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复方中草药对兔生长性能和肠道健康的影响

中国兽医杂志 2024年第1期60卷 134-143页

作者：徐翔飞黄盼崔雪梅季权安肖琛闻韦强黄叶娥鲍国连刘燕浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江杭州311300 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

为了研究复方中草药对兔生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性、抗氧化能力、肠道形态和肠道微生物的影响,本试验选取72只5周龄健康新西兰大白兔,随机分成对照组(CN,饲喂基础饲粮)和中草药组(CM,基础饲粮中添加600 mg/kg复方中草药),每... 详细信息

为了研究复方中草药对兔生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性、抗氧化能力、肠道形态和肠道微生物的影响,本试验选取72只5周龄健康新西兰大白兔,随机分成对照组(CN,饲喂基础饲粮)和中草药组(CM,基础饲粮中添加600 mg/kg复方中草药),每组36只,试验周期为42 d。每周测定各组兔的采食量和体增重,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G);试验第21、42天,每组随机选择4只健康兔,采血分离血清,检测生化指标和免疫指标;试验结束(第42天),收集兔小肠肠段,通过ELISA检测小肠黏膜消化酶活性和抗氧化指标,苏木精-伊红(H.E.)染色观察小肠绒毛形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白mRNA的相对表达量,高通量测序分析盲肠微生物多样性。结果显示,两组间ADFI、ADG和F/G均差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,在试验第21天时,中草药组兔血清中总胆固醇(Tchol)含量极显著降低(P<0.01);在试验第42天时,中草药组兔血清中免疫球蛋白M(IgM)含量和回肠黏膜中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著升高(P<0.05);肠道中消化酶(α-淀粉酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶)活性显著升高(P<0.05);空肠中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),十二指肠和空肠中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);空肠绒毛长度(V)显著增长(P<0.05),隐窝深度(C)显著降低(P<0.05),绒毛长度与隐窝深度比值(V/C)极显著升高(P<0.01);十二指肠中闭锁蛋白(Occludin)mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),回肠中膜周蛋白(ZO-1)和Occludin mRNA相对表达量也显著上调(P<0.05);盲肠内容物细菌16S rRNA基因的菌群丰富度指数(Chaol)丰度值显著升高(P<0.05);盲肠在属水平分类上的主要优势菌群为梭菌属(Clostridiales)和阿克曼菌属(Akkermansia)等。结果表明,兔日粮中添加中草药饲料添加剂能增强机体免疫力和抗氧化能力,维持肠道黏膜形态的完整,提高肠道消化酶活性,改善肠道菌群。

关键词：复方中草药兔生长性能消化酶肠道发育肠道微生物

PEX10基因缺失对兔须癣毛癣菌生长及致病性的抑制作用

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农业生物技术学报 2024年第1期32卷 189-199页

作者：潘瑶肖琛闻刘燕张蓬军应淑敏黄叶娥季权安韦强王静王教瑜鲍国连中国计量大学生命科学学院浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所/农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室

须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)又称石膏样毛癣菌，对家兔(Oryctolagus cuniculus)具有严重危害性。过氧化物酶体生物合成因子10(peroxisomal biogenesis factor 10, PEX10)与植物病原真菌的药物敏感性具有密切关系，但是其... 详细信息

须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)又称石膏样毛癣菌，对家兔(Oryctolagus cuniculus)具有严重危害性。过氧化物酶体生物合成因子10(peroxisomal biogenesis factor 10, PEX10)与植物病原真菌的药物敏感性具有密切关系，但是其影响动物病原真菌如须癣毛癣菌生长及致病性的机制尚不明晰。本研究首先构建PEX10基因敲除载体，通过根癌农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation, AtMT)和转化子筛选，获得须癣毛癣菌PEX10基因敲除株；生长特性等表型分析显示，PEX10基因敲除株的生长速率显著减慢(P<0.01)，对盐酸小檗碱的敏感性显著提高(P<0.001)，侵染兔皮肤组织的能力减弱，致病性降低。本研究结果为真菌PEX10基因功能的研究和兔须癣毛癣菌病的防治提供参考。

