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苯丙氨酸生物合成关键酶基因pheA与aroF协同表达

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食品工业科技 2012年第2期33卷 210-213页

作者：芦佳黄坤央赵越徐琪寿郭军黄英武内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018 郑州大学药学院河南郑州450001 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 中国人民解放军306医院中心实验室北京100101

目的:优化L-苯丙氨酸生物合成通路上的关键酶基因pheA、aroF的蛋白表达,构建高产L-苯丙氨酸的工程菌株。方法:通过设计酶基因的间隔调控序列,分别构建重组质粒pZE12-RBS-AF和pZE12-AF,SDS-PAGE观察蛋白表达量,转入营养缺陷菌MGΔ中构建... 详细信息

目的:优化L-苯丙氨酸生物合成通路上的关键酶基因pheA、aroF的蛋白表达,构建高产L-苯丙氨酸的工程菌株。方法:通过设计酶基因的间隔调控序列,分别构建重组质粒pZE12-RBS-AF和pZE12-AF,SDS-PAGE观察蛋白表达量,转入营养缺陷菌MGΔ中构建工程菌,并发酵培养。结果:工程菌MGΔpZE12-AF苯丙氨酸的产量比工程菌MGΔpZE12-RBS-AF高1倍,实现了L-苯丙氨酸生物合成关键酶基因pheA和aroF协同,匹配表达。结论:调整串联酶基因之间的间隔调控序列可实现苯丙氨酸合成酶基因的协同表达,提供了一种新的提高苯丙氨酸工程菌产量的方法。

关键词： L-苯丙氨酸间隔调控序列协同表达

产L-苯丙氨酸工程菌的构建及不同碳源对其产量的影响

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军事医学 2012年第2期36卷 124-127页

作者：黄坤央芦佳赵越徐琪寿黄英武郑州大学药学院郑州450001 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 内蒙古农业大学食品科学与工程学院呼和浩特010018 解放军306医院中心实验室北京10010

目的构建L-苯丙氨酸高产工程菌株,并比较甘油和葡萄糖两种碳源对工程菌产L-苯丙氨酸的影响。方法 PCR克隆glpK基因,改变其核糖体结合位点(RBS)序列,分别与载体pZE12-AF连接,得到pZE12-AF-RBSⅠ-glpK和pZE12-AF-RBSⅡ-glpK两个重组质粒,... 详细信息

目的构建L-苯丙氨酸高产工程菌株,并比较甘油和葡萄糖两种碳源对工程菌产L-苯丙氨酸的影响。方法 PCR克隆glpK基因,改变其核糖体结合位点(RBS)序列,分别与载体pZE12-AF连接,得到pZE12-AF-RBSⅠ-glpK和pZE12-AF-RBSⅡ-glpK两个重组质粒,再将它们分别导入*** MG△观察其SDS-PAGE蛋白电泳;采用HPLC法检测在不同碳源中L-苯丙氨酸的产量。结果工程菌*** MG△pZE12-AF-RBSⅠ-glpK中甘油激酶表达量较工程菌*** MG△pZE12-AF-RBSⅡ-glpK有所提高;以甘油为碳源时,工程菌*** MG△pZE12-AF-RBSⅡ-glpK的L-苯丙氨酸产量分别是工程菌*** MG△pZE12-AF-RBSⅠ-glpK的14.16倍,工程菌*** MG△pZE12-AF的3.18倍,*** MG△的63.31倍。以甘油为碳源时,工程菌苯丙氨酸产量高于以葡萄糖为碳源时的苯丙氨酸产量。结论 RBS的改变和glpK基因的表达有利于苯丙氨酸产量的提高,甘油较葡萄糖更适宜作为工程菌生长的碳源。

关键词：甘油激酶核糖体结合位点 L-苯丙氨酸发酵聚合酶链反应

替米沙坦与苯磺酸氨氯地平对冠心病合并高血压的血管内皮功能及心肌酶谱的影响

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淮海医药 2021年第3期39卷 236-238,241页

作者：黄坤央王秀真河南省平顶山市第二人民医院药品管理科 467000 河南省洛阳正骨医院/河南省骨科医院药学部 471000

目的:探究替米沙坦与苯磺酸氨氯地平治疗冠心病合并高血压的临床疗效及对患者血管内皮功能及心肌酶谱的影响。方法:选取某院收治的冠心病合并高血压患者70例,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组35例。观察组给予替米沙坦治疗... 详细信息

