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牛呼吸道合胞体病毒一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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畜牧与兽医 2024年第3期56卷 94-98页

作者：梁晓珊宁鹏李小龙鲍显伟李昊石亚楠王雪妍郭雪莲许立华宁夏大学动物科技学院宁夏银川750021

为建立一种牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus, BRSV)快速简便的检测方法,本研究基于BRSV M基因保守区序列,设计特异性引物及探针,通过优化反应条件,建立用于BRSV检测的一步法实时荧光定量PCR,并验证了该方法的敏... 详细信息

为建立一种牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus, BRSV)快速简便的检测方法,本研究基于BRSV M基因保守区序列,设计特异性引物及探针,通过优化反应条件,建立用于BRSV检测的一步法实时荧光定量PCR,并验证了该方法的敏感性、特异性和重复性;同时利用建立的检测方法对采集的临床样本进行检测。结果表明:本研究所建立的BRSV荧光定量检测方法,其特异性好,仅对BRSV存在特异性扩增;敏感性高,最低可达10 copies/μL;稳定性好,组内变异系数和组间变异系数小。使用所建立的BRSV一步法实时荧光定量PCR对宁夏地区94份临床样品进行检测,阳性率为5.3%(5/94)。上述结果表明,本研究建立的检测方法可为BRSV的快速诊断提供有力的技术支持。

关键词：牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR M基因诊断

宁夏地区三种牛病毒性繁殖障碍性疾病血清学调查及多重PCR方法的建立

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宁夏地区三种牛病毒性繁殖障碍性疾病血清学调查及多重PCR方法的...

作者：鲍显伟宁夏大学

学位级别：硕士

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)和阿卡斑病毒(Akabanevirus,AKAV)是引起牛繁殖障碍性传染病的三种病原。这三种病毒均能造成年牛发生繁殖异常,严重威胁全球养牛业的健康发展,为世界各国防控BVD、IBIR和AKA带来了极大的挑战。因此,本研究针对三种病原所引发的传染病,进行以下主要内容的研究:1.宁夏部分地区BVD、IBR和AKA血清学调查本研究采用竞争ELISA方法对来自宁夏四个地区的临床血清样本进行BVDV、IBRV和AKAV抗体检测,结果显示,三种病原抗体阳性率分别为89.13%、86.96%和1.63%。BVDV在银川地区抗体阳性率最高为89.62%;IBRV和AKAV在吴忠地区抗体阳性率最高分别为89.05%和1.63%;冬季BVDV的抗体阳性率最高分别92.86%,春秋季IBRV的抗体阳性率较高分别为85.71%和84.61%,AKAV在秋季的抗体阳性率最高为3.81%。2.多重PCR检测方法的建立与应用本试验分别针对BVDV的5'-UTR、IBRV的gB基因和AKAV的S基因设计了三对特异性引物,通过建立并优化各病原单一 PCR的基础上构建了多重PCR方法,对反应体系和条件进行了优化,并对该方法的特异性和敏感性进行了验证。结果显示,构建的多重PCR方法对其他牛源病毒无扩增,对BVDV、IBRV和AKAV的最低检测限分别为103 copies/μL、103 copies/μL和104 copies/μL。对采集的184份临床血清样品进行检测,BVDV、IBRV和AKAV的阳性率分别为18.48%、14.13%和1.63%,BVDV和IBRV两种病原混合感染阳性率为3.8%,BVDV和AKAV两种病原混合感染阳性率为1.63%。该结果与各病原单一 PCR方法以及我国出入境检疫行业标准符合率达92%以上,BVDV+IBRV和BVDV+AKAV混合感染的符合率为100%。表明本研究建立的多重PCR检测方法可用于临床样品的检测。***多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用从GenBank中选取已发表的BVDV、IBRV和AKAV三种病毒的保守性序列,利用线上Primer-BLAST分别针对BVDV 5'-UTR、IBRV gB基因和AKAV S基因分别设计了三对特异性引物和探针,使用MEGA-X软件对各引物间进行互补性分析,初步建立各病原TaqMan单一荧光定量PCR,并优化其反应条件。在此基础上通过对TaqMan多重荧光定量PCR反应体系和条件的一系列优化,成功构建了 TaqMan多重荧光定量PCR检测方法。经验证,该方法特异性良好,对BVDV、IBRV和AKAV的最低检测限分别为103 copies/μL、104 copies/μL和103 copies/μL。组内和组间重复性试验变异系数均小于4%。对采集的184份临床血清样品进行检测,BVDV、IBRV和AKAV的阳性率分别为20.65%、15.22%和1.63%,BVDV和IBRV两种病原混合感染阳性率为3.8%,BVDV和AKAV两种病原混合感染阳性率为1.63%。综上所述,本研究经血清学调查发现在宁夏主要养牛地区BVD和IBR的抗体阳性率呈现较高水平,同时发现在宁夏吴忠地区已经出现AKAV感染的情况,三种病毒抗体阳性率在不同地区和不同季节有所区别。通过此次调查为宁夏地区牛群BVD、IBR和AKA的综合防控提供理论基础。此外,还成功建立了 BVDV、IBRV和AKAV多重PCR和TaqMan多重荧光定量PCR检测方法,为我国牛群BVD、IBR和AKA的检测和流行病学调查提供了一种快捷简便的分子生物学检测方法。

