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谷胱甘肽双功能合成酶分子改造及全细胞催化

中国生物工程杂志 2024年第7期44卷 1-11页

作者：刘秋林刘娜黄浩威苏畅徐建国徐国强张晓梅史劲松许正宏江南大学工业生物技术教育部重点实验室、粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心、江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心无锡214122 江南大学生命科学与健康工程学院无锡214122 无锡福祈制药有限公司无锡214191 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司宜兴214200

目的:对嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)来源的谷胱甘肽双功能合成酶(glutathione bifunctional synthetase,GshF)在大肠杆菌(Escherichia coli)进行表达,对GshFst进行定点突变,得到酶活和稳定性有所提高的突变株,并对突变株全细胞催化条件进行优化。方法:选择6种不同的表达载体表达,获得最优表达载体后利用单因素试验进行诱导条件的优化,在此基础上,利用AlphaFold2对GshFst进行建模和分子对接,通过预测得到突变位点,经单点突变及组合突变,获得优势突变体,并对催化条件进行优化。结果:GshF在大肠杆菌中成功表达,获得了突变体GshFstL136K/V498C,其比酶活为12.03 U/mg,较野生型提高了86.80%,在37℃的半衰期为134.24 min,较野生型提高了40.95%。以GshFstL136K/V498C为出发菌株,采用单因素试验对全细胞催化条件优化,得到的最佳催化条件是:生物量OD600=30,反应温度40℃,反应pH 9.0,缓冲液Tris-HCl 50 mmol/L、L-谷氨酸40 mmol/L,L-半胱氨酸25 mmol/L,甘氨酸40 mmol/L,ATP 25 mmol/L,催化3 h后,GSH浓度可以达到24.17 mmol/L,底物L-半胱氨酸的转化率约为96.68%。结论:筛选到了适合GshFst的表达载体及诱导表达条件,对GshFst进行半理性改造提高了其催化活性和稳定性,通过优化获得了全细胞催化合成GSH的工艺。

关键词：谷胱甘肽双功能合成酶谷胱甘肽定点突变全细胞催化

当代中学生挫折教育的生命哲学审视 ——以广州南村中学为例

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当代中学生挫折教育的生命哲学审视 —...

作者：黄浩威广州大学

学位级别：硕士

中学阶段是人生的黄金时代,人的身体和心理发生着巨大变化。同时,我国社会正经历着历史上的巨大变化,对中学生的适应提出了挑战,而中学生面对挫折的各种问题日益突出,严重影响了中学生生命个体的健康成长。本论文以广州市南村中学为... 详细信息

中学阶段是人生的黄金时代,人的身体和心理发生着巨大变化。同时,我国社会正经历着历史上的巨大变化,对中学生的适应提出了挑战,而中学生面对挫折的各种问题日益突出,严重影响了中学生生命个体的健康成长。本论文以广州市南村中学为例,探讨中学生挫折教育的现状及成因,提出了具有理论价值和现实意义的应对措施。论文共分四个部分：第一部分为绪言。概述了本课题的研究背景、问题的提出及生命哲学介入挫折教育的分析,形成了本论文的基本理论结构和整体思路。首先对本文所涉及的核心概念进行阐述,其次阐述了生命哲学如何从存在、体验、表达、生成、超越等方面介入挫折教育的相关理论分析。第二部分是关于南村中学学生挫折和挫折教育的调查状况以及存在问题的分析。主要是通过问卷调查法和访谈法进行调查分析。第三部分主要分析了中学生挫折教育存在问题的成因。本部分分别从唯才教育环境、学校、挫折教育方式、师生交流状况和学生的主体性意识方面分析了当前挫折教育存在问题的原因。第四部分根据中学生挫折教育中存在的问题提出加强和完善中学生挫折教育的对策。分别从教育理念、对话方式、挫折情境、教育机制和教育情感角度提出建议,加强和完善中学生的挫折教育,为他们提供更好的生存和发展的环境,促进他们的健康成长。

