检索结果-南通市图书馆

基于第三代PacBio测序技术的家蚕微孢子虫浙江株全基因组及其比较分析

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蚕业科学 2023年第6期49卷 498-514页

作者：梁喜丽何金涛张楠鲁兴萌邵勇奇浙江大学动物科学学院蚕蜂研究所杭州310058 浙江科技大学生物与化学工程学院杭州310023

家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是危害家蚕养殖业的主要病原微生物,已在不同养蚕地区发现多种株型。本研究采用第三代基因组测序技术PacBio RSⅡ对分离自浙江地区的家蚕微孢子虫浙江株(N.bombycis Zhejiang)进行基因组测序,并对其基因... 详细信息

家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是危害家蚕养殖业的主要病原微生物,已在不同养蚕地区发现多种株型。本研究采用第三代基因组测序技术PacBio RSⅡ对分离自浙江地区的家蚕微孢子虫浙江株(N.bombycis Zhejiang)进行基因组测序,并对其基因组序列特征和基因功能注释进行分析。该微孢子虫基因组测序数据量为2.34 Gb,基因组大小为17.3 Mb,共拼接获得95个scaffolds,基因组覆盖深度达到138倍。比较基因组分析结果显示,N.bombycis Zhejiang与N.bombycis CQ1的基因组大小和GC含量相似,并且具有较好的基因组共线性关系。GO注释热图分析表明,不同微孢子虫基本功能分类基因丰度相似,但是浙江株在代谢过程等方面具有更高丰度。基于GLUT3氨基酸序列的系统进化分析显示,家蚕微孢子虫GLUT3蛋白主要分为2个亚家族,浙江株有3个GLUT3蛋白与CQ1株的亲缘关系最近,其余8个则与柞蚕微孢子虫形成进化支。利用实时荧光定量PCR对葡萄糖诱导后的浙江株GLUT3基因表达模式进行分析,结果表明,50 mmol/L葡萄糖诱导1 h后,A3834和A5849基因表达显著升高。各微孢子虫的GLUT3保守基序片段构成转运体的核心α螺旋结构,分子对接分析表明该片段氨基酸残基可能是葡萄糖结合和蛋白质稳定的关键位点。此外,家蚕微孢子虫2个GLUT3亚家族的蛋白序列长度、跨膜次数和平均疏水性均存在不同,推测2株家蚕微孢子虫在葡萄糖的摄取转运方面可能有所差异。研究结果为今后深入研究家蚕微孢子虫不同株型的进化机制和与宿主的相互作用提供了支撑。

关键词：家蚕微孢子虫基因组测序功能注释葡萄糖转运蛋白3

家蚕微粒子虫(Nosema bombycis)与其形态变异株的侵染性及孢子表面蛋白的比较研究

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中国农业科学 2004年第11期37卷 1682-1687页

作者：黄少康鲁兴萌浙江大学动物科学学院无脊椎动物病理实验室浙江大学动物科学学院无脊椎动物病理实验室杭州310029福建农林大学蜂学学院福州350002

用家蚕微粒子虫(Nosemabombycis,Nb)连续感染桑尺蠖(Hemerophilaatrilineata)24次后,获得孢子显著变粗短(P<0.01)的形态变异株(24Nbh)。Nb与24Nbh的侵染性及表面蛋白的比较研究表明,24Nbh感染2龄起蚕(Bombyxmori)的感染中浓度(IC50)为1.98×104spores/ml,而Nb为1.72×103spores/ml,即Nb连续感染桑尺蠖24次后对家蚕的侵染性下降了11.5倍。24Nbh回复感染家蚕一次后的孢子,对2龄起蚕的IC50与Nb对照相差6.9倍,即对家蚕的侵染性又快速恢复;与24Nbh相比,孢子长径及长短径比虽然显著回复(P<0.01),但仍小于Nb(P<0.05)。SDS-PAGE显示,Nb和24Nbh孢子表面蛋白的带型基本一致,均有4条主带(12kD、17kD、30kD、33kD),但在量上差异明显。2D-PAGE显示,当上样量均为120μg时,二者孢子表面蛋白都以中偏酸性蛋白(pI5～7)为主,但表面蛋白在量和种类上均存在明显差异,发现5个可疑的差异蛋白点,推测这种差异与微孢子虫的侵染性变异有关。

