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转录因子KLF4调控前列腺癌增殖及迁移的初步研究

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转录因子KLF4调控前列腺癌增殖及迁移的初步研究

作者：魏莲子上海交通大学

学位级别：硕士

目的:前列腺癌是全球范围内最常见的男性恶性肿瘤之一,严重威胁男性生命健康。在之前的研究工作中,我们发现miR-7靶向KLF4及KLF4/PI3K/p21通路,通过削弱前列腺癌干细胞的干性维持能力抑制前列腺癌细胞的增殖。作为重要的干性转录因子,... 详细信息

目的:前列腺癌是全球范围内最常见的男性恶性肿瘤之一,严重威胁男性生命健康。在之前的研究工作中,我们发现miR-7靶向KLF4及KLF4/PI3K/p21通路,通过削弱前列腺癌干细胞的干性维持能力抑制前列腺癌细胞的增殖。作为重要的干性转录因子,已发现KLF4能激活或抑制多种基因包括microRNA的转录。因此,结合我们之前的研究工作以及其他前人的研究,在本研究中我们试图探讨在前列腺癌细胞中KLF4是否以及如何调控miR-7的转录并以此调控前列腺癌的增殖及迁移。方法:在前列腺癌细胞系LNCaP中构建稳定敲降KLF4的亚克隆细胞系LNCaP-shKLF4,以及对照细胞系LNCaP-con;结合之前研究工作中已构建的PC3-shKLF4及对照PC3-con细胞系,通过实时荧光定量PCR、染色质免疫共沉淀(ChIP)实验、双荧光素酶报告系统检测稳定敲降KLF4对miR-7以及上皮间质转化相关基因表达的影响;通过细胞增殖实验、平板克隆、3D成球、细胞迁移实验在体外验证稳定敲降KLF4或过表达成熟miR-7模拟物对前列腺癌增殖及迁移的影响;通过免疫共沉淀验证过量入核的YAP是否通过与p72互作导致p72结合依赖的miR-7加工受阻。计数数据采用学生t检验,运用Prism GraphPad5软件进行统计分析和作图。P<0.05认为具有统计学意义。结果:通过本研究我们发现KLF4可以促进miR-7前体分子的转录,结合我们之前的研究结果miR-7在转录后水平上抑制KLF4的表达,表明KLF4与miR-7之间可实现环式互调控并在正常生理状态下实现两者表达的稳态。在前列腺癌细胞中,由于YAP过量入核,竞争性争夺pri-microRNA加工复合物Drosha/p72/DGCR8中的p72,干扰了p72结合依赖的miR-7加工,导致成熟的miR-7产量降低及KLF4过表达从而打破了KLF4-miR-7环式互调控的平衡。通过外源过表达p72可以重建Drosha/p72/DGCR8复合物恢复miR-7产量;此外,也可通过外源过表达成熟的miR-7模拟物规避受阻的加工过程,在体外抑制前列腺癌细胞的增殖。另一方面,稳定敲降KLF4同样可在体外抑制前列腺癌细胞的增殖并同时抑制上皮-间质转化及细胞迁移。结论:在前列腺癌细胞中由于KLF4-miR-7环式互调控平衡的破坏,导致KLF4的过表达及miR-7的表达抑制。稳定敲降KLF4表达或恢复miR-7表达可在体外有效抑制前列腺癌细胞的增殖及迁移。

