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毛竹对盐胁迫的生理响应及耐盐相关基因的表达分析

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毛竹对盐胁迫的生理响应及耐盐相关基因的表达分析

作者：黄业伟浙江农林大学

学位级别：硕士

毛竹(Phyllostachys edulis)禾本科、竹亚科、刚竹属竹种,是我国竹类植物中分布范围最广、栽培面积最大、蓄积量最多、经济价值最高的一个材用和笋用竹种。本研究以毛竹种子、苗期幼苗以及一年实生苗为研究对象,通过不同浓度NaCl溶液处... 详细信息

毛竹(Phyllostachys edulis)禾本科、竹亚科、刚竹属竹种,是我国竹类植物中分布范围最广、栽培面积最大、蓄积量最多、经济价值最高的一个材用和笋用竹种。本研究以毛竹种子、苗期幼苗以及一年实生苗为研究对象,通过不同浓度NaCl溶液处理,研究了盐胁迫对毛竹的生理生化的影响,并采用同源基因克隆的方法,克隆出与盐胁迫相关的基因,通过RT-PCR的验证,证明PeNHX1和PeLRR-RLKs这两个基因的表达受盐胁迫影响,这对于从生理生化水平及分子生物学水平上阐明毛竹的耐盐机理有着十分重要的意义。获得的主要试验结果如下:1、毛竹种子在低盐胁迫下(NaCl 0-50mM),发芽以及出苗整齐度影响不大,对三叶期幼苗的影响也不大。高盐胁迫下(NaCl 100-150mM),毛竹种子的发芽率会随着胁迫条件的增强而降低,在NaCl 200mM的情况下,毛竹种子不发芽。2、一年实生毛竹幼苗在中低浓度盐胁迫(NaCl 0-100mM)条件下培养30天,其各项生理指标呈规律性变化,初步说明毛竹实生苗对盐胁迫具有较高地耐受能力,在NaCl浓度为150mM的条件下,毛竹幼苗死亡。3、在盐胁迫条件下,通过测定相关生理指标,并做相关性分析,可以得出:脯氨酸含量(Pro)、丙二醛(MDA)含量、叶绿素含量(Chls)可以作为衡量毛竹受到盐胁迫伤害程度的重要指标。4、在盐胁迫条件下,通过对毛竹幼苗叶片叶绿素含量和叶绿素荧光特性的测定,Fv/Fm、Yield、qP均呈规律性变化,可以做为衡量毛竹受盐胁迫伤害程度的重要指标。5、在本试验中,克隆得到一个与胁迫有关的基因,命名为:PeLRR-RLKs。6、通过RT-PCR的验证,证明PeNHX1和PeLRR-RLKs这两个基因是受盐胁迫影响的,通过其表达量的增加,抵御外界环境的伤害。

关键词：毛竹盐胁迫种子萌发生理生化特性基因克隆 RT-PCR

福州地区儿童诺如病毒基因型别分析及GⅡ群诺如病毒捕获ELISA法的初步建立

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福州地区儿童诺如病毒基因型别分析及GⅡ群诺如病毒捕获ELISA法的...

作者：黄业伟福建医科大学

学位级别：硕士

目的:了解2009016年福州地区5岁以下急性腹泻住院儿童诺如病毒感染的基因型别并初步建立用于GII基因群诺如病毒检测的捕获ELISA法。方法:(1)采用系统抽样的方法随机选取2009016年福州市儿童医院以及平潭县医院因急性腹泻入院,经Real-tim... 详细信息