关键词：须癣毛癣菌过氧化物酶体生物合成因子10(PEX10) 过氧化物酶体耐药性

甘草甜素对铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制作用

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农业生物技术学报 2022年第3期30卷 570-579页

作者：黄盼王志鹏肖琛闻季权安鲍国连刘燕浙江师范大学化学与生命科学学院浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)具有多重耐药特性，生物被膜的形成是其重要的耐药机制之一。甘草甜素(glycyrrhizin, GLY)具有抗菌功效。为了探讨GLY对多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株的抗菌活性及生物膜形成的作用效果，本研究... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)具有多重耐药特性，生物被膜的形成是其重要的耐药机制之一。甘草甜素(glycyrrhizin, GLY)具有抗菌功效。为了探讨GLY对多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株的抗菌活性及生物膜形成的作用效果，本研究从角膜炎病兔(浙江嵊州’白中王’长毛兔)(Leporidae angora)眼分泌物中分离获得铜绿假单胞菌G1株(GenBank No. MZ683158)和G2株(GenBank No.MZ683159)，进一步采用微量稀释法测定GLY对G1株和G2株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)，利用结晶紫法定量生物被膜，利用扫描电子显微镜初步观察GLY对铜绿假单胞菌生物被膜形态的影响，采用qPCR方法检测GLY对铜绿假单胞菌生物被膜合成相关调控基因pelA、algA、rhlI、rhlR和pslA表达的影响。结果显示，GLY对G1株和G2株的MIC分别为40和20 mg/mL;G1株和G2株都能形成生物被膜，G1株的形成能力较强；结晶紫染色显示，20 mg/mL GLY处理使G1株和G2株生物被膜的形成量显著减少(P<0.01)。扫描电子显微镜观察发现，5 mg/mL GLY处理使生物被膜的形成显著减少，10 mg/mL GLY处理使菌体分散且未见明显生物被膜结构。qPCR检测结果显示，5 mg/mL GLY处理后，pelA基因表达量升高，但差异不显著；algA、rhlI、pslA和rhlR的基因表达量均显著降低(P<0.01);10mg/mL GLY处理后，pelA、algA、rhlI、rhlR和pslA的基因表达量均显著降低(P<0.01)。上述结果提示，GLY对铜绿假单胞菌有抗菌活性，对生物被膜的合成具有负调控作用，呈剂量依赖关系，可能通过下调相关基因表达来抑制生物被膜的形成。本研究为深入探讨GLY对铜绿假单胞菌生物被膜的影响和兔铜绿假单胞菌角膜炎治疗提供参考。

关键词：铜绿假单胞菌甘草甜素(GLY) 生物被膜长毛兔分离鉴定

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鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白生物学特性研究

生物工程学报 2008年第4期24卷 586-591页

作者：刘燕韦强鲍国连季权安浙江省农科院畜牧兽医研究所杭州310021

血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒菌株体外传200代获得了无毒力无免疫原性菌株,采用超声波裂解和超速离心法提取二株菌的外膜蛋白,以比较分析鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白的生物学特性。电镜观察细菌超微结构显示传代菌株外膜膜密度降低,外膜泡的... 详细信息

血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒菌株体外传200代获得了无毒力无免疫原性菌株,采用超声波裂解和超速离心法提取二株菌的外膜蛋白,以比较分析鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白的生物学特性。电镜观察细菌超微结构显示传代菌株外膜膜密度降低,外膜泡的数量明显减少,细胞质不均匀、内有空泡产生;免疫印迹结果表明二株菌的外膜蛋白免疫原性多肽存在明显区别;原代菌株的外膜蛋白仅与2型RA抗体出现特异性凝集,而传代菌株的外膜蛋白与1、2、10与11型RA抗体均出现凝集;二株菌的外膜蛋白均可诱导雏鸭产生抗体,但原代菌株外膜蛋白诱导雏鸭产生抗体滴度显著高于200代次菌株;原代菌株外膜蛋白免疫鸭对同源RA菌株的攻击可产生100%的免疫保护,而传代菌株外膜蛋白免疫鸭对同源RA菌株的攻击不产生免疫保护。序列分析显示两者的外膜蛋白A同源性达到99.9%。结果表明强毒菌株的外膜蛋白为良好的亚单位疫苗候选,体外连续传代对RA外膜蛋白生物学特性影响显著。

