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左归丸调控FNDC5治疗绝经后骨质疏松症的作用及机制研究

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左归丸调控FNDC5治疗绝经后骨质疏松症的作用及机制研究

作者：黄展辉广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:1、体内实验探讨左归丸在治疗野生型小鼠和基因FNDC5敲除(KO)小鼠在卵巢切除(OVX)术后骨质疏松的差异,并探讨左归丸调控FNDC5治疗绝经后期骨质疏松症(PMOP)的作用机制。2、体外实验验证左归丸调控FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路促进MC... 详细信息

目的:1、体内实验探讨左归丸在治疗野生型小鼠和基因FNDC5敲除(KO)小鼠在卵巢切除(OVX)术后骨质疏松的差异,并探讨左归丸调控FNDC5治疗绝经后期骨质疏松症(PMOP)的作用机制。2、体外实验验证左归丸调控FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路促进MC3T3-E1成骨分化。方法:1.通过两侧卵巢完全切除方式建立野生型小鼠和KO小鼠的OVX模型。将两种小鼠分别随机分组为野生型对照组、野生型OVX组、野生型治疗组、KO对照组、KO-OVX组、KO治疗组。治疗组进行左归丸水提液灌胃,其余四组予等量的生理盐水。末次灌胃后一周进行取材。检测各组小鼠股骨骨密度(BMD);H&E染色股骨切片;ELISA检测血清雌二醇(E2)、小鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)、Irisin含量;实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测 FNDC5、Runx2、OPN、OSX、OCN mRNA 的表达,Western Blot 检测 FNDC5、Wnt3a、β-catenin 蛋白表达。2.制备低、中、高剂量左归丸含药血清。使用含2种不同序列(siA,siB)的siRNA对MC3T3-E1进行FNDC5转染,检测FNDC5的mRNA和蛋白表达,选择合适的转染序列进行后续实验。分组为空白对照组(Con组)、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、中、高浓度组;对培养的MC3T3-E1细胞进行FNDC5转染后成骨诱导,分为Con组、OGI+转染组、OGI+转染+左归丸低、中、高浓度组。收集诱导第5,7,14天的细胞上清检测碱性磷酸酶(ALP)活性,取第7天的细胞进行细胞ALP染色。取诱导第14天细胞进行RT-qPCR检测FNDC5、Runx2、OSX、OCN、Wnt3a 和 β-catenin 的 mRNA 表达。结果:1.体内实验(1)OVX术后小鼠BMD均出现了下降,与野生型OVX组相比野生型治疗组BMD显著上升,而KO治疗组和KO-OVX组之间无差异。(2)H&E染色显示野生型OVX组和KO-OVX组的股骨骨小梁出现稀疏变细,结构断裂,连续性差,间距变宽。相较于野生型OVX组,野生型治疗组的股骨骨小梁面积变宽,结构较为完整、连续性改善,间距变小。相较于KO-OVX组,KO治疗组的小鼠无明显改善。(3)小鼠血清ELISA检测显示OVX术后小鼠的血清E2、PINP、Irisin含量下降,左归丸改善了 OVX后的野生型小鼠E2、PINP、Irisin含量的下降,而三组KO小鼠的Irisin含量始终保持低水平,KO治疗组相较KO-OVX组E2、PNIP含量无差异。(4)在mRNA表达上,对比野生型对照组,野生型OVX组和KO对照组FNDC5、Runx2、OSX、OCN表达显著下降,野生型OVX组中OPN显著上升。对比KO对照组,KO-OVX 组 FNDC5、Runx2、OSX、OCN 的 mRNA 表达显著下降,OPN 显著上升。野生型治疗组FNDC5、Runx2、OSX、OCN相较野生型OVX组显著升高,OPN显著上升,而KO-OVX组和KO治疗组无明显差异。(5)对比野生型对照组,野生型OVX组FNDC5、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达显著下降;KO对照组β-catenin及FNDC5蛋白表达显著下降。对比KO对照组,KO-OVX组FNDC5、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达显著下降。对比野生型OVX组,野生型治疗组FNDC5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达显著升高。2.体外实验(1)在siRNA转染实验中,siB组FNDC5的mRNA和蛋白表达显著下降。(2)细胞上清ALP检测中除了 Con组外,其余各组的ALP含量都随着成骨诱导的时间而增加,且OGI组、OGI-ZL、OGI-ZM增加幅度较大。(3)细胞ALP染色中,OGI-ZL、OGI-ZM 组 ALP 阳性蓝染区面积较大,OGI-ZH、siOGI 组、siOGI-ZL组、siOGI-ZM组和siOGI-ZH的细胞ALP阳性蓝染区面积较少。(4)在FNDC5 mRNA表达上,与Con组相比,OGI组无显著差异;与OGI组相比,OGI-ZL组、OGI-ZM组FNDC5表达显著上升,siOGI组显著降低;与siOGI组相比,siOGI-ZL组和siOGI-ZM组的表达也显著增加。在Runx2、OSX、OCN mRNA上,与Con组相比,OGI组Runx2、OSX和OCN都显著增加;与OGI组相比,OGI-ZL组和OGI-ZM组中的Runx2、OSX和OCN显著增加,siOGI组中的Runx2和OSX显著降低,而OCN呈现下降趋势但无显著差异;与siOGI相比较,siOGI-ZL组中的OSX和siOGI-ZM组中的Runx2显