目的:了解2009016年福州地区5岁以下急性腹泻住院儿童诺如病毒感染的基因型别并初步建立用于GII基因群诺如病毒检测的捕获ELISA法。方法:(1)采用系统抽样的方法随机选取2009016年福州市儿童医院以及平潭县医院因急性腹泻入院,经Real-time RT-PCR筛选为诺如病毒核酸阳性的118份5岁以下儿童粪便标本,应用RT-PCR方法扩增完整VP1和部分Rd Rp区并测序;应用在线基因分型、种系进化以及基因重组分析诺如病毒的基因型别及动态变化。(2)选择一株有代表性的GII.4基因型Sydney012变种诺如病毒,利用大肠杆菌原核表达系统,体外表达诺如病毒VP1结构蛋白的P区多肽,包涵体经初步纯化、尿素溶解、PBS透析等进行蛋白纯化和复性,并进一步尝试形成病毒样颗粒(virus like particles,VLPs)。应用ELISA法检测可溶性重组P蛋白的抗原活性,透射电镜观察VLPs。(3)具有抗原活性的可溶性重组P蛋白免疫6周龄的BALB/c小鼠,经细胞融合,有限稀释法进行亚克隆和间接ELISA筛选,获得抗重组P蛋白的单克隆抗体细胞株;利用上述细胞株,制备鼠单克隆抗体腹水并经Protein G柱纯化;采用改良的过碘酸钠法对单克隆抗体进行辣根过氧化物酶标记,利用抗重组P蛋白鼠单克隆抗体,初步建立检测GII基因群诺如病毒的捕获ELISA法;与Real-time RT-PCR比较,评价该方法的灵敏度和特异度;与进口同类商品化试剂比较,评价两种方法的符合率。结果:(1)在118份诺如病毒核酸阳性粪便标本中,共获得93份完整VP1和部分Rd Rp区双基因序列,经测序均为GII基因群。其中GII.P4II.4基因型2006b变种41份,***.4基因型Sydney012变种31份,GII.P12II.3基因型13份,GII.P4II.4基因型New Orleans 2009变种和GII.P17II.17基因型各2份,***.4基因型2006b变种、GII.P7II.7、GII.P7II.6和GII.P21II.3基因型各1份。(2)GII.4基因型Sydney012变种诺如病毒重组P蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经4mol/L尿素溶解、PBS透析复性后,可获得较强抗原活性的可溶性重组P蛋白,并能自组装成直径大小约为100nm的病毒样颗粒。(3)成功地获得2株能分泌抗重组P蛋白的鼠单克隆抗体细胞株,分别为212-1和46-2。2株单克隆抗体的效价分别为1:102400(212-1,Ig G)和1:16000(46-2,Ig M)。以212-1株单克隆抗体为材料初步建立捕获ELISA法,检测32份诺如病毒核酸阳性和30份阴性粪便标本,与Real-time RT-PCR法比较,其灵敏度和特异度分别为50%和100%;与进口商品化同类ELISA相比,两种方法的符合率为79.03%。结论:(1)2009012年、2013016年福州地区5岁以下急性腹泻住院儿童诺如病毒感染分别以GII.P4II.4基因型2006b变种、***.4基因型Sydney012变种为主。(2)成功表达具有抗原活性的GII.4基因型诺如病毒P区重组多肽,初步建立了GII基因群诺如病毒双抗夹心ELISA检测方法,为今后进一步研制质量较高、便于基层现场使用的商业化试剂盒奠定了基础。

关键词：诺如病毒基因型重组蛋白单克隆抗体捕获ELISA法

电动汽车锂离子动力电池健康状态估计方法研究

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电动汽车锂离子动力电池健康状态估计方法研究

作者：黄业伟合肥工业大学

学位级别：硕士

进入新世纪以来，非再生能源紧张和环境污染带来的问题日益突出，发展电动汽车逐渐成为世界各国加快推进交通能源战略转型的重要措施。锂离子电池是电动汽车的主流动力源，其性能状态直接表征了电动汽车的大部分性能指标。作为电池的重... 详细信息

进入新世纪以来，非再生能源紧张和环境污染带来的问题日益突出，发展电动汽车逐渐成为世界各国加快推进交通能源战略转型的重要措施。锂离子电池是电动汽车的主流动力源，其性能状态直接表征了电动汽车的大部分性能指标。作为电池的重要性能指标，电池健康状态影响到电动汽车的安全性和经济性等性能，因此必需对动力电池的健康状态进行监控。利用自设计电池测试系统，以26650型磷酸铁锂动力电池作为实验对象，建立了基于神经网络的电池健康状态估算模型，准确地估算了电池的健康状态，为电动汽车的行驶提供了安全保证。主要研究内容包括以下几个方面：(1)分析锂电池的内部结构、工作原理和电池在使用过程中容量衰减的原因，研究电池的温度、自放电倍率、开路电压和电池内阻对电池健康状态的影响。(2)介绍电池的四种建模方法：电化学模型、经验模型、等效电路模型、人工神经网络模型，分析四种方法在模型复杂度、模型准确性和实用性方面的优缺点，选定人工神经网络为建立电池模型的方法。(3)建立基于LMBP的电池健康状态估算模型，设计神经网络的结构、传输函数和神经元数目，并编写MATLAB仿真程序;对26650型磷酸铁锂电池做循环充放电实验，将参数数据输入到模型中学习。另外对30节同型号不同健康状态的电池进行健康状态估算，对观测值和估算值进行比较分析。(4)搭建电池测试平台，包括系统的硬件部分和软件部分，硬件部分包括主控及其外围模块、参数采集模块、充放电控制模块、通信接口模块和电源模块;软件部分包括下位机程序的编写和上位机软件的设计，并通过虚拟端口软件实现上位机软件与MATLAB软件的通信，最后对估算模型进行了实际试验验证。