关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白血清型

兔源大肠埃希菌噬菌体分离鉴定与生物学特性研究

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浙江农业学报 2022年第8期34卷 1599-1608页

作者：王志鹏赵剑黄盼崔雪梅南黎宋厚辉鲍国连刘燕浙江农林大学动物科技学院•动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

对浙江省某兔场腹泻病兔进行病原分离鉴定,经革兰氏染色和PCR鉴定,分离出致病性大肠埃希菌1株,命名为ZJE1株。ZJE1株对链霉素、环丙沙星敏感。以ZJE1株为宿主菌,分离纯化出噬菌体4株,分别命名为ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5,并对其生物学特... 详细信息

对浙江省某兔场腹泻病兔进行病原分离鉴定,经革兰氏染色和PCR鉴定,分离出致病性大肠埃希菌1株,命名为ZJE1株。ZJE1株对链霉素、环丙沙星敏感。以ZJE1株为宿主菌,分离纯化出噬菌体4株,分别命名为ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5,并对其生物学特性、形态与结构特征进行研究。结果显示,4株噬菌体分离株均由六角形的头部、可收缩的尾鞘和尾管组成,均属于肌尾噬菌体科。采用双层平板法测定噬菌体分离株的宿主谱、最佳感染复数、pH稳定性、热稳定性和一步生长曲线。结果显示,ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5具有宿主特异性,在37-55℃的条件下可保持良好活性。ZRP2、ZRP3在pH值7的条件下可保持良好活性,ZRP4、ZRP5在pH值5-7的条件下可保持良好活性。ZRP2、ZRP3、ZRP5的潜伏期为11-19 min,均能在体外裂解ZJE1株。研究成果可为应用噬菌体治疗兔大肠埃希菌病提供研究基础与数据支持。

关键词：肠致病性大肠埃希菌噬菌体分离鉴定生物学特性

鸭疫里默氏杆菌强、弱菌株外膜蛋白的比较蛋白质组学研究

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生物化学与生物物理进展 2008年第6期35卷 691-694页

作者：刘燕韦强鲍国连季权安浙江省农科院畜牧兽医研究所杭州310021

应用双向电泳及质谱技术对血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒株及其体外传代200代(RA200)的弱毒菌株的外膜蛋白进行比较蛋白质组学研究,借此分析鸭疫里默氏杆菌的外膜蛋白表达特点,研究差异表达蛋白与细菌毒力的关系.在实验中检测到血清2型鸭... 详细信息

应用双向电泳及质谱技术对血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒株及其体外传代200代(RA200)的弱毒菌株的外膜蛋白进行比较蛋白质组学研究,借此分析鸭疫里默氏杆菌的外膜蛋白表达特点,研究差异表达蛋白与细菌毒力的关系.在实验中检测到血清2型鸭疫里默氏杆菌原代及其体外传代获得的弱毒菌株的外膜蛋白约表达60个蛋白质点(n=3),其中相差5倍以上3个.胶内酶解和肽质量指纹图谱分析后鉴定,W1为热休克蛋白Hsp20家族成员,W2、W3为转座酶,推测它们可能与里默氏杆菌的毒力密切相关.