关键词：前列腺癌 KLF4 miR-7 细胞增殖细胞迁移

下调转录因子KLF4抑制前列腺癌细胞上皮-间质转化及细胞迁移和侵袭

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肿瘤 2017年第5期37卷 466-473页

作者：魏莲子方煜翔高维强上海交通大学医学院附属仁济医院仁济-Med X临床干细胞研究中心上海200127

目的:探讨下调Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF 4)对前列腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:构建稳定敲降KLF 4的前列腺癌LNCaP-shKLF4细胞和对照组LNCaP-con细胞。应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测LNCaPshKLF4和LNCaP-con细胞中KLF4 mRNA和蛋白的表达,以及稳定敲降KLF 4的前列腺癌PC3-shKLF4细胞、对照组PC3-con细胞、LNCaPcon细胞和LNCaP-shKLF4细胞中EMT相关分子mRNA和蛋白的表达。Transwell小室法检测PC3-con、PC3-shKLF4、LNCaP-con和LNCaPshKLF4细胞的迁移及侵袭能力。结果:成功构建LNCaP-shKLF4和对照组LNCaP-con细胞。LNCaPshKLF4细胞中KLF4 mRNA及蛋白表达水平均低于对照组LNCaP-con细胞(P<0.01,P<0.05)。PC3-shKLF4和LNCaP-shKLF4细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)mRNA的表达水平分别高于对照组的PC3-con和LNCaP-con细胞(P值均<0.01),而PC3-shKLF4和LNCaPshKLF4细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)、锌指E-盒结合同源异体框1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1,Zeb1)、Snail1、波形蛋白(vimentin,Vim)和基质金属蛋白酶1(matrix metallopeptidase 1,MMP1)mRNA的表达水平均分别低于对照组的PC3-con和LNCaP-con细胞(P值均<0.05)。PC3-shKLF4和LNCaP-shKLF4细胞中E-cad的表达水平分别高于对照组的PC3-con和LNCaP-con细胞(P值均<0.05),而PC3-shKLF4和LNCaP-shKLF4细胞中N-cad、Zeb1、Snail1、Vim和MMP1蛋白的表达水平均分别低于对照组的PC3-con和LNCaP-con细胞(P值均<0.05)。PC3-shKLF4和LNCaP-shKLF4细胞的迁移和侵袭能力均分别低于对照组PC3-con和LNCaP-con细胞(P<0.01,P<0.05)。结论:下调前列腺癌细胞中KLF4表达可促进上皮相关基因的表达,抑制间质相关基因的表达,从而在体外抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭。

关键词：前列腺肿瘤上皮-间质转化细胞迁移分析肿瘤侵润 KLF4基因

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浅谈大众媒体的社会责任

新闻世界 2013年第8期 82-83页

作者：魏莲子安徽广播电视台经济生活频道

在市场经济浪潮的冲击下，不少媒体迷失了方向，忘记自身的责任与担当。大众媒体应分析面临的问题，自觉发挥社会功能，承担应有的社会责任。

关键词：大众传媒社会责任社会功能

微RNA-378促进肾癌细胞增殖和迁移及其机制研究

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肿瘤 2018年第7期38卷 643-651页

作者：安娜王晓周培杰魏莲子方煜翔高维强上海交通大学医学院附属仁济医院临床干细胞研究中心上海200217

目的 :探讨微RNA-378(micro RNA-378,mi R-378)对肾癌细胞体外增殖和迁移能力的影响,以及其可能的作用机制。方法 :利用TCGA(e Cancer Genome Atlas)数据库分析肾癌和正常肾上皮组织中mi R-378的表达情况。采用实时荧光定量PCR法检测人... 详细信息

目的 :探讨微RNA-378(micro RNA-378,mi R-378)对肾癌细胞体外增殖和迁移能力的影响,以及其可能的作用机制。方法 :利用TCGA(e Cancer Genome Atlas)数据库分析肾癌和正常肾上皮组织中mi R-378的表达情况。采用实时荧光定量PCR法检测人肾癌细胞系786-O、ACHN、769-P和Caki-1,以及人肾小管上皮细胞系HK2中mi R-378的表达情况。人工合成mi R-378模拟物(mimic)和抑制子(inhibitor),并将它们分别转染肾癌786-O和Caki-1细胞,然后分别采用CCK-8法、Transwell小室法和划痕愈合实验检测mi R-378对肾癌细胞增殖和迁移的影响。通过生物信息学方法分析mi R-378的靶基因,并采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法进行验证。结果 :肾癌组织和肾癌细胞系中mi R-378表达均明显上调(P值均<0.001)。mi R-378 mimic转染后,肾癌786-O细胞的体外增殖(P<0.01)和迁移(P<0.001)能力均明显增强;而mi R-378 inhibitor转染后,肾癌Caki-1细胞的体外增殖(P<0.01)和迁移(P<0.001)能力均明显减弱。肾癌中mi R-378的靶基因可能是大型肿瘤抑制因子2(large tumor suppressor 2,LATS 2),肾癌786-O和Caki-1细胞中LATS2 m RNA和蛋白表达水平与mi R-378水平均负相关(P值均<0.01)。结论 :mi R-378过表达可增强人肾癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能与负调控LATS2表达有关。

