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慢病毒干扰小鼠附睾特异的meClps基因可降低精子的运动能力

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南方医科大学学报 2014年第9期34卷 1359-1364页

作者：廉滋珍曹佐武陈冉陈雷薛樱子秦俊文齐绪峰张春雪禹艳红暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院发育与再生生物学系广东广州510632 暨南大学附属第一医院麻醉科广东广州510632

目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表... 详细信息

目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表达。针对meClps基因的序列设计并合成3对靶向干扰meClps表达的寡核苷酸序列,构建重组慢病毒载体pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251、224和286。将重组慢病毒干扰质粒分别与pDsRed2.0-C1-meClps共转染到NIH-3T3细胞,半定量PCR和Western blotting检测meClps基因在mRNA和蛋白水平的变化。将筛选得到的干扰效果最好的慢病毒载体包装慢病毒,注射到小鼠附睾头部组织后分析对附睾尾部精子运动性能的影响。结果构建了体外表达meClps蛋白的pDsRed2.0-C1-meClps表达载体和靶向meClps基因的慢病毒RNAi载体。靶向meClps的RNA干扰载体对转染pDsRed2.0-C1-meClps后的NIH-3T3细胞中的meClps的mRNA和蛋白表达都有抑制,但以转染pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251对meClps的抑制效果最明显。包装后的慢病毒注射到小鼠附睾头部后附睾尾部组织中的精子运动速率降低(P<0.05)。结论筛选出RNAi-251能有效干扰meClps表达,通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后精子运动性能降低。

关键词： RNA干扰附睾特异表达蛋白 meClps 慢病毒精子运动

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心肌层表达tRNA源性小片段RNA

基础医学与临床 2016年第7期36卷 907-911页

作者：许甘霖齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室科技部及广东省国际科技合作基地发育与再生生物学系广东广州510632

目的研究大鼠左心室前壁（相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区）是否存在转移核糖核酸来源的小片段RNA（tRFs）的表达。方法分离出大鼠左心室前壁（相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区）的心肌组织并提取总RNA。使用Illumina技术对... 详细信息

目的研究大鼠左心室前壁（相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区）是否存在转移核糖核酸来源的小片段RNA（tRFs）的表达。方法分离出大鼠左心室前壁（相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区）的心肌组织并提取总RNA。使用Illumina技术对小片段RNA进行测序,以获的该两个区域的50 nt以下小片段RNA的序列及表达量信息。利用Fstax和Bowtie软件,及Perl语言编程对长度为30-36 nt部分的小片段RNA进行注释,并比较两个区域tRF表达量差异。结果大鼠心脏左心室前壁（相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区）的心肌组织存在tRF表达,而来源于tRNA的tRFs分别占总小片段RNA的9.15%和7.30%。且两个区域的经鉴别的28中tRFs种类及表达量十分接近。无论是相当于梗死区还是相当于边缘区的心肌组织,Gly GCC和Val CAC两个tRNA来源的tRFs占了所有tRFs的84.73%和84.66%。每一种tRNA来源的tRFs在两个区域间的表达差异小于4%。结论生理状态下心肌组织存在tRF表达,相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区的心肌tRFs表达谱是十分接近的。

关键词： tRFs 小片段RNA 左心室前壁心肌梗死

依据“ping-pong”循环机制预测piRNA靶基因的搜索方法

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基础医学与临床 2017年第3期37卷 399-401页

作者：许甘霖齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学科技部及广东省国际科技合作基地广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632

piRNA是指能与PIWI家族蛋白结合的小RNAs,其功能主要是稳定生殖细胞正常发育,在其他体细胞内也参与生理功能的调控[1]。相当一部分的piRNA通过被称作＂pingpong＂循环机制去识别与切割其靶基因的转录本mRNA（图1）,并通过该机制去实现初... 详细信息

piRNA是指能与PIWI家族蛋白结合的小RNAs,其功能主要是稳定生殖细胞正常发育,在其他体细胞内也参与生理功能的调控[1]。相当一部分的piRNA通过被称作＂pingpong＂循环机制去识别与切割其靶基因的转录本mRNA（图1）,并通过该机制去实现初级piRNA（primary piRNA）和次级piRNA（secondary piRNA）循环利用,piwil4或piwil2与相应的piRNA结合,通过piRNA的5＇端前10~11个碱基作为介导序列,依照碱基互补原则,对与之互补的靶mRNA进行切割,

