检索结果-南通市图书馆

作者：黄吉成吉林大学

学位级别：硕士

TAZ是Hippo信号通路的核心成分,当Hippo信号通路受抑制时,TAZ去磷酸化并定位于细胞核中,与TEAD结合继而调控下游基因表达。TAZ表达变化的同时还伴有活性氧的改变。Keap1-Nrf2信号通路可维持细胞内活性氧的稳定。当Nrf2被激活,其下游SOD... 详细信息

TAZ是Hippo信号通路的核心成分,当Hippo信号通路受抑制时,TAZ去磷酸化并定位于细胞核中,与TEAD结合继而调控下游基因表达。TAZ表达变化的同时还伴有活性氧的改变。Keap1-Nrf2信号通路可维持细胞内活性氧的稳定。当Nrf2被激活,其下游SOD、CAT和GR等抗氧化酶表达增多,从而降低细胞内活性氧含量。同时活性氧作为细胞炎症的介质可介导神经炎症的发生。神经炎症会加剧神经退行性疾病的发展,小胶质细胞介导了炎症的发展。抑制小胶质细胞的过度活化,可有效缓解神经退行性疾病。本试验体外培养永生系小鼠小胶质细胞BV2细胞,构建TAZ过表达载体,研究了TAZ对BV2细胞炎症反应的作用及机制。首先研究了TAZ对LPS诱导的小胶质细胞炎症反应的影响。通过qRT-PCR和Western blot检测了在LPS刺激后BV2细胞中TAZ表达量的变化,发现TAZ表达增强。随后利用pcDNA3.1质粒构建了两种TAZ过表达载体,通过qRT-PCR和Western blot证实。过表达TAZ后利用LPS诱导炎症模型进行后续试验。通过ELISA检测TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌量变化,通过qRT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达变化。结果显示,过表达TAZ可抑制三种促炎因子的表达。在细胞炎症过程中常伴随严重的氧化应激现象,于是我们通过相应试剂盒检测SOD、GPX、GR和CAT活性变化以及抗氧化剂GSH与GSSG比值变化;通过MDA检测试剂盒测定脂质氧化产物MDA含量变化;通过流式细胞术检测细胞总ROS和O。结果显示,TAZ含量增高可降低细胞氧化应激水平。ROS主要由线粒体产生,过量的ROS可引起细胞线粒体功能的紊乱。为了探究TAZ对线粒体的保护作用,通过流式细胞术检测mtROS和线粒体膜电位;通过ATP检测试剂盒测定ATP含量。结果显示,过表达TAZ可保护线粒体功能。线粒体功能的损伤最终将引起细胞凋亡,因此通过qRT-PCR和Caspase3活性检测试剂盒检测Caspase3表达变化,通过qRT-PCR检测BCL2与BAX的mRNA变化,通过流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果显示,TAZ过表达可降低炎症反应中细胞凋亡水平。综上所述,过表达TAZ可减弱小胶质细胞炎症反应,降低细胞氧化应激水平,扭转线粒体功能的紊乱,最终降低炎症反应中BV2细胞的凋亡。为了明确TAZ在小胶质细胞炎症反应中的抗炎机制。首先我们添加N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理4h,后加入LPS继续共处理,通过流式细胞术检测ROS和O,通过qRT-PCR和ELSIA检测TNF-α、IL-6和IL-1β表达的变化。发现NAC可降低小胶质细胞炎症反应中的氧化应激水平,进而减弱炎症反应,而TAZ过表达可以降低ROS水平,推测TAZ通过ROS调控细胞炎症水平。比对抗氧化信号通路各组分启动子区域碱基序列,并在Nrf2启动子发现TEAD结合序列,根据Nrf2启动子区域发现的3个TEAD结合序列所在位置相应的构建了三个报告基因质粒,同时将结合序列碱基进行碱基置换突变从而构建三个报告基因突变质粒。通过双萤光素酶检测试剂盒检测报告基因活性。通过qRT-PCR和Western blot检测Nrf2的表达。通过双萤光素酶检测试剂盒检测抗氧化元件ARE的启动子活性。结果显示TAZ过表达后可增加Nrf2第一位点的启动子活性,增加Nrf2的mRNA和蛋白表达与ARE的表达。TAZ过表达后利用LPS诱导炎症模型,添加Nrf2抑制剂ML385共处理后进行后续试验。通过流式细胞术检测ROS、O、mtROS、线粒体膜电位和细胞凋亡;通过qRT-PCR和ELSIA法检测TNF-α、IL-6和IL-1β的表达;用相应检测试剂盒检测Caspase3、GR、SOD、CAT、GPX、GSH/GSSG、MDA和ATP的变化;通过qRT-PCR法检测Bax和Bcl2。结果显示,添加ML385后,抑制了TAZ的上述保护作用。过表达TAZ并分别添加抗氧化系统抑制剂和ML385后,检测p65、p-IκB和IκB的表达变化,结果显示,添加抑制剂后,P65入核与P-IκB增多。综上所述,TAZ可通过TEAD直接与Nrf2启动子区域结合,增加Nrf2与下游ARE的表达。添加Nrf2抑制剂ML385后逆转了TAZ在炎症反应中对小胶质的抗炎作用和细胞氧化应激、线粒体功能紊乱和细胞凋亡的保护作用。分别添加五种抑制剂后可产生与添加ML385相同的效应。TAZ可通过TEAD与Nrf2启动子区域结合增加Nrf2表达,使下游SOD、CAT、GPX、GP及GSH表达增加,从而降低细胞ROS水平,最终调控NF-κB通路活性降低细胞炎症反应,恢复线粒体功能,抑制细胞凋亡。