目的:探究替米沙坦与苯磺酸氨氯地平治疗冠心病合并高血压的临床疗效及对患者血管内皮功能及心肌酶谱的影响。方法:选取某院收治的冠心病合并高血压患者70例,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组35例。观察组给予替米沙坦治疗,对照组给予苯磺酸氨氯地平治疗,观察2组患者治疗前后血压及心功能改善情况,比较2组血清炎症因子[血清基质金属蛋白酶(MMP-9)及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)]、心肌酶谱指标[血清肌酸激酶(CK)、脑钠肽(BNP)、醛固酮(ALD)]水平及不良反应发生情况。结果:治疗后观察组患者收缩压、舒张压、MMP-9及hs-CRP水平均显著优于对照组(P0.05);2组患者均未发生严重不良反应。结论:替米沙坦治疗冠心病合并高血压患者降压效果及改善血管内皮功能作用优于苯磺酸氨氯地平,苯磺酸氨氯地平改善心肌酶谱作用优于替米沙坦,2组用药方案均能起到显著改善血压和心功能的作用。

关键词：冠心病高血压替米沙坦苯磺酸氨氯地平

小肠推进动力学实验结合正交实验优选加味血肿解的提取工艺

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中医药导报 2017年第19期23卷 47-49页

作者：王秀真黄坤央杜天信谢文河南省洛阳正骨医院/河南省骨科医院河南洛阳471002 平顶山市第二人民医院河南平顶山467000

目的:优选加味血肿解复方的提取工艺。方法:采用小肠推进动力学试验比较水煎煮法和水蒸气蒸馏法对加味血肿解复方药效的影响;以大黄酸、大黄酚及浸膏得率的综合评分为指标,采用正交实验考察溶剂用量、提取时间、提取次数对提取工艺的影... 详细信息

目的:优选加味血肿解复方的提取工艺。方法:采用小肠推进动力学试验比较水煎煮法和水蒸气蒸馏法对加味血肿解复方药效的影响;以大黄酸、大黄酚及浸膏得率的综合评分为指标,采用正交实验考察溶剂用量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺。结果:采用煎煮法提取,最佳提取工艺为加8倍量水提取2次,每次2 h。结论:该试验优选的提取工艺稳定可靠、简便易行、经济适用,适用于加味血肿解的工业生产。

关键词：加味血肿解小肠推进动力学试验大黄酸大黄酚

新时代大中小学思政课一体化高效衔接:价值意蕴、历史逻辑与实践进路

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当代教育论坛 2025年第1期 74-82页

作者：黄坤华南理工大学马克思主义学院广州510641

大中小学思政课一体化建设是落实立德树人根本任务的一项育人工程,高效衔接是其中的关键所在。一体化高效衔接是按照不同学段学生心智成熟程度的成长规律以及思政课教学规律,对各个学段存在壁垒的思政课进行整体布局与统筹安排,其目标... 详细信息

大中小学思政课一体化建设是落实立德树人根本任务的一项育人工程,高效衔接是其中的关键所在。一体化高效衔接是按照不同学段学生心智成熟程度的成长规律以及思政课教学规律,对各个学段存在壁垒的思政课进行整体布局与统筹安排,其目标导向契合国家立德树人的根本任务,其育人格局有助于回应培养胸怀国之大者的人才战略诉求。一体化高效衔接理念发端于中华人民共和国成立时期,到改革开放之后展开要素建设,再到党的十八大之后形成系统。新时代促进一体化高效衔接要构建网络资源平台,完善课程内容,统筹教材体系,建强教师队伍,优化体制机制,从而促进一体化建设创新发展。

关键词：大中小学思政课一体化建设高效衔接价值意蕴历史逻辑实践进路

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苯丙氨酸生物合成途径关键基因的串联表达

生物技术通讯 2012年第4期23卷 488-492页

作者：赵越芦佳黄坤央徐琪寿郭军黄英武内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018 郑州大学药学院河南郑州450001 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 解放军306医院中心实验室北京100101

目的:改造大肠杆菌苯丙氨酸生物合成的中心代谢途径,优化关键酶基因pheA、aroF、ppsA、tktA的协同表达,进一步提高苯丙氨酸产量。方法:构建重组质粒pZE12-AFPT,鉴定后通过SDS-PAGE观察其蛋白表达量,并转入缺陷菌大肠杆菌MGΔ中构建工程... 详细信息

目的:改造大肠杆菌苯丙氨酸生物合成的中心代谢途径,优化关键酶基因pheA、aroF、ppsA、tktA的协同表达,进一步提高苯丙氨酸产量。方法:构建重组质粒pZE12-AFPT,鉴定后通过SDS-PAGE观察其蛋白表达量,并转入缺陷菌大肠杆菌MGΔ中构建工程菌,发酵培养后测量苯丙氨酸产量,与本室保存的重组质粒MGΔpZE12-AF做对比;构建重组质粒pZE21-AF和pZA31-PT,将后者转入感受态pZE12-AF和pZE21-AF中,得到双抗性质粒,并比较转化前后苯丙氨酸的产量。结果:工程菌MGΔpZE12-AFPT的苯丙氨酸产量比对照菌株MGΔpZE12-AF提高了近1.6倍,并且实现了4个串联基因的协同表达;质粒pZA31-PT转入pZE12-AF和pZE21-AF后,苯丙氨酸产量比原质粒pZE12-AF和pZE21-AF分别提高了近0.6倍和2.8倍。结论:实现了4个关键酶基因的串联表达,改造了苯丙氨酸的生物合成途径,使得苯丙氨酸产量有所提高,为进一步得到其高产菌株奠定了基础。