关键词： FNDC5 左归丸绝经后骨质疏松症 Wnt3a β-catenin

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数据仓库元数据管理研究

福建电脑 2010年第1期26卷 53-54页

作者：黄展辉项颖广东工业大学信息工程学院广东广州510006

元数据管理是基于决策支持的数据仓库技术研究的重点与难点之一。本文首先对数据仓库中元数据的定义,分类,作用和生命周期进行了探讨,其次对典型的数据仓库元数据管理架构进行深入研究,并提出了一种基于信息供应链(ISC)的双向联邦式的... 详细信息

元数据管理是基于决策支持的数据仓库技术研究的重点与难点之一。本文首先对数据仓库中元数据的定义,分类,作用和生命周期进行了探讨,其次对典型的数据仓库元数据管理架构进行深入研究,并提出了一种基于信息供应链(ISC)的双向联邦式的元数据管理架构。最后,指出了数据仓库元数据管理的未来研究方向。

关键词：数据仓库元数据元数据管理架构

川芎嗪通过FNDC5治疗小鼠急性心肌缺血的作用研究

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中药材 2023年第8期46卷 2044-2050页

作者：冯艺昕黄展辉李植书冯泓锐周季青丁富平张进广州中医药大学中西医结合基础研究中心广东广州510006 广州中医药大学护理学院广东广州510006

目的:研究FNDC5基因敲除对急性心肌缺血小鼠的影响并探讨川芎嗪对FNDC5基因敲除小鼠(FNDC5-/-)急性心肌缺血的治疗作用。方法:将45只野生型小鼠和45只FNDC5-/-小鼠随机分为野生型正常对照组、野生型模型组、野生型川芎嗪组、FNDC5-/-正... 详细信息

目的:研究FNDC5基因敲除对急性心肌缺血小鼠的影响并探讨川芎嗪对FNDC5基因敲除小鼠(FNDC5-/-)急性心肌缺血的治疗作用。方法:将45只野生型小鼠和45只FNDC5-/-小鼠随机分为野生型正常对照组、野生型模型组、野生型川芎嗪组、FNDC5-/-正常对照组、FNDC5-/-模型组、FNDC5-/-川芎嗪组,通过对小鼠皮下注射异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌缺血模型并用川芎嗪进行治疗。造模结束后记录小鼠心电图,测定血清LDH、CK-MB、SOD、MDA、Irisin水平,计算小鼠HM/TL、HM/BM;通过HE和Masson染色确定心肌组织病理学变化,QPCR检测FNDC5、TGF-β1、FN1、COL3A1、COL1A1 mRNA表达。结果:与相应正常对照组比较,模型组小鼠心肌组织可见明显的梗死、炎性浸润及纤维化,心肌组织FNDC5 mRNA表达及血清Irisin水平显著降低,ST段偏移值、HM/BM、HM/TL及血清CK-MB、LDH水平显著升高(P<0.05~P<0.001)。与相应模型组比较,川芎嗪组小鼠心肌组织梗死、炎性浸润及纤维化明显改善,心肌组织FNDC5 mRNA表达及血清Irisin水平显著升高,ST段偏移值显著降低,野生型川芎嗪组小鼠HM/BM、HM/TL及血清CK-MB、LDH、MDA水平和心肌组织TGF-β1、FN1、COL1A1、COL3A1 mRNA表达显著降低,血清SOD水平显著升高(P<0.05~P<0.001)。与野生型模型组比较,FNDC5-/-模型组小鼠心肌组织FNDC5 mRNA表达及血清Irisin水平显著降低,ST段偏移值、HM/BM、HM/TL及血清CK-MB、LDH水平显著升高(P<0.05~P<0.001)。结论:FNDC5基因敲除会加重小鼠急性心肌缺血损伤,FNDC5可能是川芎嗪治疗急性心肌缺血损伤的重要途径。

