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HIV-1耐药性基因型检测法在临床治疗随访中的应用

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中国性病艾滋病防治 2002年第2期8卷 74-77页

作者：徐军强魏飞力梅珊曹韵贞卫生部艾滋病预防与控制中心北京市100050

目的探索HIV-1耐药性基因型检测法在高效抗逆转录病毒疗法（HAART）治疗组中监测HIV-1耐药性病毒株的临床应用。方法从接受HAART的HIV-1感染者血浆中抽提病毒RNA,采用套式RT-PCR方法扩增HIV-1的PR和RT基因片段,并对扩增片段进行序列... 详细信息

目的探索HIV-1耐药性基因型检测法在高效抗逆转录病毒疗法（HAART）治疗组中监测HIV-1耐药性病毒株的临床应用。方法从接受HAART的HIV-1感染者血浆中抽提病毒RNA,采用套式RT-PCR方法扩增HIV-1的PR和RT基因片段,并对扩增片段进行序列测定和分析。结果HIV-1耐药性基因型检测法能够从血浆病毒载量在 1000拷贝/ml以上的样本中得到扩增产物。在 16例接受 HAART的 HIV-1感染者中,发现 1例感染者 DP31的 PR和 RT基因出现了突变,这些突变为L63P、T215F、K219Q和M184V。所有突变均与公开报道的结果一致,并被证明与HIV-1的耐药性有关。另外,DP31在接受HAART前已出现T215F、K219Q的耐药性突变,究其原因,还有待进一步研究。结论HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测接受HAART的HIV-1感染者血浆中耐药性病毒株的存在。该方法提供的结果准确、可靠,并且为临床医生评价HAART效果,合理选择和及时优化药物组合方案提供了可靠的依据。

关键词： HIV-1 耐药性蛋白酶基因逆转录酶基因 RT-PCR 序列测定

HBV包膜蛋白N-糖基化修饰变异与HBV相关慢加急性肝衰竭发生和转归的关系

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临床肝胆病杂志 2018年第7期34卷 1428-1431页

作者：陈杰姚明琦魏飞力徐金凤郭乐乐杨海霞李铭张晶首都医科大学附属北京佑安医院丙肝和中毒肝病科北京100069 山西省运城市第二医院肝病二科山西运城044000 北京市肝炎研究所北京100069 安徽省阜阳市第二人民医院安徽阜阳236000

目的探索HBV包膜蛋白N-糖基化修饰变异与慢性乙型肝炎患者发生慢加急性肝衰竭(ACLF)的关系。方法入选HBV-ACLF患者90例,同期60例慢性乙型肝炎作对照。套式PCR扩增患者的HBV S区序列并测序,分析HBV包膜蛋白N-糖基化情况与ACLF发生的关系... 详细信息

目的探索HBV包膜蛋白N-糖基化修饰变异与慢性乙型肝炎患者发生慢加急性肝衰竭(ACLF)的关系。方法入选HBV-ACLF患者90例,同期60例慢性乙型肝炎作对照。套式PCR扩增患者的HBV S区序列并测序,分析HBV包膜蛋白N-糖基化情况与ACLF发生的关系,并分析ACLF疾病严重程度、90 d生存率与HBV包膜蛋白N-糖基化的关系。结果慢性乙型肝炎患者纳入分析51例(85.0%),HBV-ACLF患者纳入分析79例(87.8%)。慢性乙型肝炎患者Asn59 N-糖基化样本33例(64.7%),Asn4 N-糖基化样本21例(41.2%),高于HBV-ACLF患者的Asn59 N-糖基化样本16例(20.3%)(P0.05)。结论 HBV包膜蛋白变异导致的Asn59、Asn4 N-糖基化水平降低与ACLF发生可能相关。

关键词：肝炎病毒乙型肝功能衰竭病毒包膜蛋白类糖基化

基于拉米夫定的治疗方案对HIV/HBV合并感染者HBV耐药的影响

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中国艾滋病性病 2016年第6期22卷 407-409,432页

