检索结果-南通市图书馆

改造非磷酸转移酶葡萄糖转运途径强化解淀粉芽胞杆菌合成L-酪氨酸

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食品与发酵工业 2020年第15期46卷 27-31页

作者：季安营魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070

L-酪氨酸是一种重要的营养必需氨基酸,广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。非磷酸转移酶葡萄糖转运途径是细菌吸收转运葡萄糖的重要途径,对细菌的新陈代谢具有显著的影响。以解淀粉芽胞杆菌HZΔptsH为出发菌株,表达了不同物种来源的... 详细信息

L-酪氨酸是一种重要的营养必需氨基酸,广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。非磷酸转移酶葡萄糖转运途径是细菌吸收转运葡萄糖的重要途径,对细菌的新陈代谢具有显著的影响。以解淀粉芽胞杆菌HZΔptsH为出发菌株,表达了不同物种来源的葡萄糖转运蛋白编码基因,探究非磷酸转移酶葡萄糖转运途径基因对解淀粉芽胞杆菌合成L-酪氨酸的影响。摇瓶发酵结果表明,HZΔptsH强化表达自身来源葡萄糖转运蛋白编码基因glcP后,L-酪氨酸产量提高了22%,而表达大肠杆菌的galP基因和谷氨酸棒状杆菌的idolT 1基因对L-酪氨酸产量没有显著性的影响。研究证实,过表达解淀粉芽胞杆菌自身glcP基因是一种有效的L-酪氨酸强化策略,该研究为后续解淀粉芽胞杆菌合成L-酪氨酸的代谢工程育种提供了借鉴。

关键词： L-酪氨酸解淀粉芽胞杆菌非磷酸转移酶葡萄糖转运途径基因过表达代谢工程

降酸酵母的筛选及其在红树莓功能饮料中的应用

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食品与发酵工业 2020年第21期46卷 133-138页

作者：王冰倩魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070

红树莓浆果采摘后不易储存,鲜果直接食用口感极酸,采用降酸技术加工了一款红树莓功能饮料。筛选鉴定了3株红树莓降酸酵母:发酵毕赤酵母M-1(Pichia fermentans M-1)、美极梅奇酵母M-4(Metschnikowia pulcherrima M-4)和近玫红锁掷孢酵母M... 详细信息

红树莓浆果采摘后不易储存,鲜果直接食用口感极酸,采用降酸技术加工了一款红树莓功能饮料。筛选鉴定了3株红树莓降酸酵母:发酵毕赤酵母M-1(Pichia fermentans M-1)、美极梅奇酵母M-4(Metschnikowia pulcherrima M-4)和近玫红锁掷孢酵母M-5(Sporidiobolus pararoseus M-5)。通过测定有机酸、总酚、花色苷含量和抗氧化能力,对比分析了3株酵母发酵制备红树莓功能饮料的效果。其中,经美极梅奇酵母M-4发酵后,红树莓功能饮料pH为4.3,较未发酵红树莓果汁pH升高了1.2;柠檬酸、苹果酸、乳酸和草酸的含量分别为2303.67、395.99、6.48和47.40 mg/L,较未发酵红树莓果汁分别降低74%、35%、81%和6%;总酚含量达到505.33 mg/L,较未发酵红树莓果汁提高了84%,抗氧化活性显著提高。与其他发酵组相比,美极梅奇酵母M-4发酵组有机酸含量低,总酚含量高,DPPH自由基清除率高,更适宜发酵红树莓功能饮料。

关键词：降酸酵母红树莓功能饮料

耐盐地衣芽胞杆菌高产聚γ-谷氨酸的发酵工艺优化及环境压力冲击对发酵的影响

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耐盐地衣芽胞杆菌高产聚γ-谷氨酸的发酵工艺优化及环境压力冲击...

