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过表达MeERF72对C3木薯淀粉合成的影响

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分子植物育种 2023年

作者：廖明馨李可李梦桃鲍茹雪陈新王文泉中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南大学热带作物学院

木薯蔗糖合酶1 (MeSuSy1)是淀粉生物合成通路上第一个关键酶，而乙烯响应因子MeERF72可调控其转录活性。为探究MeERF72对木薯(Manihot esculenta Crantz)块根淀粉合成的影响，本研究在盆栽条件下，检测野生型、MeERF72过表达系和RNAi干... 详细信息

木薯蔗糖合酶1 (MeSuSy1)是淀粉生物合成通路上第一个关键酶，而乙烯响应因子MeERF72可调控其转录活性。为探究MeERF72对木薯(Manihot esculenta Crantz)块根淀粉合成的影响，本研究在盆栽条件下，检测野生型、MeERF72过表达系和RNAi干扰系MeERF72和MeSuSy1在叶片和块根中的表达量，并测定木薯块根薯肉的淀粉、还原糖和总糖含量。结果显示，过表达株系的块根中MeERF72的表达量显著高于野生型C3，其MeSuSy1的表达量显著低于野生型，干扰植株反之。MeERF72干扰株系薯肉的淀粉和总糖含量显著高于野生型C3，过表达株系反之，表明MeERF72可能负调控MeSuSy1的转录活性，降低蔗糖分解效率，进而减少淀粉合成。本研究明确MeERF72对MeSuSy1的调控机制和对木薯淀粉合成的影响，为进一步研究淀粉代谢通路的基因调控网络以及热带作物重要性状的遗传改良策略提供参考。

关键词：木薯(Manihot esculenta Crantz) 淀粉生物合成 ERF基因蔗糖合成酶

木薯蛋白激酶MeSnRK2.12与转录因子MebHLH1的互作鉴定及其表达分析

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作物学报 2023年第9期49卷 2594-2600页

作者：郁雪婷李可李梦桃鲍茹雪陈新王文泉海南大学热带作物学院海南海口570228 海南大学生命科学学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海南海口571101

蛋白激酶SnRK2s (Sucrose Non-fermenting Related Protein Kinase 2)是植物抗逆境机制中的关键组分。木薯是全球重要的食品和工业作物,具有高淀粉累积和耐逆境的特点。迄今对木薯MeSnRK2家族成员参与逆境下淀粉合成调控的内在机制尚不... 详细信息

蛋白激酶SnRK2s (Sucrose Non-fermenting Related Protein Kinase 2)是植物抗逆境机制中的关键组分。木薯是全球重要的食品和工业作物,具有高淀粉累积和耐逆境的特点。迄今对木薯MeSnRK2家族成员参与逆境下淀粉合成调控的内在机制尚不清楚。本文围绕SnRK2家族受ABA微弱诱导的成员MeSnRK2.12展开研究,先对其进行生物信息学分析后发现其启动子区分布逆境响应元件:干旱胁迫MBS和ABA应答ABRE等顺式作用元件,且其氨基酸序列与AtSnRK2.8和OsSAPK1/2高度同源。ABA和PEG6000处理木薯SC8植株后发现, MeSnRK2.12可以在2 h内快速响应ABA和PEG6000处理,其转录活性在根中被抑制;在茎中被诱导上调,最高值分别为对照的15.0倍和8.0倍;在叶中也呈现上调趋势,但程度低于茎中。亚细胞定位试验结果显示MeSnRK2.12分布于细胞质和细胞核,利用酵母双杂交和双分子荧光互补(BiFC)试验均验证了MeSnRK2.12和转录因子MebHLH1间存在互作,且前期研究发现MebHLH1可以上调木薯蔗糖合酶基因MeSus1的转录活性,而蔗糖合酶的活性与植物库强直接相关。因此,推测MeSnRK2.12不仅在木薯应对逆境胁迫中发挥具有作用,还可能参与ABA信号介导的淀粉合成调控,有助于木薯在逆境条件下获得相对较高的淀粉产量。

关键词：木薯 SnRK2s bHLH ABA PEG

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木薯ABA受体MePYL4a在拟南芥中过表达增强其耐旱性

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农业生物技术学报 2022年第12期30卷 2290-2300页

