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群体感应调控因子LitR对嗜水气单胞菌毒力和生物膜的调控研究

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群体感应调控因子LitR对嗜水气单胞菌毒力和生物膜的调控研究

作者：黄雁大连工业大学

学位级别：硕士

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是典型的食源性病原菌,其致病性的发挥多依靠如溶血素、胞外蛋白酶、运动性和生物膜形成等。而毒力和生物膜产生通常需要依靠信号转导网络介导。前期研究发现嗜水气单胞菌中存在Ahy I/R型和Lux S型... 详细信息

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是典型的食源性病原菌,其致病性的发挥多依靠如溶血素、胞外蛋白酶、运动性和生物膜形成等。而毒力和生物膜产生通常需要依靠信号转导网络介导。前期研究发现嗜水气单胞菌中存在Ahy I/R型和Lux S型信号通路,而LitR是双通路下游的群体感应调控因子,可能与嗜水气单胞菌中多种毒力因子和生物膜形成密切相关。目前LitR对毒力和生物膜的调控机理尚不清晰。本文从LitR对毒力和生物膜形成的调控作用、LitR调控生物膜形成的网络途径等方面进行研究,旨在更为深入地揭示LitR对毒力和生物膜的调控机理。本文首先将回补质粒电击转化入嗜水气单胞菌lit R缺失突变株,利用嗜水气单胞菌野生株、lit R缺失突变株及回补株评价了LitR对生长能力、毒力和生物膜形成的影响,发现lit R缺失导致了嗜水气单胞菌生长速率有所降低;LitR能够正向调控细菌的溶血性、胞外蛋白酶活性,负向调控细菌的运动能力和生物膜形成能力。进而通过微量热泳动技术(Micro Scale Thermophoresis,MST)测定了LitR与溶血素基因hem启动子区和丝氨酸蛋白酶基因sp启动子区的结合能力。其中,LitR与hem启动子区hem3结合位点存在一强一弱的双相结合信号,与hem4有较强的结合能力,Kd值达到了4.58±1.36μM。随后,为进一步解析LitR对生物膜的调控机理,我们首先基于与霍乱弧菌生物膜形成转录因子Vps T的同源性比对分析,确定了嗜水气单胞菌中Vps T的同源蛋白Csg AB。为了探究LitR是否通过Csg AB调控生物膜形成,采用荧光定量PCR、EMSA和DNase I足迹确定LitR对csg AB的调控作用,结果表明,LitR负向调控csg AB的转录表达,并且能够直接结合csg AB的启动子区。进而通过接合转移构建csg AB无痕突变株。利用嗜水气单胞菌野生株、csg AB缺失突变株探究了Csg AB对生长能力和生物膜形成的影响,结果表明csg AB缺失对细菌生长能力没有影响,Csg AB能够正向调控运动性及生物膜形成。上述结果证明Csg AB能够介导LitR调控生物膜形成。最后,由于第二信使环二鸟苷酸(Cyclic di-GMP,c-di-GMP)信号途径在细菌生物膜形成中具有重要的调控作用,我们对嗜水气单胞菌c-di-GMP代谢相关蛋白及效应蛋白进行筛选,并研究了LitR对部分代谢相关蛋白的调控作用。首先,利用NCBI和Uni Prot数据库收集了嗜水气单胞菌中70个c-di-GMP代谢相关蛋白,通过与文献中c-di-GMP代谢活性必须的氨基酸残基进行比对,预测到嗜水气单胞菌中单GGDEF结构域蛋白中75%具有二鸟苷酸环化酶活性(Diguanylate cyclase,DGC);单EAL结构域蛋白中80%具有磷酸二酯酶活性(Phosphodiesterase,PDE);GGDEF和EAL双结构域蛋白中30.8%具有双酶活性、38.4%具有PDE活性、7.6%具有DGC活性、23.1%无活性;HD-GYP结构域蛋白中33.3%具有PDE活性。进而通过查找文献报道c-di-GMP效应蛋白结构域并进行蛋白序列比对,预测了6个可能的效应蛋白,其中包括了生物膜调控因子Csg AB,并通过亲和拉下实验钓取了53个潜在的c-di-GMP效应蛋白。而后利用荧光定量PCR技术检测LitR对18个代谢相关蛋白的调控,结果表明,LitR对大部分c-di-GMP代谢相关基因调控不明显,仅对两个GGDEF和EAL双结构域蛋白编码基因AHA469和AHA559、一个EAL结构域蛋白编码基因AHA909和一个HD-GYP结构域蛋白编码基因AHA853有较强的负向调控作用。推测群体感应调控因子LitR可能通过调控c-di-GMP信号通路相关蛋白来调控生物膜的形成。

