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G6PDH调控的活性氧代谢在苯并噻重氮诱导苹果果实抗青霉病中的作用机理

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G6PDH调控的活性氧代谢在苯并噻重氮诱导苹果果实抗青霉病中的作...

作者：魏美林渤海大学

学位级别：硕士

本文以“金冠”苹果果实为材料,采后用苯并噻重氮(ASM)浸泡处理和不同浓度葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)阻断剂脱氢异雄酮(DHEA)处理,研究常温贮藏期间损伤接种扩展青霉(Penicillium expansum)后果实病斑扩展、G6PDH活性及基因表达、活性... 详细信息

本文以“金冠”苹果果实为材料,采后用苯并噻重氮(ASM)浸泡处理和不同浓度葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)阻断剂脱氢异雄酮(DHEA)处理,研究常温贮藏期间损伤接种扩展青霉(Penicillium expansum)后果实病斑扩展、G6PDH活性及基因表达、活性氧(ROS)代谢以及品质指标的变化,主要结果如下:1.与对照相比,100 mg/L ASM处理显著抑制了苹果果实损伤接种P.expansum病斑的扩展,50μM DHEA结合ASM处理果实病斑扩展与单独ASM处理没有显著性差异,而100μM、200μM、400μM DHEA结合ASM处理均促进了果实病斑的扩展,其中以100μM DHEA处理对病斑直径扩展的促进作用最显著。2.ASM处理提高了苹果果肉和果皮中HO含量、NOX和SOD活性,并且上调了MdSOD基因表达。ASM+DHEA处理降低了贮藏前期果肉中HO积累,减少了果皮中HO含量,抑制果肉和果皮中NOX和SOD活性,并抑制MdSOD基因表达。3.ASM处理抑制了果肉中CAT活性,促进了果皮中CAT活性,提高了果肉和果皮中POD、GR、APX、MDHAR和DHAR活性,上调了MdAPX和MdDHAR基因表达,下调MdMDHAR基因表达,促进抗氧化物质AsA和GSH积累。ASM+DHEA处理消除了ASM对果肉中CAT活性的抑制,抑制了果皮中CAT活性,降低果肉和果皮中POD、GR、APX、MDHAR和DHAR活性及MdAPX基因表达,下调了果肉中MdDHAR基因表达,以及贮藏第8 d和第10 d果皮中MdDHAR基因表达。ASM+DHEA上调了果肉中MdMDHAR基因表达,但是进一步下调了果皮中MdMDHAR基因表达,使AsA和GSH含量维持在较低水平。4.ASM处理提高了果肉和果皮中G6PDH活性和NADPH含量,上调了果肉中MdG6PDH3、MdG6PDH4、MdG6PDH6基因表达以及果皮中MdG6PDH4在第4、6、10 d的表达,下调了果皮中MdG6PDH6表达。ASM+DHEA处理降低果肉和果皮中G6PDH活性和NADPH含量,上调果肉中MdG6PDH3和MdG6PDH6表达以及贮藏早期MdG6PDH4表达。与ASM处理相比,ASM+DHEA处理上调果皮中MdG6PDH6表达,下调第2、8、10 d果皮中MdG6PDH3表达。5.免疫荧光染色结果表明,贮藏第6 d,ASM处理显著促进了果肉细胞中G6PDH蛋白的积累,而ASM+DHEA处理降低了果肉细胞中G6PDH蛋白的积累。6.ASM处理对果实失重率的变化没有显著影响,但延缓了果肉硬度下降、抑制了呼吸强度和乙烯释放,降低可滴定酸(TA)积累,提高了果肉可溶性固形物(TSS)含量。ASM+DHEA处理延缓了果实失重率的增加,但是加快了果实硬度下降、提高TA含量、降低了TSS含量,促进呼吸强度和乙烯释放,并提前了呼吸高峰和乙烯高峰的出现。综上所述,ASM处理提高了MdG6PDH基因表达,增强了G6PDH活性和蛋白质积累,提高了NADPH含量,激活ROS代谢,提高了果实对青霉病的抗性,并保持较好的果实品质。而ASM+DHEA处理降低G6PDH蛋白积累和酶活性,抑制NADPH积累,抑制ROS代谢,降低果实对青霉病的抗性,并改变果实部分品质。由此说明,G6PDH调控的ROS代谢在ASM诱导苹果果实抗青霉病中具有重要作用。

