检索结果-南通市图书馆

作者：黄增文石河子大学

学位级别：硕士

抑制素(inhibin,INH)又称卵泡抑制素或性腺抑制素,是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌产生的糖蛋白质激素,由一个α亚基和一个β亚基通过二硫键构成,其中抑制素α亚基(INHα)是抑制素发挥生理功能必不可少的。抑制素主要生理... 详细信息

抑制素(inhibin,INH)又称卵泡抑制素或性腺抑制素,是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌产生的糖蛋白质激素,由一个α亚基和一个β亚基通过二硫键构成,其中抑制素α亚基(INHα)是抑制素发挥生理功能必不可少的。抑制素主要生理功能是抑制促卵泡素(FSH)的释放,对雌性动物主要表现为调节卵泡的生成,增加成熟的优势卵泡数量;对雄性动物主要表现为促进精子的发生,提高睾丸的生精能力;还对雌雄动物共同表现为促使性成熟提前。因此,可通过调节抑制素α亚基基因在机体内的表达量,降低体内抑制素水平,促进卵泡发育和精子的生成,最终提高动物的繁殖力。目前主要通过两种途径降低动物体内抑制素的水平,其一是通过对动物进行主动或被动免疫抑制素原来使得机体内抑制素抗体含量增加,中和动物体内所分泌的抑制素,从而降低动物机体内的抑制素水平;其二是通过RNA干扰技术下调抑制素α亚基基因m RNA水平上的表达,最终致使动物机体内所分泌抑制素的量相对减少,降低在动物体内的抑制素水平。本研究运用了生物信息学技术、基因克隆技术、蛋白质分析技术、基因免疫技术等以新疆塔城地区也木勒白羊卵泡抑制素α亚基作为选择基因,对目的基因主要进行以下几方面的研究试验:1、也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因的克隆及序列分析为了克隆和序列分析也木勒白羊抑制素α亚基基因,根据Gen Bank检索到的INHα亚基基因序列(Gen Bank号:XM04004955.1)设计一对特异性引物,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织为研究对象,从中快速抽提总RNA作为模板。利用基因克隆技术和现代生物技术对也木勒白羊INHαc DNA进行克隆和测序及序列分析。测序及分析结果:也木勒白羊抑制素基因全长为1109bp,其中只含有1083bp组成开放阅读框(ORF),其起始密码子为ATG,终止密码子为TAA,含完整的抑制素α亚基亚基序列编码区,共编码360个氨基酸残基。将所得序列提交到Gen Bank,获得登录号:KP-113678。2、也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因真核表达载体的构建对也木勒白羊抑制素α亚基基因进行克隆和序列分析的基础上,采用定向克隆技术,构建也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因与绿色荧光蛋白基因融合表达载体p EGFP-INHα,并对所构建的真核表达载体p EGFP-INHα,运用菌液PCR、双酶切、测序、BHK-21细胞瞬转及蛋白表达等试验进行鉴定。结果:本次试验成功构建了含也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因的绿色荧光真核表达载体(p EGFP-INHα),并在BHK-21细胞中获得了分泌型表达,转染率高达70%以上。检测到的该基因蛋白表达分子量约为40KD,该载体的构建为抑制素基因疫苗的研制奠定了一定基础。3、也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因疫苗对家兔生殖激素的影响为了初步研究构建的也木勒白羊卵泡抑制素α亚基绿色荧光真核表达载体(p EGFP-INHα)的免疫原性,在本实验中根据基因免疫技术,以成功制备的抑制素重组质粒p EGFP-INHα为免疫原,对30只家兔进行基因免疫试验,应用酶联免疫法(ELISA)检测抗抑制素抗体,放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中部分生殖激素水平。结果:重组质粒p EGFP-INHα免疫家兔后,各实验组抗体滴度均显著高于对照组(P<0.05),且在第2次加强免疫后抗体水平明显上升。首次免疫后,促卵泡素(FSH)和雌二醇(E2)平均含量均高于对照组,且在第2次加强免疫阶段差异显著(P<0.05),但在两次免疫前后促黄体素(LH)均无明显变化。这些结果表明:抑制素基因免疫家兔可降低抑制素的含量,促进FSH和E2分泌,进而影响动物卵泡发育和诱导动物多产。4、也木勒白羊卵泡抑制素α亚基基因靶向Si RNA真核表达载体的构建为了构建也木勒白羊抑制素α亚基基因靶向Si RNA真核表达载体,根据本课题上传至Gen Bank的INHα基因序列(Gen Bank号:KP-113678.1)设计3个不同位点的干扰片段,利用RNAi技术和实验室常规方法将3个干扰片段同时连接到同一个小RNA专用真核表达载体中,并对其进行相关检测、鉴定及干扰效率评价。结果:干扰表达质粒能在绵羊颗粒细胞中成功表达,且转染率在60%左右,通过Q-PCR和蛋白表达试验,发现试验组与对照组相比,试验组沉默效率达83%。

