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Caspase在氟化钠致心肌细胞损伤中的作用

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环境与健康杂志 2022年第5期39卷 203-207页

作者：徐薇石瑞丽齐瑞芳郝肖琼马宝慧包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头 014040

目的探讨caspase在氟化钠(NaF)致心肌细胞凋亡中的作用.方法将H9c2 心肌细胞分别暴露于含终浓度为 0(对照)、40 mg/L NaF以及 40 mg/L NaF+50 μmol/L Z-VAD-FMK的高糖培养基中 24、48、72 h.采用CCK-8 法检测细胞活性;采用倒置荧光... 详细信息

目的探讨caspase在氟化钠(NaF)致心肌细胞凋亡中的作用.方法将H9c2 心肌细胞分别暴露于含终浓度为 0(对照)、40 mg/L NaF以及 40 mg/L NaF+50 μmol/L Z-VAD-FMK的高糖培养基中 24、48、72 h.采用CCK-8 法检测细胞活性;采用倒置荧光显微镜观察细胞形态,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况;通过qRT-PCR法检测心肌细胞Fas、caspase-1、caspase-8 及caspase-3 mRNA的表达情况;采用Western blot法检测心肌细胞中Fas、caspase-1、caspase-8 及caspase-3蛋白的表达情况.结果与对照组相比,40 mg/L NaF染毒 24、48、72 h后,H9c2 心肌细胞的存活率均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与NaF组相比,NaF+Z-VAD-FMK组处理 24、48、72 h后,H9c2 心肌细胞的存活率均增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,NaF组H9c2 心肌细胞的凋亡率增加,差异有统计学意义(P＜0.05);与NaF组相比,NaF+Z-VAD-FMK组H9c2 心肌细胞的凋亡率降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,NaF组H9c2 心肌细胞Fas、caspase-8、caspase-1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NaF组相比,NaF+Z-VAD-FMK组H9c2 心肌细胞Fas、caspase-8、caspase-1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 caspase通路及Fas介导的死亡受体通路可能参与氟化钠诱导的心肌细胞凋亡.

关键词：氟中毒 Caspase Z-VAD-FMK H9c2心肌细胞细胞凋亡

低氧预适应对小鼠海马神经保护作用机制研究——基于TSC1/mTOR/自噬信号通路

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科技导报 2022年第13期40卷 107-113页

作者：齐瑞芳李娜吕军石瑞丽马宝慧时静华郝肖琼邵国内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院包头014040 内蒙古低氧适应转化医学重点实验室包头014040 广东省深圳市龙岗区第三人民医院转化医学中心深圳518172

为研究低氧预适应(HPC)对小鼠海马神经保护作用的机制,采用Western Blot方法检测对照组、低氧组、低氧预适应组3组实验小鼠的TSC1、mTOR和磷酸化mTOR及LC3蛋白的表达,验证TSC1/mTOR/自噬通路是否参与HPC对小鼠海马的神经保护作用。通过... 详细信息

为研究低氧预适应(HPC)对小鼠海马神经保护作用的机制,采用Western Blot方法检测对照组、低氧组、低氧预适应组3组实验小鼠的TSC1、mTOR和磷酸化mTOR及LC3蛋白的表达,验证TSC1/mTOR/自噬通路是否参与HPC对小鼠海马的神经保护作用。通过体外HT22细胞转染TSC1-peGFP,给予低氧刺激后,采用MTS法检测细胞活性,进一步确定TSC1在低氧条件下的神经保护作用。结果显示,HPC可增加小鼠低氧耐受时间;与对照组相比,HPC组TSC1蛋白表达升高,磷酸化mTOR蛋白表达下降;体外转染eGFP-TSC1质粒组与空载组相比,细胞活性增强。结果表明HPC可能通过上调TSC1表达,下调mTOR磷酸化水平激活自噬对小鼠海马发挥神经保护作用。

关键词：低氧预适应 TSC1 mTOR 自噬神经保护

姜黄素联合紫杉醇对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的体内外影响

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姜黄素联合紫杉醇对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的体内外影响