关键词：苹果苯并噻重氮葡萄糖-6-磷酸脱氢酶诱导抗性活性氧

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Gata6在胰岛素瘤中的作用及机制研究

Gata6在胰岛素瘤中的作用及机制研究

作者：魏美林上海交通大学

学位级别：硕士

目的:胰岛素瘤是一类低增殖率肿瘤,发病比较罕见,对其发病机制了解甚少。近来研究发现Gata6在调控胰岛细胞的分化的过程中发挥重要作用,亦参与体内一些肿瘤的形成。目前关于Gata6在胰岛素瘤中表达及作用未见报道,本实验拟探讨Gata6在胰... 详细信息

目的:胰岛素瘤是一类低增殖率肿瘤,发病比较罕见,对其发病机制了解甚少。近来研究发现Gata6在调控胰岛细胞的分化的过程中发挥重要作用,亦参与体内一些肿瘤的形成。目前关于Gata6在胰岛素瘤中表达及作用未见报道,本实验拟探讨Gata6在胰岛素瘤中的表达及作用机制。方法:通过RT-PCR及Western-blot技术检测Gata6在胰岛素瘤组织瘤体及瘤旁的表达差异;利用免疫荧光技术检测Gata6在胰岛素瘤及正常胰腺切片中的表达及定位。转染Si RNA干扰Min6细胞Gata6表达后流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化,同时利用荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS变化。Gata6质粒过表达后流式细胞仪检测细胞周期变化及Brd U免疫组化观察Min6细胞的增殖。棕榈酸对待Min6细胞,观察细胞活力变化、细胞凋亡、ROS变化以及Gata6表达变化,过表达Gata6后棕榈酸对待,观察ROS、Bcl-2及Bax变化。结果:1)Gata6在小鼠胰岛素瘤细胞系Min6细胞、大鼠胰岛素瘤细胞系INS-1细胞以及人胰岛素瘤中均存在表达,Gata6在胰岛素瘤瘤体组织表达较瘤旁组织表达显著增高,具有统计学差异(p<0.05)。2)Gata6免疫荧光显示,胰岛素瘤瘤体正常胰岛结构丧失,Gata6主要在定位于细胞核中,在胰岛素瘤中大量表达。3)si RNA干扰Gata6表达后,细胞凋亡较对照组显著增加,具有统计学差异(p<0.01);细胞周期分析显示处在S期细胞比例减少(p<0.01),提示沉默Gata6表达后对细胞的增殖起一定的抑制的作用。4)过表达Gata6对Min6细胞的细胞周期及增殖无明显的影响。5)500u M棕榈酸对待Min6细胞24h导致Gata6表达较对照组显著下降(P<0.01),可引起细胞内ROS产生增加(p<0.05)。6)si RNA干扰Gata6表达导致细胞ROS产生增加(p<0.01),过表达Gata6可减少PA诱导的ROS的产生(p<0.05)。7)棕榈酸对待Min6细胞导致Bcl-2表达减少,Bax表达增加,且Bcl-2/Bax比值减少,差异具有统计学意义(P<0.05);过表达Gata6后使PA诱导的Bax减少(p<0.05),Bcl-2/Bax比值增加,且差异具有统计学意义(p<0.05),提示过表达Gata6后可一定程度改善PA导致的细胞凋亡。结论:Gata6在胰岛素瘤中高表达,通过减少ROS的产生及胰岛素瘤细胞的凋亡,可能在胰岛素瘤发病机制中发挥重要的作用。

关键词：胰岛素瘤 Gata6 ROS 凋亡

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刑事诉讼司法解释方法论构建要素论析

湘潭大学学报（哲学社会科学版） 2024年第1期48卷 51-57页

作者：原美林山西大学法学院山西太原030006 中国政法大学刑事司法学院北京100088

刑事诉讼司法解释方法论是在刑事诉讼司法解释制定过程中,为确保司法解释的规范性与稳定性而构建的一种系统的方法理论,它关系到刑事诉讼法能否得到遵守。刑事诉讼司法解释方法论的构建要素可以为司法解释的制定和实施提供指导和规范。... 详细信息