作者：吴亚松邓晓军张伟伟鲁鸿燕魏飞力杨炼马烨刘中夫张福杰中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206 衡阳市第三人民医院湖南衡阳421005 广西壮族自治区疾病预防控制中心南宁530028 北京市肝病研究所北京100069 首都医科大学附属北京地坛医院感染科北京100015

目的研究拉米夫定(3TC)为基础的抗反转录病毒治疗(ART)对艾滋病病毒和乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HIV/HBV)合并感染者HBV耐药的影响。方法依托既往建立的使用仅3TC有抗HBV作用ART方案的HIV/HBV合并感染队列,选择进入队列时HBV DNA>1000拷贝... 详细信息

目的研究拉米夫定(3TC)为基础的抗反转录病毒治疗(ART)对艾滋病病毒和乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HIV/HBV)合并感染者HBV耐药的影响。方法依托既往建立的使用仅3TC有抗HBV作用ART方案的HIV/HBV合并感染队列,选择进入队列时HBV DNA>1000拷贝/mL感染者,选取治疗48周前后采集的血浆标本,用测序法检测HBV耐药,分析48周前后HBV耐药突变。结果进入队列时艾滋病初治和经治患者分别为5例和14例,6例经治患者有HBV耐药突变。48周后,5例初治患者和6例经治患者获得乙肝病毒学应答,8例经治患者HBV未被抑制,其中4例出现新的HBV耐药突变。结论对初治HIV/HBV合并感染,基于仅3TC有抗HBV作用的ART短期内对HBV有较好抑制作用,长期治疗应优先选择含3TC和替诺福韦(TDF)的方案。

关键词：乙型肝炎艾滋病病毒拉米夫定耐药

PCR产物直接测序法检测乙肝病毒耐药位点的临床研究

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北京医学 2011年第12期33卷 961-965页

作者：金怡魏飞力马丽娜陈新月首都医科大学附属北京佑安医院国际医疗部 100069 首都医科大学附属北京佑安医院艾滋病实验室 100069

目的总结核苷(酸)类药物[nucleos(t)ide analogue,NA]长期治疗应答不佳患者的临床特征,便于在耐药检测前或不具备耐药检测条件时对患者的耐药情况进行初步判断,指导治疗。方法使用直接测序法对89例NA相关耐药的慢性乙型肝炎(chronichepa... 详细信息

目的总结核苷(酸)类药物[nucleos(t)ide analogue,NA]长期治疗应答不佳患者的临床特征,便于在耐药检测前或不具备耐药检测条件时对患者的耐药情况进行初步判断,指导治疗。方法使用直接测序法对89例NA相关耐药的慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)患者进行检测,分析其耐药变异位点,总结耐药患者的临床特征。结果 89例长期使用NA治疗应答不佳的CHB患者的耐药位点检测阳性率明显高于未用药的对照组(44.9%vs.6.7%,P<0.001)。拉米夫定(lamivudine,LAM)耐药相关病例的耐药位点检测阳性率为45.0%。阿德福韦酯(ade-fovirdipivoxil,ADV)耐药相关病例的耐药位点检测阳性率为20.0%。ADV相关耐药位点检测阳性组应用ADV的疗程明显长于阴性组[(23.82±14.13)个月vs.(7.79±11.74)个月,P<0.001]。发生病毒学突破(或反弹)组耐药位点检测阳性率明显高于原发无应答组(58.33%vs.29.27%,P=0.006)。LAM治疗失败ADV再治疗患者比ADV初治者耐药检出率高,具有显著性差异(42.86%vs.11.54%,P=0.010)。多药组的耐药检出率明显高于单药组(62.75%vs.21.05%,P<0.001),且多位点联合耐药检出率高(P=0.004)。结论长期NA治疗应答不佳患者耐药人群的临床特征是:多药使用者、病毒学突破(或反弹)者、长疗程ADV用药者。了解这些高危人群的特点对于在耐药检测前或不具备耐药检测条件时对患者的耐药情况进行初步判断,进而挽救治疗具有指导意义。

关键词：慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物耐药 PCR产物直接测序法

血样的不同处理对HIV-1病毒载量检测值的影响

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中国人兽共患病学报 2008年第10期24卷 916-918页

