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基于非洲猪瘟病毒D250R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医科学 2025年

作者：朱文青徐丽华刘佳畦邬雨倩金子安吴旭琪袁秀芳周继勇郑肖娟浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞... 详细信息

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞表达的重组蛋白Flag-D250R均能被ASFV标准阳性血清识别，证明D250R蛋白是ELISA抗体检测方法的潜在靶标。在此基础上，以纯化的重组蛋白为免疫原制备鼠源多克隆抗体，该抗体ELISA效价大于1∶409 600。Western-blot试验表明该抗体与Flag-D250R和His-D250R均具有良好的反应性，证明His-D250R蛋白具有良好的抗原性。进一步以His-D250R蛋白为包被抗原，通过对抗原包被、封闭、抗体孵育、底物反应等条件的优化，建立间接ELISA抗体检测方法。其阴阳性临界值为0.359，检测PRV、PRRSV、PCV2、CSFV等阳性血清结果均呈阴性反应，灵敏度达1∶3 200，批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%，与商品化试剂盒符合率达98.8%。上述结果表明，基于His-D250R蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性、重复性良好，具备一定临床应用价值，可以为非洲猪瘟诊断方法开发提供重要支持。

关键词：非洲猪瘟病毒 D250R蛋白原核表达多克隆抗体间接ELISA

基于iTRAQ-LC-MS/MS技术的高脂血症性急性胰腺炎患者治疗前后血清蛋白质差异性分析

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国际检验医学杂志 2025年

作者：邱嘉华陈少銮黄锦文胡先福刘付俊业冯彩华深圳市龙华区人民医院消化内科

目的比较高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者治疗前后血清蛋白谱的差异,筛选并分析差异表达的蛋白质。方法采用同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)技术结合液相串联质谱(LC-MS/MS)检测20例HLAP患者治疗前后血清差异表达的蛋白质,对筛选的... 详细信息

目的比较高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者治疗前后血清蛋白谱的差异,筛选并分析差异表达的蛋白质。方法采用同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)技术结合液相串联质谱(LC-MS/MS)检测20例HLAP患者治疗前后血清差异表达的蛋白质,对筛选的差异蛋白质进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用String数据库构建差异蛋白间的相互作用网络,从中筛选出关系密切的蛋白质。结果通过试验共鉴定出蛋白质367种,与HLAP治疗前组比较,HLAP治疗后组共获得显著差异蛋白37个,其中上调34个,下调3个。GO功能富集分析结果显示,差异表达蛋白具有9种分子功能,14种细胞成分,主要参与24种生物过程,包括刺激应答、免疫反应、细胞过程、生物调节过程等。KEGG通路富集分析结果显示,共富集到26条通路,参与的差异蛋白数量最多的通路为补体和凝血级联通路。差异蛋白功能互作网络分析发现,MASP1、MASP2、C8G、CLU、SPARC关系最为密切,并且主要富集于补体和凝血级联通路。结论血清中差异表达的蛋白质MASP1、MASP2、C8G、CLU、SPARC可能是影响HLAP治疗效果的关键靶向蛋白,HLAP的治疗效果可能与补体和凝血级联通路相关。

关键词：胰腺炎高脂血症质谱分析差异蛋白同位素标记

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战地三年

1940年

作者：胡兰畦

收“劳动妇女战地服务团”成员写的抗日战地情况的报道69篇：《战地旅程》（胡兰畦）、《战场观察的生活》（秦秋谷）、《沦陷区的故事》（朱辛慧）、《欢送》（杨崎）等。书前有《三年来》（罗卓英）、《三年献词》（代序）、《编辑前... 详细信息

收“劳动妇女战地服务团”成员写的抗日战地情况的报道69篇：《战地旅程》（胡兰畦）、《战场观察的生活》（秦秋谷）、《沦陷区的故事》（朱辛慧）、《欢送》（杨崎）等。书前有《三年来》（罗卓英）、《三年献词》（代序）、《编辑前记》（胡兰畦）及多人题词。书末附该团的《三年总算》和《工作人员简历表》。

