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纪录片《光影之下》创作阐述

纪录片《光影之下》创作阐述

作者：黄依瑶南京师范大学

学位级别：硕士

在国家大力推进非物质文化遗产保护的大背景下,作为传承皮影最年轻的一拨,袖珍人发挥自身优势承担了接棒者的重要角色,皮影也为他们的生活增添了很多色彩。本片以河南精灵梦皮影艺术团的成员为对象,从特殊群体的生活状态和民俗文化传承... 详细信息

在国家大力推进非物质文化遗产保护的大背景下,作为传承皮影最年轻的一拨,袖珍人发挥自身优势承担了接棒者的重要角色,皮影也为他们的生活增添了很多色彩。本片以河南精灵梦皮影艺术团的成员为对象,从特殊群体的生活状态和民俗文化传承两个方面呈现内容。通过对皮影戏这项非遗文化幕布背后的探索,呈现特殊群体当前的生活状况和参与社会、融入社会的现状,旨在展现他们自强自立,为中国传统民俗文化皮影戏的发展和传承作贡献,他们通过组建皮影戏剧团传达了自己艺术的冲动和做人的尊严。本片渴望呼吁大众关注传统民俗文化、接纳罕见特殊群体,让更多人看见罕见的精彩。纪录片《光影之下》创作阐述旨在从纪录片创作者的角度出发,阐述作品的创作依据和创作过程。在绪论中介绍了本片选题的缘起及意义,以及创作过程中所运用的民俗文化学、社会学相关的理论依据;第一章从本片的主旨意义、人物选择、叙事结构方面来对作品进行了概述;第二章从本片的视觉风格、叙事过程、细节刻画等方面来进行艺术风格分析;第三章从视听语言方面分析了本片的表现手法;第四章是笔者的创作反思,回顾了影片的创作历程,并由此展开总结和反思。

关键词：袖珍人非物质文化遗产皮影戏特殊群体文化传承

细胞上清与血清外泌体及外泌体RNA提取方法的比较研究

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细胞上清与血清外泌体及外泌体RNA提取方法的比较研究

作者：黄依瑶南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的外泌体(exosomes)是一类可由多种活细胞通过细胞内出芽形成的多泡体(MVB)途径主动分泌至外基质的纳米级小囊泡,其直径大致位于50-200nm之间,主要结构为磷脂双分子层膜和其内包裹的蛋白质,核酸,脂类等生物信息物质。Exoso... 详细信息