作者：齐瑞芳青岛大学

学位级别：硕士

背景姜黄素是姜黄的主要成分,具有多种药理作用,最近几年的研究表明,姜黄素可以抑制多种肿瘤细胞系包括前列腺癌细胞的生长。动物实验还证实姜黄素具有肝肾保护功能。雄激素非依赖性前列腺癌的治疗临床上主要采用化疗或放疗,因而设想将... 详细信息

背景姜黄素是姜黄的主要成分,具有多种药理作用,最近几年的研究表明,姜黄素可以抑制多种肿瘤细胞系包括前列腺癌细胞的生长。动物实验还证实姜黄素具有肝肾保护功能。雄激素非依赖性前列腺癌的治疗临床上主要采用化疗或放疗,因而设想将既能抑制前列腺癌细胞又能保护肝肾的姜黄素和化疗药合用可以取得更好的治疗效果。目的:选用姜黄素与紫杉醇联合作用于雄激素非依赖性的前列腺癌PC3细胞株及PC3细胞裸鼠皮下移植瘤,从细胞和整体水平观察姜黄素和紫杉醇合用对前列腺癌细胞增殖分化和侵袭性的影响,以进一步寻找综合治疗前列腺癌的有效措施。方法:姜黄素联合紫杉醇作用于PC3细胞和PC3裸鼠皮下移植瘤,用CCK-8、β-半乳糖苷染色、划痕侵袭实验等方法从细胞增殖、老化、侵袭等方面观察姜黄素联合紫杉醇对PC3的影响。用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行实时荧光PCR(RealTime PCR)检测PC3细胞和移植瘤组织中细胞分化抑制因子1(inhibitor ofdifferentiation or inhibitor of DNA binding 1,Id1)、核增殖抗原(proliferating cell nuclear-antigen,PCNA)和反应肿瘤侵袭力的金属基质蛋白酶2(matrix metallo-proteinase2,MMP2)的mRNA变化。结果:姜黄素联合紫杉醇作用于前列腺癌PC3细胞,可协同降低细胞增殖活性(p＜0.01);划痕实验显示,姜黄素和紫杉醇合用可降低细胞的侵袭浸润能力;低浓度的姜黄素还可促使PC3细胞老化。姜黄素能够显著降低PC3细胞中Id1、PCNA、MMP2mRNA的表达,和紫杉醇合用后可协同降低PCNA和MMP2的表达。为进一步验证姜黄素和紫杉醇联合在整体治疗是否有同样的效果,本研究还检测了PC3移植瘤组织中Id1、PCNA和MMP2 mRNA的表达,结果显示,姜黄素也能够明显降低瘤组织中三者mRNA的表达量,联合紫杉醇后同样能协同降低PCNA和MMP2的表达量,说明在细胞和整体治疗水平,姜黄素和紫杉醇联合均可降低细胞增殖分化活性,减弱肿瘤细胞的侵袭浸润能力。结论:1.姜黄素能够降低PC3细胞增殖活性和侵袭浸润能力,并能促使PC3细胞老化。2.姜黄素能够降低PC3细胞和移植瘤组织中Id1、PCNA和MMP2的mRNA表达。3.姜黄素联合紫杉醇能够协同抑制PC3细胞增殖活性和侵袭浸润能力,协同降低PC3细胞中PCNA和MMP2的mRNA表达。4.姜黄素联合紫杉醇在整体治疗水平可以产生和细胞同样的协同效应。

关键词：姜黄素紫杉醇 PC3 Id1 PCNA MMP2

KIF22基因突变致脊椎干骺端发育不良伴关节松弛2型一例报告并文献复习

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中华骨科杂志 2022年第21期42卷 1460-1464页

作者：李珍卢亚超齐瑞芳王杰英李荣敏常洁王静娜桑艳梅保定市儿童医院内分泌科保定071000 首都医科大学附属北京儿童医院内分泌遗传代谢科北京100045

报告脊椎干骺端发育不良伴关节松弛2型(spondyloepimetaphyseal dysplasia with joint laxity 2,SEMDJL2)1例。男,1岁8个月,临床表现为身材矮小、面中部扁平、肌张力减退、四肢关节松弛、双手掌指关节过伸,有先天性喉喘鸣病史,符合SEMD... 详细信息

