检索结果-南通市图书馆

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

甘草次酸抗弓形虫效果的评价及作用机制研究

中国兽医科学 2024年第5期54卷 689-695页

作者：段银燕徐琼樊世杰黄思扬扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州25009

药物是目前防控弓形虫病的主要手段,筛选新的抗弓形虫药物意义重大。本试验评估了甘草次酸抗弓形虫的效果并初步探究了其作用机制。首先在HFF细胞上测定甘草次酸的CC 50,接着通过噬斑试验测定其有无抗弓形虫的效果,综合评估甘草次酸对... 详细信息

药物是目前防控弓形虫病的主要手段,筛选新的抗弓形虫药物意义重大。本试验评估了甘草次酸抗弓形虫的效果并初步探究了其作用机制。首先在HFF细胞上测定甘草次酸的CC 50,接着通过噬斑试验测定其有无抗弓形虫的效果,综合评估甘草次酸对速殖子入侵宿主细胞和在细胞内增殖的影响,最后采用JC-1荧光探针和多功能酶标仪分别检测弓形虫线粒体膜电位和活性氧(ROS)的变化情况。结果显示,甘草次酸的CC 50为351.2μmol/L。抗弓形虫的IC50为28.02μmol/L,在较高浓度下能抑制弓形虫速殖子在细胞内增殖,甘草次酸发挥抗弓形虫的作用依赖于降低弓形虫线粒体膜电位水平以及刺激活性氧的产生。综上,甘草次酸具有抗弓形虫的效果,具有作为抗弓形虫候选药物的潜力,值得进一步研究。

关键词：弓形虫甘草次酸线粒体机制

小鼠慢性弓形虫病发生过程及其动态变化规律初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期 304-309页

作者：周国庆白邵缘李宇渊朱国鼎黄思扬扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心国家卫生健康委员会寄生虫病预防和控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省医学重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室

目的观察不同形态刚地弓形虫感染后小鼠脑内包囊形成及其动态变化，为弓形虫病防控提供依据。方法取6～8周龄ICR小鼠（20～25 g）建立慢性弓形虫感染模型，其中弓形虫PRU株速殖子按1×10～5个/只剂量腹腔注射感染小鼠，包囊和卵囊分别... 详细信息

目的观察不同形态刚地弓形虫感染后小鼠脑内包囊形成及其动态变化，为弓形虫病防控提供依据。方法取6～8周龄ICR小鼠（20～25 g）建立慢性弓形虫感染模型，其中弓形虫PRU株速殖子按1×10～5个/只剂量腹腔注射感染小鼠，包囊和卵囊分别按20、200个/只剂量通过灌胃针口服感染小鼠，观察感染后小鼠临床症状和存活情况。分别以10（低剂量组）、20（中剂量组）、40个包囊/只（高剂量组）剂量感染小鼠，观察弓形虫不同感染剂量对小鼠脑内包囊数量的影响。将小鼠按性别（雌、雄性）、感染时间（感染后20、30、60、90、120、150、180 d）分组，按20个/只剂量口服弓形虫包囊后，分别观察性别和感染时间对小鼠脑内包囊数量的影响。将小鼠分成速殖子组（T组）、包囊1代组（C1组）、包囊2代组（C2组）、包囊3代组（C3组）、包囊4代组（C4组）；T组小鼠按1×10～5个/只剂量腹腔注射弓形虫速殖子，感染后第30天处死小鼠并收集其脑组织内包囊，再按20个/只感染C1组小鼠。此后每一代小鼠均采用上一代所产生包囊进行口服连续传代，观察连续传代对小鼠脑内弓形虫包囊数量的影响。结果以弓形虫速殖子、包囊、卵囊分别感染小鼠，感染第6～13天小鼠出现明显临床症状、感染第7～12天小鼠出现集中死亡。感染第30天时，感染速殖子、包囊、卵囊的小鼠存活率分别为67.0%、87.0%、53.0%，平均脑内包囊数量分别为（516.0±257.2）、（1 203.0±502.0）、（581.0±183.1）个，差异有统计学意义（F=11.94,P 0.05）；雄、雌性组小鼠存活率分别为73.0%和80.0%，平均脑内包囊数量分别为（946.4±411.4）、（932.1±322.4）个，差异无统计学意义（F=1.63,P> 0.05）。通过连续传代感染后，T、C1、C2、C3、C4组小鼠平均脑内包囊数量分别为（516.0±257.2）、（1 203.0±502.0）、（896.8±332.3）、（782.5±423.9）、（829.2±306.0）个，差异有统计学意义（F=4.82,P <0.01）;C1组小鼠脑内包囊数高于速殖子组，差异有统计学意义（P <0.01）。小鼠口服20个包囊后，感染第20天首次查见脑内弓形虫包囊，随感染时间延长脑内包囊数量逐渐增加；至感染第30、90天时，脑内包囊数量分别达峰值，此后逐步下降，至感染第180天时仍能查见脑内包囊。结论刚地弓形虫包囊较速殖子、卵囊感染后形成慢性感染的可能性更高，且慢性感染程度亦最严重；感染弓形虫包囊数量与慢性感染严重程度无关；脑内包囊形成数量于感染第30天和90天时达高峰。