关键词：挫折教育生命哲学中学生审视

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基于后现代语境的高校思想政治教育理念创新

商品与质量 2010年第S4期 89-90页

作者：黄浩威广州大学公共管理学院

后现代主义是西方广为流传的一种文化思潮或观念形态,是对现代主义的批判和扬弃,它否定理性和诸多现代性东西,对建构新的高校思想政治教育理念具有重要意义。本文在深刻剖析后现代语境的基本特征的基础上,从育人观念、本质功能、教学方... 详细信息

后现代主义是西方广为流传的一种文化思潮或观念形态,是对现代主义的批判和扬弃,它否定理性和诸多现代性东西,对建构新的高校思想政治教育理念具有重要意义。本文在深刻剖析后现代语境的基本特征的基础上,从育人观念、本质功能、教学方法、教学内容以及教学评价方式五个方面对高校思想政治教育理念进行创新。

关键词：后现代主义思想政治教育理念创新

服务育人:高校学生干部素质工程建设的创新性研究——以广东海洋大学工程学院为例

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文教资料 2014年第17期 118-119页

作者：黄浩威广东海洋大学工程学院

高校学生干部作用的发挥直接关系学生素质的提升。在新的形势下,如何提高学生干部的服务意识和责任意识是一个紧迫的课题,结合广东海洋大学工程学院学生干部服务育人工程建设模式构建学生干部素质工程建设的长效机制。

关键词：服务育人高校学生干部素质工程创新性

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后现代文化视野下的大学生青年文化建设

学理论 2012年第29期 188-189页

作者：黄浩威广东海洋大学工程学院

后现代文化是西方广为流传的一种文化思潮或观念形态,是对现代文化的批判和扬弃,大学生青年文化深受其影响,但它却为研究当代大学生青年文化建设提供全新视角。因此,积极探索后现代文化视野下的大学生青年文化建设策略,对提高大学生思... 详细信息

后现代文化是西方广为流传的一种文化思潮或观念形态,是对现代文化的批判和扬弃,大学生青年文化深受其影响,但它却为研究当代大学生青年文化建设提供全新视角。因此,积极探索后现代文化视野下的大学生青年文化建设策略,对提高大学生思想政治教育感染力和建设和谐校园文化具有重要的实践意义。

关键词：青年文化后现代文化影响策略

互联网、媒体、通信产业的竞争与融合——基于平台理论的解释

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世界社会科学 2024年第1期 119-136+245页

作者：黄浩中国社会科学院财经战略研究院中国社会科学院大学

从20世纪90年代开始，互联网的发展催生了自媒体、社交媒体、即时通信等创新服务，使得互联网成为融合通信和媒体服务的重要信息网络。这种现象模糊了互联网与传统媒体、通信产业的边界，给反垄断分析、经济统计和政府监管带来了挑战。... 详细信息

从20世纪90年代开始，互联网的发展催生了自媒体、社交媒体、即时通信等创新服务，使得互联网成为融合通信和媒体服务的重要信息网络。这种现象模糊了互联网与传统媒体、通信产业的边界，给反垄断分析、经济统计和政府监管带来了挑战。因此，研究融合的动力和过程不仅有助于理解相关的经济现象，也能为监管与产业政策的制定提供理论依据。研究发现：技术进步导致的功能性融合以及产业政策的放宽打破了互联网、通信网络和媒体网络平台之间的壁垒，促进了不同信息平台之间的竞争；互联网平台具有更大的网络效应，其竞争优势来自成本、平台规模和平台结构三个方面；捆绑、交叉补贴等竞争行为是造成互联网与媒体、通信产业广泛融合的直接原因。

关键词：互联网通信媒体产业融合双边市场平台

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基于多粒度通道和双重强化的文本分类

华中科技大学学报(自然科学版) 2024年

作者：马长林黄浩华中师范大学计算机学院

针对文本分类中多粒度信息的互补性和多特征的差异性问题，本文将深度学习模型和强化学习模块相结合，提出基于多粒度通道和双重强化的文本分类模型。本模型首先使用Word2vec进行词向量预训练，获取字符级和词级词向量，并构建马尔科夫... 详细信息

