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CircFAM53B-1/2抑制VSMC分化的机制研究

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CircFAM53B-1/2抑制VSMC分化的机制研究

作者：赵灵丹河北医科大学

学位级别：硕士

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)是动脉壁的主要细胞成分,通过维持血管壁的张力和完整性在血管稳态中发挥重要作用。在病理条件下,VSMC可以去分化为合成表型,获得增殖、迁移和合成细胞外基质的能力,这个过程被称为表... 详细信息

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)是动脉壁的主要细胞成分,通过维持血管壁的张力和完整性在血管稳态中发挥重要作用。在病理条件下,VSMC可以去分化为合成表型,获得增殖、迁移和合成细胞外基质的能力,这个过程被称为表型转化,是动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等血管重塑性疾病的病理学基础。干扰素刺激基因15(Interferon-stimulated gene 15,ISG15)是一种分子量为15k Da的类泛素蛋白。其在序列、结构和功能上与泛素类似,可通过酶促级联反应共价修饰靶蛋白使之发生ISG15化修饰,但并不直接介导蛋白质的降解,而是参与细胞信号转导、基因表达调控等过程。近年来许多研究表明ISG15可针对多种病毒发挥抗病毒活性,并在微生物感染的宿主防御反应中起着至关重要的作用。然而,对其在VSMC中的作用研究甚少。亚精胺合酶(spermidine synthase,SRM)是一种能催化合成亚精胺的重要酶,其广泛分布于生物体中。有研究表明亚精胺对心血管具有保护作用,比如能够延缓心肌衰老、减弱高盐饮食大鼠的高血压、改善小鼠动脉内皮细胞的氧化损伤以及减少动脉粥样硬化斑块中的脂质积聚等。然而,SRM是否与VSMC表型转化有关还有待探讨。环状RNA(circRNA)是一种通过反向剪接形成的具有共价闭合环状结构的RNA,广泛存在于真核细胞中。circRNA通过其mi RNA海绵作用、与蛋白质相互作用等方式调控基因表达,在肿瘤、免疫系统疾病、神经系统疾病中发挥重要作用。此外,circRNA还参与心血管疾病的发生发展。实验室前期研究发现PDGF-BB通过上调KLF4表达而促进circFAM53B-1和circFAM53B-2的形成,circFAM53B-1/2又通过抑制SRF表达抑制VSMC分化。但对于circFAM53B-1/2如何抑制SRF表达及VSMC分化尚不清楚,因此,本研究旨在观察circFAM53B-1/2抑制VSMC分化的机制。目的:研究circFAM53B-1/2抑制VSMC分化的机制。方法:1.用PDGF-BB(10 ng/m L)刺激VSMC 24 h,荧光原位杂交技术(FISH)检测circFAM53B-1/2的表达;免疫荧光检测Krüppel样因子4(KLF4)和血清应答因子(serum response factor,SRF)的表达。2.构建circFAM53B-1和circFAM53B-2表达载体并用其转染VSMC,24 h后收集细胞,Western blot检测SRF、α-肌动蛋白(SMA)、平滑肌蛋白22-α(SM22α)和Myocardin的表达;实时定量PCR(q RT-PCR)检测SRF和Myocardin的m RNA表达水平。构建SRF过表达载体,将其与circFAM53B-1/2过表达载体共同转染至VSMC,24 h后收集细胞,用Western blot检测SRF、SMA及SM22α的表达。3.在VSMC中过表达circFAM53B-1、circFAM53B-2以及KLF4并进行蛋白质谱检测;用Western blot及免疫荧光检测ISG15的表达;制备小鼠股动脉损伤模型,用免疫荧光检测ISG15表达情况。4.设计敲低ISG15的小干扰RNA和构建ISG15过表达载体,将二者分别转染至VSMC,使ISG15敲低或者过表达,用Western blot检测VSMC增殖/分化相关蛋白的表达;先转染靶向ISG15的小干扰RNA,再给予PDGF-BB(10 ng/m L)处理,用Western blot检测SMA及SM22α的表达。***-BB(10 ng/m L)处理VMSC 24 h,对ISG15免疫沉淀的蛋白进行质谱分析,用免疫共沉淀(Co-IP)与免疫荧光检测ISG15与SRM的相互作用。6.设计敲低SRM的小干扰RNA和构建SRM表达载体,将二者分别转染至VSMC,使SRM敲低或者过表达,用Western blot检测VSMC增殖/分化相关蛋白的表达。结果:***-BB通过KLF4-circFAM53B-1/2抑制SRF表达,从而抑制VSMC分化。免疫荧光染色和FISH染色证实PDGF-BB促进KLF4和circFAM53B-1/2表达,抑制SRF表达;Western blot结果显示过表达circFAM53B-1/2抑制SRF、SM22α和SMA蛋白表达,但不影响Myocardin蛋白表达;real-time PCR结果显示,过表达circFAM53B-1/2抑制SRF的m RNA表达,但不影响Myocardin的m RNA表达;过表达SRF能促进SM22α和SMA表达,并能部分逆转circFAM53B-1/2对SM22α和SMA表达的抑制作