关键词：刚地弓形虫慢性弓形虫病包囊卵囊速殖子脑组织小鼠

邻近标记技术在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进展

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医杂志 2024年第5期60卷 101-106页

作者：潘明李龙娇葛层层黄思扬扬州大学兽医学院江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 重庆三峡职业学院动物科技学院重庆万州404155

弓形虫编码数量众多的分泌蛋白,储存在微线体、棒状体和致密颗粒等虫体特有的细胞器中,于虫体入侵宿主细胞前后分泌到不同部位,并在虫体的感染、寄生和致病过程中发挥重要作用,对这些分泌蛋白的鉴定和功能研究是弓形虫致病机制研究中的... 详细信息

弓形虫编码数量众多的分泌蛋白,储存在微线体、棒状体和致密颗粒等虫体特有的细胞器中,于虫体入侵宿主细胞前后分泌到不同部位,并在虫体的感染、寄生和致病过程中发挥重要作用,对这些分泌蛋白的鉴定和功能研究是弓形虫致病机制研究中的热点和难点。传统的蛋白质组学技术在弓形虫亚细胞器的分离和组分鉴定上存在样品纯化困难和蛋白质组学信息覆盖率低等不足,且该技术在检测瞬时的或较弱的蛋白质相互作用时灵敏性较低。近年来,快速发展的邻近标记技术(PL)克服了传统技术的局限性。PL是将具有特定催化活性的工具酶与诱饵蛋白进行融合,进而添加生物素或生物素苯酚对诱饵蛋白邻近的靶蛋白进行生物素酰化标记的一门技术。该技术整合了酶促反应效率高的优点,可将特定空间内的蛋白进行高效标记,并可检测较弱的蛋白质相互作用,近年来在生物学研究中被广泛使用。本文对基于生物素连接酶(BirA)和抗坏血酸过氧化物酶(APEX)催化的PL在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进行阐述,介绍2种标记方法在弓形虫分泌蛋白的挖掘和蛋白质相互作用研究中的贡献,为弓形虫致病机制的研究和弓形虫病的防控提供参考。

关键词：邻近标记技术(PL) 弓形虫蛋白质组学生物素连接酶(BirA) 抗坏血酸过氧化物酶(APEX)

一种用于猫弓形虫病诊断的混合抗原间接ELISA方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2024年

作者：储林宏史文倩龚静芝白邵缘周国庆黄思扬教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

弓形虫是一种顶复门胞内寄生虫，可感染包括人类在内的大多数温血动物。猫作为弓形虫的终末宿主在传播弓形虫病的过程中起了关键性作用。为此，猫的弓形虫病检测就显得至关重要。本试验选取弓形虫MIC17A（TgMIC17A），构建pET-28a-MIC17... 详细信息

弓形虫是一种顶复门胞内寄生虫，可感染包括人类在内的大多数温血动物。猫作为弓形虫的终末宿主在传播弓形虫病的过程中起了关键性作用。为此，猫的弓形虫病检测就显得至关重要。本试验选取弓形虫MIC17A（TgMIC17A），构建pET-28a-MIC17A重组质粒，对重组蛋白MIC17A进行诱导表达并通过镍柱纯化，Western blot分析其免疫反应性，将其与实验室前期筛选的ALD混合作为诊断抗原，建立以MIC17A和ALD两种抗原为抗原的具有高敏感性和高特异性的猫弓形虫病间接ELISA方法（MIC17A+ALD iELISA）。通过棋盘法确定抗原最佳包被浓度和血清稀释度，并对反应条件进行优化。该方法敏感性和特异性分别可达75%和100%，经过重复性、特异性试验验证该方法均有较高重复性和特异性。利用该方法与MAT同时检测100份猫田间血清样本，最终检测结果与MAT符合率高达97%。本研究成功建立了一种同时具备高敏感性和高特异性的猫弓形虫病间接ELISA方法，为猫弓形虫病的检测提供了技术支撑。

关键词：弓形虫 MIC17A ALD 间接ELISA

两亲性聚合物分子刷水凝胶的制备及其性能研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

两亲性聚合物分子刷水凝胶的制备及其性能研究

作者：黄思扬华南理工大学

学位级别：硕士

近几年来,人们通过一些策略设计出的水凝胶力学性能可以与人体的组织器官相媲美,这拓宽了其在生物、驱动器和柔性电子设备等领域的应用。然而,这些韧性水凝胶材料通常缺乏像生物软组织材料所展现出在受到较大的应力或应变后可以变得更... 详细信息