针对文本分类中多粒度信息的互补性和多特征的差异性问题，本文将深度学习模型和强化学习模块相结合，提出基于多粒度通道和双重强化的文本分类模型。本模型首先使用Word2vec进行词向量预训练，获取字符级和词级词向量，并构建马尔科夫决策过程对词向量进行增强；其次，将强化的字符粒度词向量和词粒度词向量输入不同的卷积神经网络分别进行局部特征提取和全局上下文特征提取，并将这两种特征向量进行归一化处理后，构建马尔科夫决策过程对特征向量进行增强；最后将强化的特征向量输入全连接层和softmax层进行文本类别划分。在THUCNews和toutiaonews38w两个数据集上的实验结果表明，与已有模型相比，本文模型在各评估指标上均有所提升，进一步验证了本文方法的有效性。

关键词：文本分类深度学习强化学习模块多粒度通道双重增强

引入预训练表示混合矢量量化和CTC的语音转换

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计算机工程 2024年第4期50卷 313-320页

作者：王琳黄浩新疆大学信息科学与工程学院新疆乌鲁木齐830017

预训练模型通过自监督学习表示在非平行语料语音转换(VC)取得了重大突破。随着自监督预训练表示(SSPR)的广泛使用,预训练模型提取的特征中被证实包含更多的内容信息。提出一种基于SSPR同时结合矢量量化(VQ)和联结时序分类(CTC)的VC模型... 详细信息

预训练模型通过自监督学习表示在非平行语料语音转换(VC)取得了重大突破。随着自监督预训练表示(SSPR)的广泛使用,预训练模型提取的特征中被证实包含更多的内容信息。提出一种基于SSPR同时结合矢量量化(VQ)和联结时序分类(CTC)的VC模型。将预训练模型提取的SSPR作为端到端模型的输入,用于提高单次语音转换质量。如何有效地解耦内容表示和说话人表示成为语音转换中的关键问题。使用SSPR作为初步的内容信息,采用VQ从语音中解耦内容和说话人表示。然而,仅使用VQ只能将内容信息离散化,很难将纯粹的内容表示从语音中分离出来,为了进一步消除内容信息中说话人的不变信息,提出CTC损失指导内容编码器。CTC不仅作为辅助网络加快模型收敛,同时其额外的文本监督可以与VQ联合优化,实现性能互补,学习纯内容表示。说话人表示采用风格嵌入学习,2种表示作为系统的输入进行语音转换。在开源的CMU数据集和VCTK语料库对所提的方法进行评估,实验结果表明,该方法在客观上的梅尔倒谱失真(MCD)达到8.896 d B,在主观上的语音自然度平均意见分数(MOS)和说话人相似度MOS分别为3.29和3.22,均优于基线模型,此方法在语音转换的质量和说话人相似度上能够获得最佳性能。

关键词：预训练表示自监督学习矢量量化解耦联结时序分类

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基于模型预测的AUV轨迹跟踪滑模控制方法

中国惯性技术学报 2024年第2期32卷 205-212页

作者：黄浩乾郑康健马惊天河海大学能源与电气学院南京211100

针对自主水下航行器(AUV)在模型参数不确定和外界海流干扰情况下轨迹跟踪误差大的问题,提出一种基于模型预测的滑模控制方法。首先,基于李雅普诺夫稳定性理论,设计一种滑模控制器;其次,为高效利用计算资源,提高AUV的轨迹跟踪性能,设计... 详细信息

针对自主水下航行器(AUV)在模型参数不确定和外界海流干扰情况下轨迹跟踪误差大的问题,提出一种基于模型预测的滑模控制方法。首先,基于李雅普诺夫稳定性理论,设计一种滑模控制器;其次,为高效利用计算资源,提高AUV的轨迹跟踪性能,设计一种滑模控制器与模型预测控制相结合的控制框架;考虑到执行器饱和问题,利用滑模跟踪控制律,在该控制框架上构造收缩约束,确保闭环系统的稳定性;最后,采用仿真实验验证,实验结果表明所提方法与滑模控制器比较,在模型参数确定且无干扰情况下均方跟踪误差减小了60%以上,在模型恢复力参数不确定和海流扰动情况下均方跟踪误差减小了80%以上,能够克服时变恢复力对系统的影响,并对外界海流干扰有较好的抑制作用,保证了系统的鲁棒性。

关键词：自主水下航行器轨迹跟踪模型预测控制滑模控制