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帕米磷酸钠对成骨不全成骨细胞和成纤维细胞增殖分化以及矿化的影响

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帕米磷酸钠对成骨不全成骨细胞和成纤维细胞增殖分化以及矿化的影...

中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议

作者：鲁艳芹任秀智王延宙李公超佟加贝韩金祥山东省医学科学院天津医院山东省立医院

目的:研究双磷酸盐类药物帕米磷酸钠对成骨不全患者原代成骨细胞和成纤维细胞增殖分化及矿化的影响。方法:实验组:成骨不全患者成骨细胞及成纤维细胞;对照组:先天性胯脱位成骨细胞及成纤维细胞,两组各取三例样本。不同浓度(10M～10M)帕...

目的:研究双磷酸盐类药物帕米磷酸钠对成骨不全患者原代成骨细胞和成纤维细胞增殖分化及矿化的影响。方法:实验组:成骨不全患者成骨细胞及成纤维细胞;对照组:先天性胯脱位成骨细胞及成纤维细胞,两组各取三例样本。不同浓度(10M～10M)帕米磷酸钠分别作用48h、72h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;碱性磷酸酶(ALP)活性测定法(ELISA)检测对成骨不全症成骨、成纤维细胞成骨分化的影响。药物处理14天后进行Von kossa染色评估矿化能力。

关键词：

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胰腺癌蛋白表达谱的生物信息学分析

胰腺癌蛋白表达谱的生物信息学分析

成骨不全病人原代成骨细胞中胶原蛋白提取方法改良

华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：李天亮钟宁周小艳崔亚洲韩金祥鲁艳芹张更林山东省医药生物技术研究中心山东省医学科学院卫生部生物技术药物重点实验室山东省医学分子生物学重点实验室

目的通过生物信息学方法分析胰腺癌蛋白质组学数据。方法对通过蛋白质组学方法筛选出的98种胰腺癌表达上调蛋白使用NCI-Nature、Osprey1.2和DAVID软件分别进行信号通路分析、蛋白质相互作用分析及基因本体论(Gene ontology,GO)分析。结...

目的通过生物信息学方法分析胰腺癌蛋白质组学数据。方法对通过蛋白质组学方法筛选出的98种胰腺癌表达上调蛋白使用NCI-Nature、Osprey1.2和DAVID软件分别进行信号通路分析、蛋白质相互作用分析及基因本体论(Gene ontology,GO)分析。结果98种基因共涉及50条信号通路,其中富集度P值<0.05的信号通路有15条,最具显著性的为HIF-α转录因子信号通路;98种基因在"细胞骨架生成"、"细胞骨架"及"蛋白结合"3种GO中富集

关键词：

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医学检验与临床 2016年第1期27卷 1-4页

作者：张宇昂鲁艳芹任秀智刘军龙滕元伟韩金祥济南大学-山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250200 卫生部生物技术药物重点实验室山东省罕少见病重点实验室山东省医药生物技术研究中心山东省医学科学院济南250062 天津市武清区人民医院天津301700

目的：本文对成骨不全患者骨骼中胶原蛋白的提取方法进行探讨，拟建立较为稳定的和可控的提取技术。为该病的治疗寻找新思路。方法：选取成骨不全患者在接受外科矫形手术中废弃的骨骼组织，经原代细胞培养后，采用盐析法配合胃蛋白酶消... 详细信息

目的：本文对成骨不全患者骨骼中胶原蛋白的提取方法进行探讨，拟建立较为稳定的和可控的提取技术。为该病的治疗寻找新思路。方法：选取成骨不全患者在接受外科矫形手术中废弃的骨骼组织，经原代细胞培养后，采用盐析法配合胃蛋白酶消化提取细胞内和培养液中胶原蛋白。分别选取0．05～0．2mM抗坏血酸、0．1～0．25mMβ-氨基丙腈（BAPN）、0．5-1．5mg／mL胃蛋白酶进行梯度实验，比较胶原蛋白提取效果。抗坏血酸作用时间2到5天，每间隔24小时取样一次。胃蛋白酶作用时间，分别为5小时、10小时和20小时三个时间点进行比对。结果：从细胞中和培养液中提取的胶原蛋白，最适的胃蛋白酶消化时间为5小时，作用浓度1mg／mL。培养液中抗坏血酸浓度在0．1-0．15mM之间，β-氨基丙腈浓度达到0．1mM时，连续培养96h以上胶原蛋白产出量较高。结论：实验初步说明，通过优化后的胶原蛋白提取方法，可有效提取患者原代成骨细胞及细胞培养液中的胶原蛋白，

关键词：胶原蛋白提取原代成骨细胞盐析成骨不全

成骨不全组织病理特征分析及其与Ⅰ型胶原蛋白基因突变相关性

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成骨不全组织病理特征分析及其与Ⅰ型胶原蛋白基因突变相关性

大鼠骨髓间充质干细胞原代培养及成骨成脂分化能力染色鉴定

中华医学会第五次中青年骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议

作者：鲁艳芹任秀智王延宙佟加贝李虎李功超韩金祥山东省医学科学院天津医院山东省立医院

目的制备成骨不全症临床患者皮肤弹力纤维染色切片,骨骼肌、骨组织HE染色切片来分析成骨不全症组织病理特征,探讨其病理特征与亚型及基因突变之间的关联性。方法经山东省医学科学院伦理委员会通过以及患者知情同意,收集45例成骨不全症...