关键词：家蚕微粒子虫形态变异侵染性表面蛋白双向电泳

家蚕人工饲料来源毕赤酵母菌的分离及对饲料酸碱度的影响

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蚕业科学 2022年第2期48卷 152-161页

作者：冯荟荟张宪翠张楠梁喜丽邵勇奇鲁兴萌浙江大学动物科学学院杭州310058

为探明真菌繁殖对家蚕人工饲料酸碱度的影响,采用常规分离纯化技术,从人工饲料育养蚕环境的蚕座上获得1株可碱化饲料的真菌,经形态学和ITS序列鉴定,为库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudravzevii)。该菌株接种至家蚕人工饲料,使饲料pH在... 详细信息

为探明真菌繁殖对家蚕人工饲料酸碱度的影响,采用常规分离纯化技术,从人工饲料育养蚕环境的蚕座上获得1株可碱化饲料的真菌,经形态学和ITS序列鉴定,为库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudravzevii)。该菌株接种至家蚕人工饲料,使饲料pH在5 d内由初始值上升至7.54;接种至不同pH和葡萄糖含量的液体YPD中,其能适应繁殖基质pH的变化,碱化培养基质,使酸性培养基pH在6 h内升高,在24 h内上升到7.86(pH 5.00)和8.26(pH 6.00);培养基质中葡萄糖含量影响碱化,低浓度葡萄糖(1.2%)培养基碱化现象消失。菌株接种至pH为3.00、5.00和7.00的不含葡萄糖YPD培养基中培养不同时间,对环境中氨气释放量、碱化相关基因表达及谷氨酸脱氢酶活性进行研究,结果表明,与添加2%葡萄糖相比,固体培养基中氨气释放量在培养24 h(pH 5.00)和4 h(pH 7.00)时极显著上升(P<0.01),随后持续升至最高值280 mg/m^(3)(pH 7.00);谷氨酸脱氢酶活性逐渐升高,在12 h(pH 5.00)和24 h(pH 7.00)时达到最大值53.84 U/mL和24.84 U/mL,极显著高于对照组(P<0.01);液体培养基中碱化相关基因GDH2、DUR1,2和ATO3表达水平呈先升高后降低趋势,GDH2转录水平分别在8 h(pH 3.00)、4 h(pH 5.00)和8 h(pH 7.00)上调最高,极显著高于对照组(P<0.01),随后下降,ATO3转录水平分别在4 h(pH 3.00)、12 h(pH 5.00)和8 h(pH 7.00)显著上调,且最高(P<0.05),然后下降,DUR1,2转录水平均在8 h极显著高于对照组(P<0.01)。添加抗霉素A,碱化程度下降甚至消失。该研究可为解明家蚕人工饲料的保鲜机制及研发保鲜技术提供参考。

关键词：真菌家蚕人工饲料酸碱度

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浙江省桑园土壤病原菌及其微生态调查

浙江大学学报（农业与生命科学版） 2022年第4期48卷 493-503页

作者：金杏丽何金涛蔡永良李坤峰陈乐阳鲁兴萌邵勇奇德清县农业技术推广中心浙江湖州313200 浙江大学动物科学学院蚕蜂研究所杭州310058 德清县莫干天竺蚕种有限责任公司浙江湖州313204 浙江大学农业试验站杭州310058 金华市农业农村局浙江金华321017

桑椹菌核病是果桑生产中的重要病害。为了解桑园土壤中病原菌的存在情况及其微生态,分别从浙江4个地域[德清县(DQ)、长兴县(CX)以及金华市多湖街道(JD)和江东镇(JJ),其中长兴桑园采用大棚栽培,其他为露地栽培]及四川1个地域[对照(CK),... 详细信息