作者：张彤代丽丽魏飞力计云霞焦艳梅首都医科大学附属北京佑安医院北京100054

目的观察血样本存放时间、存放温度及冻融次数对HIV病毒载量检测值的影响。方法收集同一HIV感染者的抗凝血标本,在不同时间分离血浆,并在不同温度下保存不同时间或经过不同次数的冻融,应用HIV-1核酸序列扩增技术(NASBA法)检测各样本的... 详细信息

目的观察血样本存放时间、存放温度及冻融次数对HIV病毒载量检测值的影响。方法收集同一HIV感染者的抗凝血标本,在不同时间分离血浆,并在不同温度下保存不同时间或经过不同次数的冻融,应用HIV-1核酸序列扩增技术(NASBA法)检测各样本的病毒载量进行比较。结果与全血样本相比,以血浆形式保存的样本HIV病毒载量更加稳定;病毒载量的下降主要发生在采血后的6h内;-20℃保存的血浆样本反复冻融3次,病毒载量会显著下降。结论对于运送HIV病人的外周血进行病毒载量检测时,应尽量以低温和血浆形式保存,并尽快的送到检测单位。

关键词： HIV-1 病毒载量影响因素

肝细胞癌患者肝癌组织中乙型肝炎病毒核心启动子变异分析

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中国病毒病杂志 2013年第4期3卷 264-267页

作者：魏飞力石英李庆柳雅立陈杰陈德喜吴昊首都医科大学附属北京佑安医院艾滋病研究北京市重点实验室北京100069 北京市肝病研究所北京100069 首都医科大学附属北京佑安医院感染科北京100069

目的深入了解乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)核心启动子(core promoter,CP)变异在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者肝癌组织标本中的发生情况。方法分别对北京佑安医院52例肝细胞癌患者,45例肝硬化(cirrhosis of liver,LC)和25例... 详细信息

目的深入了解乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)核心启动子(core promoter,CP)变异在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者肝癌组织标本中的发生情况。方法分别对北京佑安医院52例肝细胞癌患者,45例肝硬化(cirrhosis of liver,LC)和25例慢性乙肝(chronic hepatitis B,CH)患者肝组织标本中HBV前C区和CP区进行克隆测序,对核心启动子变异情况进行统计分析。结果与慢性乙型肝炎和肝硬化比较,G1613A、A1727C、A1762T、G1764A和1896A突变比例在肝细胞癌患者中更高(P<0.05)。肝细胞癌组中核心启动子不同调控区的突变发生率显著高于慢性乙肝和肝硬化组(P<0.05)。结论从组织学角度进一步支持肝细胞癌组中核心启动子区突变的高流行率,特别是A1762T/G1764A双突变可以作为肝细胞癌发生的预测指标,其他突变位点对于病毒复制、转录以及肝细胞癌发生的作用,有待进一步研究确证。

关键词：乙型肝炎病毒核心启动子肝组织突变

HIV-1感染者体内自然杀伤T细胞和免疫抑制性T细胞的变化

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中国抗感染化疗杂志 2003年第6期3卷 328-331页

作者：李莉魏飞力冯鑫梅珊曹韵贞金侠北京新探健康发展研究中心 100061 北京市地坛医院中国医学科学院AIDS研究中心美国罗切斯特大学医学中心感染科

目的 :观察高效抗逆转录病毒治疗 (HARRT)治疗后HIV 1感染者体内自然杀伤T(NKT)细胞和免疫抑制性T细胞的变化。方法 :1 5例慢性HIV 1感染者 ,在治疗前后 ,定期采集外周血 ,并分离外周血血浆及单个核细胞 ,进行病毒载量及T淋巴细胞亚群... 详细信息

目的 :观察高效抗逆转录病毒治疗 (HARRT)治疗后HIV 1感染者体内自然杀伤T(NKT)细胞和免疫抑制性T细胞的变化。方法 :1 5例慢性HIV 1感染者 ,在治疗前后 ,定期采集外周血 ,并分离外周血血浆及单个核细胞 ,进行病毒载量及T淋巴细胞亚群的检测。结果 :治疗后NKT淋巴细胞数量增多 ,免疫抑制性T细胞数量降低。结论 :HARRT治疗不仅提高了CD4 +T细胞的数量。

