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以黄粉虫为主要蛋白源时草鱼摄食、生长及抗氧化能力对饲料蛋白质含量的响应研究

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饲料工业 2024年第12期45卷 5-12页

作者：朱文欢龙鲜梅张孝睿陶宇解绶启邵端何雅明谭青松农业农村部淡水生物繁育重点实验室池塘健康养殖湖北省工程实验室水产养殖国家级实验教学示范中心华中农业大学水产学院湖北武汉430070 武汉市水产技术推广指导中心湖北武汉430012 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室湖北武汉430072

实验旨在探究以黄粉虫为主要蛋白源时草鱼摄食、生长及抗氧化能力对饲料蛋白含量的响应。以黄粉虫为主要蛋白源,分别设计6组不同蛋白质水平(25.25%、29.43%、33.38%、37.96%、41.40%、45.70%,分别命名为TMF1、TMF2、TMF3、TMF4、TMF5组... 详细信息

实验旨在探究以黄粉虫为主要蛋白源时草鱼摄食、生长及抗氧化能力对饲料蛋白含量的响应。以黄粉虫为主要蛋白源,分别设计6组不同蛋白质水平(25.25%、29.43%、33.38%、37.96%、41.40%、45.70%,分别命名为TMF1、TMF2、TMF3、TMF4、TMF5组和TMF6组)的草鱼饲料,以初始体重(3.63±0.01)g的草鱼苗为实验对象进行为期8周的养殖实验,探究不同黄粉虫蛋白质水平对草鱼生长性能和抗氧化能力的影响。结果表明:(1)不同黄粉虫的添加量除了对存活率和饲料效率的影响不显著外(P>0.05),草鱼的特定生长率、增重率和蛋白质效率都会随着黄粉虫添加量的增加而减少,且TMF1组的上述指标均显著高于TMF4、TMF5和TMF6组(P0.05),但草鱼的肝体比和肠脂比会随着黄粉虫含量的增加先上升后下降,TMF2组的肠脂比显著高于其他组(P0.05);(4)草鱼肝胰脏的超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力、丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶的活性随着黄粉虫添加量的增加而降低,其中TMF1组谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量显著高于其他组(P0.05)。本研究表明,草鱼饲料中以黄粉虫为主要蛋白源时,其蛋白质含量不宜超过25.25%,较高的黄粉虫添加量对草鱼的摄食、生长和抗氧化性能产生负面影响。

关键词：黄粉虫草鱼抗氧化新型蛋白源生长

草鱼骨骼肌成肌细胞系的建立及精氨酸对其增殖和分化的影响研究

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草鱼骨骼肌成肌细胞系的建立及精氨酸对其增殖和分化的影响研究

作者：龙鲜梅华中农业大学

学位级别：硕士

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)作为中国养殖规模较大的重要淡水经济养殖鱼类,其具有分布广、营养价值高、养殖成本低、人工繁殖技术成熟、口感好、适应性强等优点。但是随着集约化养殖的大规模发展,养殖过程出现了许多问题,养殖密度... 详细信息

