不同时间(0,3,6,12,24h)，RT-PCR、Western blot分别检测PCSK9、LDLR mRNA和蛋白质的表达。应用Lipofectamine2000转染80nmol/L PCSK9siRNA进入THP-1源性巨噬细胞后，Western blot检测LDLR蛋白质的表达以及油红O染色观察细胞内脂质含量。结果随着内毒素浓度的增加，THP-1源性巨噬细胞PCSK9mRNA、蛋白质的表达逐渐增多。但是随着内毒素浓度的增加，THP-1源性巨噬细胞LDLR蛋白质表达逐渐减少;RT-PCR检测发现，LDLR mRNA表达在早期时间(3h和6h)减少，但随后(12h和24h) LDLR mRNA表达逐渐增多，到24h表达量略多于对照组。PCSK9siRNA转染THP-1源性巨噬细胞后，与LPS单独处理组相比，PCSK9siRNA组、PCSK9siRNA+LPS组LDLR蛋白质表达都增多，PCSK9siRNA组表达最为明显，其细胞内脂质的含量最多。结论 1.内毒素上调THP-1源性巨噬细胞PCSK9mRNA、蛋白质的表达;下调THP-1源性巨噬细胞LDLR蛋白质的表达，而对于LDLR mRNA的表达是可变化的;2.内毒素通过PCSK9下调THP-1源性巨噬细胞LDLR的表达，影响脂质的蓄积。

关键词：内毒素 THP-1源性巨噬细胞枯草溶菌素转换酶9 低密度脂蛋白受体炎症

齐墩果酸强化阿托伐他汀降脂效果的临床观察及初步机制

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中国动脉硬化杂志 2013年第6期21卷 537-540页

作者：杨红霞龚慧琴蒋恒波湖南永州职业技术学院湖南省永州市425000 南华大学附属南华医院心内科湖南省衡阳市421001

目的研究齐墩果酸对阿托伐他汀在高脂血症患者降脂效果的影响并初步探讨其机制。方法选取高脂血症患者107例,分为单独应用阿托伐他汀治疗组或阿托伐他汀联合应用齐墩果酸治疗组,治疗观察疗程为3个月。分别检测两组治疗前后血液TC、LDLC... 详细信息

目的研究齐墩果酸对阿托伐他汀在高脂血症患者降脂效果的影响并初步探讨其机制。方法选取高脂血症患者107例,分为单独应用阿托伐他汀治疗组或阿托伐他汀联合应用齐墩果酸治疗组,治疗观察疗程为3个月。分别检测两组治疗前后血液TC、LDLC、TG和HDLC水平。比较两组治疗前后血脂水平变化以及两组间血脂水平差异。用ELISA法分别检测两组治疗前后血清PCSK9浓度。结果治疗前阿托伐他汀组和阿托伐他汀+齐墩果酸组包括TC、LDLC、TG和HDLC等在内的一般资料匹配,差异均无显著性。两组治疗均取得显效,与同组治疗前比较,治疗后两组中TC、LDLC和TG均明显下降,差异具有显著性(P0.05)。治疗后,阿托伐他汀组血清PCSK9浓度升高了约30%,与治疗前比较差异具有显著性(72.4±4.2μg/L比95.1±3.7μg/L;P<0.01);阿托伐他汀+齐墩果酸组血清PCSK9浓度略有升高(71.1±3.9μg/L比77.6±4.4μg/L),与治疗前比较差异不具显著性;但是阿托伐他汀组血清PCSK9浓度明显高于阿托伐他汀+齐墩果酸组,差异具有显著性(95.1±3.7μg/L比77.6±4.4μg/L,P<0.05)。Spearman相关分析表明血清TC(r=0.76,P=0.001)和LDLC(r=0.72,P=0.001)与PCSK9浓度显著相关,而HDLC和TG与PCSK9浓度相关性不明显。结论血清PCSK9浓度与TC和LDLC明显相关,齐墩果酸可强化阿托伐他汀对高脂血症患者的降脂效果,其作用可能与齐墩果酸抑制PCSK9表达有关。

关键词：齐墩果酸阿托伐他汀高脂血症降脂治疗

过氧化物还原酶2通过ROS-NF-κB-miR-33a-ABCA1途径抑制巨噬细胞脂质蓄积

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第12期36卷 1446-1454页

作者：黄江伟江鑫蒋长荣龚慧琴南华大学附属南华医院心血管内科湖南衡阳421002 南华大学附属南华医院急诊科湖南衡阳421002

已有研究证实,过氧化物还原酶2(peroxiredoxin 2,Prdx2)可抑制小鼠动脉粥样硬化发展,但其在巨噬细胞脂质蓄积中的作用及机制未知。本文在体外培养THP-1源性泡沫细胞,转染Prdx2质粒过表达载体(pcDNA3.1-Prdx2)或Prdx2 siRNA,通过qRT-PCR... 详细信息