关键词：高效抗逆转录病毒治疗自然杀伤T细胞抑制性T细胞免疫调节

基于网络药理学探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制

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世界科学技术-中医药现代化 2020年第4期22卷 1004-1010页

作者：魏飞力吴梦丽郭丽谢棒祥杜宇琼陈德喜刘晓霓首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所北京市肝炎与肝癌精准医疗及转化工程技术研究中心北京100069 首都医科大学中医药学院北京100069

目的探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制。方法首先通过检索中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选瑞香狼毒中的活性成分及其对应的靶蛋白分子,通过IPA软件数据库筛选晚期肝细胞癌相关分子。利用软件网络分析功能分别... 详细信息

目的探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制。方法首先通过检索中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选瑞香狼毒中的活性成分及其对应的靶蛋白分子,通过IPA软件数据库筛选晚期肝细胞癌相关分子。利用软件网络分析功能分别构建靶蛋白分子和晚期肝细胞癌相关分子的分子网络。通过软件比较功能,分析二者共同作用的生物学通路及作用位点。结果从中药瑞香狼毒中筛选出4个活性成分,其对应的靶蛋白共18个,从IPA软件中选出晚期肝细胞癌相关基因共40个。前者主要的分子网络功能是与组织损伤、机体异常及心血管疾病相关,后者的分子网络功能主要与癌症、消化道疾病及肝脏疾病相关分子有关,且各自有不同的信号通路富集。对比前5位共有的信号转导通路,发现PI3K/AKT信号通路是共有的重要信号通路之一。PI3KCG、HSP90、PTGS2是瑞香狼毒活性靶蛋白中调控PI3K/AKT信号通路的作用分子。结论本研究推测瑞香狼毒可能通过PI3KCG、HSP90、PTGS2调控PI3K/AKT信号通路,来抑制肿瘤血管生成,发挥抗肿瘤作用。

关键词：网络药理学瑞香狼毒晚期肝细胞癌分子机制 IPA

TRUGENE HIV-1基因型检测系统在HIV-1亚型分析中的应用

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世界感染杂志 2006年第3期6卷 193-195页

作者：高磊魏飞力陈谐捷蔡枫卢洪洲曹韵贞中国医学科学院中国协和医科大学艾滋病研究中心北京100730 广州第八人民医院感染科广州510060 上海市复旦大学附属公共卫生中心上海201508

目的利用TRUGENE HIV-1基因型检测系统对我国部分地区HIV感染者的血浆样本进行耐药性检测的同时进行HIV-1的亚型分析。方法采用TRUGENE HIV-1试剂盒扩增靶HIV-1序列即pol基因中长度分别为297bp的蛋白酶基因片段和621bp的逆转录酶基因片... 详细信息

目的利用TRUGENE HIV-1基因型检测系统对我国部分地区HIV感染者的血浆样本进行耐药性检测的同时进行HIV-1的亚型分析。方法采用TRUGENE HIV-1试剂盒扩增靶HIV-1序列即pol基因中长度分别为297bp的蛋白酶基因片段和621bp的逆转录酶基因片段，采用OpenGene DNA测序系统和数据分析软件进行测序和序列分析，利用HIV Database网站提供的HIV基因亚型分析软件对所得到的靶序列进行亚型分析。结果对165份标本的靶序列进行扩增和测序全部成功，采用蛋白酶基因片断和反转录酶基因片断进行亚型分析的结果非常吻合，165份标本亚型的分类与分布情况提示目前各类感染人群中的HIV-1毒株的亚型分布特点呈现出多样化和复杂性。另外，发现了一例国内尚未报道过的CRF09-cpx HIV-1的感染。结论TRUGENE HIV-l基因型检测系统可以成功的应用于HIV-1的亚型分析。

关键词： TRUGENE HIV-1 亚型序列分析 ADHK重组