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Effect of Yifei Huoxue Granule (益肺活血颗粒) on the Proliferation of Rat Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells upon Exposure to Chronic Hypoxic Conditions in Vitro

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Chinese Journal of Integrative Medicine 2012年第7期18卷 507-513页

作者：张凌云欧敏黄友章乔媛媛张达矜 Institute of Very Important Person Pulmonary Medicine Navy General Hospital of People's Liberation Army Institute of Hematology Navy General Hospital of People's Liberation Army Institute of Central Laboratory Navy General Hospital of People's Liberation Army

Objective： To investigate the inhibitory effect of Yifei Huoxue Granule （益肺活血颗粒, YFHXG） on the hypoxia-induced proliferation of rat pulmonary artery smooth muscle cells （PASMCs） and its mechanism of decreasing pulmonary arterial pressure. Methods： Twenty male Sprague-Dawley （SD） rats were randomly divided into four groups： saline, and 0.66, 3.30 and 16.50 g/kg of YFHXG groups, the saline and different concentrations of YFHXG were given twice daily for 7 days, respectively. Serum-pharmacology method was used in the preparation of YFHXG serum. Tissue block anchorage was employed in the primary culture of rat PASMCs. The PASMCs were randomly divided into normoxia group, hypoxia group, and hypoxia＋YFHXG group （0.66, 3.30 and 16.50 g/kg doses of YFHXG-treated serum groups, exposed to hypoxic condition）. PASMCs in normoxia and hypoxia group were cultured with saline serum, hypoxia＋YFHXG groups were cultured with different concentrations of YFHXG serum. Cell viability was assessed with 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5- diphenyltetrazolium bromide （MTT） assay. Cell cycle was analyzed using flow cytometry. In addition, hypoxia inducible factor-l-alpha （HIF-1α） protein expression was evaluated by immunocytochemistry analysis, the concentration of intracellular reactive oxygen species （ROS） and Ca2＋ were determined by laser scanning confocal microscopy （LSCM）. Results： MTT assay and flow cytometry showed that hypoxia could directly activate the proliferation of PASMCs, while YFHXG dose-dependently inhibited hypoxia-induced proliferation of rat PASMCs. Immunocytochemistry showed that hypoxia enhanced HIF-1α protein expression, and LSCM showed that hypoxia significantly increased intracellular ROS and Ca2., while YFHXG decreased the expression of HIF- 1α and attenuated the hypoxia-induced increase in intracellular concentration of ROS and Ca2＋. Conclusions： YFHXG could inhibit hypoxia-induced proliferation of rat PASMCs, which may decrease pulmonary arterial pressure and vascular remodeling. The anti-hypoxia effect of YFHXG m

关键词： Yifei Huoxue Granule hypoxia pulmonary artery smooth muscle cells proliferation hypoxia inducible factor-1 α reactive oxygen species

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低温冻存对脐血树突状细胞生物特性的影响

中国应用生理学杂志 2003年第4期19卷 350-353页

作者：黄友章杨平地沈建良兰雨向丹岑坚海军总医院血液科北京100037

目的 :观察低温冻存对脐血来源的树突状细胞 (DCs)培养生物特性的影响 ,为DCs的应用提供冻存方法。方法 :设未冻存脐血细胞 (UFCB)经增殖培养后产生的DCs(UFDCs)为对照组 ,来源于经低温冻存的脐血 (CPCB)的DCs和经低温冻存的DCs(CPDCs)... 详细信息

目的 :观察低温冻存对脐血来源的树突状细胞 (DCs)培养生物特性的影响 ,为DCs的应用提供冻存方法。方法 :设未冻存脐血细胞 (UFCB)经增殖培养后产生的DCs(UFDCs)为对照组 ,来源于经低温冻存的脐血 (CPCB)的DCs和经低温冻存的DCs(CPDCs)为实验组 ,比较实验组与对照组DCs生物特性 ,包括细胞增殖量 ,不染色和染色的细胞形态 ,台盼蓝拒染回收率 (TBR) ;细胞表面抗原 ;混合淋巴细胞培养剌激指数 (SI)、抗毒杀灭效应处理率(ER)。结果 :CPCB与UFCB比 ,形成DCs的时间迟 ,细胞增殖量、树突状细胞量、CD1a、CD83、HLA DR表达、SI、ER均低。CPDCs与UFDCs比 ,形成贴壁树突状细胞迟 ,细胞增殖量、树突状细胞量、CD1a、CD83、HLA DR表达、SI、ER均低。CPCB的TBR为 95.8% ,CPDCs的TBR为 88.7%。结论 :脐血细胞和经增殖培养的脐血DCs ,经低温冻存后复温培养 ,DCs的生物特性有一定的损伤 ,但基本功能仍比较完整 ,回收率均 >85%。