关键词： circFAM53B-1/2 ISG15 SRM VSMC 分化

中学生学业成就动机、学业自我效能感与学业情绪的关系研究

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中学生学业成就动机、学业自我效能感与学业情绪的关系研究

作者：刘灵丹深圳大学

学位级别：硕士

为探讨中学生学业成就动机、学业情绪和学业自我效能感之间的关系,希望在调查研究的基础上探究建立它们之间的中介模型,进而指导教育教学实践,提高学生学业发展的水平,促进学生心理健康地成长,本研究以深圳市福田区某学校七至九年级学... 详细信息

为探讨中学生学业成就动机、学业情绪和学业自我效能感之间的关系,希望在调查研究的基础上探究建立它们之间的中介模型,进而指导教育教学实践,提高学生学业发展的水平,促进学生心理健康地成长,本研究以深圳市福田区某学校七至九年级学生为样本,采用人口学信息问卷、学业成就动机量表、学业自我效能感问卷、青少年学业情绪问卷对学生进行调查并采集相关数据,通过SPSS23.0对751份有效问卷的数据进行整理、统计分析。研究结果显示:(一)不同年级的学生在学业成就动机(F=14.800,P=0.000)及学业情绪(F=5.371,P=0.005)上均存在显著性差异,且呈现随年级升高而下降的趋势;学业自我效能感(F=1.815,P=0.16)和积极高唤醒学业情绪(F=2.953,P=0.053)在初中三年保持相对稳定,年级上不存在显著性差异。(二)非独生与独生子女在学业自我效能感(t=-2.677,P=0.008)上存在显著性差异,且独生子女(3.65±0.55)平均得分高于非独生子女(3.54±0.51),而在学业成就动机和学业情绪上不具有显著性差异。(三)父母受教育水平不同的学生在学业成就动机上不存在显著性差异,而在学业自我效能感(F=4.308,P=0.014;F=6.002,P=0.003)及学业情绪(F=3.748,P=0.024;F=3.877,P=0.021)上均存在显著性差异。(四)不同性别、不同户籍、非离异与离异家庭学生在学业成就动机、学业自我效能感和学业情绪上均不存在显著性差异。(五)学业成就动机、学业自我效能感与学业情绪两两间均呈显著正相关,其中,学业成就动机与学业自我效能感的皮尔逊相关系数是0.454,学业自我效能感与学业情绪的皮尔逊相关系数是0.679,学业情绪与学业成就动机的皮尔逊相关系数是0.340,它们的P值均小于0.01。(六)中学生成就动机在学业自我效能感与学业情绪之间中介效应不显著,成功预想和期望、克服成功障碍的态度、成功要求在学业自我效能感与学业情绪之间中介效应亦均不显著,而成功重要认识在学业自我效能感与学业情绪间部分中介效应显著,其中介模型通过总效应、直接效应和间接效应共同解释,中介效应对总效应的贡献率为6.5%。可见,学业成就动机、学业自我效能感与学业情绪密切相关地作用于学生的学习活动,其中学业自我效能感能直接影响学业情绪,也能通过成功重要性认识的中介作用影响学业情绪,教师有意识地采用干预手段提高学生的学业自我效能感和成功重要性认识对提升学生学业情绪具有积极意义。