关键词：牛病毒性腹泻病毒牛传染性鼻气管炎病毒阿卡斑病毒多重PCR TaqMan多重荧光定量PCR

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赤羽病诊断技术研究进展

动物医学进展 2023年第7期44卷 82-86页

作者：李昊石亚楠鲍显伟李小龙许立华宁夏大学农学院宁夏银川750021

赤羽病(AKAD)是由赤羽病毒(AKAV)引起的一种虫媒传染病,该病主要分布于温热带地区。随着全球变暖,该病流行范围不断扩大,对牛、羊繁殖育种造成威胁,严重影响我国畜牧业的快速发展。由于目前没有有效的治疗方法且国内尚无疫苗可用,病毒... 详细信息

赤羽病(AKAD)是由赤羽病毒(AKAV)引起的一种虫媒传染病,该病主要分布于温热带地区。随着全球变暖,该病流行范围不断扩大,对牛、羊繁殖育种造成威胁,严重影响我国畜牧业的快速发展。由于目前没有有效的治疗方法且国内尚无疫苗可用,病毒检测成为了防控该病的重要环节。同时赤羽病毒具有与同科其他病毒基因重配的特性,这给该病的诊断和防控带了更大的挑战。因此,论文结合近年来国内外研究,从病原学、免疫学、分子生物学等方面对赤羽病毒检测技术进行探讨,并介绍了不同检测技术的运用优势和局限性,以期在临床诊断、实验室检测和海关检疫等领域中为诊断和防控AKAV提供理论依据和技术指导。

关键词：赤羽病赤羽病毒基因组结构检测技术

低振动敏感性和低热噪声极限的法布里珀罗腔的设计与分析

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低振动敏感性和低热噪声极限的法布里珀罗腔的设计与分析

作者：竹显伟河南农业大学

学位级别：硕士

激光的线宽是决定激光相干性的关键性因素,半导体激光器的线宽压缩研究具有很高的研究价值和发展潜力。目前,用于线宽压缩中以长度为参考的稳频,应用最广和性能最高的是高精细度法布里-珀罗（F-P）腔稳频。法布里-珀罗（F-P）腔的光学... 详细信息

激光的线宽是决定激光相干性的关键性因素,半导体激光器的线宽压缩研究具有很高的研究价值和发展潜力。目前,用于线宽压缩中以长度为参考的稳频,应用最广和性能最高的是高精细度法布里-珀罗（F-P）腔稳频。法布里-珀罗（F-P）腔的光学长度由腔内折射率和腔镜之间的距离决定,腔内折射率与腔内的温度、压强和湿度等因素有关。但是,谐振腔的长度容易受到温度和振动影响。为了降低外界因素对谐振腔的长度的影响,本文基于有限元分析对法布里-珀罗（F-P）腔的振动和热膨胀特性进行了研究。（1）设计了激光参考锁定F-P腔模型,腔体长度为300 mm,直径为150 mm,材料为超低热膨胀玻璃（Ultra-low-expansion,ULE）。中间有一个通光孔,两侧有两个反射率为99.999%的高反射镜,材料为熔融硅,腔体、腔镜和通光孔同轴。（2）法布里-珀罗腔的噪声中振动噪声影响较大,所以对激光频率稳定的法布里-珀罗腔的腔振动敏感性进行了理论研究,以此降低法布里-珀罗腔的振动敏感性。法布里-珀罗腔的弹性形变与支撑位置和腔的形状有关,运用有限元方法模拟对其关系进行了分析,得到了腔长的振动敏感性为9.3×10-12/g的法布里-珀罗腔。（3）为了降低外界因素对谐振腔的长度的影响,对法布里-珀罗腔零膨胀温度调节进行了研究。由于ULE和熔融硅的热膨胀系数相差两个数量级,导致腔的零膨胀温度低于室温,需要将零膨胀温度调节到室温以上。设计了补偿环,腔镜通过光胶合的方法与补偿环连接,腔镜放置在通光孔内,补偿环通过光胶合粘在腔体两端,补偿环与腔镜和腔体同轴。腔体的热噪声极限为9.1×10-17。通过有限元分析,选择了ULE环,成功地将零膨胀温度可从-10 K调整到27 K,从而实现了腔的零膨胀温度容易调到室温以上。同时,该设计使加工误差对加工精度的影响很小,并且可以方便地制造出长法布里-珀罗腔。