目的制备成骨不全症临床患者皮肤弹力纤维染色切片,骨骼肌、骨组织HE染色切片来分析成骨不全症组织病理特征,探讨其病理特征与亚型及基因突变之间的关联性。方法经山东省医学科学院伦理委员会通过以及患者知情同意,收集45例成骨不全症患者及10例骻脱位患者包括皮肤、肌肉以及骨骼在内的组织标本。其中,皮肤活检组织标本进行常规石蜡切片,进行弹力纤维以及胶原纤维染色。同时制备成骨不全症骨骼肌、骨组织HE切片各30例,

关键词：

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罕少疾病杂志 2016年第2期23卷 1-3,F0002页

作者：韩振忠鲁艳芹王延宙任秀智滕元伟张宇昂韩金祥济南大学山东省医学科学院生命与医学科学学院山东济南250200 山东省医药生物技术研究中心山东省医学科学院山东济南250062 山东省立医院山东济南250021 天津市武清区人民医院骨三科天津301700

目的实验旨在建立一套简便有效的骨髓间充质干细胞原代培养、诱导分化及染色方法,观测骨髓间充质干细胞生物学特性,及其成骨、成脂分化潜能,为后续进行骨髓间充质干细胞基因修饰实验做好准备。方法本实验通过全骨髓培养法分离骨髓间充... 详细信息

目的实验旨在建立一套简便有效的骨髓间充质干细胞原代培养、诱导分化及染色方法,观测骨髓间充质干细胞生物学特性,及其成骨、成脂分化潜能,为后续进行骨髓间充质干细胞基因修饰实验做好准备。方法本实验通过全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞,并用诱导分化培养液做定向诱导培养,观察骨髓间充质干细胞向成骨及成脂肪细胞分化过程中的细胞形态学变化,进行成骨成脂细胞染色鉴定,以探讨骨髓间充质干细胞的分离培养方法、生长规律及向成骨成脂细胞分化的条件。结果 (1)通过全贴壁法成功进行了骨髓间充质干细胞原代及传代培养并绘制出第4代细胞生长曲线;(2)通过茜素红染色验证了骨髓间充质干细胞的成骨分化能力;(3)通过油红O染色验证骨髓间充质干细胞的成脂分化能力。结论全贴壁法提取的大鼠骨髓间充质干细胞经传代4次左右可达到一定纯度,在一定诱导条件下,经特定染色方法鉴定,可分化为成骨细胞,成脂细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞分离诱导分化染色

成骨不全14种长链非编码RNA差异表达分析

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罕少疾病杂志 2016年第2期23卷 55-57页

作者：滕元伟任秀智王延宙张宇昂韩振忠韩金祥鲁艳芹济南大学、山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250022 山东省医学科学院卫生部生物技术药物重点实验室山东省罕少见病重点实验室山东省医药生物技术研究中心山东济南250062 天津市武清区人民医院骨三科天津301700 山东省立医院山东济南250021

目的研究14种长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lnc RNA)在成骨不全骨组织中的表达。方法采用先天性骻关节脱位患者骨组织作为对照,应用RT-q PCR分析成骨不全骨组织中14种lnc RNA(ATB、EBIC、HEIH、h LACR1、HOTAIR、PVT1、LET、Loc28... 详细信息

目的研究14种长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lnc RNA)在成骨不全骨组织中的表达。方法采用先天性骻关节脱位患者骨组织作为对照,应用RT-q PCR分析成骨不全骨组织中14种lnc RNA(ATB、EBIC、HEIH、h LACR1、HOTAIR、PVT1、LET、Loc285194、SRHC、LSINCTS、Nbla10727、Nbla12061、PRNCR1与UC.388)的表达,使用REST-2009软件进行数据统计分析。结果与对照组相比,14种lnc RNA中仅PRNCR1表达下调并具有显著性差异;ATB、EBIC、HOTAIR、PVT1、LET、Loc285194、SRHC等7种lnc RNA表达差异均小于2倍,LSINCTS表达下调,HEIH、h LACR1、Nbla10727、Nbla12061与UC.388等5种lnc RNA表达上调,但均无统计学意义。结论 PRNCR1在成骨不全骨组织中低表达,其在成骨不全疾病的功能尚有待于进一步研究。

关键词：成骨不全 lncRNA 骨组织 PRNCR1

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槲皮素对肝细胞氧化应激损伤的保护作用

天津医药 2015年第10期43卷 1100-1103页

作者：沈钦海秦召敏刘丽岳淑英吕建华鲁艳芹山东医学高等专科学校 250002 山东省医药生物技术研究中心

目的探讨槲皮素对氧化应激Chang liver细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法培养Chang liver细胞,将细胞随机分为正常对照组、H2O2组及槲皮素低、中、高剂量组。MTT法检测肝细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二... 详细信息

目的探讨槲皮素对氧化应激Chang liver细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法培养Chang liver细胞,将细胞随机分为正常对照组、H2O2组及槲皮素低、中、高剂量组。MTT法检测肝细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二氯荧光素乙二酯(DCFH-DA)细胞内活性氧(ROS)荧光染色后,荧光显微镜观察照相及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平。试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量。采用Western blot法检测Nrf2蛋白的表达。结果 H2O2组较正常对照组细胞存活率、SOD、GSH-Px、CAT活性降低(P<0.05),凋亡率、平均荧光强度(MFI)及MDA升高(P<0.05)。不同剂量槲皮素组细胞存活率及细胞内SOD、GSH-Px、CAT活性高于H2O2组(P<0.05),MDA、凋亡率、MFI水平低于H2O2组(P<0.05)。槲皮素低、中及高剂量组Nrf2蛋白均高于H2O2组(P<0.05)。结论槲皮素对氧化应激肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2-ARE通路,进而增强下游抗氧化基因的表达有关。

关键词：槲皮素氧化性应激超氧化物歧化酶过氧化氢酶谷胱甘肽过氧化酶 Chang liver细胞 Nrf2/ARE通路