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人白细胞介素－2－绿脓杆菌外毒素融合蛋白的初步研究

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1995年第4期27卷 453-458页

作者：高基民黄洪莲郑仲承徐舲飞刘新垣中国科学院上海生物化学研究所第一军医大学免疫学教研室

白细胞介素－２：绿脓杆菌外毒素；融合蛋白；原核表达；细胞毒活性

关键词： Interleukin-2 Pseudomonas exotoxin Fusion protein Prokaryotic expression Cytotoxic activity

逆转录病毒载体介导的GFP基因在四种细胞株中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第4期18卷 349-350页

作者：郭志兵黄洪莲刁志宏王小宁成都军区总医院检验科四川成都610058 第一军医大学分子免疫研究所广东广州510515 广州军区总医院广东广州510072

基因治疗中 ,所用的目的细胞通常为哺乳动物的细胞 ,体外培养条件要求高。传统的转基因细胞的筛选对细胞损伤大 ,且比较费时。ＧＦＰ是一种新型的报道基因 ,目前已在多种细菌和真菌中有效表达 ,如果ＧＦＰ能在多种哺乳动物细胞中广泛而... 详细信息

基因治疗中 ,所用的目的细胞通常为哺乳动物的细胞 ,体外培养条件要求高。传统的转基因细胞的筛选对细胞损伤大 ,且比较费时。ＧＦＰ是一种新型的报道基因 ,目前已在多种细菌和真菌中有效表达 ,如果ＧＦＰ能在多种哺乳动物细胞中广泛而高效的表达 ,我们就可以利用流式细胞仪等设备 ,将其用于基因治疗的转基因细胞快速分离。利用逆转录病毒载体 ,对哺乳动物细胞进行基因转移是一种高效的方法。我们利用同时含有新霉素抗性基因 (ＮｅｏＲ)、ＧＦＰ报道基因和ＨＳＶＴＫ目的基因多顺反子重组逆转录病毒载体ＧＣＧＰＴＫＳＮ ,转染Ｋ5 6 2、ＮＳ 1、ＥＬ4及Ｓｐ2 / 0细胞株 ,通过荧光显微镜观察 ,研究了ＧＦＰ

关键词： GFP 逆转录病毒载体报道基因转染

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白介素10受体及其信号传导

南方医科大学学报 2001年第S1期25卷 56-58页

作者：欧阳平黄洪莲徐安龙第一军医大学南方医院心内科广东广州510515 中山大学生命科学学院广东广州510275

综述了白介素10受体及白介素10与受体结合后的信号传导研究进展。

关键词：受体白介素10 信号传导

反义血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ_B基因转移对大鼠颈动脉损伤后新生内膜的影响

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中华心血管病杂志 1999年第5期27卷 381-383页

作者：欧阳平许顶立黄洪莲刘伊丽侯玉清宋后燕戴云第一军医大学南方医院心内科广州510515 第一军医大学基础部上海医科大学分子遗传研究室

目的　探讨腺病毒载体介导的大鼠反义血管紧张素Ⅱ受体ⅠB(AT1B)RNA转移对大鼠颈动脉损伤后新生内膜的影响。方法　利用重组腺病毒载体将大鼠反义AT1B RNA转移至大鼠颈动脉球囊损伤模型中 ,2 1天后观察其对新生内膜形成的影响。结果　... 详细信息

目的　探讨腺病毒载体介导的大鼠反义血管紧张素Ⅱ受体ⅠB(AT1B)RNA转移对大鼠颈动脉损伤后新生内膜的影响。方法　利用重组腺病毒载体将大鼠反义AT1B RNA转移至大鼠颈动脉球囊损伤模型中 ,2 1天后观察其对新生内膜形成的影响。结果　用腺病毒载体转导大鼠反义AT1BRNA至大鼠球囊损伤的颈动脉 ,与对照组相比 ,2 1天后损伤血管新生内膜 /中层面积比降低了 4 7%(P <0 0 0 1)。结论　反义AT1BRNA对血管成形术后再狭窄可能有一定的预防作用。

关键词：颈动脉损伤血管内膜基因治疗 AT1B

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B7基因转染对小鼠肝癌细胞致瘤性的影响

中山大学学报（医学科学版） 1998年第S1期18卷 16-18页

作者：刘晓平区庆嘉黄洪莲王小宁中山医科大学孙逸仙纪念医院外科第一军医大学分子免疫学研究所

目的：研究小鼠Ｂ７基因转染对小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法：用逆转录病毒载体，将小鼠Ｂ７基因导入小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株中，经Ｇ４１８筛选，获得高表达Ｂ７分子的阳性细胞... 详细信息

目的：研究小鼠Ｂ７基因转染对小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法：用逆转录病毒载体，将小鼠Ｂ７基因导入小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株中，经Ｇ４１８筛选，获得高表达Ｂ７分子的阳性细胞克隆，采用ＣＴＬＡ４Ｉｇ的间接免疫荧光法检测Ｂ７分子的表达情况，并观察了Ｂ７基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果：①亲本小鼠肝癌细胞株Ｈｅｐａｌ６不表达Ｂ７分子，转染Ｂ７基因的Ｈｅｐａｌ６细胞高表达Ｂ７分子；②转染Ｂ７基因的Ｈｅｐａｌ６细胞与亲本Ｈｅｐａｌ６细胞相比，体外生长速度和细胞形态无明显改变，但免疫原性大大增强，致瘤性消失。结论：Ｂ７基因转染使得小鼠肝癌细胞株Ｈｅｐａｌ６免疫原性大大增强。