关键词： FNDC5 川芎嗪心肌缺血心肌纤维化氧化应激

左归丸通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗绝经后骨质疏松症的机制研究

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中国骨质疏松杂志 2023年第8期29卷 1147-1153页

作者：黄展辉魏其鹏梁炜瑜周季青丁富平张进广州中医药大学中西医结合基础研究中心广东广州510006 广州中医药大学广东广州510006 广州中医药大学护理学院广东广州510006

目的对左归丸治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制进行研究。方法通过体外实验制备左归丸低、中、高剂量对应的含药血清,对培养的MC3T3-E1进行药物干预,分为空白对照组、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、... 详细信息

目的对左归丸治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制进行研究。方法通过体外实验制备左归丸低、中、高剂量对应的含药血清,对培养的MC3T3-E1进行药物干预,分为空白对照组、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、中、高浓度组;对培养的MC3T3-E1细胞进行FNDC5转染后成骨诱导,分为空白对照组、OGI+转染组、OGI+转染+左归丸低、中、高浓度组。对上述细胞培养液进行ALP活力检测及染色。在体内实验中将野生型小鼠随机分为野生型对照组、野生型卵巢切除(OVX)组、野生型治疗组,将FNDC5基因敲除(KO)小鼠随机分为KO对照组、KO-OVX组、KO治疗组,采用OVX方式造模,给予治疗组小鼠灌胃左归丸12周。12周灌胃结束后检测各组股骨骨密度(bone mineral density,BMD),HE染色股骨切片,ELISA检测血清E2、PINP、Irisin含量,实时荧光定量PCR检测FNDC5、Runx2、OPN、OCN、OSX mRNA表达,Western Blot检测FNDC5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达。结果左归丸含药血清增加了MC3T3-E1的ALP表达,FNDC5转染后ALP表达下降;左归丸可以显著改善野生型小鼠OVX术后导致的BMD降低及股骨骨小梁损害,缓解E2、PINP、Irisin表达降低,而对于KO小鼠无显著差异;左归丸抑制了OPN的表达,提高了Runx2、OSX、OCN的mRNA表达。对比KO-OVX组,KO治疗组的OPN、Runx2、OSX、OCN等均没有明显差异。左归丸可以上调Wnt3a和β-catenin的表达,当FNDC5被敲除后这种上调效果被显著抑制。结论左归丸可能通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗PMOP。

关键词：左归丸 FNDC5通路绝经后骨质疏松症 Wnt3a/β-catenin通路

^(131)I治疗甲亢合并低钾性周期性麻痹31例临床分析

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福建医药杂志 2019年第2期41卷 65-67页

作者：黄展辉高荣光郭晶晶中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院核医学科福州350025 福建医科大学附属协和医院超声科

目的分析甲亢合并低钾性周期性麻痹(TPP)的临床特点,探讨^(131)I治疗该疾病的临床价值。方法对我院确诊为TPP的患者31例进行回顾性分析。其中17例患者(A组)根据公式计算法口服^(131)碘化钠溶液治疗;其余14例患者(B组)给予甲巯咪唑治疗;... 详细信息