近几年来,人们通过一些策略设计出的水凝胶力学性能可以与人体的组织器官相媲美,这拓宽了其在生物、驱动器和柔性电子设备等领域的应用。然而,这些韧性水凝胶材料通常缺乏像生物软组织材料所展现出在受到较大的应力或应变后可以变得更加坚硬的特性即应变硬化行为。目前,在应变硬化行为水凝胶的制备仍存在以下亟需解决的问题:（i）制备工艺复杂。如先前报道利用线型-刷状-线型共聚物设计的应变硬化水凝胶,涉及到复杂的合成路径,制备水凝胶的工艺复杂不适合大批量生产,不利于系统探究分子结构参数对宏观材料力学性能的影响。（ii）具有应变硬化行水凝胶本身并未展现出优异的力学性能,不利于拓展其在各种领域的应用。两亲性聚合物分子刷是将亲疏水性聚合物或小分子无规接枝到聚合物主链上形成的具有一类特殊结构的高分子体系。基于两亲性聚合物分子刷设计的凝胶不仅保持材料应变硬化的特性,同时分子刷侧链含有的疏水部分能够在溶液中缔合,是构建强韧水凝胶体系最常见的策略,具有构筑条件简单等特点。基于此,本论文的研究内容如下:（1）以亲水性降冰片烯-聚乙二醇（NB-PEG）为大分子单体,疏水性降冰片烯-己醇（NB-C）为侧链间隔,两边降冰片烯封端的聚乙二醇作为交联剂,通过开环易位聚合反应一次成型形成两亲性聚合物分子刷凝胶。通过系统调控刷状聚合物的侧链长度、侧链接枝密度以及单体浓度和交联剂含量,研究了结构参数对水凝胶力学性能的影响。通过优化结构参数,刷状聚合物水凝胶具有良好的力学性能（如模量:328 k Pa;断裂应力:648 k Pa;断裂应变:351%;断裂能:450 J/m）。同时,该水凝胶展现出与生物组织类似的应变硬化特性,其侧链密度和成胶浓度对应变硬化特性的影响较大。（2）利用开环易位聚合将NB-PEG与NB-C进行无规共聚得到一种两亲性线型刷状聚合物,将其作为填料添加入聚丙烯酸水凝胶中制备了一种复合水凝胶材料。通过改变刷状聚合物侧链长度以及添加的质量分数,研究其对水凝胶力学性能的影响。该水凝胶不仅具有出色的力学性能（模量:6 k Pa;断裂应力:29 k Pa;断裂应变290%）,而且具有良好的生物组织粘附特性,其粘附能达到35 J/m。猪胃的粘附模拟实验表明刷状聚合物复合聚丙烯酸水凝胶在胃穿孔治疗领域具有较大的应用潜力。

关键词：两亲性聚合物分子刷应变硬化生物组织粘附

肝片吸虫ANN蛋白的表达及其间接ELISA方法的建立与初步应用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2022年第9期52卷 1087-1093页

作者：黄艳丽龚静芝吴云萍黄思扬扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009

从我们前期实验获得的蛋白组学数据中筛选到1个新的诊断靶标Annexin(ANN),并从肝片吸虫cDNA中扩增Ann基因,将其在大肠杆菌中表达,通过亲和层析纯化后,以该重组蛋白为诊断抗原,建立间接ELISA方法,通过棋盘法优化反应条件,并计算其临界值... 详细信息

从我们前期实验获得的蛋白组学数据中筛选到1个新的诊断靶标Annexin(ANN),并从肝片吸虫cDNA中扩增Ann基因,将其在大肠杆菌中表达,通过亲和层析纯化后,以该重组蛋白为诊断抗原,建立间接ELISA方法,通过棋盘法优化反应条件,并计算其临界值,接着使用该ELISA方法检测来自河北省9个地区的312份绵羊血清样本。结果显示,成功获得了rANN蛋白,并成功建立临界值为1.145的间接ELISA方法,该方法的敏感性和特异性分别为95.00%和86.36%,河北这些地区片形吸虫病的平均感染率为43.27%。本实验成功筛选得到了一种新的片形吸虫病诊断靶标ANN,并建立了基于该重组蛋白的间接ELISA方法,该方法可初步用于绵羊片形吸虫病的诊断。

关键词：肝片吸虫病 ANN蛋白间接ELISA 重组蛋白诊断方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

犬埃立克体病原特点及其致病性研究进展

中国畜牧兽医 2023年第5期50卷 2023-2031页

作者：张婧怡陈莉黄思扬陈祥刘宗平仝锡帅扬州大学兽医学院农业科技发展研究院教育部农业与农产品安全国际联合实验室扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州225009

