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左旋紫草素通过抑制蛋白酶体活性抗肿瘤作用的体内外研究

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左旋紫草素通过抑制蛋白酶体活性抗肿瘤作用的体内外研究

作者：黄洪标广州医学院

学位级别：硕士

背景与目的泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是细胞内主要的蛋白质降解系统,介导了细胞内多种蛋白的降解,参与细胞重要生命过程的调节。蛋白酶体本身已成为包括抗肿瘤在内多种疾病的重要靶点,因此寻找有效的蛋白酶... 详细信息

背景与目的泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是细胞内主要的蛋白质降解系统,介导了细胞内多种蛋白的降解,参与细胞重要生命过程的调节。蛋白酶体本身已成为包括抗肿瘤在内多种疾病的重要靶点,因此寻找有效的蛋白酶体抑制剂也随之成为众多学者研究的热点。我国具有丰富的中草药资源,从中药单体中筛选具有抑制蛋白酶体活性的药物具有广阔前景。本实验室运用已建立的的蛋白酶体抑制剂筛选平台,对中草药单体化合物进行粗筛,发现左旋紫草素在体外能明显抑制蛋白酶体活性。本研究在实验室前期工作基础上拟进一步探讨左旋紫草素在不同细胞系诱导细胞死亡及在体抗肿瘤作用与其抑制蛋白酶体功能之间的关系。方法与结果 1、左旋紫草素对稳定转染的GFPu-HEK293细胞内蛋白酶体的抑制作用选用稳定转染GFPu的HEK293细胞为研究对象,加入不同剂量(0-8μmol/L)左旋紫草素作用8小时收集细胞,裂解细胞抽提总蛋白进行western blot蛋白测定。SDS-PAGE电泳根据已报道的方法进行。采用ECL-plus测定试剂及KodaK公司生产的X曝光成像系统对实验结果进行采集。结果表明:反映UPS系统功能的内源性蛋白Ub、外源性蛋白GFPu在不同浓度左旋紫草素作用下开始出现聚集,并呈浓度依赖关系。 2、左旋紫草素诱导P388细胞死亡与其抑制细胞蛋白酶体活性关系的研究采用小鼠白血病P388细胞为研究对象,加入不同浓度的左旋紫草素(0-6μmol/L)作用6小时及相同剂量(2μmol/L)作用不同时间(0-12h)后,裂解细胞抽提总蛋白测定细胞蛋白酶体活性,发现左旋紫草素能明显抑制P388细胞内蛋白酶体活性,且呈浓度和时间依赖关系。同等条件下用Annexin V-FITC染色流式细胞术检测细胞的死亡情况,发现左旋紫草素诱导P388细胞死亡呈浓度和时间依赖关系。抽提总蛋白进行western blot检测内源性蛋白Ub,凋亡相关蛋白PARP,结果显示左旋紫草素引起明显的泛素化蛋白聚集和PARP的切割存在浓度和时间依赖的关系,且蛋白酶体抑制发生在细胞死亡之前。 3、左旋紫草素对腹水瘤小鼠生存时间的影响实验选择P388腹水瘤昆明小鼠为研究对象,小鼠腹腔接种肿瘤细胞24小时后开始给予腹腔注射剂量为4mg/kg的左旋紫草素,每天一次,持续给药7天,观察小鼠生存时间,连续观察60天。结果显示4mg/kg左旋紫草素能明显延长P388腹水瘤小鼠生存时间,溶剂对照组在23天内小鼠全部死亡,而给药组第28天死亡一只,其余小鼠都存活到实验结束(60天)。 4、左旋紫草素对实体瘤小鼠抑瘤作用与其抑制蛋白酶体功能之间的关系实验选择小鼠肝癌细胞H22实体瘤昆明小鼠为研究对象,小鼠左腋皮下接种肿瘤细胞24小时后开始给予腹腔注射剂量为4mg/kg和8mg/kg的左旋紫草素,每天一次,持续给药7天,第九天剥取肿瘤组织,称重,提取肿瘤组织总蛋白用western blot检测反映UPS系统功能的内源性蛋白Ub、Hsp70、IkBα、Bax、P27,同时中性甲醛固定肿瘤组织用免疫组化法检测P27,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果显示4mg/kg和8mg/kg的左旋紫草素能明显抑制在体肿瘤生长,抑瘤率分别达到42.4%和55.9%,western blot检测显示给药组肿瘤组织内反映UPS系统功能的Ub、Hsp70、IkBα、Bax、P27都出现了聚集,免疫组化同样显示肿瘤组织内P27蛋白聚集,凋亡细胞增加。结论 1、左旋紫草素能抑制细胞内蛋白酶体活性,引起内源性和外源性蛋白酶体底物蛋白聚集。 2、左旋紫草素在体抗肿瘤作用可能是其抑制蛋白酶体功能的结果。

