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江苏省创新驱动政策体系研究及对广东的启示

科技管理研究 2016年第7期36卷 54-59页

作者：龙云凤广东省科学技术情报研究所广东广州510033

分析江苏省创新驱动战略布局,以及围绕这一战略布局开展的政策设计与实践;研究其在高新技术产业、研发投入、知识产权、创新人才、政策保障等方面的政策布局特点,并结合广东特点提出广东实施创新驱动战略的意见和建议。

关键词：江苏创新驱动政策体系广东

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广东省创新政策环境现状及问题分析

科技管理研究 2014年第15期34卷 29-34,39页

作者：龙云凤广东省科学技术情报研究所广东广州510033

分析广东特色的创新政策体系的现状和特点,指出广东创新环境存在的问题,并结合广东实际提出完善创新政策体系,抓好政策落实,简化政策办理程序,提高政策服务水平等优化创新政策环境的意见和建议。

关键词：创新政策现状问题广东

典型国家全球竞争力指数分析及对广东创新驱动发展的启示

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科技管理研究 2016年第9期36卷 17-21页

作者：龙云凤广东省科学技术情报研究所广东广州510033

研究分析全球竞争力指数体系,结合全球竞争力指数的判断标准,首次提出广东处于全球创新驱动的"2.5"阶段;同时,对日本、德国、韩国等典型创新驱动国家的竞争力和创新要素进行深入分析,对中国的全球竞争力排名及创新优势进行分析判断,并... 详细信息

研究分析全球竞争力指数体系,结合全球竞争力指数的判断标准,首次提出广东处于全球创新驱动的"2.5"阶段;同时,对日本、德国、韩国等典型创新驱动国家的竞争力和创新要素进行深入分析,对中国的全球竞争力排名及创新优势进行分析判断,并结合广东特点,从全球竞争力角度提出加快推动广东创新驱动发展的建议。

关键词：全球竞争力指数创新驱动日本德国韩国中国广东

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日本风险投资发展模式及其对广东的启示

科技管理研究 2012年第13期32卷 40-44页

作者：龙云凤广东省科学技术情报研究所广东省科学技术发展战略研究院广东广州510000

日本的风险投资始于20世纪50年代初,经历了三落三起,但作为与我国一衣带水、文化同宗同源的亚洲国家,日本在风险投资机构建设、风险资金投入、风险投资运作、风险投资退出机制、政策环境营造方面的模式和经验值得广东学习和借鉴。

关键词：风险投资运作模式日本广东

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广东汽车产业自主品牌之路及对策建议

科技管理研究 2011年第20期31卷 1-3,29页

作者：龙云凤广东省科学技术情报研究所广东省科学技术发展战略研究院广东广州510033

近年来,我国汽车工业飞速发展,同时发展模式也陷入"合资模式"迷局,汽车产业自主品牌的发展非常薄弱。通过分析当前我国汽车产业自主品牌的现状及市场环境,结合广东汽车产业发展,从税收政策、人才战略、产业布局等方面提出促进自主品牌... 详细信息

近年来,我国汽车工业飞速发展,同时发展模式也陷入"合资模式"迷局,汽车产业自主品牌的发展非常薄弱。通过分析当前我国汽车产业自主品牌的现状及市场环境,结合广东汽车产业发展,从税收政策、人才战略、产业布局等方面提出促进自主品牌发展的几点建议。

关键词：汽车产业自主品牌广东

小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及C-ELISA抗体检测试剂盒的研制

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小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及C-ELISA抗体检测试剂盒...

作者：龙云凤昆明理工大学

学位级别：硕士

参照NCBI公布的小反刍兽疫病毒疫苗株Nigeria75/1全基因序列(GenBank登录号：X74443),人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列并将其插入载体pBluescriptsk,通过PCR扩增,将N基因克隆至pMD19-T载体,经引物设计引入的EcoR Ⅰ和Kpn Ⅰ特... 详细信息

参照NCBI公布的小反刍兽疫病毒疫苗株Nigeria75/1全基因序列(GenBank登录号：X74443),人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列并将其插入载体pBluescriptsk,通过PCR扩增,将N基因克隆至pMD19-T载体,经引物设计引入的EcoR Ⅰ和Kpn Ⅰ特异性酶切,将N基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,阳性重组质粒命名为pFastBacHTA-PPRV-N,测序结果显示克隆基因片段长度为1578bp,编码525个氨基酸。将pFastBacHTA-PPRV-N转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-PPRV-N,在脂质体介导下用Bacmid-PPRV-N转染Sf9昆虫细胞,获得表达PPRV N蛋白的重组杆状病毒VBacmid-PPRV-N。 SDS-PAGE和Western blot分析结果表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物活性,分子量大小约为61.3ku。以纯化的Bacmid-PPRV-N重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG作用下融合,经克隆培养和间接ELISA方法筛选,获得了2株能稳定分泌抗小反刍兽疫病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5B11和3H10-3B8。生物学特性鉴定试验表明：5B11和3H10-3B8抗体类型和亚类均为IgG2b;5B11单抗腹水的效价达1：819200,3H10-3B8达1：12800;血清学试验证明2株单抗均能与Bacmid-PPRV-N重组蛋白抗原结合,具有高度的特异性;相加ELISA试验结果显示,5B11和3H10-3B82株单克隆抗体分别识别N蛋白上不同的抗原位点;2株杂交瘤细胞的染色体均为99-104。以Bacmid-PPRV-N重组蛋白和用亲和层析纯化的单抗5B11建立了小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测方法。通过检测已知为PPRV抗体阳性和阴性的血清对该方法进行条件优化,最终确定抗原用碳酸盐缓冲液以1：1000稀释后包被酶标板,于37℃条件下震荡反应,以含0.5%BSA和0.05%Tween-20的PBS作为稀释液,稀释血清至1：10、单抗至0.17ng/孔的终浓度后一起加到酶标板,使单抗与血清中的PPRV抗体竞争结合N抗原特异性表位,检测结果的临界值通过92份已知为PPRV抗体阴性血清的抑制率分布来确定,最终将临界值确定为50,即92份阴性血清的PI均值加上3倍的标准偏差。基于上述研究成果,先后组装了3个批次的试剂盒。在试剂盒的初步应用中,将自制的试剂盒与国际通用的标准试剂盒(CIRAD-BIOS PPRV rC-ELISA试剂盒)进行比较分析,对自制的PPRV C-ELISA抗体检测试剂盒的使用价值进行了评估。通过对977份临床样品进行检测,结果经统计分析表明：自制的试剂盒与参考试剂盒的符合率为99.38%,说明自制的PPRVC-ELISA抗体检测试剂盒可用于PPR临床检测。

关键词：小反刍兽疫病毒核蛋白杆状病毒表达系统单克隆抗体竞争ELISA