目的分析甲亢合并低钾性周期性麻痹(TPP)的临床特点,探讨^(131)I治疗该疾病的临床价值。方法对我院确诊为TPP的患者31例进行回顾性分析。其中17例患者(A组)根据公式计算法口服^(131)碘化钠溶液治疗;其余14例患者(B组)给予甲巯咪唑治疗;定期复查甲状腺功能,测定血钾并关注患者低钾性周期性麻痹的恢复情况。所有患者均予口服补充氯化钾;对血钾低于3.2 mmol/L的患者另加静脉补钾。结果所有患者经补钾治疗后血钾均恢复正常,肌无力症状缓解,四肢肌力均恢复至5级。随访2年,A组患者甲亢治疗后显效13例,有效3例,无效1例(总有效率94.1%),低钾性周期性麻痹症状复发者2例(复发率11.8%)。B组患者甲亢治疗后显效4例,有效4例,无效6例(总有效率42.9%),低钾性周期性麻痹症状复发6例(复发率42.9%)。结论 TPP发病主要是由甲状腺激素升高引起,补钾治疗的同时应积极治疗甲状腺功能亢进。^(131)I治疗TPP方法简单,安全有效,治愈时间短,治愈率高,副作用小,且不易复发,可作为该疾病首选治疗方法。

关键词： 131I 甲状腺功能亢进低钾周期性麻痹

从PGC1-α/FNDC5/UCP1信号通路探讨淫羊藿苷对FNDC5基因敲除小鼠脂代谢的影响

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时珍国医国药 2022年第4期33卷 850-853页

作者：许世超冯艺昕黄展辉唐佩华李植书冯泓锐苏晴黄进丁富平张进广州中医药大学中西医结合基础研究中心广东广州511400

目的探究淫羊藿苷(ICA)调控PGC1-α/FNDC5/UCP1信号通路对FNDC5基因敲除模型(KO)中老年小鼠脂代谢的影响。方法50周龄野生型(WT)和KO小鼠随机分成4组:对照组、淫羊藿苷组(40mg·kg^(-1)·d^(-1))、KO模型组、KO淫羊藿苷组(40mg·kg^(-1)... 详细信息

目的探究淫羊藿苷(ICA)调控PGC1-α/FNDC5/UCP1信号通路对FNDC5基因敲除模型(KO)中老年小鼠脂代谢的影响。方法50周龄野生型(WT)和KO小鼠随机分成4组:对照组、淫羊藿苷组(40mg·kg^(-1)·d^(-1))、KO模型组、KO淫羊藿苷组(40mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续灌胃给药21天后处死。分离血清与腹股沟白色脂肪,检测血清甘油三酯(total triglyceride,TG)与总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,通过苏木素伊红染色((hematoxylin-eosin staining,H&E)染色和UCP1免疫组化检测淫羊藿苷对白色脂肪组织的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PGC1-α、FNDC5、UCP1 mRNA与蛋白水平。结果与对照组相比,KO模型组体重,皮下白色脂肪积聚程度,血清TC均显著增加,PGC1-α,FNDC5,UCP1mRNA和蛋白水平均显著降低;淫羊藿苷组体重,皮下白色脂肪积聚程度,血清TC均显著降低,PGC1-α,FNDC5,UCP1mRNA和蛋白水平均显著增加。与KO模型组相比,KO淫羊藿苷组以上指标均无显著变化。结论淫羊藿苷可能主要通过PGC1-α/FNDC5/UCP1信号通路促进白色脂肪的棕色化,从而发挥减脂减重效果。

关键词：淫羊藿苷 PGC1-α FNDC5 UCP1 基因敲除白色脂肪

肿瘤患者骨外软组织异常摄取骨显像剂的临床意义分析

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中国医疗设备 2016年第B12期31卷 190-191页

作者：高荣光陈贞春黄展辉吴泽南福州总医院核医学科福建福州350025

探讨骨外软组织异常摄取骨显像剂的临床意义.方法将４００例骨外软组织异常摄取９９mTc－MDP的骨扫描与CT和MRI成像结果进行比较.分析骨外软组织对９９mTc－MDP摄取的临床意义.结果５７例患者被诊断为肺癌,其中２１例为弥漫性摄取,３... 详细信息

探讨骨外软组织异常摄取骨显像剂的临床意义.方法将４００例骨外软组织异常摄取９９mTc－MDP的骨扫描与CT和MRI成像结果进行比较.分析骨外软组织对９９mTc－MDP摄取的临床意义.结果５７例患者被诊断为肺癌,其中２１例为弥漫性摄取,３６例为局部吸收,１１例为转移性乳腺癌,１１例为肺部错构瘤,炎症假性肿瘤,２例原发性乳腺癌和乳腺癌复发,２例鼻咽癌,１例肾癌.骨显像剂异常肿瘤摄取率为７０％,摄入部位以肺,胸部为主.结论９９mTc－MDP骨显像剂在骨和软组织中的异常摄取在原发性和转移性癌中是常见的,其分析具有临床意义.