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)作为中国养殖规模较大的重要淡水经济养殖鱼类,其具有分布广、营养价值高、养殖成本低、人工繁殖技术成熟、口感好、适应性强等优点。但是随着集约化养殖的大规模发展,养殖过程出现了许多问题,养殖密度高、水质差、病虫害高发以及抵抗力下降等问题,由此也导致了人工养殖的草鱼肉品质下降。不同的肌纤维亚型与牲畜和家禽的优质肉类具有一定的相关性,而骨骼肌发育可以在早期通过特定基因的表达或营养物质的添加来调节,添加营养素通常可以产生持久的效果。因此,本研究通过建立一种草鱼骨骼肌来源的成肌细胞系来作为研究营养策略调节草鱼骨骼肌发育机制机理的体外模型。根据细胞系的来源将其命名为CIM,并对CIM细胞系的生物学特性和肌源性特性进行表征和鉴定,再对细胞系在营养调控方面的影响机制进行初步探究。研究结果如下:1.草鱼骨骼肌成肌细胞系的建立和表征首先通过胶原酶-胰蛋白酶法将原代细胞从草鱼骨骼肌组织中分离出来,通过评估原代细胞在不同培养基中的活力和生长状况筛选出最适的培养基DMEM,再利用差速贴壁法根据肌源性细胞和非肌源性细胞的贴壁速率对细胞悬液中的肌源性细胞进行纯化。CIM细胞系在冻存1-6个月后复苏的存活率79.78-95.06%,培养过程未发现细菌、真菌以及支原体的污染;CIM细胞系的生长曲线呈明显的“S”型,且群体倍增时间(PDT)约为27.24 h;CIM细胞系的染色体模式数为48,该48条染色体核型主要由8对中部着丝粒染色体和16对亚中部着丝粒染色体组成,且草鱼骨骼肌成肌细胞系的线粒体12S r RNA序列与已知的草鱼12S r RNA线粒体序列(Gen Bank登录号AY897013.1)之间的匹配率达到99%。这些结果表明CIM细胞系具有与草鱼相似的遗传背景和正常的生物学功能。2.草鱼骨骼肌成肌细胞系的肌源性和永生性鉴定在基因水平上,关键肌源性调控因子myod、pax7、myog、myf5、myh1、myh2、myh4和myh7在原代细胞和CIM细胞系中都有表达,只是各基因的相对表达量不一样。成肌细胞特异性标记基因myod在原代细胞和CIM细胞系中的表达量都是最高的,但是在CIM细胞系中的表达量差异最大。在蛋白水平上,肌源性特异标记蛋白Myo D、Desmin、CD34在CIM细胞系中表达,而成纤维细胞特异性标记蛋白PDGFRα在CIM细胞系中不表达。因此,从特异肌源性标记基因和蛋白中证实了,来自草鱼骨骼肌组织的CIM细胞系的细胞类型主要是成肌细胞。该CIM细胞系在用2%马血清的诱导培养基诱导10 d后的肌生成指数和融合指数分别为8.96%-9.42%和3-24;通过脂质体转染的方法将载体p EGFP-N1成功转入CIM细胞系中培养48 h后的转染效率为23%至24%;利用鱼端粒酶检测试剂盒检测了CIM细胞系中5.06×10个细胞的端粒酶活是0.03 IU/mgprot,所以本研究所建立的CIM成肌细胞系是具有肌管融合能力的不朽细胞系。3.精氨酸对草鱼骨骼肌成肌细胞增殖和分化的影响为了将该细胞系进行初步的应用,本研究以CIM细胞系为模型探究了精氨酸对草鱼骨骼肌成肌细胞增殖和分化的影响。不同的精氨酸浓度对草鱼骨骼肌细胞的生长和活力影响不一样,浓度为100μg/mL的精氨酸对草鱼骨骼肌细胞生长和活力的影响明显高于其他浓度,且可以促进细胞的生长和细胞活力;本研究还探究了不同的生长时间和精氨酸浓度对草鱼骨骼肌成肌细胞的影响,其中生长时间、精氨酸浓度以及生长时间和精氨酸浓度的交互作用都会对肌源性关键调控因子pax7、myod、myog、myh1、myh2、myh4和myh7在草鱼骨骼肌成肌细胞体内的表达产生显著性影响,但是对乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的酶活没有显著性影响。用100μg/m L的精氨酸处理CIM细胞系可以显著性促进myh7、igf-ⅱ、myod、myog、mrf4、myf5和cyclind1肌源性调控基因的相对表达,而对myh1、myh2、myh4、fgf6和mstn基因的相对表达影响不具有显著性,由此推测,精氨酸可能是通过激活igf-ⅱ、myod、mrf4、myf5和cyclind1基因的转录对草鱼骨骼肌成肌细胞的增殖产生影响。蛋白免疫印迹和免疫荧光结果表明,精氨酸处理显著性降低了肌球蛋白重链亚型Myh4和Myh1的表达,而显著性增加了肌球蛋白重链亚型Myh7的表达。由此推测,精氨酸可能是通过激活myh7、igf-ⅱ、myod、mrf4、myf5和cyclind1基因的转录和肌球蛋白重链亚型Myh7的表达对草鱼骨骼肌成肌细胞的增殖和分化产生影响的。本研究成功建立了草鱼骨骼肌成肌细胞系和初步探究了精氨酸对该细胞系的增殖和分化的影响。该细胞系可以为研究草鱼肌肉发育的相关机制提供体外模型,且精氨酸对该细胞系的影响探究可以为营养调控肌肉发育相关的研究提供参考数据和理论依据。