已有研究证实,过氧化物还原酶2(peroxiredoxin 2,Prdx2)可抑制小鼠动脉粥样硬化发展,但其在巨噬细胞脂质蓄积中的作用及机制未知。本文在体外培养THP-1源性泡沫细胞,转染Prdx2质粒过表达载体(pcDNA3.1-Prdx2)或Prdx2 siRNA,通过qRT-PCR、Western印迹、油红O和高效液相色谱等手段,检测ABCA1、NF-κB p65和miR-33a表达,胆固醇流出水平,胞内脂滴数目,胆固醇含量及ROS水平。此外,用NF-κB抑制剂PDTC和/或miR-33a抑制剂作预处理,观察上述指标有何变化。结果表明,Prdx2过表达组细胞ABCA1表达水平显著提高(P<0.05),而NF-κB和miR-33a水平明显下调(P<0.05),胞内[3H]-胆固醇流出增加(P<0.05),脂质蓄积减轻;而预处理PDTC和miR-33a抑制剂后,上述效应则更加明显。相反,Prdx2沉默组ABCA1水平下降(P<0.05),NF-κB和miR-33a表达上调(P<0.05)。我们发现,Prdx2过表达能有效降低泡沫细胞内ROS水平。综上所述,Prdx2可通过ROS-NF-κB-miR-33a-ABCA1途径促进巨噬细胞胆固醇流出,抑制脂质蓄积。

关键词：过氧化物还原酶2 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 活性氧 NF-κB miR-33a

LNG在微小通道中沸腾流动与换热特性的数值研究

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舰船科学技术 2024年第5期46卷 126-132页

作者：龚慧芝赵忠超江苏科技大学能源与动力学院江苏镇江212100

针对LNG在亚临界状态下的工作要求,利用VOF多相流模型对LNG在1 mm、1.5 mm、2 mm和2.5 mm共4种直径微小通道内的沸腾流动与换热特性进行研究,操作压力为0.1 MPa,热通量为40.9~385.4 kW/m^(2),质量通量为110~600 kg/m^(2)·s。研究结果表... 详细信息

针对LNG在亚临界状态下的工作要求,利用VOF多相流模型对LNG在1 mm、1.5 mm、2 mm和2.5 mm共4种直径微小通道内的沸腾流动与换热特性进行研究,操作压力为0.1 MPa,热通量为40.9~385.4 kW/m^(2),质量通量为110~600 kg/m^(2)·s。研究结果表明:在直径为1.5 mm、2 mm和2.5 mm的微小通道中,观察到了泡状流、弹状流、波状-环状流、过渡流和雾状流5种流型,而对于直径为1 mm的通道,没有观察到弹状流和过渡流,却出现了受限泡状流和柱塞流,且发现流型随通道直径的减小而转变加快,不同管径中的流型种类以及所占通道比例不同。当通道直径由2.5 mm减小到1 mm时,在波状-环状流区域对流换热系数提高了24.6%,但压降增加了50.1%。当质量通量增加到600 kg/m^(2)·s,对流换热系数提高了22.6%,压降增加了55.8%。

关键词：微小通道流动沸腾两相流型流动与换热数值模拟

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基于锂负极的液态金属电池研究进展

储能科学与技术 2024年第1期13卷 299-310页

作者：曾坤郑晓妍龚慧玲邹博陈凯晏忠钠长沙理工大学能源与动力工程学院湖南长沙410114 长沙理工大学城南学院湖南长沙410015

液态金属电池由于具有低成本、易于组装和扩容等优点,且在充放电过程中能够有效地避免枝晶生长和电极结构变形等问题,在规模化电网储能领域具有显著优势。本文系统地综述了液体金属电池的工作原理、优缺点、电池材料(包括电极和电解质)... 详细信息

液态金属电池由于具有低成本、易于组装和扩容等优点,且在充放电过程中能够有效地避免枝晶生长和电极结构变形等问题,在规模化电网储能领域具有显著优势。本文系统地综述了液体金属电池的工作原理、优缺点、电池材料(包括电极和电解质)的选取原则以及近期液态金属电池电极材料的研究进展,着重介绍了Li‖Te体系、Li‖Bi体系、Li‖Sb体系、Li‖Sb-X(X=Pb,Sn)体系以及Li‖Bi-X(X=Sn,Pb)体系等以金属锂为负极的液态金属电池关键材料体系,重点分析了上述材料体系的电化学储能特性、安全性、循环稳定性以及性能提升策略,并对比分析了上述材料体系在大规模储能应用时存在的优势与不足。此外,综述了Li基液态金属电池在熔盐电解质、高温密封及腐蚀防护、电池热管理等方面存在的问题以及面临的技术难题。最后,展望了液态金属电池正、负极材料的主要发展方向。综合分析表明,基于Li负极的液态金属电池具有低熔点、低成本、高库仑效率以及高放电电压等优点。