关键词：癌,肾细胞微RNAs 基因表达调控细胞增殖细胞迁移分析 miR-378 大型肿瘤抑制因子2

DEB-TACE联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期肝癌的临床疗效及对肿瘤标志物和T淋巴细胞亚群的影响

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现代生物医学进展 2023年第18期23卷 3596-3600页

作者：杨晶张庆桥魏宁崔艳峰许伟徐浩魏莲子徐州医科大学附属医院介入放射科江苏徐州221006 徐州医科大学附属医院介入肿瘤科江苏徐州221006

目的:探讨载药微球-肝动脉化疗栓塞术(DEB-TACE)联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期肝癌的临床疗效及对肿瘤标志物和T淋巴细胞亚群的影响。方法:采用随机数字表法,将徐州医科大学附属医院于2019年7月-2020年7月期间收治的80例中晚期肝癌患者分... 详细信息

目的:探讨载药微球-肝动脉化疗栓塞术(DEB-TACE)联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期肝癌的临床疗效及对肿瘤标志物和T淋巴细胞亚群的影响。方法:采用随机数字表法,将徐州医科大学附属医院于2019年7月-2020年7月期间收治的80例中晚期肝癌患者分为对照组(DEB-TACE治疗,n=40)和研究组(对照组的基础上接受经肝动脉灌注卡瑞利珠单抗治疗,n=40)。对比两组疗效、血清肿瘤标志物、T淋巴细胞亚群指标的变化情况和总生存期(OS)、无进展生存期(PFS),并观察两组不良反发生情况。结果:研究组的客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)均高于对照组(P0.05)。结论:DEB-TACE联合经肝动脉灌注卡瑞利珠单抗治疗中晚期肝癌,可改善免疫功能,降低血清肿瘤标志物水平,安全有效。

关键词：载药微球-肝动脉化疗栓塞术卡瑞利珠单抗中晚期肝癌疗效肿瘤标志物 T淋巴细胞亚群动脉灌注

基于Multitask⁃YOLO网络的卫星帆板ISAR图像快速分割

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Transactions of Nanjing University of Aeronautics and Astronautics 2024年第2期41卷 253-262页

作者：姚雨晴汪玲王莲子张弓吴斌朱岱寅南京航空航天大学电子信息工程学院雷达成像与微波光子技术教育部重点实验室中国南京211106 上海宇航系统工程研究所中国上海201109

随着空间技术的飞速发展,空间态势感知能力需求不断增加。与传统光学传感器相比,逆合成孔径雷达(Inverse synthetic aperture radar,ISAR)具有全天候、远距离高分辨率成像的能力,且成像不受光照条件的影响。此外,空间态势感知系统需要... 详细信息

随着空间技术的飞速发展,空间态势感知能力需求不断增加。与传统光学传感器相比,逆合成孔径雷达(Inverse synthetic aperture radar,ISAR)具有全天候、远距离高分辨率成像的能力,且成像不受光照条件的影响。此外,空间态势感知系统需要对周围航天器进行准确的评估,因此对空间目标部件识别能力的需求日益迫切。本文提出了一种基于YOLOv5结构的Multitask⁃YOLO网络,用于卫星ISAR图像中卫星帆板的识别和分割。首先,本文添加了分割解耦头来实现网络的分割功能。然后用空间金字塔池快速算法(Spatial pyramid pooling fast,SPPF)和距离交并比算法(Distance intersection over union,DIoU)代替原有结构,避免图像失真,加快收敛速度。通过在通道中引入注意机制,提高了分割和识别的准确性。最后使用模拟卫星的ISAR图像进行实验。结果表明,所提出的Multitask⁃YOLO网络高效、准确地实现了部件的识别和分割。与其他的识别和分割网络相比,该网络的平均精度(mean Average precision,mAP)和平均交并比(mean Intersection over union,mIoU)提高了约5%。此外,该网络的运行速度高达16.4 GFLOP,优于传统的多任务网络的性能。