作者：赵东黎鲍茹雪李梦桃陈新王文泉海南大学热带作物学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所

脱落酸(abscisic acid, ABA)及其受体pyrabactin resistance-like (PYL)蛋白在植物抵御干旱胁迫中发挥重要功能。为探究木薯(Manihot esculenta) MePYL4a (GenBank No. XM＿021766535)基因的抗旱功能，本研究从木薯品种’SC8’中克隆MePYL4a基因，对其进行了生物信息学分析，利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的瞬时转化法进行亚细胞定位；通过实时荧光定量PCR检测MePYL4a基因在干旱胁迫处理下的表达情况；并构建了MePYL4a过表达载体转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)，进行拟南芥转基因植株的抗旱分析。结果表明，MePYL4a是不稳定蛋白，MePYL4a蛋白的亚细胞定位特征分析表明其定位于细胞核和细胞质内；qPCR分析显示，MePYL4a基因的表达水平显著受到干旱胁迫诱导，在1 h达到最高，随后慢慢下降。干旱处理后，观察表型发现MePYL4a能够提高干旱胁迫下拟南芥幼苗的耐旱性，过表达植株平均生物量是野生型(wild type, WT)的1.5倍，ABA合成关键限速酶基因9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED3)和干旱胁迫诱导表达基因(responsive to desiccation29A, RD29A)表达量显著高于WT和Atpyl4突变体植株，抗氧化酶活性也大约比WT高了2倍，表明MePYL4a的过表达植株清除活性氧的能力强于WT和Atpyl4突变体植株，在干旱胁迫下能积累更多的生物量，增强拟南芥的抗旱性。综上所述，MePYL4a过表达降低了干旱胁迫下拟南芥中活性氧的积累，诱导抗逆基因上调表达，增强拟南芥抗旱性。本研究为MePYL4a参与木薯抗逆的进一步研究提供参考依据。

关键词：木薯木薯脱落酸受体4a(MePYL4a) 干旱胁迫基因表达量生理生化指标

木薯野生种与栽培种的嫁接影响地上部生长发育的初步研究

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木薯野生种与栽培种的嫁接影响地上部生长发育的初步研究

作者：鲍茹雪南京农业大学

学位级别：硕士

木薯野生祖先种与栽培品种在光合效率、块根淀粉积累效率两方面均存在显著的差异,其本质是两类不同的基因型对热带环境因子光照、温度、土壤水分与养分吸收利用的反应存在遗传差异。本研究采用已经完成全基因组测序的野生种W14与栽培品... 详细信息

木薯野生祖先种与栽培品种在光合效率、块根淀粉积累效率两方面均存在显著的差异,其本质是两类不同的基因型对热带环境因子光照、温度、土壤水分与养分吸收利用的反应存在遗传差异。本研究采用已经完成全基因组测序的野生种W14与栽培品种KU50,SC205进行相互嫁接,对嫁接方法及环境条件进行优化,获得嫁接基因型嵌合苗。通过系统的生理与表型分析,淀粉合成与光合关键基因表达量的分析,探索木薯库强变化对于地上部生长发育的影响,对木薯生长发育和育种提供基础。1、W14种子浸泡24 h不同浓度萘乙酸(NAA)与赤霉素(GA3)混合激素溶液。从中筛选出NAA与GA3混合激素溶液终浓度均为100 mg/L时,W14种子发芽率最高,达52%。2、C3野生型W14与C3-C4栽培型KU50、SC205,相互嫁接。通过芽接与劈接法的对比,筛选出适宜的嫁接手法-劈接。对嫁接后管理条件进行优化,得到适当的嫁接管理方案:温度27-29℃,暗培养24 h后,逐渐增加光照;嫁接前三天湿度控制在90%以上,后逐渐降低湿度至正常。3、对嫁接与非嫁接植株表型统计、株高和茎粗的测定,结果显示群体中嫁接植株的植物学形态特征变化不明显。但嫁接苗K/W与S/W(接穗/砧木)的株高分别高于非嫁接植株KU50和SC205,而茎粗正好相反,其中嫁接植株株高的生长贡献绝大部分来源于接穗。4、于嫁接后60 d、90 d、180 d和210 d,对嫁接与非嫁接植株进行光合速率及叶绿素含量测定,结果显示野生型的砧木会抑制栽培型接穗的光合效率,相反的,栽培型砧木则会促进野生型接穗的光合效率。说明地上部的生长发育与砧木的选取有关,砧木库强的增加,有利于植株的生长发育;库强降低则起到相反的作用。5、选取具有代表性的光合通路3个关键基因家族成员MeRibulose,MePEPC和Mech lPPDK,利用GenBank和JGI的木薯基因组数据库下载相关信息,通过荧光定量PCR分析其表达量,其中嫁接植株K/W、S/W(接穗/砧木)分别与非嫁接植株KU50、SC205相比较,MechlPPDK表达量降低,并且变化差异显著。而MeRibulose,MePEPC的表达量在嫁接与非嫁接品种间变化差异显著性不高,表明砧木的不同,会影响关键基因的表达进而影响植株地上部的生理特性。本研究旨在获得嫁株嵌合植株的同时,可以进一步阐述嫁接后,木薯库强变化对植株表型、叶片淀粉合成、光合效率以及光合通路关键基因等的影响,并确定源与库的变化给植株生长发育带来的变化,为以后挖掘木薯源、流、库之间内在协调机制做了前期工作,也为接下来的育种工作以及木薯生产提供参考依据。