关键词：草鱼精氨酸肌源性鉴定细胞增殖基因表达肌球蛋白重链

基础教育研究2023年度发展报告——2023年人大《复印报刊资料·中小学教育》论文转载情况统计与分析

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课程．教材．教法 2024年第4期44卷 146-153页

作者：郭洪瑞廖鲜梅杭州师范大学中国教育现代化研究院杭州311121 中国人民大学书报资料中心北京100086

通过对2023年度人大《复印报刊资料·中小学教育》转载论文的统计分析可以看出,文章来源较为广泛,在被全文转载的文章中,其源期刊所占篇目较多的依次为《课程·教材·教法》《教育研究》《教育发展研究》《中国教育学刊》。从第一作者... 详细信息

通过对2023年度人大《复印报刊资料·中小学教育》转载论文的统计分析可以看出,文章来源较为广泛,在被全文转载的文章中,其源期刊所占篇目较多的依次为《课程·教材·教法》《教育研究》《教育发展研究》《中国教育学刊》。从第一作者所属单位性质看,高校仍然处于绝对主体地位。基础教育研究的热点主要集中在拔尖创新人才培养、教育数字化转型、“双新”背景下的教学研究、减负提质、科学教育方面。

关键词：基础教育研究人大《复印报刊资料·中小学教育》论文转载

微核激活cGAS-STING信号通路的机制及其肿瘤免疫功能

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浙江大学学报（医学版） 2024年第1期53卷 25-34页

作者：沈琴徐平龙梅陈浙江大学生命科学研究院浙江杭州310058 浙江大学生命系统稳态与保护教育部重点实验室、浙江省癌症分子细胞生物学重点实验室浙江杭州310058 浙江大学杭州国际科创中心智能医药研究所浙江杭州311200 浙江大学癌症研究院浙江杭州310058

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路可监测微生物入侵和组织损伤等生理病理异常状态,是天然免疫系统的重要组成之一。作为DNA感受器,cGAS主要识别异常定位于细胞质的双链DNA(dsDNA),通过催化合成二级信使... 详细信息

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路可监测微生物入侵和组织损伤等生理病理异常状态,是天然免疫系统的重要组成之一。作为DNA感受器,cGAS主要识别异常定位于细胞质的双链DNA(dsDNA),通过催化合成二级信使环鸟苷酸-腺苷酸启动由STING介导的Ⅰ型干扰素和炎症信号通路。微核是有丝分裂后期染色体错误分离的产物,也是细胞质dsDNA的重要来源之一。作为一类不稳定的亚细胞器结构,微核核膜倾向于不可逆的破裂,导致微核基因组DNA暴露在细胞质中。暴露的微核基因组DNA招募并激活cGAS-STING信号通路,诱导STING下游信号通路活化,包括Ⅰ型干扰素信号通路和经典核因子κB(NF-κB)信号通路,导致细胞衰老、细胞凋亡和细胞自噬的发生,从而介导免疫系统的活化以清除肿瘤细胞,或者直接诱导肿瘤细胞死亡。另外,STING持续激活诱导的内质网应激,以及慢性Ⅰ型干扰素信号通路和非经典NF-κB信号通路的活化,营造了免疫抑制的肿瘤微环境,导致肿瘤细胞免疫逃逸,促进肿瘤转移和肿瘤细胞存活。因此,在肿瘤的发生发展和治疗过程中,活化的cGAS-STING免疫通路扮演着抑制或促进肿瘤的双重作用。本文阐述了肿瘤微环境中微核诱导cGAS-STING免疫通路活化的机制研究进展,探讨了其在肿瘤发生发展和治疗中的潜在重要作用。