关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白双向电泳毒力因子

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体内繁殖禽巴氏杆菌的提取及其交叉保护特性

中国兽医学报 2005年第1期25卷 16-18页

作者：韦强鲍国连佟承刚季权安浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

通过不同攻毒途径、不同攻毒剂量、不同采血时间及不同采血途径的试验表明 ,以翅静脉途径攻击多杀巴氏杆菌 ,剂量 10亿 /只 ,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血 ,可以自鸡体采集到最大量的含菌血 ,每只鸡 37～ 39m L ,再将血液进行差... 详细信息

通过不同攻毒途径、不同攻毒剂量、不同采血时间及不同采血途径的试验表明 ,以翅静脉途径攻击多杀巴氏杆菌 ,剂量 10亿 /只 ,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血 ,可以自鸡体采集到最大量的含菌血 ,每只鸡 37～ 39m L ,再将血液进行差速和蔗糖密度梯度离心 ,可最大限度地提取到血液中的巴氏杆菌 ,每只鸡 30 0～ 4 0 0亿的总菌量。该结果与报道的提取方法相比 ,效率提高了 10 0 0倍以上。提取的细菌灭活后免疫鸡 ,经异型菌交叉攻毒试验表明 ,体内繁殖的巴氏杆菌具有交叉保护特性 ,而体外培养菌则没有。用该方法提取的巴氏杆菌 ,其总蛋白和总糖含量均高于培养基培养菌。

关键词：体内血液交叉保护剂量颈静脉静脉途径采血时间巴氏杆菌养菌繁殖

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浙江省肉兔产业发展的几种新模式

中国养兔 2023年第1期 39-41页

作者：韦强肖琛闻季权安刘燕黄叶娥鲍国连浙江省农业科学院畜牧兽医研究所杭州310021

产业模式是劳动者在生产中自动形成的有利于生产效率最大化的一种生产方式,是根据生产的各要素相互组合而成的,但产业的主体为了产生最理想的经济效益需要根据生产需求的各要素变化随时作出必要的调整,这样才能促进产业的发展,适应时代... 详细信息

产业模式是劳动者在生产中自动形成的有利于生产效率最大化的一种生产方式,是根据生产的各要素相互组合而成的,但产业的主体为了产生最理想的经济效益需要根据生产需求的各要素变化随时作出必要的调整,这样才能促进产业的发展,适应时代的变化,这过程需要不断地探索并趋于完善。肉兔产业是以提供兔肉产品为主的产业,其主体是提供兔肉,围绕着如何提高肉产量,节约成本,增加销路,才能使产业可持续发展,形成效益最佳的肉兔产业。但市场是不断变化的,随着影响产业各种因素的变化,生产效益常常会不尽如人意,全国各地区肉类消费习惯的差异,加上市场容量所限,因此常常会影响肉兔产业的可持续发展。为了摆脱这种困境,养殖者穷则思变,不断地开拓和创新,探索新的生产模式,拓展新的产业空间,转型升级。为此,以中小规模为主的浙江肉兔养殖者敢为人先,拓展进取,探索出多种新的养殖模式,除了沿袭传统的肉兔消费方式外,呈现出多元化的产业格局,给人以新的启发。为了能使更多的养殖者能从中受益,打开想像空间,引导养殖者创新出更多理想的产业模式,也为了使肉兔能更好地持续发展,介绍浙江几种新的肉兔产业模式,抛砖引玉,以飨读者。

关键词：肉兔产业养殖模式肉类消费肉产量想像空间效率最大化产业模式肉兔养殖

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立

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浙江农业学报 2009年第5期21卷 434-438页

作者：邵泽香韦强鲍国连崔言顺刘燕季权安浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

参考GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了一对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的RT-PCR检测方法。以该方法对实验室分离并保存的DHV强毒株Z10株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到了预期大小... 详细信息

参考GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了一对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的RT-PCR检测方法。以该方法对实验室分离并保存的DHV强毒株Z10株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到了预期大小为699 bp的目的片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果与GenBank中的DHV-Ⅰ的相应基因序列比对分析,同源性均达90%以上,表明为DHV-Ⅰ的基因序列,对NDV,IBDV,DPV和GPV等常见病毒扩增结果为阴性。该方法敏感性检测结果表明,最低RNA模板检出量为24 pg。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于I型鸭病毒性肝炎病毒的快速诊断。

关键词： Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ) RT-PCR 检测