关键词：肿瘤患者软组织摄取放射性核素显像

阿立哌唑联合氨磺必利治疗首发精神分裂症的临床效果

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临床合理用药杂志 2022年第16期15卷 5-8页

作者：袁志彪黄展辉杜斯瑜广东省惠州市第二人民医院精神科 516000

目的观察阿立哌唑联合氨磺必利治疗首发精神分裂症的临床效果。方法回顾性选取2019年9月—2021年3月广东省惠州市第二人民医院收治的首发精神分裂症患者60例,根据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组30例。2组患者均接受常规治疗,在此... 详细信息

目的观察阿立哌唑联合氨磺必利治疗首发精神分裂症的临床效果。方法回顾性选取2019年9月—2021年3月广东省惠州市第二人民医院收治的首发精神分裂症患者60例,根据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组30例。2组患者均接受常规治疗,在此基础上,对照组采用氨磺必利治疗,观察组采用阿立哌唑联合氨磺必利治疗,1周为1个疗程,2组均治疗8个疗程。比较2组患者临床疗效、治疗前后阳性和阴性症状量表(PANSS)评分、血清催乳素(PRL)、瘦素水平及不良反应。结果观察组患者总有效率为93.33%,高于对照组的70.00%(χ^(2)=4.630,P=0.031);治疗后,2组患者阳性症状、阴性症状、一般精神药理、总评分均低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.05),对照组患者治疗后瘦素水平高于治疗前及观察组(P<0.01);2组患者不良反应总发生率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.131,P=0.718)。结论阿立哌唑联合氨磺必利治疗首发精神分裂症可获得更满意的效果,降低患者血清PRL水平,且安全性良好,值得临床推广与应用。

关键词：精神分裂症阿立哌唑氨磺必利临床效果

^(99m)Tc-MIBI及^(99m)Tc-GH联合肺癌三维立体显像研究

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福州总医院学报 2010年第2期17卷 79-81页

作者：高瞻邱贵华高荣光黄镐叶玲黄展辉赖国祥福州总医院核医学科福州总医院呼吸科

目的:观察^(99m)Tc-MIBI及^(99m)Tc-GH联合三维立体显像对肺癌患者的临床应用价值。方法:对48例肺占位病变的患者,采用PHILIPS公司FORTE-AZ SPECT仪进行采集,配以低能高分辨准直器,均分别行^(99m)Tc-MIBI及^(99m)Tc-GH早期和延迟肺显像... 详细信息

目的:观察^(99m)Tc-MIBI及^(99m)Tc-GH联合三维立体显像对肺癌患者的临床应用价值。方法:对48例肺占位病变的患者,采用PHILIPS公司FORTE-AZ SPECT仪进行采集,配以低能高分辨准直器,均分别行^(99m)Tc-MIBI及^(99m)Tc-GH早期和延迟肺显像。断层采集矩阵64×64,每帧40s,zoom1.5,采集64帧,获得三维影像并进行三维动态显示;同时,测定病变靶/非靶摄取比值和肿瘤滞留指数。结果:研究结果表明,三维显示对诊断肺部恶性病变优于平面显像法,^(99m)Tc-MIBI显像的灵敏度89.5%,特异性90.0%,准确率89.6%;^(99m)Tc-GH显像灵敏度86.8%,特异性80.0%,准确率85.4%;两种显像方法具有互补性。肺良性病变患者早期及延迟显像的病变靶/非靶摄取比值分别≤1.14±0.02和1.06±0.13,肿瘤滞留指数1。肺癌化、放疗后早期显像和延迟显像的病变靶/非靶摄取比值和肿瘤滞留指数均明显低于治疗前的相应值。结论:^(99m)Tc-MIBI三维立体显像法可提高肺癌阳性显像的分辨力,更好地进行空间定位,提高肺癌原发病灶及其在相邻的部位转移灶检出率,是一项实用性较强的肺癌辅助检查手段。同时也是监测肺癌复发与评价肺癌治疗效果的有效方法。

关键词：肺肿瘤 ^99mTc-MIBI ^99mTC-GH 放射性核素显像