关键词： TAZ Nrf2 小胶质细胞炎症反应氧化应激

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Von—Mises统计量正则函数的自助(Boot—Strap)法

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哈尔滨工业大学学报 1991年第3期23卷 1-7,19页

作者：姜民奇黄吉成荆成明哈尔滨工业大学数学系

本文基于近似独立的刀切虚拟值,对Von-Mises统计量的正则函数(?)建立了Bootstrap法。在适当的条件下证明了f(V_n)的Bootstrap逼近的相合性,并讨论了这种逼近的收敛速度,达到了理想的Berry-Esscen下限。

关键词： V-M统计量自助法虚拟值刀切

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电力通信技术在智能电网中的应用研究

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移动信息 2017年第1期 56-57页

作者：黄吉成晴隆供电局贵州兴义561400

随着人们经济状况的改善,对电能质量要求也越来越高。电力企业为提高电能供应力度,不仅扩大了电网规模,同时逐渐步入智能化运行轨道。智能电网运行中,电力通信技术属于是核心部分,在建设智能电网的过程中,就要对电力通信技术予以高度重... 详细信息

随着人们经济状况的改善,对电能质量要求也越来越高。电力企业为提高电能供应力度,不仅扩大了电网规模,同时逐渐步入智能化运行轨道。智能电网运行中,电力通信技术属于是核心部分,在建设智能电网的过程中,就要对电力通信技术予以高度重视。基于此,针对电力通信技术在智能电网中的应用进行了研究。

关键词：智能电网电力通信技术应用

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广东省暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学特点分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第1期27卷 5-8页

作者：李晖方苓邹丽容柯昌文黄平黄吉成广东省疾病预防控制中心微检所广东省应急病原学重点实验室广州510300

目的研究广东省暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学特点。方法对2003年至2004年的13起急性胃肠炎患者的粪便和肛拭子标本，采用针对诺如病毒的特异引物和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术进行检测，再经核苷酸序列测定分析病毒的... 详细信息

目的研究广东省暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学特点。方法对2003年至2004年的13起急性胃肠炎患者的粪便和肛拭子标本，采用针对诺如病毒的特异引物和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术进行检测，再经核苷酸序列测定分析病毒的基因型，同时收集患者相关流行病学资料。结果13起暴发性胃肠炎中有8起是由诺如病毒引起的，时间主要集中在每年的10月至12月，基因分析显示这些病毒都属基因Ⅱ组，但分属3个亚型，6株病毒属GⅡ-4型。结论诺如病毒是广东省暴发性非细菌性胃肠炎的重要病原体之一，具有分布广、流行时间集中在秋冬季的特点。引起暴发的病毒主要为基因Ⅱ组，在现阶段存在优势毒株。

关键词：诺如病毒暴发性胃肠炎序列分析分子流行病学

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提高政治站位细化工作举措推动干部联企行动落地见效

提高政治站位细化工作举措推动干部联企行动落地见效

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邵阳日报

作者：朱杰黄吉成

邵阳日报讯（记者朱杰通讯员黄吉成）6月14日至18日，省万名干部联万企“送政策、解难题、优服务”行动第五督导组（邵阳工作组）在我市督查指导干部联企行动工作推进情况。18日上午，向我市反馈和交办督导问题。省农业农村厅党组成... 详细信息

邵阳日报讯（记者朱杰通讯员黄吉成）6月14日至18日，省万名干部联万企“送政策、解难题、优服务”行动第五督导组（邵阳工作组）在我市督查指导干部联企行动工作推进情况。18日上午，向我市反馈和交办督导问题。省农业农村厅党组成员、副厅长、省第五督导组组长唐建初提出......

关键词：细化工作

来源： cnki报纸评论

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YAP对梅花鹿鹿茸间充质细胞增殖与分化的影响

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中国兽医学报 2021年第2期41卷 315-321页

作者：张静柳舒黄吉成岳占碰杨占清郭斌吉林大学动物医学学院吉林长春130062

以梅花鹿为研究对象,通过流式细胞术、荧光定量PCR等方法,探讨YAP(Yes-associated protein,即Yes相关蛋白)对鹿茸间充质细胞增殖与分化的影响。分离培养鹿茸间充质细胞,添加一定浓度的YAP抑制剂Verteporfin后,通过流式细胞术检测发现,... 详细信息

以梅花鹿为研究对象,通过流式细胞术、荧光定量PCR等方法,探讨YAP(Yes-associated protein,即Yes相关蛋白)对鹿茸间充质细胞增殖与分化的影响。分离培养鹿茸间充质细胞,添加一定浓度的YAP抑制剂Verteporfin后,通过流式细胞术检测发现,细胞的增殖活性被显著抑制,G0/G1期细胞百分比增加,S期细胞百分比降低。同时,Verteporfin可降低CCND1、CCND2、CCND3、CCNE1、CDK2、CDK4和CDK6在鹿茸间充质细胞中的表达。Verteporfin处理12,24,36,48,72 h后,软骨细胞标志性分子COLⅡ、SOX9和AGC的表达显著增强。进一步研究了YAP对间充质细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响,结果显示Verteporfin可增加间充质细胞中ROS含量,促使细胞中超氧阴离子(O2-)和线粒体ROS(mtROS)含量升高。为了探究YAP是否通过ROS来影响鹿茸间充质细胞的分化,细胞经Verteporfin处理2 h后再添加抗氧化剂GSH和NAC处理24 h,结果显示GSH和NAC可显著减低Verteporfin对COLⅡ、SOX9和AGC mRNA的诱导效应。结果表明,YAP在鹿茸间充质细胞的增殖与分化过程中起重要作用。

关键词： YAP Verteporfin 鹿茸间充质细胞增殖分化

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