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基于分子佐剂EDA的弓形虫DNA疫苗研究

中国兽医科学 2018年第11期48卷 1374-1380页

作者：龚丽贞黄春芳陈欢黄潇航林霞琳宋肇程黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院福建省动物药物工程实验室

为构建分子佐剂纤维连接蛋白外域A（EDA）与弓形虫表面膜蛋白1（SAG1）基因融合的真核表达载体并探讨其对小鼠的免疫原性,以本实验室保存的质粒为模板,进行PCR扩增,获得EDA-SAG1与SAG1目的片段,再分别连接到真核表达载体pVAX1上,构建出... 详细信息

为构建分子佐剂纤维连接蛋白外域A（EDA）与弓形虫表面膜蛋白1（SAG1）基因融合的真核表达载体并探讨其对小鼠的免疫原性,以本实验室保存的质粒为模板,进行PCR扩增,获得EDA-SAG1与SAG1目的片段,再分别连接到真核表达载体pVAX1上,构建出重组质粒pVAX1-EDA-SAG1和pVAX1-SAG1。将构建的质粒pVAX1-EDA-SAG1、pVAX1-SAG1同空载体pVAX1通过肌肉注射的方式免疫小鼠,通过ELISA、CCK-8法和小鼠攻虫试验对该DNA疫苗的免疫效果进行评价。经PCR扩增获得的SAG1片段长为855 bp,EDA-SAG1片段长为1 131 bp。双酶切和测序结果显示成功构建了上述重组质粒。在ELISA检测中,实验组血清中抗体IgG、IgG1、IgG2a水平和细胞因子IL-4、IL-10、IL-12p70及IFN-γ的质量浓度较高,与对照组相比差异显著（P〈0.05）。在脾淋巴细胞增殖试验中,分子佐剂EDA-SAG1组的增殖效果最明显（P〈0.05）。攻虫后,pVAX1-EDA-SAG1实验组小鼠存活时间最长,较空白对照组多存活4 d。实验组pVAX1-EDA-SAG1相对于对照组pVAX1-SAG1具有较好的免疫效果,分子佐剂EDA可以显著地增强弓形虫SAG1的免疫原性。

关键词：弓形虫 EDA SAG1 分子佐剂小鼠免疫保护

基因芯片技术在动物疫病检测中的应用研究进展

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贵州畜牧兽医 2020年第4期44卷 49-51页

作者：黄潇航施远妮符云芳江和基黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 福建省动物药物工程实验室福建福州350002

基因芯片技术具有高通量、高特异性、高敏感性等优点,作为1种新型的快速检验检测技术被应用于动物疫病的检测诊断,并显示出良好的临床检测效果。文章介绍了基因芯片技术的设计原理、基本特点以及在多领域动物疫病检测诊断中的开发现状,... 详细信息

基因芯片技术具有高通量、高特异性、高敏感性等优点,作为1种新型的快速检验检测技术被应用于动物疫病的检测诊断,并显示出良好的临床检测效果。文章介绍了基因芯片技术的设计原理、基本特点以及在多领域动物疫病检测诊断中的开发现状,展望未来发展前景,为基因芯片技术在动物疫病检测诊断中的应用提供参考。

关键词：基因芯片核酸杂交技术疫病诊断

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滑鼠蛇横纹肌肉瘤的临床症状与病理学观察

野生动物学报 2022年第2期43卷 493-498页

作者：黄潇航陈榕彭佳佳李诗艺贺金峪王诗晨张龙白云鹏祁保民黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 福建省动物药物工程实验室福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013

应用临床诊断、血液学、X光、病理剖检及病理组织学方法对1例圈养滑鼠蛇(Ptyas mucosus)体表肿物进行检测分析。X光检查显示该蛇体侧后有2个肿物,与周围组织界限明显,内有实质及钙化灶生成。剖检发现肿物包膜破溃,小肿物切面呈白色,质... 详细信息