研究背景与目的外泌体(exosomes)是一类可由多种活细胞通过细胞内出芽形成的多泡体(MVB)途径主动分泌至外基质的纳米级小囊泡,其直径大致位于50-200nm之间,主要结构为磷脂双分子层膜和其内包裹的蛋白质,核酸,脂类等生物信息物质。Exosomes可由体外培养的活细胞分泌至细胞培养上清液中,同时也可由体内各种活细胞分泌至人体各类体液标本中,如血清、尿液等。Exosomes可通过体液将其内包裹的核酸、蛋白质等生物大分子远距离转运至靶细胞,通过内吞或配体结合等方式使生物信息分子进入靶细胞,发挥相应功能,调控机体多种生理过程。除此之外,exosomes的浓度、粒径分布和内容物均会随机体生理状态和疾病进展发生变化,是极具应用潜力的循环疾病标志物,然而目前exosomes及exo-RNA、蛋白质分离提取方法尚未标准化,尚存纯化方法种类繁多,对现有不同方法提取所得exosomes及exo-RNA质量进行综合比较,选取适宜的分离方法以便后续机制和循环标志物研究具有重要的实用意义。Exosomes的分离纯化方法中,应用最早且最广的方法为差速超高速离心法,其根据exosomes体积和物理性质分离exosomes,在对标本进行一系列低速离心去除标本中的细胞碎片后利用>1 00,OO0g的离心力使exosomes沉淀于管底。差速超高速离心法改良后发展为蔗糖密度梯度离心法,将离心力与粒子的沉降系数结合共同分离纯化exosomes。除此之外,超高速离心法还可与超滤法、免疫吸附法等方法配合使用,以获得浓度和纯度更高的exosomes。由于传统超高速离心法需要昂贵的超高速离心机,且提取过程耗时,近年来衍生了一些新研发的商品化试剂盒,如Exoquick试剂盒和Total Exosomes Isolatin Reagent(TEI)试剂盒,试剂盒利用亲和性沉淀的原理利用试剂直接将exosomes沉淀至管底,具有操作简便、节约时间、不依赖大型仪器的特点。在获得纯度和浓度足够的exosomes后,需要进一步对其内容物如RNA进行分析。Exosomes中RNA提取方法种类繁多,常规提取方法包括酚类裂解液裂解后利用有机溶剂(氯仿)相分离,最后醇类沉淀的方法,如传统的TRIZOL-LS法;酚类裂解液与滤柱结合法,经过裂解和相分离后,取RNA水相加至滤柱,利用膜吸附作用和缓冲液进一步纯化RNA,如TER试剂盒,HLR试剂盒和miRNeasy试剂盒[1];非酚类裂解液与滤柱结合方法,利用非酚类裂解液裂解exosomes后裂解液无需相分离过程直接过滤柱,如SeraMir试剂盒法;除此之外Qiagen公司近年来新研发的exoRNeasy是专门用于提取血清中exo-RNA的试剂盒,该方法无需经过exosomes纯化过程,可利用亲和性滤膜一步法直接从血清/血浆标本中分离exosomes中RNA,操作简便快捷。Exosomes应用于临床诊断和病情监测,首先需要提取到高质量、高纯度、产量大的exosomes和exo-RNA进行分析,因此本研究选取目前应用较广泛的exosomes及exo-RNA提取方法,分别提取细胞上清液和血清来源exosomes及exo-RNA,根据exosomes的产量纯度,exo-RNA浓度及片段分布,以及不同方法提取exo-RNA中miRNA表达情况,综合评价比较各方法优缺点,为exosomes及exo-RNA应用与临床诊断提供技术支持。本研究主要分为以下三个部分:第一部分利用不同方法提取细胞上清与血清来源外泌体及方法间提取效率的比较一、实验目的综合比较传统超高速离心法和分别来自System Biosciences和Invitrogen公司的ExoQuick与TEI试剂盒这三种exosomes提取方法,为细胞上清液和血清中外泌体提取方法的选择提供建议。二、实验方法1.提取细胞上清液与血清中exosomes:经过前处理步骤的细胞上清液和人血清样本,分别按步骤利用超高速离心法和ExoQuick与TEI试剂盒提取exosomes。2.利用透射电子显微镜(TEM)观察不同方法提取细胞上清液和血清来源exosomes的形态和背景,比较不同方法提取exosomes形态和大小差异。***蛋白定量和Western Blot:利用Bradford法检测各方法提取细胞上清液和血清来源exosomes蛋白浓度;利用Western Blot检测exosomes特异性标志蛋白CD9,CD63和TSG101表达水平。4.纳米粒度分析仪(NTA)检测exosomes浓度与粒径分布:利用NTA软件记录exosomes悬液中每一个颗粒的布朗运动,对每个颗粒定位,并且跟踪其中心运动的轨迹,计算平均位移,得到颗粒粒径的数量和大小分布信息,绘制出颗粒数量-浓度二维图谱。三、实验结果T

关键词：外泌体(exosomes) 外泌体RNA(exosomal RNA) 提取方法细胞上清液血清

从文学出发,以传统翻新传统青春版越剧《孔雀东南飞》创作札记

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中国戏剧 2024年第6期 54-56页

作者：黄依群浙江小百花越剧院

《孔雀东南飞》是中国最早的长篇叙事诗,与《木兰诗》并誉为“乐府双璧”。越剧《孔雀东南飞》源自汉乐府长诗,是经典的传统剧目。今年夏天,为培养新生代演员,温州越剧院决定为周莉和陈娟娟创排青春版越剧《孔雀东南飞》。该剧旨在传承... 详细信息

《孔雀东南飞》是中国最早的长篇叙事诗,与《木兰诗》并誉为“乐府双璧”。越剧《孔雀东南飞》源自汉乐府长诗,是经典的传统剧目。今年夏天,为培养新生代演员,温州越剧院决定为周莉和陈娟娟创排青春版越剧《孔雀东南飞》。该剧旨在传承范瑞娟和傅全香的艺术流派,提升年轻演员的演唱和表演能力。导演面临的任务是让新时代观众感受传统艺术的悲剧力量,焕发作品的生命力。

关键词：《孔雀东南飞》长篇叙事诗汉乐府陈娟《木兰诗》表演能力范瑞娟傅全香

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基于液压透析法的尿液细胞外囊泡分离

中华检验医学杂志 2017年第6期40卷 460-462页

作者：徐咏覃思华安泰学唐月汀黄依瑶郑磊南方医科大学南方医院检验科广东省重大疾病临床快速诊断生物传感工程技术研究中心广州510515 武汉大学中南医院检验科

细胞外囊泡（extracellular vesicles，EVs）是用于细胞间信息传递的膜性囊泡，EVs的内容物如核酸、蛋白质、脂质等可反映机体的生理病理状态，研究表明EVs中的微小RNA（microRNA，miRNA）在多种疾病中发挥重要作用，并被认为有作为疾... 详细信息

细胞外囊泡（extracellular vesicles，EVs）是用于细胞间信息传递的膜性囊泡，EVs的内容物如核酸、蛋白质、脂质等可反映机体的生理病理状态，研究表明EVs中的微小RNA（microRNA，miRNA）在多种疾病中发挥重要作用，并被认为有作为疾病标志物的巨大潜力.