关键词：中学生学业成就动机学业自我效能感学业情绪

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旅游地产开发模式及其选择研究

旅游地产开发模式及其选择研究

作者：黄灵浙江工业大学

学位级别：硕士

近年来,我国经济实力不断提升,人民生活水平获得改善,生活方式及观念产生了重大变化,对满足自身生存以外的需求的关注和要求越来越高。旅游地产作为第三产业中两大支柱产业(旅游业和房地产业)相互融合的产物,能够充分利用旅游目的地的... 详细信息

近年来,我国经济实力不断提升,人民生活水平获得改善,生活方式及观念产生了重大变化,对满足自身生存以外的需求的关注和要求越来越高。旅游地产作为第三产业中两大支柱产业(旅游业和房地产业)相互融合的产物,能够充分利用旅游目的地的旅游资源满足人们多层次的需求,这一新型的旅游消费方式和投资方式不仅实现了旅游资源与房地产资源直接的共享,形成良性互动,同时带动了旅游目的地区域的经济发展,也为其他关联产业带来了联动效应。鉴于目前国内已有研究存在概念相对混乱、理论基础薄弱等问题,加上旅游地产行业开发混乱,存在很多隐患,因此针对旅游地产的概念界定、开发模式研究,为该行业的稳健发展提供了必要保障。在对国内外文献的梳理以及结合我国旅游地产实际发展状况的基础上,本文首先对旅游地产理论中的基本问题进行梳理,包括概念、类型、特征等,作了较为全面的概述;其次从功能属性、依托的旅游资源、空间构成角度对其开发模式进行划分,结合典型案例分析各个模式的内涵;最后本文以当前研究者关于旅游地产开发模式的研究文献为参考,探索出一套较为完善的评价指标体系,并科学合理的筛选出重要指标,以定性与定量相结合的方法,充分运用层次分析法衡量在不同开发模式下的各层级指标权重,采用德尔菲法邀请专家根据实际情况为指标打分,最后以模糊综合评价求得在不同开发模式下的指标综合评价结果。结果显示杭州宋城旅游景区A旅游地产的开发项目应当以旅游度假开发模式为最佳选择。

关键词：旅游地产开发模式评价模型宋城

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作者：黄灵福建医科大学

学位级别：硕士

【目的】研究人乳头瘤病毒(HPV)相关疾病中HPV亚型分布,HPV16的E2、E6、E7基因突变和E6、E7抗原表达,及其与疾病临床特征间的相关性。【方法】1、标本收集:收集厦门大学附属中山医院病理科2007～2013年HPV相关疾病的库存石蜡包埋组织共9... 详细信息

