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尾叶桉叶绿体ROS代谢相关基因表达与不定芽分化的关系

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东北林业大学学报 2023年第9期51卷 41-45页

作者：杨玉红方函梁雪婷黄真池岭南师范学院湛江524048 杭州师范大学

为研究不同类型愈伤组织的叶绿体活性氧(ROS)代谢相关基因表达,探讨尾叶桉再生型愈伤组织转绿和不定芽分化之间的关系,将9 d苗龄的尾叶桉(Eucalyptus urophylla S. T. Blake)幼苗下胚轴接种在添加N-苯基-N-噻唑基脲、6-苄氨基腺嘌呤、吲... 详细信息

为研究不同类型愈伤组织的叶绿体活性氧(ROS)代谢相关基因表达,探讨尾叶桉再生型愈伤组织转绿和不定芽分化之间的关系,将9 d苗龄的尾叶桉(Eucalyptus urophylla S. T. Blake)幼苗下胚轴接种在添加N-苯基-N-噻唑基脲、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸的标准平板计数琼脂培养基(SPCA)中,外植体先膨大形成白色愈伤组织,8周后分化形成不同类型的愈伤组织(绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织、白色愈伤组织)。4种愈伤组织中叶绿素质量分数分别为0.24、0.18、0.07、0.03 mg/g。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测叶绿体rbcL基因和6个ROS代谢相关基因(TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)的表达。qPCR检测到8周前的白色愈伤组织中4个叶绿体基因rbcL、TDP1、SOD2和DAR1的转录。其中,rbcL、TDP1、SOD2的转录水平随愈伤组织块的膨大不断升高,DAR1基因转录水平则较低。8周后,叶绿体rbcL基因和6个活性氧代谢相关基因均在绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织中转录。设定红色愈伤组织中对应基因的表达量为1,绿色愈伤组织中,上述7个叶绿体基因(rbcL、TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)相对表达量分别为8.84、3.36、2.89、2.65、2.53、1.28和7.49,绿色带芽点愈伤组织中7个基因的相对表达量分别为19.57、3.72、4.59、3.53、4.73、3.08和4.12。结果表明,愈伤组织转绿和不定芽分化过程中,叶绿体发育开始启动、叶绿素大量合成、rbcL转录显著增强,叶绿体中与活性氧代谢相关基因的表达水平升高。

关键词：尾叶桉愈伤组织叶绿体基因表达活性氧

拟南芥中人工启动子GWSF转录特性及乙烯诱导活性分析

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植物生理学报 2018年第1期54卷 121-126页

作者：黄真池李恒岭南师范学院生命科学与技术学院广东湛江524048

理想的病原诱导型启动子可用来精确调控抗病基因的时空表达,消除转基因中的副作用。选用Gst1-box、W-box、S-box、F-box元件和CaMV minimal 35S启动子设计长度为374 bp的人工启动子GWSF。用GWSF替代p BI121中调控gus基因的CaMV 35S启动... 详细信息

理想的病原诱导型启动子可用来精确调控抗病基因的时空表达,消除转基因中的副作用。选用Gst1-box、W-box、S-box、F-box元件和CaMV minimal 35S启动子设计长度为374 bp的人工启动子GWSF。用GWSF替代p BI121中调控gus基因的CaMV 35S启动子后,将重组质粒导入农杆菌GV3101,并通过花序浸泡法得到转GWSF:gus拟南芥。以T_4代植株为材料,GUS染色发现GWSF本底表达低,受疫霉菌、青枯菌及抗病信号分子水杨酸的诱导,但不受非致病菌大肠杆菌和逆境激素脱落酸(ABA)的诱导。序列分析发现,GWSF含有乙烯应答元件(ERE)。用乙烯处理T_4代转基因植株,通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测GWSF的乙烯诱导活性。当乙烯浓度为0.2 mmol·L^(-1)时,GWSF转录活性最高,达到CaMV 35S的11.33倍。结果表明,GWSF是较为理想的植物病原和乙烯诱导型启动子,具有本底表达低、诱导因子广、启动表达快、诱导效率高等优点,可用于植物转基因抗病育种。

关键词：人工启动子 GWSF 乙烯

不破坏种子活力测定方法研究──Ⅰ不同活力种子挥发性组分和释放量分析

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种子 1998年第4期 1-3,7页

作者：黄真池黄上志中山大学生命科学学院广州510275

用气相色谱分析了白菜、水稻、绿豆种子在密闭贮藏期间挥发性组分的种类与释放量。不同温度下含水量不同的各种种子都有挥发性组分产生。种于贮藏在0℃比的在25℃产生的挥发性组分多：经32％相对湿度（RH）平衡水分的种子比经9％或64％R... 详细信息