关键词：脐血树突状细胞低温冻存肿瘤疫苗治疗

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人下鼻甲微血管内皮细胞的体外培养及鉴定

临床耳鼻咽喉科杂志 2005年第14期19卷 652-654页

作者：钱进孙建军江平黄友章海军总医院全军耳鼻咽喉中心北京100037

目的:研究人下鼻甲微血管内皮细胞的体外培养方法,为鼻腔、鼻窦相关疾病的研究提供实验基础。方法:采用手术中获得的人下鼻甲边缘黏膜及黏膜下组织,机械分离和酶解消化微血管内皮细胞,在体外条件下进行培养。分别行细胞形态学观察、细... 详细信息

目的:研究人下鼻甲微血管内皮细胞的体外培养方法,为鼻腔、鼻窦相关疾病的研究提供实验基础。方法:采用手术中获得的人下鼻甲边缘黏膜及黏膜下组织,机械分离和酶解消化微血管内皮细胞,在体外条件下进行培养。分别行细胞形态学观察、细胞生长曲线的测定和培养细胞免疫荧光鉴定。结果:体外培养条件下得到人下鼻甲微血管内皮细胞,经细胞形态学观察、细胞生长曲线测定及免疫荧光鉴定证实为血管内皮细胞。结论:本研究获得的体外培养人下鼻甲微血管内皮细胞,可为鼻腔过敏性疾病和炎症性疾病的微血管病理改变及药物对鼻腔下鼻甲微血管功能影响等研究提供实验基础。

关键词：下鼻甲微血管内皮细胞细胞培养

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人骨髓细胞长期冻存的观察

制冷学报 1996年第4期 42-45页

作者：黄友章汪声恒海军总医院

以１０％二甲基亚砜作冷冻保护剂，用“二步”冻存法在液氮液相中冻存１７份骨髓细胞，１、５、１０年ＣＦＵ—ＧＭ回收率分别为７２．４±１２．３％、６９．７％±１０．３％和５５．５±１８．８％，计算出ＣＦＵ—ＧＭ回收率相关公... 详细信息

以１０％二甲基亚砜作冷冻保护剂，用“二步”冻存法在液氮液相中冻存１７份骨髓细胞，１、５、１０年ＣＦＵ—ＧＭ回收率分别为７２．４±１２．３％、６９．７％±１０．３％和５５．５±１８．８％，计算出ＣＦＵ—ＧＭ回收率相关公式Ｙ＝０．７６２４—０．０２０９Ｘ。表明在液氮中不能无限期保存骨髓细胞活力。但用２０％ＦＭ—ＣＭ、ＰＨＡ—ＬＹＣＭ、ＰＨＡ—ＰＭＣＭ孵育冻存骨髓细胞，其ＣＦＵ—ＧＭ、ＢＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—ｍｉｘ集落产率明显增加，仅含ＣＦＵ—ＧＥＭｍ的集落产率不增加，此现象说明部分经冷冻保存损伤的造血细胞能在一定条件恢复其活力。

关键词：骨髓细胞低温保存造血细胞长期冻存

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造血细胞活力冷冻损伤的可恢复性

中国应用生理学杂志 1991年第4期7卷 328-331页

作者：汪声恒黄友章解放军海军总医院内科北京100037

人骨髓冻存后其造血祖细胞活力有一定程度下降,本研究对这种下降的可逆性作了初步观察。结果发现,用双层法和单层法作CFU-GM培养时,未冻存骨髓集落产率相近,冻存骨髓双层法的CFU-GM产率高于单层法。骨髓细胞用20％FM-CM、PHA-LYCM、PHA-... 详细信息

人骨髓冻存后其造血祖细胞活力有一定程度下降,本研究对这种下降的可逆性作了初步观察。结果发现,用双层法和单层法作CFU-GM培养时,未冻存骨髓集落产率相近,冻存骨髓双层法的CFU-GM产率高于单层法。骨髓细胞用20％FM-CM、PHA-LYCM、PHA-PMCM预孵育2h后,分别测定其CFU-GM、BFU-E与CFU-Mix,发现这种孵育过程对未冻存骨髓的集落产率无明显影响,而冻存骨髓的集落产率在孵育后可升高(GEMmeg除外)。说明骨髓造血祖细胞对冻存的损伤反应不均一,部分受损细胞在一定条件下可以恢复其增殖活力。这对于用冻存骨髓作骨髓移植可能有一定意义。

