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miR-148-5p靶向H型血管调控因子Slit3的实验研究

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中国骨质疏松杂志 2022年第7期28卷 959-965页

作者：陈赛楠黄云梅林燕萍黄美雅福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室福建福州350003 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

目的观察绝经后骨质疏松症中H型血管调控因子Slit3表达差异,进一步探讨其上游靶向调控miRNAs。方法雌性SD大鼠随机分假手术组和模型组,Real-time PCR和免疫组化检测骨组织Slit3 mRNA和蛋白表达水平;生物信息学预测可能与Slit3-3′UTR... 详细信息

目的观察绝经后骨质疏松症中H型血管调控因子Slit3表达差异,进一步探讨其上游靶向调控miRNAs。方法雌性SD大鼠随机分假手术组和模型组,Real-time PCR和免疫组化检测骨组织Slit3 mRNA和蛋白表达水平;生物信息学预测可能与Slit3-3′UTR互作的miRNAs,构建野生型和突变型Slit3-3′UTR重组荧光素酶报告载体,和miRNAs表达载体共转染293 T细胞,双荧光素酶报告基因测定荧光素酶活性验证miRNA对Slit3-3′UTR的靶向作用。结果与假手术组相比,模型组Slit3 mRNA表达水平略上调和平均光密度显著上调,生物信息学预测Slit3-3′UTR与miR-148a-5p、miR-148b-5p、miR-410-3p、miR-129-5p和miR-374-5p存在碱基结合位点,野生型Slit3-3′UTR共转染miR-148b-5p荧光活性下调至空白对照组的68.91%,突变型Slit3-3′UTR共转染miR-148b-5p荧光活性未见下调。结论 Slit3可能是绝经后骨质疏松症H型血管的调控基因,miR-148b-5p与Slit3-3′UTR的靶向结合直接调控Slit3的表达水平。

关键词：绝经后骨质疏松症 H型血管 Slit3 miR-148-5p 双荧光素酶报告基因

巴戟天抗去卵巢骨质疏松大鼠的血清代谢组分析

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中国药理学通报 2022年第3期38卷 446-453页

作者：刘文静杨娟张楚天孙攀黄美雅黄云梅福建中医药大学药学院福建中医药大学中西医结合研究院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

目的基于代谢组学研究巴戟天对去卵巢骨质疏松大鼠血清代谢谱的影响,探讨其治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、巴戟天组,每组14只。术后1周,通过灌胃给予相应药物6周、12周后各取材一半,检测大鼠股骨... 详细信息

目的基于代谢组学研究巴戟天对去卵巢骨质疏松大鼠血清代谢谱的影响,探讨其治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、巴戟天组,每组14只。术后1周,通过灌胃给予相应药物6周、12周后各取材一半,检测大鼠股骨骨密度、胫骨三点抗弯及腰椎抗压最大载荷。利用血清代谢组学方法鉴定卵巢切除骨质疏松大鼠的内源性代谢物,筛选鉴定出潜在的差异代谢物。结果模型组骨密度和骨最大载荷明显下降,巴戟天组较模型组明显上升。确定了与去卵巢后骨质疏松症相关的28种代谢物及5条代谢通路。巴戟天干预后可回调硬脂酸及尿嘧啶等代谢物含量,涉及不饱和脂肪酸的生物合成及嘧啶代谢等相关代谢途径。结论巴戟天能改善大鼠去卵巢后骨质疏松,其机制可能与巴戟天调节机体紊乱的脂代谢及核酸代谢等有关。

关键词：巴戟天代谢组学血清绝经后骨质疏松去卵巢术大鼠

健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠尿脱氧吡啶酚及骨组织整合素β_1 mRNA表达的影响

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中国中西医结合杂志 2006年第5期26卷 435-438页

作者：林燕萍周瑞祥李异龙袁俊黄美雅福建中医学院骨伤系福州350003 福建医科大学基础医学院

目的从分子水平及骨代谢角度探讨健骨颗粒对成骨细胞功能的调控作用以及对骨吸收的影响。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,药物干预,分别运用酶联免疫吸附法和原位杂交等手段,检测模型鼠尿脱氧吡啶酚(D-Pyr)水平和骨组织整合素β1... 详细信息

目的从分子水平及骨代谢角度探讨健骨颗粒对成骨细胞功能的调控作用以及对骨吸收的影响。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,药物干预,分别运用酶联免疫吸附法和原位杂交等手段,检测模型鼠尿脱氧吡啶酚(D-Pyr)水平和骨组织整合素β1(Itgβ1)mRNA表达。结果切除卵巢后模型鼠尿D-Pyr水平明显升高(P<0·01),骨组织成骨细胞Itgβ1mRNA表达降低。健骨颗粒治疗12周,骨质疏松模型鼠尿D-Pyr水平明显下降(P<0·05),而骨组织成骨细胞数量以及Itgβ1mRNA表达均显著增加。结论健骨颗粒通过降低骨质疏松模型鼠骨基质中Ⅰ型胶原纤维的分解代谢,提高成骨细胞的成骨活性,从而改善或扭转因E2下降出现的成骨不足病理态势,发挥“健骨”之功。