关键词：锂负极液态金属电池电化学储能关键材料

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微小RNA-126模拟物对肿瘤坏死因子α诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

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中华高血压杂志 2020年第9期28卷 862-867页

作者：张凯周支香王佐曾钧发龚慧琴南华大学附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院机能学实验中心南华大学衡阳医学院心血管疾病研究所南华大学附属南华医院心血管内科

目的探究微小RNA(miR)-126模拟物在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,随机进行如下处理:无特殊处理(对照组);加100μg/L TNF-α(TNF-α组);转染Lipofectamine 20... 详细信息

目的探究微小RNA(miR)-126模拟物在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,随机进行如下处理:无特殊处理(对照组);加100μg/L TNF-α(TNF-α组);转染Lipofectamine 2000+100μg/L TNF-α(miR-126阴性组);转染miR-126模拟物+100μg/L TNF-α(miR-126模拟物组),每组设置6个重复样品。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-126表达情况;MTT法检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附试验法检测细胞中白细胞介素(IL)6、IL-1β水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测细胞中内皮细胞黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达;双荧光霉素活性实验检测miR-126、HMGB1间的靶向关系。结果与对照组相比,TNF-α组、miR-126阴性组miR-126表达降低,细胞增殖率降低,IL-6、IL-1β水平升高,细胞凋亡率升高,VCAM-1、ICAM-1、HMGB1蛋白表达升高(均P<0.05);与TNF-α组、miR-126阴性组相比,miR-126模拟组miR-126表达升高,细胞增殖率升高,IL-6、IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,VCAM-1、ICAM-1、HMGB1蛋白表达降低(均P<0.05)。与miR-126阴性组+HMGB13’非编码区(UTR)-携带野生型(Wt)组相比,miR-126模拟物+HMGB13’UTR-Wt组荧光素酶活性降低(0.43±0.05比1.06±0.15,P<0.05)。结论miR-126模拟物可能通过降低炎症反应缓解TNF-α诱导的细胞损伤,实现对血管内皮细胞损伤的保护。

关键词：血管内皮细胞微小RNA-126 肿瘤坏死因子α 炎症反应

前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因多态性的临床研究进展

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中国动脉硬化杂志 2012年第4期20卷 380-384页

作者：龚慧琴吴琪文红艳刘录山南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室南华大学附属第一医院心血管内科湖南省衡阳市421001 湖南省中医药大学西医诊断学教研室湖南省长沙市410208

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来新发现的一种与调节胆固醇代谢密切相关蛋白,属前蛋白转化酶家族。PCSK9可通过调节低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平进而影响冠状动脉粥样硬化性心脏病、外周血管病、脑血管病、神经系统疾病及糖尿... 详细信息

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来新发现的一种与调节胆固醇代谢密切相关蛋白,属前蛋白转化酶家族。PCSK9可通过调节低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平进而影响冠状动脉粥样硬化性心脏病、外周血管病、脑血管病、神经系统疾病及糖尿病等疾病的风险。近来研究表明,PCSK9基因多态性位点双向调节胆固醇水平。认识这些多态性位点,对于评估疾病严重性、预后或药物治疗反应有重要临床意义。本文就PCSK9基因多态性及其临床研究进展做一综述。

关键词：前蛋白转化酶枯草溶菌素9 低密度脂蛋白胆固醇胆固醇代谢冠状动脉粥样硬化性心脏病糖尿病

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“双减”政策下小学音乐素养培养策略研究

中国科技经济新闻数据库教育 2024年第4期 0137-0140页

作者：龚慧如江西省宜春市宜阳新区官园学校江西宜春336000

随着“双减”政策的正式落实与持续践行,在国家与社会教育部门倾力打造下,对中小学教育领域提出了改革与创新的新要求。一方面,要求教育遵照“减负、提质”原则,减轻压力与负担的同时,给予学生自我展现与学习机会,在课外注重生活色彩的... 详细信息

随着“双减”政策的正式落实与持续践行,在国家与社会教育部门倾力打造下,对中小学教育领域提出了改革与创新的新要求。一方面,要求教育遵照“减负、提质”原则,减轻压力与负担的同时,给予学生自我展现与学习机会,在课外注重生活色彩的融入,打造素质人生;另一方面,强调教师的灵动教学成果,根据不同学生的成长与个性魅力,制定与之相契合的教育调整方案,为学生倾力构建高品质的文化学习环境。基于上述内容,在新时代教育背景下,借助“双减”打造素质化教育课堂;如何针对小学音乐学科,将“双减”融入其中,促进学生音乐艺术素养全面培育,成为当前学科教育指导工作中的主要任务。具体实施与素质培育成长方案如下文所述。

关键词： “双减”政策小学音乐音乐素养提质减负