关键词：细胞外囊泡透析法细胞间信息传递疾病标志物分离尿液液压

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血清中外泌体及外泌体RNA提取方法的比较

中华检验医学杂志 2016年第6期39卷 427-432页

作者：黄依瑶唐月汀覃思华徐咏安泰学郑磊南方医科大学南方医院检验科广东省重大疾病临床快速诊断生物传感工程技术研究中心广州510515

目的评价超高速离心法、ExoQuick与TEI试剂盒提取血清中外泌体的价值。方法方法学比较。收集2015年8至11月南方医科大学南方医院检验科健康者3名，采集静脉血至采血管，4℃静置12h使其自然凝固后离心取上清液为血清，采用超高速离心法、... 详细信息

目的评价超高速离心法、ExoQuick与TEI试剂盒提取血清中外泌体的价值。方法方法学比较。收集2015年8至11月南方医科大学南方医院检验科健康者3名，采集静脉血至采血管，4℃静置12h使其自然凝固后离心取上清液为血清，采用超高速离心法、ExoQuick与TEI试剂盒提取血清中外泌体，通过透射电子显微镜、蛋白印迹技术和NTA颗粒粒度分析仪检测外泌体形态结构、蛋白表达量和浓度与粒径分布，评估外泌体提取效率；采用超高速离心法＋Trizol LS法、ExoQuick＋SeraMir、TEI＋TER与ExoRNeasy试剂盒提取法分离3例血清中外泌体总RNA（exo—RNA），利用Agilent生物分析仪分析RNA片段分布，实时荧光定量PCR仪检测miRNA表达水平。组间蛋白浓度与miRNA表达量的比较采用方差分析。结果外泌体提取方法中，比较外泌体浓度和其蛋白浓度，ExoQuick与TEI试剂盒提取浓度高于超高速离心法；超高速离心法提取外泌体同时表达CD9、CD63和TSG101蛋白，而ExoQuick与TEI试剂盒提取外泌体仅表达TSG101。外泌体RNA提取方法中，不同方法影响RNA片段分布和miRNA表达，未影响miRNA相对表达趋势；ExoRNeasy提取RNA条带浓度较高，各miRNA表达水平较高；TEI＋TER法未见明显RNA条带，样本中各miRNA表达水平稳定；超高速离心法＋TrizolLS法与ExoQuick＋SeraMir法提取RNA可见范围较广的低浓度条带，此两法提取RNA中各miRNA表达无明显规律。结论外泌体提取方法中传统超高速离心法适用于蛋白组学方面研究，而ExoQuick与TEI试剂盒提取方法适用于血清等稀缺样本外泌体制备。

关键词：外泌体微RNAs 超速离心法

基于格子Boltzmann方法的钉扎螺旋波反馈控制

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物理学报 2024年第4期73卷 78-87页

作者：赖瑶瑶陈鑫梦柴振华施保昌华中科技大学数学与统计学院武汉430074 华中科技大学工程建模与科学计算湖北重点实验室武汉430074 华中科技大学数学与应用学科交叉创新研究院武汉430074

螺旋波是心室跳动过速和纤维性颤动的根源,钉扎螺旋波相对于自由螺旋波来说更难消除.本文采用格子Boltzmann方法求解,以FitzHugh-Nagumo模型为对象,研究了使用反馈控制法消除钉扎螺旋波.数值结果表明,无论钉扎螺旋波钉在圆形障碍物还是... 详细信息

螺旋波是心室跳动过速和纤维性颤动的根源,钉扎螺旋波相对于自由螺旋波来说更难消除.本文采用格子Boltzmann方法求解,以FitzHugh-Nagumo模型为对象,研究了使用反馈控制法消除钉扎螺旋波.数值结果表明,无论钉扎螺旋波钉在圆形障碍物还是矩形障碍物上,反馈控制法对其都具有很好的控制作用.此外,通过数值模拟系统研究了可激性系数、反馈控制信号幅度、记录反馈信号时间和障碍物的大小对钉扎螺旋波的控制情况.研究表明,钉扎螺旋波消除有三种情况.首先,反馈控制信号幅度和可激性系数与钉扎螺旋波消除所需的时间有关,反馈控制信号幅度越大或可激性系数越小,钉扎螺旋波消除越快.其次,障碍物大小和可激性系数影响着能成功消除钉扎螺旋波下记录反馈信号时间与加入反馈控制时间之间对应的时间间隔.最后,在保持加入反馈控制时间不变的情况下,记录反馈信号时间影响着能成功消除钉扎螺旋波所需的最小反馈控制信号幅度.