关键词：骨质疏松脱氧吡啶酚整合素健骨颗粒

健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨质量的影响

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中国中西医结合杂志 2004年第5期24卷 431-434页

作者：林燕萍周瑞祥郭世明黄美雅张安桢福建中医学院骨伤系福州350003 福建医科大学基础医学院

目的探讨健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠骨质量的影响。方法运用切除大鼠卵巢方法建立去卵巢骨质疏松症模型,应用双能X线骨密度仪测定骨密度;运用不脱钙骨切片、甲苯胺蓝染色观察胫骨上端组织结构并作形态计量;运用光测弹性仪加力架测定... 详细信息

目的探讨健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠骨质量的影响。方法运用切除大鼠卵巢方法建立去卵巢骨质疏松症模型,应用双能X线骨密度仪测定骨密度;运用不脱钙骨切片、甲苯胺蓝染色观察胫骨上端组织结构并作形态计量;运用光测弹性仪加力架测定第1腰椎压缩强度极限和弹性模量,以及股骨弯曲破坏荷载。结果健骨颗粒能有效提高模型大鼠骨密度、骨小梁面积和骨皮质厚度/髓腔直径比值,提高椎体骨压缩强度极限和股骨弯曲破坏荷载。结论健骨颗粒在增加骨质疏松模型大鼠骨密度的同时,能有效改善骨组织的结构状况,提高骨骼生物力学性能,提高骨质量。

关键词：健骨颗粒去卵巢大鼠骨质疏松生物力学骨质量

健骨颗粒含药血清对大鼠成骨细胞G_1期调节蛋白的影响

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中国中西医结合杂志 2010年第9期30卷 966-969页

作者：吴银生林燕萍卢天祥林煜黄云梅黄美雅福建中西医结合研究院骨病研究所福州350108 福建中西医结合研究院基础重点实验室

目的探讨健骨颗粒含药血清对成骨细胞G_1期调节蛋白的影响。方法采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,免疫细胞化学法、RT-PCR法检测成骨细胞G_1期调节... 详细信息

目的探讨健骨颗粒含药血清对成骨细胞G_1期调节蛋白的影响。方法采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,免疫细胞化学法、RT-PCR法检测成骨细胞G_1期调节蛋白细胞周期蛋白(Cyclin)D1、CDK4、P21表达。结果 20%健骨颗粒含药血清能推进成骨细胞增殖周期进程,促进其增殖;成骨细胞核中存在Cyclin D1、CDK4、P21等蛋白表达;与生理盐水血清比较,健骨颗粒含药血清干预24、48、72 h均能提高成骨细胞CyclinD1、CDK4蛋白及mRNA表达(P<0.05或P<0.01),而降低P21表达(P<0.05,P<0.01)。结论健骨颗粒含药血清能从mRNA及蛋白层面上提高体外培养成骨细胞Cyclin D1、CDK4表达,抑制负性调节因子p21的表达,调节G_1期调节蛋白,促进成骨细胞增殖。

关键词：成骨细胞细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白质依赖激酶癌基因蛋白P21 健骨颗粒

健骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症预防作用的研究

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中国中西医结合杂志 2002年第5期22卷 369-371页

作者：林燕萍马建华冯尔宥黄美雅福建中医学院骨伤系福州350003

目的 :探讨健骨颗粒对实验性Ⅰ型原发性骨质疏松症的预防作用。方法 :运用切除大鼠卵巢方法建立去卵巢骨质疏松症模型 ,采用双能X线骨密度测定法和放射免疫分析法等 ,检测实验鼠骨骼密度、血清骨钙素、雌二醇、降钙素水平以及子宫指数... 详细信息

目的 :探讨健骨颗粒对实验性Ⅰ型原发性骨质疏松症的预防作用。方法 :运用切除大鼠卵巢方法建立去卵巢骨质疏松症模型 ,采用双能X线骨密度测定法和放射免疫分析法等 ,检测实验鼠骨骼密度、血清骨钙素、雌二醇、降钙素水平以及子宫指数。结果 :健骨颗粒可明显升高骨密度和子宫指数 ,提高血清雌二醇、降钙素水平 ,降低骨钙素含量。结论 :健骨颗粒可通过调节机体相关内分泌功能 ,有效协调钙调节激素 ,降低骨的转换率 ,增加骨密度 ,对Ⅰ型原发性骨质疏松有预防或延缓发生的作用。

关键词：骨质疏松症预防健骨颗粒骨密度内分泌激素子宫指数实验研究

去卵巢骨质疏松大鼠成骨细胞G_1期调节蛋白的改变

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第15期14卷 2675-2679页

作者：吴银生林燕萍卢天祥林煜黄云梅黄美雅福建中医学院中西医结合研究院骨病研究所福建省福州市350108 福建省泉州市第一医院骨科福建省泉州市362000 福建中医学院中西医结合研究院基础重点实验室福建省福州市350108