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路染色体不稳定微核肿瘤免疫综述

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企业全面预算管理实施现状和优化策略探究

现代商业研究 2024年第7期 164-166页

作者：鲜梅浙江正泰电器股份有限公司

市场竞争的加剧，使企业面临着前所未有的挑战，必须通过综合竞争实力的不断增强才能占据更大的市场份额。在企业中实施全面预算管理，有助于明确企业长期发展的目标方向，并为各项经营活动的开展提供足够的资金支持，使得企业能够尽快... 详细信息

市场竞争的加剧，使企业面临着前所未有的挑战，必须通过综合竞争实力的不断增强才能占据更大的市场份额。在企业中实施全面预算管理，有助于明确企业长期发展的目标方向，并为各项经营活动的开展提供足够的资金支持，使得企业能够尽快实现战略发展目标，步入可持续健康发展的道路。目前，部分企业在全面预算管理的实施过程中出现一些问题，亟须通过有效方式解决。因此，对于企业全面预算管理的实施现状和优化策略进行探讨，具有迫切的现实意义。基于此，本文从企业全面预算管理实施的重要价值入手，分析企业全面预算管理的实施现状，探讨优化全面预算管理工作的有效策略，力求为企业在竞争环境下的稳步健康发展提供借鉴。

关键词：企业全面预算管理管理现状优化策略

来源：博看期刊

从辅导员职业能力标准看高职辅导员的精细化管理

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学周刊 2024年第16期16卷 155-158页

作者：赵鲜梅江西青年职业学院学工处江西南昌330006

随着我国高等职业教育的快速发展,学生管理工作也面临着新的任务和挑战。在高职院校中,辅导员是开展大学生思想政治教育的骨干力量,承担着对学生进行道德品质教育、维护安全稳定、抓好班级建设、开展就业指导等多项工作,是促进大学生健... 详细信息

随着我国高等职业教育的快速发展,学生管理工作也面临着新的任务和挑战。在高职院校中,辅导员是开展大学生思想政治教育的骨干力量,承担着对学生进行道德品质教育、维护安全稳定、抓好班级建设、开展就业指导等多项工作,是促进大学生健康成长的指导者和引路人。2014年《高等学校辅导员职业能力标准(暂行)》发布,明确了高校辅导员的职业概况、基本要求和各级能力标准,也为高职院校辅导员工作指明了方向。高职院校的学生有其特殊性,需要辅导员立足新时期岗位职责的要求,从精细化管理角度出发,扎实做好教育、管理、服务等各项工作,落实立德树人的根本任务,促进学生在职业能力和综合素质方面得到全面发展,为其走向社会夯实基础。

关键词：高职院校辅导员现状辅导员职业能力标准精细化管理

8份五指毛桃种质抗旱性及其与叶片形态结构的关联分析

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中药材 2024年 553-558页

作者：陈庆梅庾韦花陈会鲜黄小娟蒙平林茜广西南亚热带农业科学研究所广西农业科学院生物技术研究所

目的:筛选出能够表征五指毛桃抗旱性的重要叶片形态特征及解剖结构指标,探索五指毛桃叶片形态结构与其抗旱性的关联性。方法:对8份五指毛桃种质进行抗旱性测定,并观察这8份种质的叶片形态特征及解剖结构,利用方差分析、相关性分析及隶... 详细信息