【目的】研究人乳头瘤病毒(HPV)相关疾病中HPV亚型分布,HPV16的E2、E6、E7基因突变和E6、E7抗原表达,及其与疾病临床特征间的相关性。【方法】1、标本收集:收集厦门大学附属中山医院病理科2007～2013年HPV相关疾病的库存石蜡包埋组织共91例,包括31例尖锐湿疣(CA)、11例2级宫颈上皮内瘤变(CIN2)、23例3级宫颈上皮内瘤变(CIN3)、3例鲍温样丘疹病(BP)、9例鲍温病(BD)和14例派吉特病(PD)。2、从福尔马林固定-石蜡包埋组织中提取HPV基因组DNA,用PCR-膜杂交法检测HPV DNA并做HPV分型。3、应用DNA测序法测定HPV16的E2、E6和E7基因序列,并应用BLAST软件将测序结果与基因库中野生型HPV16序列(GeneBank NC001526)比对,以分析HPV16的E2、E6和E7基因突变。4、应用免疫组织化学S-P法检测HPV16的E6和E7抗原表达。5、分析HPV相关疾病中HPV亚型分布、HPV16的E2、E6和E7基因突变、HPV16的E6和E7抗原表达与疾病临床特征(性别、年龄、部位、组织病理特征等)间相关性。6、统计学分析:HPV DNA检出率差异比较采用x2检验,设p50岁组HR-HPV检出率高于年龄<50岁组,但差异无统计学意义。CIN3患者HPV、HR-HPV和HPV16 DNA检出率均略高于CIN2,但差异无统计学意义。2、HPV16的E2、E6和E7基因突变:1例CA和1例CIN3中检出HPV16的E2基因置换突变,2例CIN3中检出HPV16的E2、E6和E7基因置换突变。HPV16的E2基因中共检出10个碱基置换突变:G2827A(Asp→Asn)、C3158A(Thr→Lys)、G3248A(Arg→Gln)、T3383C(Ile→Thr)、C3409T(Pro→Ser)、G3448A(Glu→Lys)、C3683A(Thr→Lys)和C3786A(Asp→Gln)为错义突变;HPV16 E6基因中共检出5个碱基置换突变,其中G94A置换突变位于起始密码子之前导致一个调控氨基酸改变,G132T(Arg→Ile)、T178A(Asp→Glu)、T178G(Asp→Glu)和C278G(Pro→Ala)为错义突变,T178A(Asp→Glu)和T178G(Asp→Glu)突变后编码的氨基酸相同;HPV16的E7基因中共检出4个碱基置换突变,其中A647G(Asn→Ser)为错义突变。3、HPV16的E6和E7抗原表达:14例HPV16 DNA阳性标本中1例BD、1例CA、1例CIN2和3例CIN3呈HPV16 E6抗原阳性,1例BD和3例CIN3呈HPV16 E7抗原阳性。【结论】1、女性CA中存在LR-HPV和HR-HPV混合感染,HR-HPV检出部位主要为宫颈。2、CIN中检出的HR-HPV主要为HPV16。3、发现CA中存在HPV16 E2基因突变。4、HPV16 E2、E6和E7基因置换突变可能与CA、CIN2和CIN3的发生和进展有关。5、HPV16 E7抗原只在癌前病变或原位癌中检出,因此可能作为疾病恶性指标之一。6、PD可能与所检测HPV亚型无关。

关键词：人乳头瘤病毒亚型致癌基因抗原表达基因突变

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告诉太阳

丛书名：千秋文学

2001年

作者：黄灵燕

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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自愿婚前医学检查服务模式的探讨

中国妇幼保健 2006年第19期21卷 2629-2630页

作者：黄灵聪福建省厦门市妇幼保健院 361003

目的：探讨在自愿婚前医学检查（以下简称婚检）的条件下，如何提高婚检率，并寻求符合待婚男女青年不同需求的最佳服务模式。方法：对1999年10月1日-2005年5月20日来院进行婚检的待婚青年及2005年1月1日-5月20日做优生检查的情况进行... 详细信息

目的：探讨在自愿婚前医学检查（以下简称婚检）的条件下，如何提高婚检率，并寻求符合待婚男女青年不同需求的最佳服务模式。方法：对1999年10月1日-2005年5月20日来院进行婚检的待婚青年及2005年1月1日-5月20日做优生检查的情况进行分析。结果：在硬性婚检时期，平均每年婚检人数2556人，平均疾病检出率10．97％，主要影响婚育疾病检出率2．02％，性病检出率0．67％；在自愿婚检中，经过宣传婚检的意义并采取一系列措施后，2005年前5个月比2004年同期的婚检人数增加78．68％；2005年主要影响婚育疾病的检出率已经从2004年的0．52％上升至1．43％；性病的检出率从0．00％上升至0.36％。此外，在2005年1月1日-5月20日来院做优生检查519人。结论：原有的婚检服务模式已不能适应自愿婚检的需要，采用以“尊重生命尊重爱”为主题来宣传婚检的意义，开展免费婚前卫生咨询、部分婚检项目免费以及多样化的检查项目，转变服务观念，提高医生自身素质，是自愿婚检条件下较佳的服务模式。

关键词：婚前医学检查尊重生命服务模式

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基于地理图像的高中生综合思维培养研究

基于地理图像的高中生综合思维培养研究

作者：王灵丹南京师范大学

学位级别：硕士

综合思维是地理学的基本思维方式之一,也是高中地理课程的重要育人目标,地理图像是地理学的第二语言,也是培养学生地理素养和能力的重要工具和载体。因此,运用地理图像培养学生的综合思维是地理学的必然要求,但目前将二者融合起来的研... 详细信息