关键词：电池管理系统磷酸铁锂电池电池健康状态(SOH) LMBP

桥塔尾流风作用下吊索尾流致振动模型与参数分析

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中国公路学报 2022年第4期35卷 117-127页

作者：陈文礼黄业伟孟昊陈冠斌哈尔滨工业大学土木工程智能防灾减灾工业和信息化部重点实验室黑龙江哈尔滨150090 哈尔滨工业大学结构工程灾变与控制教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150090

现场实测表明,大跨度悬索桥塔后吊索受桥塔尾流影响常发生大幅尾流致振。为研究该振动机理,同时为工程设计和应用实践提供理论指导,以某大跨悬索桥桥塔单根塔柱和塔后吊索为研究对象,首先进行了大比例尺节段模型的风洞试验。通过试验,... 详细信息

现场实测表明,大跨度悬索桥塔后吊索受桥塔尾流影响常发生大幅尾流致振。为研究该振动机理,同时为工程设计和应用实践提供理论指导,以某大跨悬索桥桥塔单根塔柱和塔后吊索为研究对象,首先进行了大比例尺节段模型的风洞试验。通过试验,再现吊索在桥塔尾流区内的尾流致振现象,研究吊索的振动特征与桥塔尾流风速特征。在此基础上,考虑尾流刚度作用,建立吊索的非定常气动力模型与吊索尾流致运动微分方程。利用四阶龙格库塔算法积分求解吊索尾流致运动微分方程。影响吊索运动的参数分为3种类别:结构参数、流场参数和位置参数。通过对各影响参数进行逐个分析,研究不同参数对桥塔尾流区中吊索振动特征的影响规律。结果表明:质量比这一参数对于吊索的振动模式的组成和占比起到关键性作用;而其他参数对于吊索振幅仅起到调节作用,对于吊索运动模式改变作用不显著;增大吊索阻尼比与减小尾流场风速脉动成分均可有效减小吊索振动幅值,这为吊索减振工程实际问题提供了解决思路。

关键词：桥梁工程尾流致振参数分析吊索气动力模型

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斜拉索涡激振动的被动自吸吹气流动控制

中国公路学报 2019年第10期32卷 222-229页

作者：陈文礼陈冠斌黄业伟李惠哈尔滨工业大学结构工程灾变与控制教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150090 哈尔滨工业大学土木工程智能防灾减灾工业与信息化部重点实验室黑龙江哈尔滨150090

圆形斜拉索长细比大、阻尼及刚度小,因而其经常发生风致振动,尤其是涡激振动。涡激振动是一种限幅振动,其发生风速较低,因而斜拉索经常发生涡激振动现象,为此提出一种被动自吸吹气流动控制措施来抑制斜拉索涡激振动。通过节段模型气弹... 详细信息

圆形斜拉索长细比大、阻尼及刚度小,因而其经常发生风致振动,尤其是涡激振动。涡激振动是一种限幅振动,其发生风速较低,因而斜拉索经常发生涡激振动现象,为此提出一种被动自吸吹气流动控制措施来抑制斜拉索涡激振动。通过节段模型气弹试验得到,被动吸吹气控制方法在套环间距适当下使得斜拉索涡激振动区间变窄,甚至可以完全抑制其发生涡激振动。通过分析斜拉索节段模型表面压力分布,得到被动自吸吹气能大幅度降低压力脉动值和脉动风荷载;且模型背风面的平均压力值的平台区也有所提升,表明平均阻力也有所减小。频谱分析表明:此控制方法改变了旋涡脱落模式及脱落强度。最后由尾流速度剖面可得,被动吸吹气流动控制方法缩小了模型尾流区宽度,尾流中的速度脉动也极大降低。折算风速为5.99时,对尾流速度时程做频谱分析可得,吸吹气控制方法能抑制住无控圆柱模型尾流中周期性交替脱落的旋涡。套环控制方法应用于三维柔性索性索模型上,能极大地降低柔性斜拉索的前三阶涡激振动幅值,同时发现套环间距越小,控制效果越强。

关键词：桥梁工程涡激振动风洞试验阻尼比被动自吸吹气速度脉动

NaCl胁迫对毛竹种子萌发及幼苗生长的影响

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种子 2009年第10期28卷 16-18,22页

作者：黄业伟杨丽张智俊浙江林学院/浙江省现代森林培育重点实验室浙江临安311300

以毛竹种子及幼苗为研究材料,研究NaCl胁迫对毛竹种子萌发和幼苗生长的影响,结果表明:NaCl胁迫下,毛竹种子发芽势、发芽率均呈总体下降趋势,但低浓度下的发芽势和发芽率与对照ck无显著差异。随着NaCl浓度的增高,毛竹幼苗的外部形态特征... 详细信息