关键词：左旋紫草素蛋白酶体抑制剂肿瘤死亡

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浅谈网络课件的开发应用

福建电脑 2009年第2期25卷 162-163页

作者：黄洪标广东建设职业技术学院广东广州510450

运用计算机信息技术实现高校课程资源的整合是当前我国高等教育课程研究和课程改革的一个热点问题,随着教育需求的不断增长.对学习资源特别是录制好的"课堂"学习课件的需求也日益增加。近年来,"网视宝"录播机在课堂的现场录制、会议上... 详细信息

运用计算机信息技术实现高校课程资源的整合是当前我国高等教育课程研究和课程改革的一个热点问题,随着教育需求的不断增长.对学习资源特别是录制好的"课堂"学习课件的需求也日益增加。近年来,"网视宝"录播机在课堂的现场录制、会议上直播方面发挥着较太作用,提高了录制与传播课堂教学的效率,实现了传统课堂教学的搬家,有效解决了学习资源的供需矛盾。

关键词：教育技术网络课件网视宝

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实施“体育心理”策略培养初中女生体育兴趣

体育师友 2010年第3期33卷 53-54页

作者：黄洪标广东省珠海市斗门区第二中学

初中女生与男生在身体形态、生理和心理上有着明显的差异,部分女生对体育课不感兴趣,甚至出现厌学的现象。本文通过对初中女生体育心理的探询,触摸女生体育心理,描画心理发展轨迹,注重细节、完善方法,为培养初中女生的体育兴趣,提高体... 详细信息

初中女生与男生在身体形态、生理和心理上有着明显的差异,部分女生对体育课不感兴趣,甚至出现厌学的现象。本文通过对初中女生体育心理的探询,触摸女生体育心理,描画心理发展轨迹,注重细节、完善方法,为培养初中女生的体育兴趣,提高体育课堂教学效率提供了应对策略。

关键词：体育心理初中女生策略体育兴趣

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

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实用医学杂志 2013年第7期29卷 1044-1047页

作者：黄洪标周萍赵灿国杨昌山董晓先广州医学院病理生理学教研室 510182

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Westernblot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋... 详细信息

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Westernblot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化。结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用。漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡。两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割。结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关。

关键词：肝肿瘤漆树酸紫杉醇肝癌细胞

基于翻转课堂的项目教学模式研究与应用——以数字影音处理课程为例

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电脑知识与技术 2022年第34期18卷 94-97页

作者：车伟坚黄洪标沈燕芬广东建设职业技术学院广东广州510440

基于翻转课堂的项目教学模式通过翻转课堂将理论知识放到课前,弥补项目教学法耗时过长的弱点;同时将项目实践放到课中,解决翻转课堂中如何充分利用课堂时间这一难题。在数字影音处理课程中应用该模式,教学过程由课前、课中、课后组成,... 详细信息

基于翻转课堂的项目教学模式通过翻转课堂将理论知识放到课前,弥补项目教学法耗时过长的弱点;同时将项目实践放到课中,解决翻转课堂中如何充分利用课堂时间这一难题。在数字影音处理课程中应用该模式,教学过程由课前、课中、课后组成,教师活动分为布置项目、理论讲解、理论总结、指导及答疑、点评总结、布置拓展任务几个过程,学生活动分为项目规划、理论学习、分享项目规划、项目实施、项目互评、项目拓展几个过程。