综合思维是地理学的基本思维方式之一,也是高中地理课程的重要育人目标,地理图像是地理学的第二语言,也是培养学生地理素养和能力的重要工具和载体。因此,运用地理图像培养学生的综合思维是地理学的必然要求,但目前将二者融合起来的研究较少。鉴于此,本文探寻基于地理图像的高中生综合思维培养现状,并挖掘各类地理图像在培养学生综合思维中的功能和价值,然后提出相应的培养策略。首先,结合前人及本文的研究编制调查问卷和访谈提纲。然后,对郑州二中和宜阳一高的307名学生进行问卷调查,对两所学校不同发展阶段的6名地理教师进行访谈,发现学生的地理图像技能水平较低,学生的综合思维总体上处于中等偏下水平,教师运用地理图像的教学状况不佳,教师对综合思维的理解比较浅,教师的地理图像收集渠道窄、质量差,相关培训不足等问题,并且教师根据教学经验提出了相关建议,为本文的研究提供了借鉴。继而探究地理图像在培养学生综合思维中的作用,并辅助相关案例进行说明,发现不同地理图像在培养学生综合思维中存在很大差异。地理统计图表、等值线图、地理动态图像和地理动画利于培养学生的时空综合思维,地理示意图利于培养学生的要素综合和时空综合思维,地理景观图和区域地图利于培养学生的地方综合思维,电子地图和思维导图对要素综合、时空综合和地方综合思维的培养都有利。研究最后总结归纳培养学生综合思维的模式和针对性策略。培养模式包括要素综合思维的培养模式、时空综合思维的培养模式和地方综合思维的培养模式。策略包括精选地理图像,重视信息技术的应用,夯实学生的图像技能,利用地理动画培养学生时空综合思维,借助思维导图培养学生综合思维,扩展图像收集渠道并提高图像质量,加强教师培训等。模式和策略的提出有助于提升教学有效性,对地理教师运用地理图像培养学生综合思维具有较强的指导价值。

关键词：地理图像高中生综合思维培养

2011—2018年广西桂林市恶性肿瘤发病与死亡分析

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中国肿瘤 2020年第11期29卷 844-850页

作者：黄灵石瑀桂林市疾病预防控制中心广西桂林541001

[目的]分析2011—2018年广西桂林市恶性肿瘤发病与死亡情况及变化趋势。[方法]收集桂林市2011—2018年恶性肿瘤发病、死亡以及人口资料,按照地区、性别、年龄分层,计算恶性肿瘤发病与死亡率、标化率、累积率(0~74岁)、截缩率(35~64岁)... 详细信息

[目的]分析2011—2018年广西桂林市恶性肿瘤发病与死亡情况及变化趋势。[方法]收集桂林市2011—2018年恶性肿瘤发病、死亡以及人口资料,按照地区、性别、年龄分层,计算恶性肿瘤发病与死亡率、标化率、累积率(0~74岁)、截缩率(35~64岁)、年龄别率以及前10位恶性肿瘤发病与死亡顺位和构成等,其中分别采用2000年全国普查标准人口年龄构成、Segi’s世界标准人口年龄构成计算标化率。[结果] 2011—2018年桂林市恶性肿瘤发病率为267.92/10万,中标发病率为191.07/10万,世标发病率为185.42/10万,累积率(0~74岁)为20.85%,截缩率(35~64岁)为321.48/10万。年龄别发病率在40岁以后快速上升,在80~岁年龄组达到发病高峰,主要恶性肿瘤发病顺位依次为女性乳腺癌、肺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌等,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤发病的74.10%;2011—2018年桂林市恶性肿瘤死亡率为153.89/10万,中标死亡率为106.17/10万,世标死亡率为104.44/10万,累积率(0~74岁)为11.74%,截缩率(35~64岁)为155.90/10万。年龄别死亡率在45岁以后快速增加,在80~岁年龄组达到高峰,男性各年龄组死亡率均高于女性,主要恶性肿瘤死亡顺位依次为肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、女性乳腺癌等,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤死亡的78.55%。[结论]桂林市恶性肿瘤整体发病低于全省和全国水平,但单个癌种表现差异较大。肺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌、女性乳腺癌是当前桂林市需重点防治的癌种。