作者：魏雪团华中农业大学

学位级别：硕士

聚γ-谷氨酸(polyγ-glutamic acid,γ-PGA)是由微生物合成的一种胞外高分子粘性物质,是由L-和D-谷氨酸单体连接形成的同聚酰胺。γ-PGA可以广泛地应用于医药、食品、轻化工、环保和农业等领域。本研究以中国应城盐矿土样为筛选材料,... 详细信息

聚γ-谷氨酸(polyγ-glutamic acid,γ-PGA)是由微生物合成的一种胞外高分子粘性物质,是由L-和D-谷氨酸单体连接形成的同聚酰胺。γ-PGA可以广泛地应用于医药、食品、轻化工、环保和农业等领域。本研究以中国应城盐矿土样为筛选材料,获选到一株高产小分子量γ-PGA的耐盐性菌株WX-02。经过形态、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为地衣芽胞杆菌。研究了改良E培养基中不同氯化钠浓度对该菌株γ-PGA发酵的影响,发现该菌株合成γ-PGA是盐诱导型的,随着培养基中氯化钠浓度提高,γ-PGA产量增大,氯化钠浓度为8%时,γ-PGA产量达到最大值13.86 g/L;发酵液粘度同γ-PGA产量呈相同的变化趋势;γ-PGA的分子量随着盐浓度的提高而降低。WX-02是第一株被报道的高产γ-PGA的耐盐性地衣芽胞杆菌。以地衣芽胞杆菌WX-02为研究菌株,优化了发酵培养基成分和发酵条件,得到了优化的γ-PGA摇瓶发酵工艺。摇瓶发酵培养基成分(g/L):谷氨酸钠70,葡萄糖70,柠檬酸钠8,氯化铵8,MnSO·HO 0.01,MgSO·7HO 0.2,KHPO 0.8,ZnSO.7HO 0.2,CaCl·2HO 0.2;摇瓶发酵条件:发酵温度37℃,种龄12h,接种量3%,初始pH 7.0。在优化的摇瓶发酵工艺条件下,γ-PGA产量高达37.05g/L,谷氨酸钠表观转化率为53%。在3L发酵罐中,优化了搅拌转速和通气量。当搅拌转速为800r/min,通气量1.5 vvm,γ-PGA浓度达到39.59 g/L,谷氨酸钠表观转化率为57%。为提高谷氨酸钠的表观转化率,在发酵培养基中添加8%氯化钠的条件下,研究了谷氨酸钠含量对其自身表观转化率的影响,结果显示在谷氨酸钠含量为40g/L时,表观转化率最大,达到86%。在谷氨酸钠含量为40g/L时,不添加氯化钠的情况下,研究了氯化钾介导的渗透压冲击、热冲击和pH冲击处理对γ-PGA发酵的影响,优化了环境压力冲击处理条件。在优化的渗透压冲击处理条件(发酵第0小时,向培养基中添加3%的KCl),热冲击处理条件(50℃热处理发酵种子液15min)和pH冲击处理条件(发酵第0小时,调整发酵液pH至8.5)下,与对照相比,谷氨酸钠的表观转化率分别提高了106%,66%和133%,单位菌体γ-PGA产量(Y)分别提高了72%,44%和110%。当同时采用热冲击和pH冲击处理时,γ-PGA产量达到29.34g/L,谷氨酸钠表观转化率达到73%,与对照相比,提高了185%。本研究建立了通过环境压力冲击处理来提高γ-PGA产量的新方法,成本低且简单易行,可显著提高γ-PGA产量和谷氨酸钠的表观转化率。单位菌体γ-PGA合成量的增加,说明地衣芽胞杆菌增加γ-PGA的合成量是其对渗透压力、热压力和碱性压力的一种应激反应,γ-PGA可能是一种增强地衣芽胞杆菌对渗透压力、热压力和碱性压力抗性的抗逆保护剂。

关键词：聚γ-谷氨酸地衣芽胞杆菌耐盐性发酵优化环境压力

通过敲除解淀粉芽胞杆菌表面活性剂基因促进S-腺苷甲硫氨酸合成

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食品与发酵工业 2020年第11期46卷 17-22页

作者：姜聪郭爱玲魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070

S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM),可作为营养补充剂用于改善人体健康,对人体新陈代谢至关重要。在解淀粉芽胞杆菌从头合成SAM的过程中,脂肽类表面活性剂常导致能量损失、发酵起泡等问题,不利于SAM的积累。通过研究敲除解淀粉... 详细信息