关键词： Multitask⁃YOLO 空间目标逆合成孔径雷达图像目标识别与分割

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中间产品来源地进口多样化与中国企业创新

经济学报 2024年第1期11卷 49-76页

作者：何欢浪古莲子毛健上海对外经贸大学国际经贸学院北京师范大学经济与工商管理学院

在扩大进口战略和“卡脖子”背景下,本文使用2000—2013年中国工业企业数据库、国家专利数据库和中国海关进出口贸易数据库构建了核心中间产品来源地的进口多样化指标,研究其对企业创新的影响。经验研究发现:(1)核心中间产品进口来源地... 详细信息

在扩大进口战略和“卡脖子”背景下,本文使用2000—2013年中国工业企业数据库、国家专利数据库和中国海关进出口贸易数据库构建了核心中间产品来源地的进口多样化指标,研究其对企业创新的影响。经验研究发现:(1)核心中间产品进口来源地多样化对企业专利总数存在显著的促进作用,核心中间产品进口来源国越分散,越能促进企业创新,当其他条件不变时,核心中间产品进口来源地数量每增加1个,企业专利总数将提高0.92个百分点。(2)从机制检验的回归结果来看,进口来源地多样化通过成本下降效应和技术溢出效应两个方面显著地提升企业创新水平。(3)从异质性回归结果来看,核心中间产品进口来源地多样化对混合贸易的企业、东部地区企业、中高技术产业、从发达国家进口的企业创新激励效应更为明显。在扩大进口战略背景下,本文认为中国企业可以尽可能多样化地进行核心中间产品的全球采购,一方面可以分散“卡脖子”的风险,另一方面也可以提升企业的创新水平,推动我国经济高质量发展。

关键词：核心中间产品来源地进口多样化企业创新

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长白山林区病虫害产生的原因及防治策略

中文科技期刊数据库（全文版）农业科学 2024年第8期 0181-0184页

作者：保莲子青海森众生态科技有限公司青海西宁810000

最近这些年来,随着气候变化的影响及生物多样性遭受破坏,森林病虫害问题的严重性呈现出显著的增长趋势。这些病虫害事件不仅对森林的结构和健康产生了负面影响,破坏了森林生态系统的整体功能,而且还会对森林资源造成一定程度的流失。因... 详细信息

最近这些年来,随着气候变化的影响及生物多样性遭受破坏,森林病虫害问题的严重性呈现出显著的增长趋势。这些病虫害事件不仅对森林的结构和健康产生了负面影响,破坏了森林生态系统的整体功能,而且还会对森林资源造成一定程度的流失。因此,摸清林区病虫害产生的原因并采取针对性的防治策略显得尤为重要。本文以长白山林区为例,分析长白山林区病虫害产生的主要原因,提出相应的病虫害防治策略,以期为林业病虫害防治工作提供借鉴和参考依据。

关键词：长白山林区病虫害防治策略

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松筋柔脊十二法的美学特征研究

产业与科技论坛 2024年第1期23卷 104-106页

作者：叶莲子内江师范学院体育学院

松筋柔脊十二法动作舒缓优美,刚柔相济,蕴含着具有中国特色的传统体育美学价值。本研究采用文献资料法、逻辑分析法、比较分析法,对松筋柔脊十二法的美学特征、美学价值和美学思想进行研究。经过研究发现,松筋柔脊十二法具有深厚的美学... 详细信息

松筋柔脊十二法动作舒缓优美,刚柔相济,蕴含着具有中国特色的传统体育美学价值。本研究采用文献资料法、逻辑分析法、比较分析法,对松筋柔脊十二法的美学特征、美学价值和美学思想进行研究。经过研究发现,松筋柔脊十二法具有深厚的美学思想,具有名称取义美、形体姿态美、动作表现美、音乐韵律美、服装造型美等美学特征;此外,还具有促进美育发展、提高道德修养和审美能力、提升精神境界等美学价值。

关键词：松筋柔脊十二法美学特征美学价值美学思想