背景:G1期调节蛋白对调控增殖细胞的增殖周期具有重要作用,目前关于成骨细胞G1期调节蛋白的研究甚少,绝经后骨质疏松与成骨细胞G1期调节蛋白的关系更未被阐明。目的:观察去卵巢大鼠骨质疏松发病过程中成骨细胞G1期调节蛋白的改变,探讨... 详细信息

背景:G1期调节蛋白对调控增殖细胞的增殖周期具有重要作用,目前关于成骨细胞G1期调节蛋白的研究甚少,绝经后骨质疏松与成骨细胞G1期调节蛋白的关系更未被阐明。目的:观察去卵巢大鼠骨质疏松发病过程中成骨细胞G1期调节蛋白的改变,探讨绝经后骨质疏松症的发病机制。方法:100只6月龄SD雌性大鼠,随机分成假手术组和模型组各50只,模型组进行双侧卵巢结扎切除术,假手术组除未行卵巢结扎切除外,其余步骤与手术组相同。所有大鼠于术后4,8,12,18,24周分批取材,每批每组各处死10只,取大鼠腰椎。运用免疫组织化学方法检测骨组织中成骨细胞G1期调节蛋白CyclinD1、CDK4、p21蛋白表达。结果与结论:CyclinD1、CDK4蛋白阳性表达主要定位于骨小梁表面的成骨细胞。假手术组有CyclinD1、CDK4蛋白阳性表达,模型组表达强于假手术组。p21蛋白阳性表达部位与CyclinD1相似,假手术组和模型组均有明显阳性表达,但模型组的表达维持在较高水平,在各时期均明显高于同期假手术组(P<0.01)。结果证实,去卵巢骨质疏松模型大鼠发病过程中,成骨细胞CyclinD1、CDK4、p21蛋白出现明显高表达。提示成骨细胞增殖加快,同时成骨细胞周期受阻滞亦增多,成骨细胞数量相对不足,骨形成低于骨吸收,导致骨质疏松的发生。

关键词：绝经后骨质疏松症细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白质依赖激酶癌基因蛋白质p21 骨组织工程

粗叶悬钩子总生物碱抑制肝细胞凋亡的超微结构与TUNEL染色观察

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中国中药杂志 2010年第8期35卷 1060-1063页

作者：陈文列洪振丰李天骄赵锦燕林久茂周建衡黄美雅福建中医学院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350108 福建中西医结合研究院重点实验室福建福州350108

目的:研究粗叶悬钩子总生物碱对肝细胞凋亡及肝细胞超微结构的影响。方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、粗叶悬钩子总生物碱处理组和阳性药对照组。采用CC l4腹腔内注射建立肝损伤大鼠模型。应用TUNEL检测各组肝组织的凋亡指数,电... 详细信息

目的:研究粗叶悬钩子总生物碱对肝细胞凋亡及肝细胞超微结构的影响。方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、粗叶悬钩子总生物碱处理组和阳性药对照组。采用CC l4腹腔内注射建立肝损伤大鼠模型。应用TUNEL检测各组肝组织的凋亡指数,电镜观察肝细胞超微结构。结果:粗叶悬钩子总生物碱处理组与阳性药对照组的大鼠肝细胞超微结构损伤程度、肝组织中凋亡指数,均分别较模型组显著减轻与下降。结论:粗叶悬钩子总生物碱能明显减轻肝细胞超微结构损伤,抑制肝组织中细胞凋亡。

关键词：粗叶悬钩子总生物碱细胞凋亡超微结构原位末端标记法

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健骨颗粒对维甲酸致骨质疏松模型大鼠的影响

中国医药学报 2004年第9期19卷 531-533页

作者：林燕萍冯尔宥王和鸣黄美雅福建中医学院骨伤系福州350003

目的 :探讨健骨颗粒对维甲酸致骨质疏松模型大鼠的影响。方法 :建立维甲酸致骨质疏松大鼠模型 ,并进行药物干预。 2 8d后分别运用双能X线骨密度仪、放射免疫分析法、酶联免疫吸附法和骨组织形态学等手段 ,观察各组模型大鼠的骨密度 (BMD... 详细信息

目的 :探讨健骨颗粒对维甲酸致骨质疏松模型大鼠的影响。方法 :建立维甲酸致骨质疏松大鼠模型 ,并进行药物干预。 2 8d后分别运用双能X线骨密度仪、放射免疫分析法、酶联免疫吸附法和骨组织形态学等手段 ,观察各组模型大鼠的骨密度 (BMD)、骨形态结构及血清甲状旁腺素 (PTH)、绒毛膜促甲状腺激素 (CT)、肿瘤坏死因子α (TNF -α)等指标变化情况。结果 :健骨颗粒组股骨颈骨密度和血清CT水平显著升高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 ) ,而PTH、TNF -α浓度低于模型组 ,骨小梁结构明显优于模型组。结论 :健骨颗粒能有效控制维甲酸致骨质疏松模型大鼠的骨量丢失 ,抑制骨吸收 ,促进骨形成 ,改善骨代谢负平衡状态 ,有效防治维甲酸导致的骨质疏松症。

关键词：维甲酸大鼠骨质疏松模型 PIH 骨密度血清 CT 结论平衡状态手段