桑椹菌核病是果桑生产中的重要病害。为了解桑园土壤中病原菌的存在情况及其微生态,分别从浙江4个地域[德清县(DQ)、长兴县(CX)以及金华市多湖街道(JD)和江东镇(JJ),其中长兴桑园采用大棚栽培,其他为露地栽培]及四川1个地域[对照(CK),极少或未发生桑椹菌核病]的桑园采集土壤样本,并对样本中的真菌和细菌进行内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)和16S rRNA基因高通量测序。结果表明:德清(DQ)、江东(JJ)及多湖(JD)3个桑园土壤的菌核病病原杯盘菌属(Ciboria)的相对丰度分别为28.84%、60.17%、70.15%,未见桑椹菌核病病果的长兴(CX)和四川(CK)桑园土壤分别为0.02%和0.06‱。长兴(CX)桑园土壤的主要真菌类群为被孢霉属(Mortierella)、毛壳菌属(Chaetomium)和腐质霉属(Humicola),其相对丰度分别为36.46%、21.59%、15.93%;四川(CK)桑园土壤的主要真菌类群为青霉属(Penicillium)、镰刀菌属(Fusarium)和Fusicolla,其相对丰度分别为24.05%、15.35%、9.75%。各桑园土壤的细菌多样性丰富,其中假单胞菌属(Pseudomonas)是唯一在5个地域桑园土壤样本中均有可鉴定序列的细菌,但相对丰度最高的江东(JJ)桑园土壤也仅有6.81%。综上所述,杯盘菌属的相对丰度、真菌和细菌的多样性既揭示了桑园土壤菌核病病原与土壤微生态之间的复杂关系,也暗示了通过改变土壤微生态结构来防控桑椹菌核病的可能性。

关键词：桑椹菌核病杯盘菌属土壤微生态

家蚕消化液中抗链球菌蛋白含量和抑菌活性的研究

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蚕业科学 1990年第1期16卷 33-38页

作者：鲁兴萌金伟浙江农业大学蚕学系

分析了家蚕幼虫五龄不同时间,消化液中抗链球菌蛋白(ASP)的含量和抑菌活性的强弱,不同蚕品种ASP的含量和抑菌活性,五龄起蚕过度饥饿对ASP含量和抑菌活性的影响.并调查了不同家蚕品种五龄不同时期添食Strcptococcus属细菌的致病情况.研... 详细信息

分析了家蚕幼虫五龄不同时间,消化液中抗链球菌蛋白(ASP)的含量和抑菌活性的强弱,不同蚕品种ASP的含量和抑菌活性,五龄起蚕过度饥饿对ASP含量和抑菌活性的影响.并调查了不同家蚕品种五龄不同时期添食Strcptococcus属细菌的致病情况.研究的结果证明:ASP的含量和抑菌活性与家蚕幼虫的强健性有关,ASP可能是家蚕幼虫防御细菌性胃肠病发生的一种重要的物质.另外,还发现了食桑期的蚕ASP由三种蛋白质组成,而起蚕比食桑期的蚕要少一种蛋白质组份.

关键词：家蚕抗链球菌蛋白抑菌活性消化液

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家蚕微粒子病防控技术研究的发展现状与趋势

蚕业科学 2016年第6期42卷 945-952页

作者：鲁兴萌邵勇奇浙江大学蚕蜂研究所杭州310058

家蚕微粒子病是养蚕业的毁灭性病害之一。对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)进入饲养家蚕群体的路径、在家蚕个体内繁殖扩散和在饲养家蚕群体中的扩散规律3个方面的研究进展,以及与此相关的家蚕微粒子病防控技术的发展进行了概述。提出... 详细信息

家蚕微粒子病是养蚕业的毁灭性病害之一。对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)进入饲养家蚕群体的路径、在家蚕个体内繁殖扩散和在饲养家蚕群体中的扩散规律3个方面的研究进展,以及与此相关的家蚕微粒子病防控技术的发展进行了概述。提出在防止家蚕微孢子虫进入饲养家蚕群体方面,必须根据生产实际并掌握病害流行规律构建因地制宜的防控技术体系;在家蚕个体抗病能力提升方面,家蚕微孢子虫与家蚕的互作机制解明,新型育种技术和微生态技术的应用等非常值得期待;在控制微粒子病在家蚕群体中扩散方面,解明感染个体在蚕座内传播的基本规律,构建新型检疫体系与研发检测技术是迫切需要解决的关键问题。

关键词：家蚕家蚕微孢子虫微粒子病流行规律防控技术

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中国蚕桑生态系统能值分析

应用生态学报 2006年第2期17卷 233-236页

作者：陈敏刚金佩华黄凌霞鲁兴萌浙江大学动物科学学院杭州310029

蚕桑生态系统是我国农业生态系统的重要组成部分.本文采用能值评估原理和方法,系统研究了中国蚕桑生态系统的内部结构及其与外界自然、环境、经济之间的关系,定量计算了反映中国蚕桑生态系统的能值指标,并与中国农业生态系统相比较.结... 详细信息