关键词：法布里-珀罗腔振动敏感性零膨胀温度有限元分析

基于高斯小波函数和线性表达法的开口板自由振动特性研究

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振动与冲击 2024年第6期43卷 29-37页

作者：郭文杰柴天建颜建伟洪显华东交通大学轨道交通基础设施性能检测与保障国家重点实验室南昌330013

研究开口板自振特性的求解方法,将开口部位视为厚度为零的板,引入局域化特性的高斯小波函数作为位移形函数来捕捉厚度突变的情况,提高解的精确度。提出线性表达方法解耦位移形函数与边界条件,基本思路是通过高斯消元法找到约束条件矩阵... 详细信息

研究开口板自振特性的求解方法,将开口部位视为厚度为零的板,引入局域化特性的高斯小波函数作为位移形函数来捕捉厚度突变的情况,提高解的精确度。提出线性表达方法解耦位移形函数与边界条件,基本思路是通过高斯消元法找到约束条件矩阵中线性无关的列向量,将位移形函数中的未知系数转变为线性无关系数列向量的线性表达,从而将有约束问题转变为无约束问题。对四边简支和四边固定的开口板进行分析,结合有限元方法计算结果,讨论解的收敛性和准确性。研究了不同开口尺寸、开口形状对自振频率的影响,得到开口尺寸、开口形状与自振频率关系曲线,对影响的原因进行了解释。最后计算了不同边界约束条件下多开口板的自振频率。

关键词：高斯小波函数线性表达法自振特性能量法开口板

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基于特征重组的遥感图像有向目标检测

光学学报 2024年第6期44卷 318-328页

作者：王友伟郭颖邵香迎王季宇鲍正位南京信息工程大学江苏省大气环境与装备技术协同创新中心江苏南京210044 南京信息工程大学自动化学院江苏南京210044

针对遥感有向目标存在的检测问题,设计了一个基于改进Rotated RPN的网络,设计特征重组机制,通过加权使网络关注有效目标区域。使用新的有向框标注方法,避免在临界角度出现错位等问题。在检测头前端使用极化注意力模块,改善因为分类和回... 详细信息

针对遥感有向目标存在的检测问题,设计了一个基于改进Rotated RPN的网络,设计特征重组机制,通过加权使网络关注有效目标区域。使用新的有向框标注方法,避免在临界角度出现错位等问题。在检测头前端使用极化注意力模块,改善因为分类和回归任务所需特征不一致导致的性能下降问题。实验结果表明,该模型可以提高多类目标的检测精度。相较于基准Rotated RPN,该模型在Dior-R数据集上精度提升4.95%,在HRSC2016数据集上精度提升11.75%。

关键词：遥感有向目标检测深度学习特征重组极化注意力

撞击流-共沉淀法制备三水碳酸镁的工艺优化及结晶动力学

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过程工程学报 2024年第5期24卷 533-545页

作者：张建伟邹显泓董鑫冯颖沈阳化工大学机械与动力工程学院辽宁沈阳110142

采用新型撞击流技术结合共沉淀法制备三水碳酸镁(MgCO_(3)·3H_(2)O)晶体,对MgCO_(3)·3H_(2)O制备的工艺条件及其结晶动力学进行了研究。实验以长径比为指标讨论了反应物浓度c、反应温度T、循环撞击流量Q和循环撞击时间t对MgCO_(3)·3H... 详细信息

采用新型撞击流技术结合共沉淀法制备三水碳酸镁(MgCO_(3)·3H_(2)O)晶体,对MgCO_(3)·3H_(2)O制备的工艺条件及其结晶动力学进行了研究。实验以长径比为指标讨论了反应物浓度c、反应温度T、循环撞击流量Q和循环撞击时间t对MgCO_(3)·3H_(2)O晶体形貌及结构的影响。实验的最佳工况为:反应物浓度0.25 mol/L、反应温度50℃、循环撞击流量500 L/h、循环撞击时间50 min,在该工况下可得到长径比为20、晶体平均长度为57.3μm的MgCO_(3)·3H_(2)O晶体。运用粒数衡算模型分析晶核粒数密度、生长速率以及成核速率。最佳工况下晶体成核速率为2.061×10^(6)#/(mL·min)、生长速率为0.148μm/min。得出了撞击流-共沉淀法反应体系下各因素的成核、生长动力学方程,确定了各因素对晶体生长影响的敏感系数i。各影响因素得到的敏感系数呈现的关系为iQ