报告脊椎干骺端发育不良伴关节松弛2型(spondyloepimetaphyseal dysplasia with joint laxity 2,SEMDJL2)1例。男,1岁8个月,临床表现为身材矮小、面中部扁平、肌张力减退、四肢关节松弛、双手掌指关节过伸,有先天性喉喘鸣病史,符合SEMDJL2的临床特征。Sanger测序结果显示患儿携带KIF22基因c.443C>T错义突变,导致编码产物p.Pro148Leu氨基酸变异,初步判定该突变为致病性变异。对有先天性喉喘鸣、全身关节松弛、关节过伸等表现的患儿可行二代测序基因检测协助遗传学诊断。

关键词：关节松弛先天性喉喘鸣掌指关节身材矮小肌张力减退氨基酸变异遗传学诊断基因突变

5-Aza-CdR促进小鼠海马神经细胞HT22自噬增加通过启动TSC1/mTOR通路

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中国药理学通报 2020年第9期36卷 1265-1269页

作者：齐瑞芳包素雅邵国包头医学院低氧适应转化医学重点实验室基础医学与法医学院包头医学院神经科学研究所内蒙古包头014060 四川大学华西临床医学院四川成都610041

目的研究5-杂氮脱氧胞嘧啶核苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)能否诱导小鼠海马神经细胞HT22产生自噬对以及TSC1/mTOR通路是否参与其中。方法通过体外培养HT22细胞,5-Aza-CdR孵育24 h后,采用MTS检测对细胞活力的影响。采用RT-PCR... 详细信息

目的研究5-杂氮脱氧胞嘧啶核苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)能否诱导小鼠海马神经细胞HT22产生自噬对以及TSC1/mTOR通路是否参与其中。方法通过体外培养HT22细胞,5-Aza-CdR孵育24 h后,采用MTS检测对细胞活力的影响。采用RT-PCR和Western blot,检测TSC1、mTOR和LC3的mRNA和蛋白表达水平;采用组织免疫荧光的方法检测TSC1在不同组别HT22细胞中的表达;通过转染TSC1质粒,检测TSC1/mTOR途径在自噬中的作用。结果10μmol·L^-15-Aza-CdR可降低HT22细胞的活力,5-Aza-CdR使TSC1 mRNA和蛋白表达水平增加,p-mTOR(Ser2448)蛋白水平降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高;过表达TSC1后小鼠海马HT22细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高。结论5-Aza-CdR可以诱导HT22自噬增加,可能是通过启动TSC1/mTOR通路。

关键词： 5-Aza-CdR HT22细胞自噬 TSC1 mTOR 细胞活力

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氧气的适应性机制及低氧预适应研究进展

科技导报 2020年第2期38卷 86-91页

作者：齐瑞芳张晓璐邵国包头医学院低氧适应转化医学北京市重点实验室包头014060 包头医学院基础医学与法医学院包头014060 包头医学院第一附属医院神经外科包头014010

氧气是有氧代谢和能量产生的必要条件,对于大多数生物来说都是必不可少的。过多或过少的氧气都可能危害生命,因此研究生物快速响应变化的氧气水平的机制至关重要。当氧气需求超过氧气供应时,细胞就会变得低氧。介绍了氧气的特性以及生... 详细信息

氧气是有氧代谢和能量产生的必要条件,对于大多数生物来说都是必不可少的。过多或过少的氧气都可能危害生命,因此研究生物快速响应变化的氧气水平的机制至关重要。当氧气需求超过氧气供应时,细胞就会变得低氧。介绍了氧气的特性以及生理、病理条件下低氧的适应机制,论述了低氧作为的积极方面——低氧预适应的历史和研究进展,展望了低氧预适应在高空、高原等极端环境中以及在卒中等相关临床疾病中的治疗前景。

关键词：氧气氧感应低氧预适应神经保护

丙酮酸钠对小鼠海马神经HT22细胞神经保护作用

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中国药理学通报 2023年第8期39卷 1522-1526页