关键词：抑制素真核表达载体基因疫苗免疫 SiRNA

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升学加试体育是教育改革的需要

体育师友 1989年第4期12卷 41-42页

作者：黄增文

升学加试体育作为教育改革的内容有其重要的意义: 1.国家的教育方针明确地指出:“要把学生培养成为德智体全面发展、有社会主义觉悟,有文化的劳动者”。就是要求普通中学要培养造就全面发展的四化建设人才。 2.当前仍有片面追求升学率... 详细信息

升学加试体育作为教育改革的内容有其重要的意义: 1.国家的教育方针明确地指出:“要把学生培养成为德智体全面发展、有社会主义觉悟,有文化的劳动者”。就是要求普通中学要培养造就全面发展的四化建设人才。 2.当前仍有片面追求升学率的倾向。只重视文化课的学习,忽视了全面贯彻党的教育方针。以至使体育教师队伍存在量少德差的现象,学校体育场地器材建设远远来能完善,有些学校甚至严重不足。学生的课外活动常常被挤占,早操变成早读课。晚上晚自习、星期日加班辅导,为了升学考试而不惜牺牲学生的健康。

关键词：教育改革德智体全面发展升学考试存在量片面追求升学率素质分析教学场地引体向上不合格立定跳远

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高层建筑框支剪力墙结构设计实例

福建建材 2013年第8期 44-45,47页

作者：黄增文福建联盛建筑设计院有限公司福建福州350011

高层建筑转换层上的不落地抗震墙,占该层总抗震墙的比例很小,一般仅在10%左右。由于转换层上下侧移刚度基本相同,这使得它们的一些特性更加接近抗震墙结构。这种介于抗震规范所讲的抗震墙结构和部分框支抗震墙结构之间的结构形式称为局... 详细信息

高层建筑转换层上的不落地抗震墙,占该层总抗震墙的比例很小,一般仅在10%左右。由于转换层上下侧移刚度基本相同,这使得它们的一些特性更加接近抗震墙结构。这种介于抗震规范所讲的抗震墙结构和部分框支抗震墙结构之间的结构形式称为局部框支抗震墙结构。本文介绍的是一个框支剪力墙结构的设计实例,具体探讨此类建筑结构的抗震设计。

关键词：高层建筑框支剪力墙结构计算分析抗震设计

寻求教育与体育两个部门为共同培养体育后备人才的最佳结合

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体育师友 1991年第1期14卷 45-46页

作者：黄增文江门市教育局体卫科

江门市位于珠江三角洲西沿,下辖五县两区、是全国著名侨乡之一。人口340万,面积约80万平方公里。江门市体育有着“体操之城”美誉、曾培养出不少世界冠军,江门市队员代表国家从76年至1984年参加第二至第六届世界中学生体操锦标赛、夺取... 详细信息

江门市位于珠江三角洲西沿,下辖五县两区、是全国著名侨乡之一。人口340万,面积约80万平方公里。江门市体育有着“体操之城”美誉、曾培养出不少世界冠军,江门市队员代表国家从76年至1984年参加第二至第六届世界中学生体操锦标赛、夺取金牌31枚。多次取得男、女子团体冠军。江门曾赞誉为世界体操冠军的“摇篮”。台山县素有“排球之乡”、“全国排球半台山”的美誉。江门体校也曾培养输送出国家女子篮球主力队员洗丽清、国家男篮青年队员李卓民、他们均以灵活、快速多变准确的风格风靡全国。江门也曾培养出田径好手。著名跳远纪录创造者黄智梧、女子亚洲跳远冠军新会县的黄东活,第五届全国运动会上。