关键词：循环机制 piRNA ping-pong 碱基互补转录本蛋白结合起始位点结果符合率循环利用大鼠

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心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响

时珍国医国药 2014年第5期25卷 1084-1086页

作者：齐绪峰洪绯罗志毅李艳梅李英镇李昀键陈叙伟沈晓涛郑馨暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 科技部及广东省科技厅"国际科技合作基地" 广东广州510632 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学) 广东广州510632 暨南大学发育与再生生物学系广东广州510632 漳州片仔癀药业股份有限公司福建漳州363000

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油... 详细信息

目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及血糖浓度。结果①与对照组相比,心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC及LDL水平;②心舒宝对高血脂大鼠模型血清中的TG、HDL及血糖的水平均无显著影响。结论心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC与LDL水平。

关键词：心舒宝高血脂大鼠

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苏云金芽孢杆菌防治烟草害虫研究进展

烟草科技 2006年第4期39卷 58-61页

作者：齐绪峰宋纪真 JE YEON HO JIN BYUNG RAE 李建洪华中农业大学植物科学技术学院武汉市南湖狮子山特1号430070 中国烟草总公司郑州烟草研究院韩国国立首尔大学农业生物技术学院东亚大学天然资源与生命科学学院

综述了苏云金芽孢杆菌的发展概况、杀虫机理、在烟草害虫防治上的应用等,并讨论了苏云金芽孢杆菌在防治烟草害虫中存在的问题及其发展前景。

关键词：苏云金芽孢杆菌杀虫机理烟草害虫

基于Cre-LoxP系统的新型慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P的构建与鉴定

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2015年第2期36卷 160-167页

作者：高文勇夏景波陈卓莹吴彩红王健欢龙颖妍齐绪峰武汉市汉口医院神经内科湖北武汉430012 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院发育与再生生物学系广东广州510632

目的:基于Cre-Lox P系统构建携带EGFP及Puromycin抗性基因,并带有巨细胞病毒(CMV)及翻译延伸因子1α(EF1α)双启动子的新型慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统.方法:以已经插入Lox P序列的p LOX-TERT-ire... 详细信息

目的:基于Cre-Lox P系统构建携带EGFP及Puromycin抗性基因,并带有巨细胞病毒(CMV)及翻译延伸因子1α(EF1α)双启动子的新型慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统.方法:以已经插入Lox P序列的p LOX-TERT-ires TK慢病毒载体为模板,用Spe I与Kpn I进行双酶切,去除TERT-ires TK片段,然后与人工设计合成的多克隆位点片段连接,构建p LOX-MCS表达载体.同时,以p B513载体为模板扩增EF1α-EGFP-Puro表达框(带有Bam HI及Kpn I酶切位点),然后与经过Bam HI及Kpn I双酶切的p LOX-MCS载体连接,进而构建p LOX-CMV-EF1α-EGFP-Puro(简称p LOX-CMV-E/P)载体.将p LOX-CMV-E/P载体与慢病毒包装载体p CMVR8.74及p MD2.G共转染293T细胞,包装病毒进行报告基因的功能分析.结果:菌落聚合酶链式反应(PCR)、酶切鉴定及测序结果均与预期结果一致,绿色荧光蛋白及抗药性基因均有较好的活性与功能.结论:成功构建了p LOX-MCS及p LOX-CMV-E/P慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒表达系统.

关键词：慢病毒表达载体 Cre-LoxP 系统绿色荧光蛋白基因嘌呤霉素抗性基因

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跑台运动对高龄大鼠运动机能的改善作用

中国实验动物学报 2017年第1期25卷 48-53页

作者：孙华伟廖肇福赖炳林李艳梅沈晓涛郑馨冯珊珊齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室科技部广东省国际科技合作基地(暨南大学) 暨南大学发育与再生生物学系广州510632

目的探讨大鼠运动机能随增龄的变化规律,以及运动对高龄大鼠运动机能的改善作用。方法对26月龄、8月龄和2月龄SD大鼠进行为期2周的中等强度跑台运动干预,测定大鼠运动前后前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度4个机能指标,进行... 详细信息