应用临床诊断、血液学、X光、病理剖检及病理组织学方法对1例圈养滑鼠蛇(Ptyas mucosus)体表肿物进行检测分析。X光检查显示该蛇体侧后有2个肿物,与周围组织界限明显,内有实质及钙化灶生成。剖检发现肿物包膜破溃,小肿物切面呈白色,质地较硬,大肿物质软,有恶臭气味,内部呈现分层结构,外部层腐烂部分伴有少量脓性增生;镜下可见大量具有嗜酸性胞浆的、组织细胞样细胞的增生,局部可见大量粉色的、具有多核的巨细胞及大量钙化灶,结构疏松,大量毛细血管扩张。经病理学诊断,结合临床检查分析,该蛇确诊为横纹肌肉瘤。研究结果可为兽医对异宠临床横纹肌肉瘤的诊断提供参考。

关键词：滑鼠蛇横纹肌肉瘤脓性增生钙化

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鸭源蛔虫分子生物学鉴定及临床病理研究

鸭源蛔虫分子生物学鉴定及临床病理研究

墨西哥钝口螈蜡样芽胞杆菌感染的分离鉴定与致病性研究

2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛

作者：黄潇航王诗晨李诗艺贺金峪张龙黄志坚殷光文

为了解鸭源蛔虫感染的临床病理及相关分子生物学特性。本研究对1例番鸭感染蛔虫病病例中的鸭只肠道进行苏木精-伊红染色的病理组织学研究,同时以分离自我国福建省屏南县的番鸭肠道蛔虫研究对象,基于传统形态学研究基础上,提取3株肠道内... 详细信息

为了解鸭源蛔虫感染的临床病理及相关分子生物学特性。本研究对1例番鸭感染蛔虫病病例中的鸭只肠道进行苏木精-伊红染色的病理组织学研究,同时以分离自我国福建省屏南县的番鸭肠道蛔虫研究对象,基于传统形态学研究基础上,提取3株肠道内疑似蛔虫的线虫DNA,借助PCR技术对提取的DNA进行18S rRNA基因片段的扩增和Sanger测序比对。病理结果显示:蛔虫寄生造成肠道黏膜大量损伤脱落,并伴有大量的嗜酸性细胞浸润。患病番鸭肠道内感染的寄生虫种类为鸡蛔虫,测序结果显示:在18S rRNA基因遗传上与鸡蛔虫(EF180058.1)高达100.0%。此次分离的鸭源蛔虫属于鸡蛔虫,为国内对鸭源蛔虫分子生物鉴定,为鸭蛔虫病的防控提供了相关参考。

关键词：鸭源蛔虫 18S rRNA 基因序列

来源： cnki会议评论

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中国兽医科学 2022年第9期52卷 1149-1156页

作者：黄潇航李诗艺占观平李梦蕊李永霞黄志坚王磊殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 福建省动物药物工程实验室福建福州350002 福建农林大学生命科学学院福建福州350002

福建省福州市某居民家饲养的观赏型墨西哥钝口螈发生未明原因死亡,为探究其死亡原因,本研究通过对病死钝口螈进行临床解剖观察和细菌分离,并对分离的细菌进行生化试验、药敏试验、动物感染试验、16S rDNA序列分析;在确定为蜡样芽胞杆菌(... 详细信息

福建省福州市某居民家饲养的观赏型墨西哥钝口螈发生未明原因死亡,为探究其死亡原因,本研究通过对病死钝口螈进行临床解剖观察和细菌分离,并对分离的细菌进行生化试验、药敏试验、动物感染试验、16S rDNA序列分析;在确定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的基础上,进行毒力因子基因扩增和对蝾螈的致病性研究。结果显示,该分离菌为革兰阳性短杆菌,在LB培养基中呈现圆形灰白色菌落,在血琼脂培养基中呈现β溶血。16S rDNA基因序列分析结果显示,该菌为蜡样芽胞杆菌,毒力因子扩增结果显示,该菌携带有hblA、hblB、hblC、hblD、nheA、nheB、nheC、entFM、cytK等至少9种毒力因子;药敏结果显示,该菌对红霉素敏感,对其余测试药物表现不同程度的耐药。人工感染试验结果显示,该菌可造成蝾螈的死亡。病理切片结果显示,该细菌感染后可导致蝾螈皮肤基底层出现坏死和炎性浸润,除皮肤溃疡外,导致肝、肺、肠等多脏器变性、坏死和炎性细胞浸润。综上,本试验从墨西哥钝口螈中分离到1株蜡样芽胞杆菌,并筛选出敏感药物,从而为该类细菌病的诊断和治疗提供了参考依据。