S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM),可作为营养补充剂用于改善人体健康,对人体新陈代谢至关重要。在解淀粉芽胞杆菌从头合成SAM的过程中,脂肽类表面活性剂常导致能量损失、发酵起泡等问题,不利于SAM的积累。通过研究敲除解淀粉芽孢杆菌脂肽类表面活性剂合成基因ituD和srfAC,探究该类基因对SAM从头合成的影响。实验结果显示:单敲除ituD基因并未对菌体生长和SAM合成产生显著的影响,单敲除srfAC基因促进SAM产量提高了23%,对菌体生长影响不显著;叠加敲除ituD和srfAC后,SAM产量提高32%,且对菌体生长没有显著性影响。研究首次证实敲除脂肽类表面活性剂基因可显著提高SAM产量,研究结果为SAM的代谢工程育种提供了新策略。

关键词： S-腺苷甲硫氨酸解淀粉芽胞杆菌脂肽类表面活性剂基因敲除代谢工程

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纳豆激酶高产菌的快速筛选及其发酵纳豆特性

食品科学 2016年第21期37卷 131-135页

作者：刘梦洁陈守文魏雪团华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070

通过纤溶活性筛选法和纳豆激酶基因筛选法,快速、准确筛选到一株纳豆激酶高产菌株MJ-1,经16S r RNA基因序列分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌。以黄豆为原料进行固体发酵制备纳豆食品,考察了纳豆食品的纳豆激酶活力、抗凝活性和抗氧化... 详细信息

通过纤溶活性筛选法和纳豆激酶基因筛选法,快速、准确筛选到一株纳豆激酶高产菌株MJ-1,经16S r RNA基因序列分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌。以黄豆为原料进行固体发酵制备纳豆食品,考察了纳豆食品的纳豆激酶活力、抗凝活性和抗氧化活性。在初始含水量60%、发酵温度37℃的条件下,纳豆激酶发酵活力在20 h达到最大值(90.18 FU/g,以干质量计),达到了商业化纳豆的酶活力水平。抗凝活性分析显示该菌株可合成抗凝成分,赋予纳豆食品抗凝活性,在提取物质量浓度为3 mg/m L时,抗凝效率达91%。同时,与未发酵黄豆相比,发酵过程显著提高了其抗氧化活性。

关键词：纳豆激酶枯草芽孢杆菌基因筛选法抗凝活性抗氧化活性

解淀粉芽孢杆菌mtnN基因对其生物合成S-腺苷甲硫氨酸的影响

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食品科学 2020年第6期41卷 193-200页

作者：阮丽英温志友魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 爱荷华州立大学食品科学与人类营养系美国爱荷华州埃姆斯50013

为探索解淀粉芽孢杆菌中mtnN基因编码的S-腺苷高半胱氨酸核苷酶对S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成的影响,通过基因敲除技术和反义RNA抑制技术构建了针对mtnN基因的系列工程菌株。与出发菌株HZ-12相比,缺失mtnN基因的菌株... 详细信息

为探索解淀粉芽孢杆菌中mtnN基因编码的S-腺苷高半胱氨酸核苷酶对S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成的影响,通过基因敲除技术和反义RNA抑制技术构建了针对mtnN基因的系列工程菌株。与出发菌株HZ-12相比,缺失mtnN基因的菌株SAM产量和生物量分别下降了51%和26%,说明完全阻断该基因不利于菌体的生长和产物的合成。进一步通过反义RNA微调抑制mtnN基因的表达,与对照菌株HZ-12/pHY300相比,所构建的反义RNA工程菌HZ-12/pHY-mtnNasRNA-1、HZ-12/pHY-mtnNasRNA-2和HZ-12/pHYmtnNasRNA-3生物量没有显著性变化,且其SAM产量分别达到14.58、12.27 mg/L和12.49 mg/L,相比对照分别提高了44%、22%和24%。本研究不仅阐释了mtnN基因对SAM合成的影响规律,而且为SAM高产工程菌株的构建提供了新的思路。

关键词： S-腺苷甲硫氨酸解淀粉芽孢杆菌 S-腺苷高半胱氨酸核苷酶反义RNA 代谢工程

敲除srfAC基因对解淀粉芽胞杆菌抑菌性能的影响

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食品工业科技 2021年第5期42卷 100-104页

作者：何宇轩温志友魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 爱荷华州立大学食品科学与人类营养系爱荷华州埃姆斯50013