关键词：造血细胞冷冻损伤骨髓冻存

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胎肌条件培养液生物效应的研究

中国应用生理学杂志 1993年第4期9卷 349-351页

作者：汪声恒黄友章海军总医院北京100037

胎肌条件培养液(FMCM)常用于体外CFU—GM培养中提供集落刺激活性(CSA),在工作中我们偶然发现它能减轻阿糖胞甙对CFU—GM的抑制作用,从而想到FMCM可能存在多方面的生物效应,为此,开展了一系列实验研究,试图探讨FMCM对抗多种理化损伤因子... 详细信息

胎肌条件培养液(FMCM)常用于体外CFU—GM培养中提供集落刺激活性(CSA),在工作中我们偶然发现它能减轻阿糖胞甙对CFU—GM的抑制作用,从而想到FMCM可能存在多方面的生物效应,为此,开展了一系列实验研究,试图探讨FMCM对抗多种理化损伤因子对CFU—GM的抑制效应,及FMCM对成熟粒细胞的作用。

关键词：胎肌培养液生物效应

外照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系药物敏感性的影响

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解放军医学杂志 2003年第7期28卷 624-626页

作者：段蕴铀宋鹏聂青黄友章周丽君海军总医院北京100037

观察分次外照射对小细胞肺癌NCI H44 6细胞系药物敏感的影响并探讨其机制。采用GWGP80型远距离6 0 Co治疗机对进入指数生长期的NCI H44 6细胞进行分次外照射 ,每次 2Gy,总剂量为 5 0Gy。通过不同浓度丝裂霉素的干扰来观察外照射前后NCI ... 详细信息

观察分次外照射对小细胞肺癌NCI H44 6细胞系药物敏感的影响并探讨其机制。采用GWGP80型远距离6 0 Co治疗机对进入指数生长期的NCI H44 6细胞进行分次外照射 ,每次 2Gy,总剂量为 5 0Gy。通过不同浓度丝裂霉素的干扰来观察外照射前后NCI H44 6细胞存活率的变化。结果显示 ,在相同浓度丝裂霉素的干扰下 ,照射组细胞的存活率均明显高于未照射组 (P <0 0 1)。提示对小细胞肺癌细胞系NCI H44 6进行外照射可抑制其总RNA的生物合成 ,提高其MDR1mRNA的表达水平 ;

关键词：肺肿瘤放射疗法 RNA 药物敏感性丝裂霉素

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非血缘脐血移植后淋巴增殖性疾病一例

中华儿科杂志 2007年第4期45卷 315-316页

作者：唐湘凤栾佐吴南海徐世侠黄友章海军总医院儿科北京100037

移植后淋巴增殖性疾病（posttransplantation lymphoproliferation disease，PTLD）是造血干细胞移植后少见的严重并发症之一，重者危及生命。我们于2005年9月为1例5岁急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿行非血缘脐血移植（umbilical cord b... 详细信息

移植后淋巴增殖性疾病（posttransplantation lymphoproliferation disease，PTLD）是造血干细胞移植后少见的严重并发症之一，重者危及生命。我们于2005年9月为1例5岁急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿行非血缘脐血移植（umbilical cord blood transplantation，UCBT），移植后92d并发PTLD，使用CD加单抗治疗成功，报道如下。

关键词：非血缘脐血移植淋巴增殖性疾病移植后急性淋巴细胞白血病严重并发症造血干细胞单抗治疗

维拉帕米对外照射导致的小细胞肺癌细胞系耐药性的逆转作用

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解放军医学杂志 2007年第4期32卷 365-367页

作者：宋鹏段蕴铀杨建军黄友章雷军慧海军总医院呼吸内科北京100037 海军总医院院部北京100037 海军总医院防疫大队北京100037 海军总医院血液科实验室北京100037 海军总医院妇产科北京100037

目的观察维拉帕米对分次外照射引发的小细胞肺癌细胞系NCI-H446耐药性的逆转作用。方法采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446细胞进行分次外照射,总照射剂量为50Gy。用不同浓度的丝裂霉素(MMC)干扰,观察外照射前后NC... 详细信息

目的观察维拉帕米对分次外照射引发的小细胞肺癌细胞系NCI-H446耐药性的逆转作用。方法采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446细胞进行分次外照射,总照射剂量为50Gy。用不同浓度的丝裂霉素(MMC)干扰,观察外照射前后NCI-H446细胞存活率的变化;同时观察在上述干扰条件不变的前提下,加入逆转剂维拉帕米后其存活率的变化。结果在相同浓度MMC干扰下,照射组细胞的存活率均明显高于未照射组(P0.05)或者照射组细胞的存活率反而明显低于未照射组(P<0.01)。结论经逆转剂维拉帕米作用后,照射组细胞的耐药性几乎完全被逆转甚至对MMC更敏感。

关键词：细胞系,小细胞肺癌辐射维拉帕米药物筛选试验,抗肿瘤丝裂霉素