关键词：嗜水气单胞菌 LitR 毒力生物膜 CsgAB c-di-GMP

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乙基纤维素水性缓释包衣液的释放行为

塑料 2014年第2期43卷 82-83页

作者：黄雁唐山学院环境与化学工程系河北唐山063000

对乙基纤维素水性缓释包衣液进行包衣及溶出实验,测试包衣药丸后体外释放效果,研究其释放行为受增塑剂含量及后处理温度的影响程度。结果表明:增塑剂含量的浓度为25、30份时释药行为接近,40份时药物释放最慢。此外,在相同条件下,随着后... 详细信息

对乙基纤维素水性缓释包衣液进行包衣及溶出实验,测试包衣药丸后体外释放效果,研究其释放行为受增塑剂含量及后处理温度的影响程度。结果表明:增塑剂含量的浓度为25、30份时释药行为接近,40份时药物释放最慢。此外,在相同条件下,随着后处理温度的增加,药物释放变慢。

关键词：乙基纤维素增塑剂后处理温度释放行为缓释包衣液

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谁改变了中国

作者：黄雁

来源：南通市图书馆图书评论

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图书馆跨地域合作发展的途径探索

图书馆 2010年第2期 103-104页

作者：黄雁湘潮州市图书馆广东潮州521000

跨地域合作是图书馆可持续发展的必然之路。网络信息化的发展,为图书馆实现多方面的跨地域合作提供了发展前提和物质保障。当前我国图书馆跨地域合作虽然已经迈出了可喜一步,但在合作的途径方面还有许多地方值得探讨。创新地域合作的方... 详细信息

跨地域合作是图书馆可持续发展的必然之路。网络信息化的发展,为图书馆实现多方面的跨地域合作提供了发展前提和物质保障。当前我国图书馆跨地域合作虽然已经迈出了可喜一步,但在合作的途径方面还有许多地方值得探讨。创新地域合作的方式方法、拓展地域合作新路径,将有助于我国图书馆整体服务质量的提高和服务空间的无限扩展。

关键词：图书馆跨地域可持续数字化标准化

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清末中葡澳门勘界谈判过程中的博弈与周折

中国文化研究 2014年第2期 122-135页

作者：黄雁鸿澳门理工学院中西文化研究所

中葡于清末年间的澳门勘界谈判,是一次关乎主权和国力的竞争。其无疾而终的结果,也使之成为近代史上值得关注的历史事件。勘界谈判的过程,同时是中国与葡萄牙对掌握权力话语的来源与转替过程。本文以葛兰西的政治霸权、福柯的权力话语... 详细信息

中葡于清末年间的澳门勘界谈判,是一次关乎主权和国力的竞争。其无疾而终的结果,也使之成为近代史上值得关注的历史事件。勘界谈判的过程,同时是中国与葡萄牙对掌握权力话语的来源与转替过程。本文以葛兰西的政治霸权、福柯的权力话语及萨义德的文化殖民理论,结合谈判的历史事实,探讨中葡双方如何透过这次谈判来完成后殖民语境中,话语权力来源、掌握与让渡;结论出勘界谈判是掺杂了政治霸权、基层权力和文化殖民的因素,在中葡互不退让又实力相当的形势下,谈判的没有结果,看来是注定的。