用气相色谱分析了白菜、水稻、绿豆种子在密闭贮藏期间挥发性组分的种类与释放量。不同温度下含水量不同的各种种子都有挥发性组分产生。种于贮藏在0℃比的在25℃产生的挥发性组分多：经32％相对湿度（RH）平衡水分的种子比经9％或64％RH平衡水分的种子产生的挥发性组分释放量多。分析种子产生的挥发性组分与种子活力关系，发现乙醛释放量与种子活力成显著正相关，乙醛／乙醇与种子活力也成明显正相关。

关键词：挥发性组分种子活力非破坏性方法测定

不破坏种子活力测定方法研究　Ⅱ种子活力与呼吸速率的关系

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种子 1998年第5期17卷 3-5页

作者：黄真池黄上志中山大学生命科学学院广州510275

对不同活力的白菜种子进行连续5次吸水回干处理，发现吸水回干处理使种子的抗劣变能力显著提高。测定种子吸胀初期的呼吸速率发现：高活力种子（发芽率82％）和中等活力种子（发芽率68％）的呼吸速率显著高于低活力种子（发芽率44％）... 详细信息

对不同活力的白菜种子进行连续5次吸水回干处理，发现吸水回干处理使种子的抗劣变能力显著提高。测定种子吸胀初期的呼吸速率发现：高活力种子（发芽率82％）和中等活力种子（发芽率68％）的呼吸速率显著高于低活力种子（发芽率44％）的呼吸速率，但高活力种子与中等活力种子的呼吸速率差别不明显。种子经吸水回干处理（1～5次）再自然老化后，种子吸胀初期的呼吸速率则与种子活力呈明显的正相关。

关键词：白菜种子吸水回干处理呼吸速率检验

脲类细胞分裂素诱导尾叶桉愈伤组织分化过程中SOD活性及基因表达变化

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东北林业大学学报 2023年第12期51卷 104-109页

作者：李丽纯许漫琪黄惠紫陈裕婷李观玲黄真池岭南师范学院湛江524048

探讨3种脲类细胞分裂素(UCTK):N-苯基-N-噻唑基脲(PBU)、苯基噻二唑脲(TDZ)和氯吡苯脲(CPPU)诱导尾叶桉(Eucalyptus urophylla)愈伤组织分化的效果及作用机理。将下胚轴接种在含0.57μmol/L 6-BA+0.57μmol/L IAA的SPCa培养基,再添加4μ... 详细信息

探讨3种脲类细胞分裂素(UCTK):N-苯基-N-噻唑基脲(PBU)、苯基噻二唑脲(TDZ)和氯吡苯脲(CPPU)诱导尾叶桉(Eucalyptus urophylla)愈伤组织分化的效果及作用机理。将下胚轴接种在含0.57μmol/L 6-BA+0.57μmol/L IAA的SPCa培养基,再添加4μmol/L的单种UCTK或浓度各为2μmol/L的UCTK间的两两组合。8周后,UCTK组合诱导所得再生型愈伤组织比例均高于49.27%,显著高于单种UCTK的不到29%。与单种UCTK处理相比,UCTK组合诱导的愈伤组织H 2O 2质量摩尔浓度降低、超氧阴离子清除速率下降、SOD活性则无规律性变化。与PBU处理相比,UCTK组合使6周龄愈伤组织的6个SOD基因的转录全部上调。设PBU+CPPU组合诱导所得2周龄愈伤组织中对应基因表达值为1,分析UCTK组合诱导愈伤组织膨大和分化过程中SOD基因的表达变化,发现SOD1和SOD3基因的转录变化最为显著。CPPU+TDZ处理2周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为762.53和1119.82;PBU+TDZ处理6周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为1501.81和7086.52;PBU+CPPU处理10周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为524.77和14789.44。分析结果可知:不同UCTK有协同效应,通过影响ROS代谢,减轻桉树愈伤组织褐化,促进分化;UCTK组合处理后,SOD1和SOD3的转录水平变化极为显著,预示其与愈伤组织分化密切相关。

关键词：尾叶桉愈伤组织脲类细胞分裂素超氧化物歧化酶(SOD) 活性氧(ROS)