关键词：嫁接移栽表型生理基因

木薯枯草杆菌蛋白酶家族鉴定及MeSDD1的功能分析

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核农学报 2022年第7期36卷 1308-1317页

作者：肖亮鲍茹雪曹升陆柳英尚小红曾文丹聂宣红严华兵广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所广西南宁530007 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530007 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 越南农业科学院河内12500越南

枯草杆菌蛋白酶基因家族(SBT)是控制植物生长发育和响应环境胁迫的重要基因家族。为进一步了解木薯SBT基因家族的数量、基本特征、功能域和进化关系等,在全基因组水平通过生物信息学方法对SBT基因家族进行了鉴定和分析,并对其中一个成... 详细信息

枯草杆菌蛋白酶基因家族(SBT)是控制植物生长发育和响应环境胁迫的重要基因家族。为进一步了解木薯SBT基因家族的数量、基本特征、功能域和进化关系等,在全基因组水平通过生物信息学方法对SBT基因家族进行了鉴定和分析,并对其中一个成员的功能进行了分析。进化树分析结果表明,在木薯基因组中共鉴定到69个SBT成员,其中Manes.18G044300与拟南芥抗旱基因SDD1亲缘关系最近,因此将该成员命名为MeSDD1;22个成员无内含子,69个成员的蛋白携带5个高度保守的结构域,一部分SBT成员在染色体上呈紧密的串联分布,启动子存在干旱响应元件。用qRT-PCR检测筛选出表达量高的2个纯合株系用于后续研究。相关生理指标检测结果表明,2个转基因株系叶片的相对含水量均显著高于野生型;转基因株系离体叶片失水率小于野生型;转基因株系的气孔密度显著小于野生型;断水处理14 d,转基因株系的萎焉程度轻于野生型,表明MeSDD1增强了拟南芥植株的抗旱性。本研究结果为木薯抗旱育种提供了基因资源,并为后续研究MeSDD1介导的抗旱分子机制奠定了理论基础。

关键词：木薯枯草杆菌蛋白酶家族转基因拟南芥抗旱性功能分析

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木薯野生种与栽培种相互嫁接技术的研究

热带农业科学 2019年第9期39卷 24-29页

作者：鲍茹雪张怀方陈新邹枚伶王文泉南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

传统的嫁接技术能够创造一个地上地下遗传嵌合体,对于采用现代组学技术研究生物信号与物质传导具有特殊的价值。为获得嫁接嵌合植株,对木薯野生祖先种W14与栽培品种KU50、SC205进行相互嫁接,通过破种壁结合激素处理解决W14种子苗繁育问... 详细信息

传统的嫁接技术能够创造一个地上地下遗传嵌合体,对于采用现代组学技术研究生物信号与物质传导具有特殊的价值。为获得嫁接嵌合植株,对木薯野生祖先种W14与栽培品种KU50、SC205进行相互嫁接,通过破种壁结合激素处理解决W14种子苗繁育问题。结果表明,采用终浓度为100mg/L的萘乙酸(NAA)与赤霉素(GA3)混合激素溶液处理后,W14种子发芽率最高;筛选出劈接为适合的嫁接手法,嫁接成活率达87.0%;嫁接后温度控制在27℃左右,暗培养24h后,逐渐增加光照;嫁接前3d湿度控制在90%以上,后逐渐降低湿度至正常,可以保证嫁接苗健康生长发育。获得的生理性嵌合体植株,为揭示木薯源、流、库之间内在协调机制提供重要的基础材料。

关键词：木薯嫁接激素处理成活率

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新工笔花鸟画中的超现实表现研究

新工笔花鸟画中的超现实表现研究

作者：岳茹雪新疆艺术学院

学位级别：硕士

“85新潮美术”运动之后,工笔花鸟画家们保留原先传统工笔画的语言方式与“视觉真实”,在预设“想法”阶段,结合超现实主义中的象征性与隐喻性对作品进行观念与趣味上的不断尝试,逐步形成“新工笔”样式。新工笔花鸟画家们通过运用传统... 详细信息