关键词：蜡样芽胞杆菌毒力因子分离鉴定 16S rDNA 动物模型

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两栖动物棒状线虫的研究进展

中国动物传染病学报 2023年第6期31卷 202-208页

作者：黄潇航李诗艺贺金峪王诗晨李永霞李梦蕊张龙黄志坚殷光文福建农林大学动物科学院福州350002 福建省动物药物工程实验室福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013

棒状线虫是一类报道寄生于两栖类、爬行类呼吸系统的线虫,在生物学分类上属于小杆目,棒状科,在全球南美洲、亚洲、大洋洲等均有感染野生两栖动物报道。该类线虫对蛙类、蟾蜍等两栖动物规模化养殖业的破坏性较强,潜在的生产风险不容忽视... 详细信息

棒状线虫是一类报道寄生于两栖类、爬行类呼吸系统的线虫,在生物学分类上属于小杆目,棒状科,在全球南美洲、亚洲、大洋洲等均有感染野生两栖动物报道。该类线虫对蛙类、蟾蜍等两栖动物规模化养殖业的破坏性较强,潜在的生产风险不容忽视。本文将从近年来国内外已报道的对两栖动物棒状线虫的种类、感染途径、流行概况、临床发病特征、遗传研究、现有检测技术、临床治疗、防控措施等方面的研究进行综述,希望为该类寄生虫在两栖动物中的防治及研究提供重要的理论数据参考。

关键词：棒状线虫流行趋势防控

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林蛙肺线虫的临床分离,病理研究及分子生物学鉴定

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林蛙肺线虫的临床分离,病理研究及分子生物学鉴定

2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛

作者：黄潇航贺金峪李诗艺王诗晨唐丹彤黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建省动物药物工程实验室

为探究1例自林蛙肺线虫病的肺线虫感染种类和蛙肺线虫自然感染对肺部的病理损伤影响。采用临床剖检法确诊患有肺线虫病的林蛙,采用传统形态学观察和聚合酶链式扩增反应(PCR)扩增1株分离获得虫株的核糖体间隔转录区ITS部分片段,对采集获... 详细信息

为探究1例自林蛙肺线虫病的肺线虫感染种类和蛙肺线虫自然感染对肺部的病理损伤影响。采用临床剖检法确诊患有肺线虫病的林蛙,采用传统形态学观察和聚合酶链式扩增反应(PCR)扩增1株分离获得虫株的核糖体间隔转录区ITS部分片段,对采集获得的虫株综合进行生物学鉴定,同时使用H.E染色法制备肺病理切片进行病变观察。[结果]通过临床剖检发现林蛙肺外观出血,肺毛细血管间出血严重,采用灭菌生理食盐水冲洗发现肺腔内存在大量的线虫感染,通过光镜形态学观察分离获得的线虫具有典型的棒状型食道,尾刺等结构特征符合文献记载棒状科线虫的临床特征。H.E病理组织切片结果显示,肺线虫在林蛙肺部的寄生感染导致了炎性浸润,组织出血,肺腔黏膜脱落等症状。通过PCR扩增获得大小约为750bp的阳性条带,产物测序后通过NCBI数据库物种序列比对,DNA Star7.0等分析结果显示,扩增获得的肺线虫与报道的Rhabdias ***(KF999609.1),同源性最高,为100%,其次为Rhabdias bufonis.(KF999593.1,99.7%)、Rhabdias engelbrechti.(MG428406.1,99.0%),邻近法进化树结果显示该肺线虫与Rhabdias ***聚于一支,与其余棒状线虫类群形成较为明显的分支。结合形态学和分子生物学鉴定结果,确定病蛙感染肺线虫种类为Rhabdias ***,多量寄生肺导致肺炎,引起病理损伤,在蛙类人工养殖繁育中应该引起重视并进行相关的驱虫防控。