以毛竹种子及幼苗为研究材料,研究NaCl胁迫对毛竹种子萌发和幼苗生长的影响,结果表明:NaCl胁迫下,毛竹种子发芽势、发芽率均呈总体下降趋势,但低浓度下的发芽势和发芽率与对照ck无显著差异。随着NaCl浓度的增高,毛竹幼苗的外部形态特征的伤害逐渐加重;叶片SOD、POD活性呈先升高,后下降的趋势;叶片MDA含量呈上升趋势;叶片叶绿素含量呈下降趋势。

关键词： NaCl胁迫毛竹种子萌发幼苗生长

天然化合物抑制HMG-CoA还原酶改善心脑血管疾病的研究进展

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食品安全质量检测学报 2021年第18期12卷 7333-7341页

作者：聂妍张蒙黄业伟云南农业大学普洱茶学教育部重点实验室昆明650201 云南农业大学食品科学技术学院昆明650201 云南农业大学理学院昆明650201

HMG-CoA还原酶,即3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme Areductase,HMGR)是胆固醇合成过程中的限速酶,抑制HMGR活性能够阻碍胆固醇合成,降低低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol, LDL-C)水平,进而改善心脑血管疾病。由于现市售的HMG-CoA还原酶抑制剂(他汀类)已被证明有诸多的副作用,研发出他汀类药物替代物就具有重要意义。本文综述了HMGR与心脑血管疾病的关系、他汀类药物存在的问题,以及天然化合物抑制HMGR的研究现状,并展望了HMGR天然抑制剂的研究方向。

关键词： HMG-CoA还原酶心脑血管疾病天然小分子他汀类药物

NaCl胁迫对毛竹幼苗叶绿素荧光特性及生理指标的影响

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竹子研究汇刊 2010年第1期29卷 29-32,35页

作者：杨洋黄业伟罗淑萍杨丽张智俊新疆农业大学农学院新疆乌鲁木齐830052 浙江林学院浙江省现代森林培育重点实验室浙江临安311300

以毛竹幼苗为材料，通过测定在不同浓度（0、50、100、150mmol·L^-1）NaCl胁迫条件下的幼苗生长、叶绿素荧光参数及生理指标的影响，结果表明：随着NaCl浓度的增加，毛竹幼苗的植株生长量、苗高生长量呈显著下降的趋势；与对照相比，N... 详细信息

以毛竹幼苗为材料，通过测定在不同浓度（0、50、100、150mmol·L^-1）NaCl胁迫条件下的幼苗生长、叶绿素荧光参数及生理指标的影响，结果表明：随着NaCl浓度的增加，毛竹幼苗的植株生长量、苗高生长量呈显著下降的趋势；与对照相比，NaCl胁迫条件下，毛竹幼苗叶片的PSⅡ最大光化学效率（Fv／Fm）显著降低，PSⅡ电子传递量子效率（ФPSⅡ）显著降低。低NaCl浓度（50mmol·L^-1）胁迫下，光化学淬灭（qP）与对照无显著差异，高NaCl浓度（100—150mmol·L^-1）胁迫下，qP显著下降。非光化学淬灭（NPQ）无显著差异；毛竹叶片的叶绿素含量在低NaCl浓度胁迫下，与对照无显著差异，高NaCl浓度胁迫下，显著降低；各个NaCl浓度处理下的毛竹叶片脯氨酸含量均有显著差异。

关键词：毛竹 NaCl胁迫幼苗生长叶绿素荧光生理指标

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提升云茶产业发展措施与建议

福建茶叶 2010年第12期33卷 41-45页

作者：王耕黄业伟云南农业大学龙润普洱茶学院昆明650201

近年来云南省云茶产业发展迅速,取得很大成就。但也还存在一些问题需要规划才能得到长足性,持续性的进步和发展,进一步提升在市场上的竞争力。本文旨在依托云南特有的地方优势,提出云南省云茶产业中在未来的发展中一系列近期以及远景的... 详细信息

近年来云南省云茶产业发展迅速,取得很大成就。但也还存在一些问题需要规划才能得到长足性,持续性的进步和发展,进一步提升在市场上的竞争力。本文旨在依托云南特有的地方优势,提出云南省云茶产业中在未来的发展中一系列近期以及远景的建议和措施。从而使云茶产业不但能够持续健康快速发展,并且在未来成为云南省最具低碳绿色生态特征的新兴支柱产业。

关键词：云茶产业建议措施