“85新潮美术”运动之后,工笔花鸟画家们保留原先传统工笔画的语言方式与“视觉真实”,在预设“想法”阶段,结合超现实主义中的象征性与隐喻性对作品进行观念与趣味上的不断尝试,逐步形成“新工笔”样式。新工笔花鸟画家们通过运用传统工笔画中的造型方式,对物象进行精细描画,努力刻画出物象的“实物感”构建出符合大众认同的真实,再结合超现实表现方法对画面中的元素进行组合创新,营造出虚幻离奇的审美认知与判断。一改传统工笔画中的写意化特征,可持续的发掘运用属于新时代的艺术元素,在语言表达、造型元素、趣味呈现上凸显个性,彰显当下社会的文化精神。文章正文部分主要分为三个部分。第一部分是从“新工笔”名词的出现到概念的产生与发展进行叙述以及选择超现实表现的原因;第二部分分析新工笔花鸟画画面元素的选择和朦胧画境下的“灰”色调以及超现实与“新工笔”空间观点的阐释;第三部分是笔者对新工笔花鸟画中表现超现实的创作阐述。

关键词：超现实表现新工笔花鸟画新时代

80 Gbit/s PAM4光接收机低噪声模拟前端电路设计

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微电子学 2024年第2期54卷 201-206页

作者：张春茗王浩宋茹雪西安邮电大学电子工程学院

采用UMC 28 nm CMOS工艺，设计了一款应用于光接收机、工作在80 Gbit/s PAM4的低噪声模拟前端电路（AFE）。对噪声和带宽进行折中设计，采用了跨阻放大器（TIA）级联连续时间线性均衡器（CTLE）技术和输入电感峰化技术。为了更好地控制... 详细信息

采用UMC 28 nm CMOS工艺，设计了一款应用于光接收机、工作在80 Gbit/s PAM4的低噪声模拟前端电路（AFE）。对噪声和带宽进行折中设计，采用了跨阻放大器（TIA）级联连续时间线性均衡器（CTLE）技术和输入电感峰化技术。为了更好地控制低频增益，进一步拓展带宽，采用了跨导跨阻（gm-TIA）结构的VGA。在输入电容100 fF和供电电压1.2 V下，实现的跨阻增益为48.5 dBΩ,带宽为36.1 GHz,平均等效输入噪声电流为■,功耗为14.5 mW。

关键词： PAM4编码跨阻放大器级联连续时间线性均衡器可变增益放大器

粗毛纤孔菌与桑叶发酵产物活性成分含量测定及抗氧化活性与急性毒理研究

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菌物研究 2024年

作者：白茹雪罗诗蓉包海鹰吉林农业大学菌类中药资源开发与利用重点研究室吉林农业大学农业农村部北方食用菌资源利用重点实验室

以桑叶为培养基质，发酵粗毛纤孔菌菌株，制备发酵产物。以粗毛纤孔菌、桑叶为对照，对不同发酵时期发酵产物进行活性成分测定，并对其DPPH自由基清除、铁离子还原、超氧阴离子清除、ABTS 清除和羟基自由基清除等5种清除自由基抗氧化活... 详细信息

以桑叶为培养基质，发酵粗毛纤孔菌菌株，制备发酵产物。以粗毛纤孔菌、桑叶为对照，对不同发酵时期发酵产物进行活性成分测定，并对其DPPH自由基清除、铁离子还原、超氧阴离子清除、ABTS 清除和羟基自由基清除等5种清除自由基抗氧化活性进行研究，同时对发酵产物—粗桑茶进行急性毒理实验。结果表明：不同发酵时期发酵产物中多糖类物质含量均高于桑叶，低于粗毛纤孔菌；除35 d发酵产物外，多酚类及三萜含量高于粗毛纤孔菌和桑叶；黄酮类成分均高于桑叶， 21，28，35 d发酵产物高于粗毛纤孔菌；生物碱（1-脱氧野尻霉素）含量均低于桑叶，高于粗毛纤孔菌；21 d发酵产物具有较强的抗氧化活性，可能与发酵物中多糖、多酚、三萜及黄酮含量增高有关；以7.8 g/kg为给药剂量，0.04 mL/g为给药体积，对KM小鼠灌胃14 d后小鼠无异常现象，体重明显增加，无死亡发生，最大给药量实验结果HE病理切片及血液学指标显示与空白组无显著（P＞0.05）或极显著（P＞0.01）差异。说明发酵产物无急性毒性，采用粗毛纤孔菌菌株发酵桑叶制备产品思路可行，为后续开发利用提供依据。

关键词：粗毛纤孔菌桑叶活性成分抗氧化急性毒理