目的探讨大鼠运动机能随增龄的变化规律,以及运动对高龄大鼠运动机能的改善作用。方法对26月龄、8月龄和2月龄SD大鼠进行为期2周的中等强度跑台运动干预,测定大鼠运动前后前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度4个机能指标,进行对比分析。结果 126月龄大鼠组的前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力、极限速度均显著低于8月龄组和2月龄组,且后3个指标呈现增龄性下降;226月龄和8月龄组的前肢拉力运动后高于运动前,8月龄组和2月龄组的躯体向上活动能力运动后高于运动前;3运动干预前后4项指标的运动机能总评分进行比较,26月龄组运动后显著高于运动前。结论大鼠的前肢拉力、耐力、躯体向上活动能力及极限速度等4项运动机能指标呈增龄性下降,可作为大鼠运动机能的衰老指标。中等强度的跑台运动能显著改善高龄大鼠总运动机能的下降。

关键词：衰老运动机能跑台运动训练大鼠

Telocytes在大鼠心脏不同部位的分布

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第19期15卷 3546-3548页

作者：刘娟娟沈晓涛郑馨李震王健齐绪峰蔡冬青暨南大学再生医学教育部重点实验室广东省广州市510632 暨南大学再生医学香港中文大学暨南大学联合实验室广东省广州市510632 暨南大学科技部及广东省科技厅国际科技合作基地广东省广州市510632 暨南大学生物医学工程系广东省广州市510632

背景:心脏Telocytes可能是心肌细胞及心脏内源性干细胞的联系及支持细胞,在心肌损伤后的修复与再生和心室重构中起重要作用,但目前对Telocytes在心脏中的分布与相应的功能所知甚少。目的:观察Telocytes在大鼠心脏不同部位的分布情况。方... 详细信息

背景:心脏Telocytes可能是心肌细胞及心脏内源性干细胞的联系及支持细胞,在心肌损伤后的修复与再生和心室重构中起重要作用,但目前对Telocytes在心脏中的分布与相应的功能所知甚少。目的:观察Telocytes在大鼠心脏不同部位的分布情况。方法:取成年SD雌性大鼠心脏,行横断面连续冰冻切片,分别取心脏心底部、心脏中间部、心房-心耳部分的代表性切面进行抗c-kit免疫荧光染色,观察Telocytes在心脏的分布情况。结果与结论:结果发现心底部(26个/mm2)和心房-心耳部(20个/mm2)的Telocytes密度明显多于中间部(9个/mm2)。上述三个代表性横断面,其心肌外层区域Telocytes密度(心底部:18个/mm2;中间部:5个/mm2;心房-心耳部:13个/mm2)显著多于心肌内层区域(心底部:7个/mm2;中间部:4个/mm2;心房-心耳部:7个/mm2)。结果提示心脏Telocytes在心脏不同部分的分布不同,可能与心肌细胞及其内源性干细胞在上述区域分布不同有关。

关键词：心肌内源性干细胞 Telocytes 心肌分布解剖

贮烟仓库中苏云金芽孢杆菌对烟草甲的杀灭活性

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烟草科技 2006年第5期39卷 57-59页

作者：齐绪峰宋纪真谢剑平 JE YEON HO JIN BYUNG RAE 李建洪华中农业大学植物科学技术学院湖北省武汉市武昌狮子山430070 中国烟草总公司郑州烟草研究院韩国国立首尔大学农业生物技术学院东亚大学自然资源与生命科学学院

为研究苏云金芽孢杆菌（＆）防治贮烟害虫的可行性，从全国7个主要卷烟厂的不同贮烟仓库中采集到不同类型的样品521份，采用醋酸钠抑制选择法从其中的225份样品中分离获得Bt952株，其分布率为100％，检出率为43．19％，用其中600株的发... 详细信息

为研究苏云金芽孢杆菌（＆）防治贮烟害虫的可行性，从全国7个主要卷烟厂的不同贮烟仓库中采集到不同类型的样品521份，采用醋酸钠抑制选择法从其中的225份样品中分离获得Bt952株，其分布率为100％，检出率为43．19％，用其中600株的发酵液对2～3龄烟草甲幼虫进行了初步毒力测定。结果表明，有18株分离株对烟草甲幼虫具有较高的生物活性，药后9d烟草甲幼虫的校正死亡率均达73％以上。

关键词：贮烟仓库苏云金芽孢杆菌烟草甲虫杀虫活性