关键词：肺线虫病理鉴定分子生物学 ITS Rhabdias cf.bufonis

来源： cnki会议评论

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蟾蜍似矛球吻棘头虫的临床病例研究

中国畜牧兽医 2022年第6期49卷 2423-2430页

作者：黄潇航李诗艺李永霞李梦蕊贺金峪张龙刘道泉江和基黄志坚殷光文福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 福建省动物药物工程实验室福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013 福州市动物疫病预防控制中心福州350009

【目的】对1例中华蟾蜍多脏器寄生虫感染临床案例进行病理诊断并通过分子生物学鉴定其物种分类。【方法】对实验室饲养的1只消瘦、拒食后发生死亡的雌性中华蟾蜍进行解剖观察,病理组织学研究,采用蠕虫剖检法、结节压片法对分离获得的虫... 详细信息

【目的】对1例中华蟾蜍多脏器寄生虫感染临床案例进行病理诊断并通过分子生物学鉴定其物种分类。【方法】对实验室饲养的1只消瘦、拒食后发生死亡的雌性中华蟾蜍进行解剖观察,病理组织学研究,采用蠕虫剖检法、结节压片法对分离获得的虫体进行形态学观察研究,并进行分子生物学鉴定。【结果】剖检发现蟾蜍心脏、肝脏等脏器及多系膜寄生棘头虫,未在蟾蜍体内发现线虫、吸虫等其他蠕虫寄生。HE染色结果显示,棘头虫的感染寄生造成了蟾蜍肺脏、肝脏等多脏器的机械性损伤、炎性反应,其中肠壁黏膜发生严重损坏脱落。通过PCR扩增其细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因片段,获得5株不同部位的目的虫株COⅠ基因目的片段,经对比发现,鉴定的棘头虫均为同一种棘头虫,且其GC含量在40.14%~40.83%之间。选取JS-01株进行NCBI-BLAST比对,与似矛球吻棘头虫(Sphaerirostris lanceoide,登录号:MG931943.1)相似性最高,为99.5%。借助分子生物学分析并结合形态学观察结果确定其为似矛球吻棘头虫。【结论】似矛球吻棘头虫的大量感染寄生造成了蟾蜍的死亡,本试验结果可为药用蟾蜍棘头虫病的防控提供临床症状、病理、分子生物学等方面的参考,对两栖动物似矛球吻棘头虫的诊断与研究具有参考价值。

关键词：蟾蜍似矛球吻棘头虫病理组织学

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我国人工养殖蛇类的常见传染性肺炎

畜牧兽医科技信息 2019年第4期35卷 156-156页

作者：黄潇航福建农林大学动物科学学院福建福州350002

肺炎是蛇类规模化养殖中具有较大危害性的疾病。患有肺炎的蛇类主要表现为拉风箱的喘气声、肺部呼吸道等纤维素性渗出,或者干酪样物质填塞等呼吸系统病症。蛇肺炎是蛇类常见的呼吸道传染病,夏季多发,常见于水律蛇等抗病力较差的蛇种。... 详细信息

肺炎是蛇类规模化养殖中具有较大危害性的疾病。患有肺炎的蛇类主要表现为拉风箱的喘气声、肺部呼吸道等纤维素性渗出,或者干酪样物质填塞等呼吸系统病症。蛇肺炎是蛇类常见的呼吸道传染病,夏季多发,常见于水律蛇等抗病力较差的蛇种。该病具有传播快、治愈慢等特点。赵成坚对广西地区的蛇类患病个体(包括肺炎病例在内)进行了较为系统的病原菌分离鉴定与致病力分析,共分离纯培养17株菌种,其中包括奇异变形杆菌、彭氏变形杆菌、肠道沙门氏菌等致病菌类。具有传染性的群发性肺炎主要划分为细菌性肺炎、寄生虫性肺炎、真菌性肺炎和病毒性肺炎四大类,以下逐一进行总结。

关键词：蛇传染性肺炎致病原