关键词：反馈控制法钉扎螺旋波 FitzHugh-Nagumo模型格子Boltzmann方法

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接受高等教育对健康的影响效应研究

华东师范大学学报（教育科学版） 2024年第7期42卷 66-76页

作者：刘凌宇黄依梵蒋凯教育部学位与研究生教育发展中心评估处 100083 厦门大学高等教育发展研究中心 361005 北京大学教育学院 100871

长期以来,学术界对高等教育回报的探讨更多地围绕物质回报,对于高等教育的非物质回报关注不足。本文基于2018年中国家庭追踪调查(CFPS)数据,分析接受高等教育产生的健康效应,并在此基础上探究接受大专教育与本科及以上阶段教育产生的健... 详细信息

长期以来,学术界对高等教育回报的探讨更多地围绕物质回报,对于高等教育的非物质回报关注不足。本文基于2018年中国家庭追踪调查(CFPS)数据,分析接受高等教育产生的健康效应,并在此基础上探究接受大专教育与本科及以上阶段教育产生的健康回报异质性。研究发现,接受高等教育对提升自身自评健康及认知水平和降低超重状况及抑郁水平均有显著影响;不论接受大专教育还是接受本科及以上阶段教育,均能够获得正向健康回报;与接受大专教育相比,接受本科及以上阶段的高等教育对提升自身认知水平具有更大的积极作用。

关键词：高等教育健康高等教育回报非物质回报

科研高手如何成为教学能手——基于全国本科高校教师调查的实证分析

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中国高教研究 2024年第7期 58-64页

作者：黄依梵马晓璐蒋凯厦门大学高等教育发展研究中心福建厦门361005 厦门大学教育研究院福建厦门361005 北京大学教育学院北京100871

厘清科研与教学的关系对促进教师职业发展及提升人才培养质量具有重要意义。以全国本科高校教师为分析对象,考察科研能力与其教学质量之间的关系。结果表明:高校教师的科研能力对其教学质量存在显著的正向影响;理工科教师的科研能力对... 详细信息

厘清科研与教学的关系对促进教师职业发展及提升人才培养质量具有重要意义。以全国本科高校教师为分析对象,考察科研能力与其教学质量之间的关系。结果表明:高校教师的科研能力对其教学质量存在显著的正向影响;理工科教师的科研能力对教学获奖情况的影响低于人文社科教师,“双一流”建设高校教师的科研能力对教学获奖情况的影响低于非“双一流”建设高校教师;教师科研能力主要通过影响其情感和行为教学投入提高教学质量。为提高教师教学质量,应推动以研促教的发展模式、开展分类管理的推进策略、实施分科指导的培训方案。

关键词：科研能力教学质量教学投入本科高校教师

室温驱动腐植酸钠基碳纳米簇用于荧光比色检测银离子和温度传感

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高等学校化学学报 2024年第6期45卷 44-60页

作者：李林马静许畅琳陈彤瑶郭衡瑶李紫悠武文鑫太原师范学院化学与材料学院晋中030619 山西省腐植酸工程技术研究中心晋中036019 山西省蛋白质基功能材料实验室晋中036019

基于氢键结合自组装策略,以富含羟基的高生物相容性煤源腐植酸钠大分子和抗坏血酸为原料,通过绿色经济的室温方法构建了一种低毒水溶性青色荧光碳纳米簇(HAN-CNCs).研究发现,在p H=5.0条件下,Ag^(+)可与HAN-CNCs表面的C=N/C=O基团配位结... 详细信息

基于氢键结合自组装策略,以富含羟基的高生物相容性煤源腐植酸钠大分子和抗坏血酸为原料,通过绿色经济的室温方法构建了一种低毒水溶性青色荧光碳纳米簇(HAN-CNCs).研究发现,在p H=5.0条件下,Ag^(+)可与HAN-CNCs表面的C=N/C=O基团配位结合,从而诱导HAN-CNCs发生荧光静态猝灭,实现对Ag^(+)较宽线性范围(5.0~300μmol/L)和较低检出限(27.5 nmol/L)的特异灵敏检测.进一步观察发现,Ag^(+)与HAN-CNCs相互作用后,HAN-CNCs在日光灯下由淡黄色变为灰蓝色,在紫外灯下由青色荧光变为蓝紫色,基于此,将HAN-CNCs制作成便携式纸基传感器,通过手机分析测试条颜色的G/B值,实现了Ag^(+)的视觉比色荧光检测.此外,HAN-CNCs在20~85℃范围内表现出优异的可逆热响应性能,有望作为一种温度传感器.荧光显微镜成像测试发现,HAN-CNCs在选择性检测活细胞中的Ag^(+)时表现出低生物毒性和优异的细胞渗透性,表明该传感系统可应用于评估人体潜在风险和健康安全.

关键词：煤基腐植酸钠碳纳米簇室温驱动银离子比色荧光检测温度传感