关键词：翻转课堂项目教学法数字影音处理数字媒体技术

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新疆新源山区黄土滑坡形成条件与防治措施

新疆地质 2004年第3期22卷 233-237页

作者：张鸿义黄洪标闫中学新疆维吾尔自治区地质工程勘察院新疆乌鲁木齐830091

新疆新源山区黄土滑坡十分发育,造成的危害相当严重.黄土滑坡的形成条件主要包括地质条件、地貌条件和斜坡受力条件3种.在地质条件和地貌条件一定的前提下,受力条件的改变是导致黄土斜坡稳定失衡和发生滑坡的最根本原因,降雨和融雪水入... 详细信息

新疆新源山区黄土滑坡十分发育,造成的危害相当严重.黄土滑坡的形成条件主要包括地质条件、地貌条件和斜坡受力条件3种.在地质条件和地貌条件一定的前提下,受力条件的改变是导致黄土斜坡稳定失衡和发生滑坡的最根本原因,降雨和融雪水入渗是影响斜坡受力条件改变的主导因素.对黄土滑坡的防治,建议采取避让和以避让为主的防治措施.

关键词：新疆新源山区黄土滑坡斜坡受力条件

肝性脑病实验的教学体会与思考——善待实验动物

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医学理论与实践 2013年第7期26卷 972-974页

作者：黄洪标董晓先吴卫广州医学院病理生理学教研室广东省广州市510182

动物实验是医学生掌握医学知识,深入理解医学理论和规律的重要中介环节,而实验动物伦理学尚未引起充分的重视。本文通过对机能实验中常用的肝性脑病动物实验操作进行分析,提出实验教学要结合实验动物伦理学的要求进行改革,教师应引导学... 详细信息

动物实验是医学生掌握医学知识,深入理解医学理论和规律的重要中介环节,而实验动物伦理学尚未引起充分的重视。本文通过对机能实验中常用的肝性脑病动物实验操作进行分析,提出实验教学要结合实验动物伦理学的要求进行改革,教师应引导学生善待实验动物,树立正确的生命伦理观,提升未来"拯救生命的责任感和使命感"。

关键词：动物实验动物伦理医学生

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政府办工作要提质提效提速 A02

高职扩招社会生源学情调查分析与对策研究——以广东建设职业技术学院IT类专业为例

郴州日报

作者：黄洪标贺茂峰

本报11月23日讯（通讯员黄洪标贺茂峰）11月20日下午，市政府办召开全体干部职工大会，传达贯彻市委、市政府“三抓一保”（抓生产、抓经营、抓收入，保增长）工作动员大会精神，大会提出政府办工作要提质提效提速，努力做好领导和...

本报11月23日讯（通讯员黄洪标贺茂峰）11月20日下午，市政府办召开全体干部职工大会，传达贯彻市委、市政府“三抓一保”（抓生产、抓经营、抓收入，保增长）工作动员大会精神，大会提出政府办工作要提质提效提速，努力做好领导和干部群众的勤务兵、服务员。　　会议指出

关键词：

来源： cnki报纸评论

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科技风 2022年第31期 157-159页

作者：沈燕芬熊国华车伟坚黄洪标广东建设职业技术学院广东广州510440

百万扩招社会生源从年龄阶段、成长背景、从业经历、认知特点等与传统生源有明显差异,为高职教育带来挑战。主要通过问卷调查方式对扩招社会生源成长背景、学习动机、学习投入度、学习有效度和学习满意度等进行调研与分析。针对调研结果... 详细信息

百万扩招社会生源从年龄阶段、成长背景、从业经历、认知特点等与传统生源有明显差异,为高职教育带来挑战。主要通过问卷调查方式对扩招社会生源成长背景、学习动机、学习投入度、学习有效度和学习满意度等进行调研与分析。针对调研结果,从人才培养方案制订、教师培训、教学模式、思想建设等方面提出对策和建议,以提高社会生源教学质量。

关键词：高职扩招学情分析社会生源问卷调查

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