目的:筛选出能够表征五指毛桃抗旱性的重要叶片形态特征及解剖结构指标,探索五指毛桃叶片形态结构与其抗旱性的关联性。方法:对8份五指毛桃种质进行抗旱性测定,并观察这8份种质的叶片形态特征及解剖结构,利用方差分析、相关性分析及隶属函数值进行比较分析。结果:8份五指毛桃种质的抗旱性大小依次为LC5>LC13>LC10>LC4>LC6>LC7>LC3>LC8;叶色、绒毛量、叶厚、栅栏组织厚度、栅海比与抗旱性呈显著正相关,下表皮细胞厚度与抗旱性呈显著负相关,叶长、叶宽、角质层、海绵组织厚度与抗旱性的相关性不显著;以叶色、绒毛量、叶厚、栅栏组织厚度、下表皮细胞厚度、栅海比6个指标进行隶属函数值分析,发现8份五指毛桃种质的抗旱性大小排序为:LC5>LC13>LC10>LC4>LC6>LC7>LC8>LC3,与8份种质自身的抗旱性大小顺序基本吻合。结论:叶色、绒毛量、叶厚可做为表征五指毛桃抗旱性的外在形态指标,栅栏组织厚度、下表皮细胞厚度、栅海比可作为表征五指毛桃抗旱性的内在解剖结构指标。

关键词：五指毛桃抗旱性叶片形态解剖结构

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山香圆叶三萜类化合物的提取及浓缩丸的制备

山香圆叶三萜类化合物的提取及浓缩丸的制备

作者：龙弟梅宜春学院

学位级别：硕士

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草鱼肌纤维原代培养的适宜培养基筛选

水产学杂志 2023年第5期36卷 85-92页

作者：张浩龙鲜梅陈旺旺胡广文谭青松华中农业大学水产学院水产养殖国家级实验教学示范中心湖北武汉430070

原代培养的细胞离体时间短,生物学性状和体内细胞相似,为研究生物体的正常生理学和生物化学性质、化合物对生物体的作用等提供了模型系统。探讨不同培养基对草鱼肌纤维的培养效果,筛选出适合草鱼肌纤维原代培养的培养基,可为后期草鱼肌... 详细信息

原代培养的细胞离体时间短,生物学性状和体内细胞相似,为研究生物体的正常生理学和生物化学性质、化合物对生物体的作用等提供了模型系统。探讨不同培养基对草鱼肌纤维的培养效果,筛选出适合草鱼肌纤维原代培养的培养基,可为后期草鱼肌纤维原代培养研究提供参考。分别选用DMEM、M199、L-15三种培养基采用组织块法培养草鱼肌纤维,在倒置显微镜下观察不同培养基对草鱼肌纤维生长状态和细胞形态、细胞迁出时间和细胞达到首次传代时间的影响;采用细胞计数法计算不同培养基对细胞增殖情况以及细胞贴壁率的影响;用MTT比色法测定不同培养基对细胞活力的影响。与DMEM和L-15相比,M199培养基培养的草鱼肌纤维从组织块中开始迁出时间短(P<0.05),细胞贴壁率高,2 h细胞贴壁率高达(44.60±11.46)%(P<0.05),而DMEM、L-15培养基培养的细胞2 h贴壁率分别为(33.25±8.35)%、(22.83±0.70)%(P<0.05);同时M199组的细胞增殖速度快,进入对数生长期仅需72 h,且传代培养72 h后的草鱼肌纤维平均扩增倍数最高(P<0.05);MTT法测细胞活力发现,M199培养基培养的草鱼肌纤维平均OD值为1.03±0.17显著高于DMEM和L-15组的OD值(分别为0.06±0.02和0.05±0.02)。综上M199培养基对于草鱼肌纤维的生长具有较好的促进作用,该培养基中的生长增殖速率均明显高于DMEM和L-15培养基,且肌纤维贴壁和伸展状态更好。M199培养基可作为草鱼肌纤维原代培养的培养基。

关键词：草鱼肌纤维培养基组织块法细胞培养筛选