关键词：苯丙氨酸大肠杆菌串联表达甘油

财政管理体制与中国地方公共服务均衡保障:研究状况及未来展望

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技术经济 2025年第1期44卷 80-87页

作者：卢盛峰黄坤武汉大学经济与管理学院武汉430072

近些年来,地方公共服务均衡保障问题日益受到社会各界的广泛关注。党的二十大报告及二十届三中全会决定中也都强调要“增强基本公共服务均衡性和可及性”。而如何更好地理顺多级政府间的财政管理关系,完善和做好激励设计,充分发挥好“... 详细信息

近些年来,地方公共服务均衡保障问题日益受到社会各界的广泛关注。党的二十大报告及二十届三中全会决定中也都强调要“增强基本公共服务均衡性和可及性”。而如何更好地理顺多级政府间的财政管理关系,完善和做好激励设计,充分发挥好“上级政府”和“地方政府”在公共服务供给中的两个积极性,对于保障公共服务的均衡性和可及性供给尤为重要。本文将从财政管理体制角度切入,对中国地方公共服务均衡保障的相关理论文献进行梳理。研究发现:第一,中国地方公共服务供给存在明显的地区差异和城乡差异,特别是教育、医疗公共服务供给不均衡问题尤为突出;第二,财政分权体制、地方政府的晋升激励及财政支出结构等因素是导致地方公共服务供给失衡的重要原因;第三,增加公共支出、提高转移支付、推进户籍改革、鼓励政府购买服务等公共政策都有助于改善地方公共服务供给状况;第四,事权与支出责任划分、政府间财政关系的优化设计等财政管理体制改革措施对地方公共服务供给的均衡性和可及性具有显著影响。

关键词：财政管理体制公共服务均衡财政分权晋升激励

水平定向钻载荷下天然气管道失效智能预测研究

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安全与环境学报 2025年

作者：何婷杨松张开陈利琼黄坤陈星宇西南石油大学石油与天然气工程学院中国石油运输有限公司四川分公司

为研究水平定向钻载荷下埋地天然气管道的失效条件，结合水平定向钻施工特点和天然气管道实际情况，建立了钻头–土体–管道有限元模型，得到包括影响水平定向钻载荷作用的六个关键特征变量的失效数据集。基于该数据集，建立智能失效预... 详细信息

为研究水平定向钻载荷下埋地天然气管道的失效条件，结合水平定向钻施工特点和天然气管道实际情况，建立了钻头–土体–管道有限元模型，得到包括影响水平定向钻载荷作用的六个关键特征变量的失效数据集。基于该数据集，建立智能失效预测模型，通过树结构Parzen估计器（Tree-structured Parzen Estimator，TPE）优化极端梯度提升（Extreme Gradient Boosting，XGBoost）模型性能。结果表明，与支持向量积、随机森林、贝叶斯回归等算法相比，XGBoost–TPE算法性能最好，平均绝对误差（Mean Absolute Error，MAE）为7.812 7 MPa，均方根误差（Root Mean Square Error，RMSE）为11.325 6 MPa，决定系数(R2)为0.989 1。研究可为天然气管道交叉工程及周边工程水平定向钻施工风险定量评价及安全管理提供理论支撑。

关键词：安全工程天然气管道水平定向钻载荷有限元模拟极端梯度提升树结构Parzen估计器优化

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优化小学体育教学效果的策略

读写算 2025年第5期 139-141页

作者：黄坤山东省青岛哲范小学

在传统的小学体育教育中，无论是课时量还是教学内容都相对匮乏，很多教师的教育引导方式较为单一，因而部分学生对于体育学科知识探究和技能学习抱有抵触心理。为了落实立德树人的教育目标，促进学生的长远发展，小学体育教师应当认真... 详细信息

在传统的小学体育教育中，无论是课时量还是教学内容都相对匮乏，很多教师的教育引导方式较为单一，因而部分学生对于体育学科知识探究和技能学习抱有抵触心理。为了落实立德树人的教育目标，促进学生的长远发展，小学体育教师应当认真研究新课标的指导文件，理清教学的方向。在学科教育中不断优化教学模式，从而提高教学效果，促进学生的德智体美劳全面发展。本文阐述了小学体育学科教学的价值，分析了当前小学体育教学中的不足，提出了优化小学体育教学效果的策略，以供参考。

关键词：小学体育教学效果优化策略