关键词：撞击流三水碳酸镁粒数衡算模型结晶动力学生长速率

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长三角地区近地层臭氧高值特征及其成因分析

环境化学 2024年

作者：牟显金赞侯雪伟朱小东南京信息工程大学气象灾害预报预警与评估协同创新中心气象灾害教育部重点实验室气候与环境变化国际合作联合实验室中国气象局气溶胶与云降水重点开放实验室中国气象局大气化学重点开放实验室

为研究长三角地区近地层臭氧污染现状及成因，对2018年3月1日至2021年2月28日三年间环境空气质量数据中的臭氧、二氧化氮和同期欧洲中期天气预报中心全球气候第五代大气再分析数据（ECMWF ERA5）进行了深入分析，结果表明，2018年至202... 详细信息

为研究长三角地区近地层臭氧污染现状及成因，对2018年3月1日至2021年2月28日三年间环境空气质量数据中的臭氧、二氧化氮和同期欧洲中期天气预报中心全球气候第五代大气再分析数据（ECMWF ERA5）进行了深入分析，结果表明，2018年至2020年间，长三角地区臭氧浓度呈现夏季最高，春季次之，冬季最低的季节变化特征.空间分布上呈现明显的“北高南低”特征，春季和夏季的南北差异较明显，而秋、冬季的臭氧浓度在空间上分布较均匀.臭氧浓度日变化呈单峰型分布，06:00—08:00达到最低值，14:00—16:00达到最高值；臭氧污染事件主要发生在夏季的苏南和皖苏北地区；2018年月平均臭氧浓度呈单峰型分布，6月份达最高，2019年和2020年均呈双峰结构，受疫情影响，2020年的峰值浓度略有降低. 2019年5月31日至6月19日期间，徐州地区臭氧污染持续20 d，南京地区持续18 d，为近三年长三角典型城市地区臭氧污染持续最长的时段.臭氧污染期间，两地的臭氧8 h滑动平均日最大浓度一直保持在高位.此外，温度达到峰值的时间较臭氧浓度峰值总是提前1 h左右，这可能与近地面大气光化学对气象条件响应速度的滞后性有关；徐州地区和南京地区发生臭氧污染事件的成因多与局地光化学反应有关，降雨量大幅下降也有一定贡献.除此外，徐州和南京两地在此期间存在两次明显的平流层向对流层传输过程（STT），是臭氧浓度升高的另一原因.此外，徐州和南京受南风和偏南风影响，缓慢的臭氧区域水平输送作用也可能会加剧本地臭氧污染.

关键词：长江三角洲臭氧污染时空特征平流层—对流层输送

基于非合作博弈的EV换电站容量优化配置与削峰方法研究

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现代电力 2024年

作者：黄正伟鲍奕辰刘璐三峡大学经济与管理学院三峡大学电气与新能源学院

针对中大型换电站的高峰时段和用电重载问题，考虑换电站的削峰需求和用户换电体验，提出基于非合作博弈的换电站容量优化配置方法。首先，根据各时段用户换电需求和换电站削峰任务，提出换电站的服务能力约束和削峰任务约束。其次，将... 详细信息

针对中大型换电站的高峰时段和用电重载问题，考虑换电站的削峰需求和用户换电体验，提出基于非合作博弈的换电站容量优化配置方法。首先，根据各时段用户换电需求和换电站削峰任务，提出换电站的服务能力约束和削峰任务约束。其次，将换电站和用户作为博弈参与者，分别以换电站日综合收益最大和用户换电满意度最高为优化目标，提出基于非合作博弈的换电站容量优化配置方法。然后，考虑各博弈参与者的利益需求，利用粒子群算法对该非合作博弈模型进行求解，并确定二者利益最大化的纳什均衡点。最后，以国内某换电站为算例进行仿真分析，结果表明该模型能够在用户换电体验最佳的前提下使换电站的收益达到最大，验证了所提方法的有效性。

关键词：电动汽车换电站非合作博弈用户体验负荷削峰补贴电价纳什均衡