关键词：体育后备人才女子篮球女子团体主力队员台山县丽清二至训练水平体育事业世界纪录

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前进中的恩平市学校体育

体育师友 1999年第4期22卷 45-46页

作者：梁华林黄增文江门市教育局

恩平市位于江门市的西南部,与阳江市接壤,广湛线国道横贯恩平,交通颇为方便。近年来由于受到多方面的影响,去年又遭到百年一遇的特大洪涝的灾害,所以恩平市的经济状况一直不见好转。有的镇教师的工资也长期拖欠,就在这样的经济不佳的环... 详细信息

恩平市位于江门市的西南部,与阳江市接壤,广湛线国道横贯恩平,交通颇为方便。近年来由于受到多方面的影响,去年又遭到百年一遇的特大洪涝的灾害,所以恩平市的经济状况一直不见好转。有的镇教师的工资也长期拖欠,就在这样的经济不佳的环境下,学校的体育工作,依然保持着生机勃勃、欣欣向荣的景象。为全面推进素质教育,寻找突破口。去年底,江门市在恩平市召开了学校体育工作现场会,恩平市为学校如何开展体育改革工作提供了宝贵的经验。

关键词：学校体育学校体育工作体育改革江门市全面推进素质教育特大洪涝经济状况阳江市突破口西南部

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山羊五种常见疫病的防控措施

兽医导刊 2016年第22期 90-91页

作者：潘光生黄增文四川省达州市达川区石梯畜牧兽医站四川达州 635000 四川省达州市达川区畜牧食品局四川达州635000

今冬受拉尼娜气候影响，可能导致使山羊常见疾病发生较多，为防患未然，本文就山羊五种常见病的症状及防控措施作以下建议。

关键词：山羊疫病症状措施

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也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达

中国畜牧兽医 2015年第6期42卷 1340-1347页

作者：黄增文木尔扎提吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832003

为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,... 详细信息

为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。

关键词：也木勒白羊卵泡抑制素真核表达同源性分析

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也木勒白羊INHα基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

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中国畜牧杂志 2015年第11期51卷 74-77页

作者：黄增文阿曼太木尔扎提吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 四川省达川区畜牧食品局四川达州635000

实验旨在验证INHα基因真核表达载体的表达、纯化以及多克隆抗体的制备。利用基因重组技术构建也木勒白羊INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα),并将质粒(pEGFP-INHα)作为抗原免疫,制备抗INHα的多克隆抗体。结果表明:成功构建了INH... 详细信息

实验旨在验证INHα基因真核表达载体的表达、纯化以及多克隆抗体的制备。利用基因重组技术构建也木勒白羊INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα),并将质粒(pEGFP-INHα)作为抗原免疫,制备抗INHα的多克隆抗体。结果表明:成功构建了INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα);该抗体能特异性地与INHα的抗原以及卵巢组织产生明显免疫亲和反应,说明(pEGFP-INHα)能够有效提高家兔的排卵率。本研究建立了高效稳定的INHα真核表达系统,获得具有生物学活性的蛋白,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。

关键词： INHα基因真核表达载体多克隆抗体也木勒白羊

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关于ISO 标准磁轭法检测焊缝的探讨

广东造船 2023年第5期42卷 96-99页

作者：张国林黄增文招商局重工(深圳)有限公司深圳518054

本文基于ISO标准磁轭法检测技术在修造船厂的应用,结合笔者的现场经验,分别对磁极间距、有效磁化区域、系统灵敏度验证、有效磁化区域的重叠、固定长度焊缝的最少磁化次数作了详细阐述,列举了现场磁轭检测技术存在的一些不合理做法,并... 详细信息

本文基于ISO标准磁轭法检测技术在修造船厂的应用,结合笔者的现场经验,分别对磁极间距、有效磁化区域、系统灵敏度验证、有效磁化区域的重叠、固定长度焊缝的最少磁化次数作了详细阐述,列举了现场磁轭检测技术存在的一些不合理做法,并对其进行纠正,对于磁轭法检测焊缝的操作具有现实的指导意义。

关键词： ISO标准磁轭磁粉检测技术焊缝