作者：李娜蔡珂沁李文欣吕军石瑞丽马宝慧时静华郝肖琼邵国齐瑞芳内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014040 内蒙古科技大学包头医学院内蒙古低氧适应转化医学重点实验室内蒙古包头014040 广东省深圳市龙岗区第三人民医院转化医学中心广东深圳518172

目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22... 详细信息

目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22细胞的溶酶体变化;采用Western blot检测Bcl-2、Bax和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达。结果5 mmol·L^(-1)的SP能提高HT22细胞活力以及减少HT22细胞损伤;SP提高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加。结论在低氧的条件下给予SP可能通过减少HT22细胞凋亡,激活自噬发挥神经保护作用,从而降低低氧损伤。

关键词：低氧丙酮酸钠 HT22细胞细胞凋亡自噬神经保护

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低氧预适应对神经细胞能量代谢调节作用

包头医学院学报 2023年第4期39卷 71-75页

作者：李娜邵国郭光辉高冰齐瑞芳内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014040 内蒙古科技大学包头医学院内蒙古低氧适应转化医学重点实验室深圳市龙岗区第三人民医院转化中心深圳市龙岗区第三人民医院检验科内蒙古科技大学包头医学院公共卫生学院

低氧预适应是通过亚致死的低氧处理后,激活体内小分子内源性保护机制,让机体对接下来的更严重或致死性低氧刺激产生耐受/抗性。神经细胞是一种能接收和传导兴奋的细胞,对氧含量的变化十分敏感,其能量代谢随氧气变化较为显著。在低氧环境... 详细信息

低氧预适应是通过亚致死的低氧处理后,激活体内小分子内源性保护机制,让机体对接下来的更严重或致死性低氧刺激产生耐受/抗性。神经细胞是一种能接收和传导兴奋的细胞,对氧含量的变化十分敏感,其能量代谢随氧气变化较为显著。在低氧环境下,神经细胞的腺嘌呤核苷三磷酸(adenosinetriphosphate,ATP)合成减少可激活AMP激活的蛋白激酶[adenosine5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]和TSC1/TSC2复合体抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)。mTOR的一个复合物mTOR复合体1(mTORC1)的表达对机体的能量代谢产生影响。低氧预适应,通过激活或抑制一些基因表达让神经细胞有效利用氧气,使机体产生低氧耐受。在氧浓度低的生存环境下,通过低氧预适应调节能量变化增加机体存活的可能性。高原、航空航天事业、水下作业以及病理性的低氧时,低氧预适应诱导相关分子变化可防止对氧有大量需求的脑组织发生病变,增加神经细胞的存活时间,减少死亡。

关键词：低氧预适应神经细胞能量代谢能量代谢调节

姜黄素对前列腺癌PC3细胞迁移的抑制作用及对MMP2体内外表达影响

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中国中医基础医学杂志 2015年第11期21卷 1398-1400页

作者：齐瑞芳于小玲赵辉包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014060 青岛大学医学院病理生理教研室山东青岛266021

目的:观察不同浓度姜黄素对前列腺癌PC3细胞侵袭浸润的抑制作用以及对金属基质蛋白酶2(MMP2)表达的影响。方法:采用细胞划痕实验观察姜黄素对PC3细胞迁移能力的影响;建立PC3裸鼠移植瘤,western blotting检测PC3细胞和移植瘤组织中MMP2... 详细信息

目的:观察不同浓度姜黄素对前列腺癌PC3细胞侵袭浸润的抑制作用以及对金属基质蛋白酶2(MMP2)表达的影响。方法:采用细胞划痕实验观察姜黄素对PC3细胞迁移能力的影响;建立PC3裸鼠移植瘤,western blotting检测PC3细胞和移植瘤组织中MMP2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测MMP2 mRNA的表达。结果:姜黄素可减弱PC3细胞的迁移浸润能力,并下调MMP2的表达且呈剂量依赖性。结论:姜黄素可有效地抑制PC3细胞的迁移能力,下调MMP2的表达。

关键词：姜黄素前列腺癌侵袭 MMP2