关键词：文学中国文学

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给孩子讲中国历史故事

2019年

作者：汤芸畦

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中国历史故事

1948年

作者：汤芸畦编

选收历史故事40篇，按年代先后排列。内有《舜的家庭生活》、《夏少康的中兴》、《商纣的残暴》、《周幽王的失国》、《齐桓公的霸业》等。

关键词：历史、地理中国史通史

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“诸法无我”辨析

南开学报（哲学社会科学版） 1996年第1期 76-79页

作者：艾畦

“诸法无我”辨析艾畦至少从公元三世纪以来，人们提起释迦牟尼的理论学说（不包括后来的大乘思想）来，总是以“三法印”来概括。“印”是印章，“三法印”的意思是说；符合三点理论的说法就好比盖有佛法印章，是真佛说；否则就是“外... 详细信息

“诸法无我”辨析艾畦至少从公元三世纪以来，人们提起释迦牟尼的理论学说（不包括后来的大乘思想）来，总是以“三法印”来概括。“印”是印章，“三法印”的意思是说；符合三点理论的说法就好比盖有佛法印章，是真佛说；否则就是“外道”，就是假佛说。这“三法印”即三...

关键词：诸法无我三法印世俗世界上座部五蕴 “有我” “灵魂” 主宰者精神活动《大智度论》

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水平基因转移及其发生机制

科学通报 2017年第12期62卷 1221-1225页

作者：黄锦岭 Department of Biology East Carolina UniversityGreenville NC 27858USA 中国科学院昆明植物研究所东亚植物多样性与生物地理学重点实验室昆明650201

水平基因转移被认为是原核生物进化的主要动力,同时也广泛存在于真核生物各主要类群之中.通过引进新的遗传变异,水平基因转移可以减少由点突变积累产生的破坏作用,同时也加速进化过程中产生的成功性状在不同物种个体之间的扩散.在原核... 详细信息

水平基因转移被认为是原核生物进化的主要动力,同时也广泛存在于真核生物各主要类群之中.通过引进新的遗传变异,水平基因转移可以减少由点突变积累产生的破坏作用,同时也加速进化过程中产生的成功性状在不同物种个体之间的扩散.在原核生物中,水平基因转移的主要发生机制包括转化、接合和转导.在真核生物中,不同物种个体之间的物理接触常可以促进水平基因转移的发生,但具体机制仍不完全清楚.

关键词：水平基因转移基因共享生命进化生命之网基因转移机制

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蔗糖酯和尿素对淀粉改性的协效作用

高分子学报 2012年第11期22卷 1264-1269页

作者：程飞王佳丽吴正畦吴潇朱谱新四川大学纺织研究所成都610065 四川丝绸科学研究院成都610031 成都纺织高等专科学校成都611731

蔗糖酯是一种对环境无害的表面活性剂,含有与淀粉相容的极性头.将不同比例蔗糖硬脂酸酯加入到玉米淀粉或20%尿素增塑的玉米淀粉中,在热水中煮浆后浇铸成膜.采用X-射线衍射法表征淀粉膜的结晶结构,并测定了浆膜在不同相对湿度下的吸湿性... 详细信息

蔗糖酯是一种对环境无害的表面活性剂,含有与淀粉相容的极性头.将不同比例蔗糖硬脂酸酯加入到玉米淀粉或20%尿素增塑的玉米淀粉中,在热水中煮浆后浇铸成膜.采用X-射线衍射法表征淀粉膜的结晶结构,并测定了浆膜在不同相对湿度下的吸湿性以及浆膜的拉伸性能.结果表明,蔗糖酯可与淀粉形成V-型包合配合物,并影响淀粉的B-型结晶,因此改变淀粉的吸湿性和力学性能.添加0.5%蔗糖酯使淀粉的吸湿率提高,随着蔗糖酯进一步增加,淀粉的吸湿率下降.含尿素20%的淀粉混合物中添加不同比例的蔗糖酯,对淀粉材料的结晶度、结晶形态,以及吸湿率和力学性能产生了不同的影响.蔗糖酯与尿素对淀粉材料改性具有协效作用.含蔗糖酯0.5%的尿素增塑淀粉膜显示出非晶特征,且具有较高的断裂伸长.

关键词：淀粉蔗糖酯尿素增塑包合配合

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一个二次泛函的估计(Ⅰ)

数学物理学报（A辑） 2010年第5期30卷 1347-1353页

作者：丁夏畦中国科学院数学与系统科学研究院应用数学所北京100190

该文给出一个与Riemann猜想有关的二次泛函的下界估计.共分为两部分,第一部分(Ⅰ)推出若干关系式,第二部分(Ⅱ)给出具体估计.

关键词：次泛函下界估计有限元