关键词：肿瘤登记恶性肿瘤发病率死亡率广西

电子词典与本科非英语专业学生英语词汇习得相关性研究

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电子词典与本科非英语专业学生英语词汇习得相关性研究

作者：黄灵武汉科技大学

学位级别：硕士

词汇是构建语言的材料和表达信息的载体，特别是在学习第二语言的过程中，词汇量的大小会直接影响学习者第二语言的听、说、读、写、译等各方面能力的发展。课堂词汇教学是英语教学的一个重要环节,但并不是学习者掌握词汇的唯一途径。... 详细信息

词汇是构建语言的材料和表达信息的载体，特别是在学习第二语言的过程中，词汇量的大小会直接影响学习者第二语言的听、说、读、写、译等各方面能力的发展。课堂词汇教学是英语教学的一个重要环节,但并不是学习者掌握词汇的唯一途径。研究表明，学习者课堂外的自我学习反而更能促进其词汇习得，这种自我学习包括课后阅读英语读物，听英语广播，看英语视频和使用电子词典等等。国内外关于英语词汇习得的研究众多，关于词典使用策略的研究也为数不少，但大多数研究集中在使用词典策略的不同对英语词汇习得的影响上，且研究所涉及的词典大部分为纸质词典;即使涉及到电子词典的使用策略，也只是在文章中一笔带过，着墨不多。本文以一些学者的前期研究为基础，试图探讨电子词典的使用策略与英语词汇习得之间的相关性。本文以注意理论及Craik&Lockhart提出的深度加工假设作为理论框架，结合***的词汇量测试问卷及专门为非英语专业学生设计的调查问卷作为分析材料，试图回答这三个问题：（1）词汇习得和电子词典的使用是否具有相关性;（2）如果词汇习得和电子词典的使用之间存在某种相关性：不同的电子词典使用策略是促进还是抑制学习者的词汇习得？（3）学习者的词汇量大小是否影响这种相关性？本研究将受试者分为两组：实验组和对照组。实验前，对两组受试者进行相同的电子词典使用策略问卷调查和词汇量测试，了解他们的电子词典使用策略、接受性和产出性词汇量大小;在此基础上，总结受试者普遍认为高效的电子词典使用策略。在随后的两个月内，将其运用到实验组的受试者中进行英语词汇习得，对照组则按照原有的电子词典使用策略习得英语词汇;两个月之后，对实验组和对照组进行相同的词汇量大小测试，观察两组受试者在接受性和产出性方面的词汇量是否会有明显变化。为探究其相关性，本研究以电子词典使用策略问卷结果作为自变量，以词汇的接受性和产出性能力测试的数据作为因变量，运用Spearman相关系数分析法和SPSS统计软件，将实验前后的全部数据进行分析，获得不同电子词典使用策略与接受性和产出性词汇能力的相关数据，并对每组数据进行了显著性分析。为了检验词汇量大小组在电子词典使用策略方面的差异，对接受性和产出性词汇高低分组进行了电子词典使用策略的T检验和显著性检验。统计结果表明：(1)电子词典提供的读音、搭配与受试者根据语境选择性注意识记单词、有重点地根据词条对应的例句做笔记等电子词典使用策略，有助于学习者的词汇习得;(2)不同的电子词典使用策略与接受性和产出性词汇的习得有不同的相关性，如语境和接受性词汇的习得相关性明显;而做作笔记与产出性词汇的习得相关性显著。选择性注意对接受性和产出性词汇的习得均呈现出显著相关性;(3)接受性和产出性词汇的习得具有不同步性;(4)接受性词汇量大的受试者倾向于使用语境、选择性注意及英汉词典等电子词典使用策略，而产出性词汇量大的受试者更频繁地使用搭配、做笔记及英英词典等电子词典使用策略，且相关性明显。本文由六部分组成，第一部分介绍研究的原因、目的及意义;第二部分为文献综述;第三部分陈述相关的理论基础并构建本研究的理论框架;第四部分介绍采取的研究方法;第五部分对调查问卷和测试的数据进行了统计分析;第六部分指出本研究的不足之处和将来的研究方向。

关键词：电子词典电子词典使用策略接受性词汇产出性词汇词汇习得