关键词：抗原.CD80 抗原CD86 转染免疫活性肝细胞癌小鼠

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B7修饰的肿瘤细胞疫苗体内外抗肿瘤作用

中山医科大学学报 1998年第4期19卷 265-268页

作者：刘晓平区庆嘉黄洪莲王小宁中山医科大学孙逸仙纪念医院外科第一军医大学分子免疫学研究所

目的：研究小鼠Ｂ７修饰的肿瘤细胞疫苗的体内外抗肿瘤作用。方法：应用逆转录病毒载体，将小鼠Ｂ７１和Ｂ７２导入小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株中，Ｇ４１８筛选后获高表达Ｂ７分子的阳性细胞克隆，经丝裂霉素处理制备成肿瘤... 详细信息

目的：研究小鼠Ｂ７修饰的肿瘤细胞疫苗的体内外抗肿瘤作用。方法：应用逆转录病毒载体，将小鼠Ｂ７１和Ｂ７２导入小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ６细胞株中，Ｇ４１８筛选后获高表达Ｂ７分子的阳性细胞克隆，经丝裂霉素处理制备成肿瘤细胞疫苗（ＴＣＶ），观察ＴＣＶＢ７体外刺激的脾细胞对不同肿瘤细胞系的抗瘤活性及对不同动物模型的体内免疫保护作用和免疫治疗作用。结果：①ＴＣＶＢ７体外刺激的脾细胞对亲本肝癌细胞和小鼠ＮＫ敏感的Ｙａｃ１细胞的体外细胞毒作用明显增强；②在免疫模型中，经ＴＣＶＢ７免疫的小鼠，能对同系肝癌细胞产生完全的免疫保护作用，并能保持无瘤状态长期存活；③在早期模型中，经ＴＣＶＢ７治疗的小鼠，能部分产生对同系肝癌细胞的免疫治疗作用，肿瘤的生长速度减缓，荷瘤小鼠的生存期延长。肿瘤组织（尤其是肿块包膜下）中淋巴细胞浸润增加；④在晚期模型中，经ＴＣＶＢ７治疗的小鼠，未能产生对同系肝癌细胞的免疫治疗作用。结论：Ｂ７修饰的肿瘤细胞疫苗能明显刺激增强体内外抗肿瘤作用。

关键词： B7修饰抗原 CD80 CD86 疫苗瘤苗肝癌

白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达

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生物工程学报 1996年第2期12卷 129-133页

作者：高基民黄洪莲王小宁徐舲飞郑仲承刘新垣第一军医大学免疫教研室广州510515 中国科学院上海生物化学研究所上海200031

利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66^(4Glu)和IL2-PE66^(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20％～30... 详细信息

利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66^(4Glu)和IL2-PE66^(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20％～30％。此外,由于这一表达质粒在IL-2cDNA与PE基因连接处引入了唯一的SmaⅠ位点,其5＇、3＇端分别含有唯一的EcoRⅠ、PstⅠ位点,因此可方便地用其它基因替换IL-2或PE基因而获得相应融合蛋白的表达质粒。

关键词：白细胞介素-2 绿脓杆菌外毒素融合蛋白制备

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4-1BB及其配体的分子生物学研究进展

国外医学（分子生物学分册） 1998年第6期20卷 248-251页

作者：黄洪莲欧阳平第一军医大学分了免疫研究所广州510515

4-1BB是激活的T淋巴细咆表而抗原。属神经生长因了受体(NGF-R)/肿瘤坏死因子受体(TNF-R)家族,4-1BB通过与其相应配体(4-1BB-L)结合,不仅能调节T淋巴细胞的激活和生长,而且还能促进抗μ激活的B淋巴细胞的增殖。抗4-1BB抗体能诱导T淋巴细... 详细信息

4-1BB是激活的T淋巴细咆表而抗原。属神经生长因了受体(NGF-R)/肿瘤坏死因子受体(TNF-R)家族,4-1BB通过与其相应配体(4-1BB-L)结合,不仅能调节T淋巴细胞的激活和生长,而且还能促进抗μ激活的B淋巴细胞的增殖。抗4-1BB抗体能诱导T淋巴细胞增殖,其抗肿瘤作用比抗CD28单抗和抗CTLA4单抗作用更强。以4-1BB为基础的免疫基因治疗有望成为临床治疗某些低免疫原性肿瘤的有效策略。

关键词： 4-1BB 4-1BB配体分子生物学 T细胞表面抗原

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肿瘤坏死因子-α与充血性心力衰竭

心血管病学进展 1997年第1期18卷 51-52页

作者：欧阳平黄洪莲第一军医大学南方医院心内科

肿瘤坏死因子－α与充血性心力衰竭第一军医大学南方医院心内科欧阳平黄洪莲综述刘伊丽审校肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα，ＴＮＦ－α）是由激活的巨噬细胞分泌的一种具有多种生物学效应的细胞因子，在... 详细信息

肿瘤坏死因子－α与充血性心力衰竭第一军医大学南方医院心内科欧阳平黄洪莲综述刘伊丽审校肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα，ＴＮＦ－α）是由激活的巨噬细胞分泌的一种具有多种生物学效应的细胞因子，在体内的作用广泛。一方面其具有抗肿瘤...

关键词：心力衰竭肿瘤坏死因子充血性心力衰竭