不同诱导因子对膜脂过氧化与对超微结构影响的关系

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2007年第5期33卷 546-551页

作者：曾富华黄真池湛江师范学院应用生命科学技术研究所广东湛江524048

为了阐明诱导因子诱导系统获得性抗性机制,研究了百草枯PQ,钛铁试剂Tiron和稻白叶枯菌弱毒株XOO75-1等诱导因子对稻白叶枯病的系统获得抗性、诱导叶活性氧代谢及挑战接种叶超微结构的影响.结果表明,PQ和XOO75-1可诱导系统获得抗性.XOO7... 详细信息

为了阐明诱导因子诱导系统获得性抗性机制,研究了百草枯PQ,钛铁试剂Tiron和稻白叶枯菌弱毒株XOO75-1等诱导因子对稻白叶枯病的系统获得抗性、诱导叶活性氧代谢及挑战接种叶超微结构的影响.结果表明,PQ和XOO75-1可诱导系统获得抗性.XOO75-1使处理稻叶SOD和CAT活性降低,使POD活性、O2i产生速率及MDA含量升高;PQ使SOD,CAT,POD活性、O2i产生速率及MDA含量升高;两者均使处理稻叶膜脂IUFA降低,饱和脂肪酸相对含量升高.PQ和XOO75-1使挑战接种叶病斑附近组织结构受保护,比未处理叶的细胞结构损伤小,较接近正常叶,细胞内结构以叶绿体变化最为显著.Tiron处理使PQ和XOO75-1诱导的系统获得抗性减弱,诱导局部的活性氧变化减小以及病斑附近的结构改变更显著.证明O2i在XOO系统获得抗性中起重要作用.

关键词：稻白叶枯病系统获得抗性超微结构活性氧代谢

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人类早期听觉发育及早产儿听觉管理研究进展

中国康复医学杂志 2024年第3期39卷 443-447页

作者：王翠黄真北京大学第一医院康复医学科北京市100034

目前,全球平均早产率是11%左右,每年约有1500万早产儿出生,并且早产率具有增加的趋势^([1])。近些年,随着围生期医疗水平的提高,包括产前类固醇、表面活性剂替代疗法、无创通气、营养治疗等,早产儿的神经发育结局已大大改善,但每年仍有... 详细信息

目前,全球平均早产率是11%左右,每年约有1500万早产儿出生,并且早产率具有增加的趋势^([1])。近些年,随着围生期医疗水平的提高,包括产前类固醇、表面活性剂替代疗法、无创通气、营养治疗等,早产儿的神经发育结局已大大改善,但每年仍有100万早产儿会存在持续终身的障碍^([2]),其中,2%-10%的早产儿会被诊断为听力障碍,而普通儿童发生率仅为0.1%^([3])。

关键词：营养治疗早产率无创通气围生期医疗水平早产儿听力障碍类固醇

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植物基因工程中人工启动子的研究进展

植物生理学报 2011年第2期47卷 141-146页

作者：彭舒黄真池欧阳乐军程杰曾富华湛江师范学院生命科学与技术学院广东湛江524048 湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128

启动子是调控基因转录的一段DNA,也是构建基因工程表达载体的重要元件。天然启动子在表达强度和特异性等方面存在一定的局限性。采用人工构建的方法,有望得到诱导因子广、本底活性低、表达强度高、启动表达快等特点的启动子。本文综述... 详细信息

启动子是调控基因转录的一段DNA,也是构建基因工程表达载体的重要元件。天然启动子在表达强度和特异性等方面存在一定的局限性。采用人工构建的方法,有望得到诱导因子广、本底活性低、表达强度高、启动表达快等特点的启动子。本文综述了人工启动子在诱导表达、组织特异性表达、高效表达等方面的研究进展。

关键词：人工启动子诱导表达组织特异性表达高效表达

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桉树胚状体再生与遗传转化的研究进展

植物生理学报 2012年第4期48卷 325-332页

作者：沙月娥欧阳乐军彭舒黄真池陈信波曾富华湛江师范学院生命科学与技术学院广东湛江2524048 湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128

文章综述了桉树胚状体发生过程中基因型、外植体材料、培养基、光照、植物生长调节剂种类与配比以及其他添加物对外植体胚性愈伤组织诱导以及胚状体发生的影响,探讨了影响桉树遗传转化体系建立的因素,并对近年来桉树胚状体再生和转基因... 详细信息

文章综述了桉树胚状体发生过程中基因型、外植体材料、培养基、光照、植物生长调节剂种类与配比以及其他添加物对外植体胚性愈伤组织诱导以及胚状体发生的影响,探讨了影响桉树遗传转化体系建立的因素,并对近年来桉树胚状体再生和转基因研究进展进行了介绍。

关键词：桉树胚状体遗传转化植株再生