关键词：勘界谈判中葡澳门

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无茎玫瑰——电影《香水》的泅渡与解脱

电影评介 2008年第11期 45-46页

作者：黄雁南广西师范大学

电影《香水》讲述了一个游离于社会之外的孤儿的故事,他是专注的,因为他没有社会中普通人所有的杂念与欲望,他又是无情的,因为他没有社会中普通人所有的道德与感情。正是这些,成就了他与他的"香水"。

关键词：奋斗社会道德基础个人成就

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印象派电影《绢恋》之水色云服包裹的心

电影文学 2009年第24期 86-87页

作者：黄雁南广西师范大学漓江学院中文系

电影《绢恋》讲述了一个出身乡绅家庭的青年,他从家庭的温室中被工业革命惊醒,金钱上的独立直接刺激了他个性的颠覆。他开始追求与原本生活相反的刺激与神秘,忽略了妻子的感情,最终导致终身孤独的悲剧。他的人生轨迹与画家莫奈高度相似... 详细信息

电影《绢恋》讲述了一个出身乡绅家庭的青年,他从家庭的温室中被工业革命惊醒,金钱上的独立直接刺激了他个性的颠覆。他开始追求与原本生活相反的刺激与神秘,忽略了妻子的感情,最终导致终身孤独的悲剧。他的人生轨迹与画家莫奈高度相似,电影画面更是具有印象派画作的神韵。

关键词：世俗反抗理想美

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脑小血管病与认知功能障碍的研究进展

中国动脉硬化杂志 2014年第2期22卷 204-208页

作者：黄雁游咏南华大学附属第一医院神经内科湖南省衡阳市421001

脑小血管病目前已成为血管性痴呆的最常见病因。脑小血管病可导致认知功能、情绪及运动的障碍。近年来,脑小血管病受到越来越多的重视,本文将从脑小血管病的定义、常见分类、病理学、影像学及认知损害等研究现状进行综述。

关键词：脑小血管病认知功能障碍血管性痴呆

脑小血管病的结构影像学特征与认知功能障碍的关系研究

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脑小血管病的结构影像学特征与认知功能障碍的关系研究

作者：黄雁南华大学

学位级别：硕士

目的：探讨脑小血管病的结构影像学特征与认知功能障碍的关系研究。方法：收集2012年8月至2013年8月我院神经内科及住院部脑小血管病（SVD）患者126例，血管性认知功能障碍患者86例，其中包括血管性痴呆（Vascular dementia，VaD）组患... 详细信息

目的：探讨脑小血管病的结构影像学特征与认知功能障碍的关系研究。方法：收集2012年8月至2013年8月我院神经内科及住院部脑小血管病（SVD）患者126例，血管性认知功能障碍患者86例，其中包括血管性痴呆（Vascular dementia，VaD）组患者42例，无痴呆型血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment no dementia,VCIND）组患者44例，并且选取同时期年龄相匹配的认知功能正常者40例作为对照组（no cognitive impairment，NCI）;采用结构磁共振（MRI）视觉评估方法，记录腔隙性脑梗死（LI）的倾向性分布、数量及发生部位的比较;白质病变(WML)的发生率及病变的程度,分析LI、WML与SVD-VCI之间的关系。结果：1、三组受检者的认知功能评分具有统计学意义(P0.05)。2、VaD组和VCIND组双侧LI发生率高于NCI组，其差异具有统计学意义（P＜0.05）;VaD组左侧LI发生率高于VCIND组和NCI组（P0.05）;SVD患者的脑白质病变的严重程度与MMSE评分呈负相关。结论：1、腔隙性脑梗死的数目和部位与SVD的认知功能障碍有关。2、脑白质病变的发生率和病变程度与SVD的认知功能障碍密切相关，其中脑白质病变的严重程度是导致SVD认知功能障碍的危险因素。

关键词：脑小血管病认知功能障碍血管性痴呆