蚕桑生态系统是我国农业生态系统的重要组成部分.本文采用能值评估原理和方法,系统研究了中国蚕桑生态系统的内部结构及其与外界自然、环境、经济之间的关系,定量计算了反映中国蚕桑生态系统的能值指标,并与中国农业生态系统相比较.结果表明,中国蚕桑生态系统能值投入率(EIR)为3.78,能值产出率(EYR)为4.68,环境负载率(ELR)为0.18,系统能值可持续指标(ESI)为26.0,表明中国蚕桑生态系统环境压力小,生态效益良好,但需进一步提升科技水平,以降低劳动力投入,促进蚕桑资源综合利用.

关键词：蚕桑生态系统能值可持续性

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家蚕微粒子病检验技术综述

蚕业科学 2016年第4期42卷 717-721页

作者：鲁兴萌邵勇奇浙江大学蚕蜂研究所杭州310058

家蚕微粒子病检验技术是防控该传染性病害流行的关键技术,该技术的建立和实施在我国家蚕微粒子病流行控制中发挥了重要的作用,如何改进与发展该技术对养蚕业的可持续发展具有重要意义。本文在综述家蚕微粒子病检验技术发展过程及存在主... 详细信息

家蚕微粒子病检验技术是防控该传染性病害流行的关键技术,该技术的建立和实施在我国家蚕微粒子病流行控制中发挥了重要的作用,如何改进与发展该技术对养蚕业的可持续发展具有重要意义。本文在综述家蚕微粒子病检验技术发展过程及存在主要问题的基础上提出:厘清技术管理体系,明确蚕种质量检验和监管主体与责任,构建良性竞争体系是基础;构建技术性和经济性符合生产实际的检测技术及配套抽样技术是关键;解明家蚕微粒子病蚕座内流行规律,以及科学设置风险评估参数是核心。

关键词：家蚕微粒子病检验技术流行规律风险评估

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一种家蚕微孢子虫感染成品卵检测方法的研究

蚕业科学 2023年第5期49卷 414-422页

作者：朱春群张宪翠何恩洁范明亮孟正乐楼霞邵勇奇鲁兴萌浙江省农业技术推广中心杭州310019 湖州师范学院生命科学学院浙江湖州313000 杭州市蚕桑技术推广总站杭州310017 浙江大学新农村发展研究院杭州310058

感染家蚕微孢子虫的成品卵检测是业内关注的技术问题之一。用磨碎管分装1000粒蚕卵并加海绵塞,进行一段式催青的实验室二日孵化率达98.25%或以上,对生产用不同蚕品种、越年或冷藏浸酸蚕种及不同单位生产蚕种的二日孵化率最低为94.40%。... 详细信息

感染家蚕微孢子虫的成品卵检测是业内关注的技术问题之一。用磨碎管分装1000粒蚕卵并加海绵塞,进行一段式催青的实验室二日孵化率达98.25%或以上,对生产用不同蚕品种、越年或冷藏浸酸蚕种及不同单位生产蚕种的二日孵化率最低为94.40%。用含0.01%十二烷基磺酸钠和2.00%氢氧化钠的溶液浸泡和磨碎蚕卵样本(约1000粒),固形物去除率为83.38%。5龄起蚕添食感染5×10^(5)颗/mL家蚕微孢子虫孢子悬浮液后获取的混合蚕卵,在催青孵化后第7天检出率明显上升。1000粒蚕卵混入3000颗家蚕微孢子虫孢子的检出率为100%。蚕卵磨碎液用PBS缓冲液(pH=7.2~7.6)稀释40倍或以上时,qPCR法检测可稳定检出家蚕微孢子虫,检测灵敏度为4×10^(6)颗/mL,低于光学显微镜法的1.5×10^(3)颗/mL。105个一代杂交蚕种母蛾检疫批(166623张毛种)母蛾检测和蚕卵集团检测的检出情况类似。不论是母蛾检测还是成品卵检测都涉及家蚕微孢子虫的胚传率和流行病学风险管控的阈值确定,上述研究提供了一种成品卵集团检测的方法,但实际应用尚需更为丰富的流行病学调查数据。

关键词：家蚕家蚕微孢子虫成品卵集团检测