本实验为了探究表面活性素(Surfactin)对解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)抑制金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的影响,在*** HZ-12中敲除了Surfactin合成关键基因srfAC。结果显示,缺失菌*** HZ-12ΔsrfAC对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显提高,相对抑制率比对照菌提高了64%。对工程菌*** HZ-12ΔsrfAC的培养基碳氮源进行了优化,在玉米淀粉30 g/L和豆粕40 g/L的条件下,*** HZ-12ΔsrfAC的生物量达到3.3×10^(10) CFU/mL,是优化前的2.23倍。本研究首次证实敲除srfAC基因可明显提高***对***的抑制作用,并获得了高效培养*** HZ-12ΔsrfAC的培养基配方,具有重要的理论意义和潜在的应用价值。

关键词：解淀粉芽胞杆菌金黄色葡萄球菌抑菌活性基因敲除表面活性素

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烟草黑胫病生防菌的筛选、定殖及应用评价

应用与环境生物学报 2015年第4期21卷 672-677页

作者：曾衡徐迪红冀志霞陈守文魏雪团华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学工学院武汉430070 华中农业大学食品科技学院武汉430070

为有效防治烟草黑胫病,筛选了3株可高效拮抗烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica ***)的生防菌ZH、C9和C20,经生理生化和基因序列分析,3株菌都被鉴定为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).以ZH为代表性菌株进行定殖实验.结... 详细信息

为有效防治烟草黑胫病,筛选了3株可高效拮抗烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica ***)的生防菌ZH、C9和C20,经生理生化和基因序列分析,3株菌都被鉴定为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).以ZH为代表性菌株进行定殖实验.结果显示,解淀粉芽胞杆菌ZH在土壤和烟草植株体内都具有良好的定殖能力,123 d后根际土壤和根围土壤中生防菌的生物量分别达到9.07×106 CFU/g和1.2×107 CFU/g,烟草茎、叶内的生防菌生物量分别达到1.83×104CFU/g和5.58×104 CFU/g.以正常施用化学药剂的烟草为对照,以ZH、C9和C20混合菌剂进行生防菌大田应用试验.与对照相比,施用混合菌株发酵液不同时期的防效为85.37%-95.11%.同时,烟草的产量相比对照每公顷增产20.18%,每公顷增值31.27%.本研究提供了一种新型高效的烟草黑胫病生防菌及其大田应用方法,具有重要的应用价值.

关键词：烟草黑胫病生物防治解淀粉芽胞杆菌定殖

依托全国重点实验室培养微生物学一流创新人才的探索与实践

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微生物学通报 2024年第12期51卷 5249-5259页

作者：全拓魏雪团何进陈雯莉华中农业大学

微生物学是农业高校生物科学、生物技术、生物工程及其他涉农专业的重要专业基础课，主要讲授微生物及其生命活动规律。华中农业大学微生物学教学团队依托农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室，面向国家重大需求、聚焦农业微生物学... 详细信息

微生物学是农业高校生物科学、生物技术、生物工程及其他涉农专业的重要专业基础课，主要讲授微生物及其生命活动规律。华中农业大学微生物学教学团队依托农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室，面向国家重大需求、聚焦农业微生物学前沿领域，以高水平科学研究为支撑，在微生物学创新人才培养方面一直进行着探索与实践。在讲授微生物学课程前、后或过程中，任课教师同时作为全国重点实验室固定研究人员，将实验室科研优势、学科优势转化为一流育人资源，将课程讲授与科研训练相结合，指导学生在国家级科研平台接受规范化、系统性、前沿性的科研训练。同时，依托一流学科底蕴，培养学生的交叉思维；借助国际科技合作，拓展学生的全球视野；通过产教研学引领，强化学生的实践能力；弘扬科研文化精神，促进学生的全面发展。多措并举，微生物学教学团队科研育人成效显著，为生物产业和乡村振兴输送了大批微生物学相关领域的创新人才。

关键词：微生物学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室创新人才科研育人

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