犬埃立克体(Ehrlichia canis,E.canis)引起的传染性疾病对犬或人类生命健康具有严重威胁,其可通过皮肤表面的伤口或节肢动物的叮咬侵入机体,进一步引起机体一系列反应,导致犬埃立克体相关疾病。此外,由犬埃立克体引起的疾病的临床症状... 详细信息

犬埃立克体(Ehrlichia canis,E.canis)引起的传染性疾病对犬或人类生命健康具有严重威胁,其可通过皮肤表面的伤口或节肢动物的叮咬侵入机体,进一步引起机体一系列反应,导致犬埃立克体相关疾病。此外,由犬埃立克体引起的疾病的临床症状与较多疾病的临床症状相似,在快速诊断上带来了一定程度的困难。犬埃立克体为严格的胞内寄生病原体,革兰氏染色为阴性,吉姆萨染色为紫色。目前已能成功分离该病原,并实现体外传代培养。犬埃立克体可诱导宿主细胞自噬,夺取宿主细胞的营养物质利于自身存活和增殖,并可诱导机体发生免疫反应,产生大量致炎因子,引起机体发热和对组织器官造成不同程度的损伤。犬埃立克体存在一种特殊的免疫逃避机制,能避免被宿主溶酶体或其他免疫因子清除,并在巨噬细胞内生长繁殖,破坏宿主细胞内的抗炎因子,进而破坏宿主的免疫功能。然而,犬埃立克体夺取或破坏宿主细胞营养成分或存活的具体机制尚不清楚,且如何逃避宿主免疫系统“追踪”有待研究。治疗方面,犬埃立克体仅对多西环素(doxycycline)等部分抗生素敏感,预防该病的最佳方法仍是定期清除体外寄生虫。笔者对犬埃立克体的病原特性、流行病学、致病机制等主要方面及部分病原与宿主细胞间作用的研究现状进行了综述。

关键词：犬犬埃立克体单核-巨噬细胞致病机制

刚地弓形虫MIC2蛋白的表达及间接ELISA方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2022年

作者：司浣妍张鸿曦毛靖瑀贺何鑫王燕吴云萍龚静芝黄思扬教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

弓形虫病作为一种食源性人兽共患寄生虫病，严重危害公共卫生安全以及畜牧业生产。本实验选取弓形虫微线体蛋白2（TgMIC2）作为新的诊断靶标，构建TgMIC2重组表达质粒，并利用大肠杆菌表达系统进行表达，通过亲和层析纯化后获得重组蛋白...

弓形虫病作为一种食源性人兽共患寄生虫病，严重危害公共卫生安全以及畜牧业生产。本实验选取弓形虫微线体蛋白2（TgMIC2）作为新的诊断靶标，构建TgMIC2重组表达质粒，并利用大肠杆菌表达系统进行表达，通过亲和层析纯化后获得重组蛋白，Western Blot检测该蛋白的免疫反应性，棋盘法确定最佳抗原包被量和血清稀释度，优化反应条件后，成功建立基于重组MIC2蛋白的猫弓形虫病间接ELISA（iELISA）方法，并通过重复性、敏感性、特异性实验评价该方法，并对田间样品进行检测。结果显示，抗原最佳包被量为0.5 μg/孔，血清稀释度为1:100，临界值为0.7130时，该方法的敏感性为81.25%，特异性为100%。批内与批间重复变异系数均低于或在10%左右，具有良好的重复性；与猫沙门氏菌和猫细小病毒阳性血清均无交叉反应，特异性好。使用MIC2-iELISA方法和弓形虫全裂解抗原（TLA）建立的iELISA方法检测扬州地区的48份田间猫血清样本，符合率为93.75%。本研究基于重组MIC2蛋白建立了一种新的间接ELISA方法，该方法可初步用于猫弓形虫病的诊断。

关键词：

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

弓形虫病诊断研究进展

中国动物传染病学报 2023年第2期31卷 211-222页

作者：吴云萍祭天锴白邵缘龚静芝姚娜黄思扬扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州225009

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人兽共患寄生虫病,危害严重且分布广泛,目前尚未有理想的防治药物。因此,及时准确的诊断对于防治弓形虫病尤为重要。本文主要从常用的检测方法,即病原学检测、血清... 详细信息

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人兽共患寄生虫病,危害严重且分布广泛,目前尚未有理想的防治药物。因此,及时准确的诊断对于防治弓形虫病尤为重要。本文主要从常用的检测方法,即病原学检测、血清学检测及分子生物学检测等进行论述,介绍了各类方法的研究现状及应用情况,分析了各种技术的优点与局限性,并结合近年来最新研发的诊断方法,希望为动物弓形虫检测方法的发展和研究提供参考。

关键词：弓形虫弓形虫病诊断防控