刑事诉讼司法解释方法论是在刑事诉讼司法解释制定过程中,为确保司法解释的规范性与稳定性而构建的一种系统的方法理论,它关系到刑事诉讼法能否得到遵守。刑事诉讼司法解释方法论的构建要素可以为司法解释的制定和实施提供指导和规范。这些要素中,司法解释理念决定司法解释的基本方向和思维方式;司法解释目标是司法解释活动的目的和追求的结果;司法解释原则是在司法解释理念的指导下具体操作的准则;司法解释程序是实现司法解释目标的具体操作过程;法律论证是司法解释程序中确保司法解释严密性和科学性的重要环节。这五大构建要素提高了司法解释的质量和水平,增强了刑事诉讼法的可预测性和可操作性。

关键词：刑事诉讼司法解释方法论构建要素

乡村振兴路上的“领头雁”——记“全国优秀共产党员”、江苏省东台市五烈镇甘港村党委书记刘怀仁

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党建 2024年第6期 59-61页

作者：陈美林江苏省东台市融媒体中心

初夏时节,沿着新204国道一路向北,在江苏省东台市五烈镇的东北角,一座园林式的乡村呈现在眼前。树绕村庄,水满陂塘;目之所及,和谐安逸。这就是远近闻名的甘港村,也是“全国优秀共产党员”、“全国劳动模范”、甘港村党委书记刘怀仁扎根... 详细信息

初夏时节,沿着新204国道一路向北,在江苏省东台市五烈镇的东北角,一座园林式的乡村呈现在眼前。树绕村庄,水满陂塘;目之所及,和谐安逸。这就是远近闻名的甘港村,也是“全国优秀共产党员”、“全国劳动模范”、甘港村党委书记刘怀仁扎根奋斗了30多年的“根据地”。从曾经负债累累的小村庄,到如今成为中国美丽休闲乡村、全国文明村,30多年来,刘怀仁用忠诚、奉献、坚守与担当,向党和人民交出了一份合格答卷。“我想为乡亲们做点事”每一天,在村里走走,和乡亲们聊聊天,成为刘怀仁的习惯。

关键词：全国文明村村党委书记乡村振兴合格答卷东台市五烈镇怀仁领头雁根据地

宋代仕女画中的屏风空间关系及对个人创作影响

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宋代仕女画中的屏风空间关系及对个人创作影响

作者：侯美林山东师范大学

学位级别：硕士

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胰岛素样肽5及其受体的研究进展

上海医学 2014年第9期37卷 816-819页

作者：毛月芹魏美林魏丽苏州大学医学部江苏苏州215006 上海市第六人民医院东院上海交通大学上海市第六人民医院内分泌科

胰岛素样肽（INSL）5是胰岛素（INS）超家族的成员,1999年首次由Conklin等[1]在研究INS超家族成员B链的半胱氨酸序列时,通过搜索表达序列标签（EST）数据库时发现。2003年Liu在人类基因组数据库中发现一个激素受体,命名为GPR100,最初将... 详细信息

胰岛素样肽（INSL）5是胰岛素（INS）超家族的成员,1999年首次由Conklin等[1]在研究INS超家族成员B链的半胱氨酸序列时,通过搜索表达序列标签（EST）数据库时发现。2003年Liu在人类基因组数据库中发现一个激素受体,命名为GPR100,最初将其描述为缓激肽受体[2]。2005年的研究[3]发现,其为INSL5的受体,重命名为RXFP4,也称为G蛋白耦联受体142（GPCR142）。本综述对INSL5及其受体RXFP4的基因、结构、表达和功能等进行介绍。

关键词：基因组数据库受体结合超家族缓激肽受体激素受体表达序列标签耦联神经内分泌功能氨基酸组成葡萄糖耐量试验

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早发性结直肠癌的多组学研究进展

中华胃肠外科杂志 2024年第5期27卷 447-451页

作者：陈思璐辛俊逸杜牧龙王美林南京医科大学公共卫生学院南京211166

全球范围内,50岁以下的早发性结直肠癌(EOCRC)的发病率不断上升。与晚发性结直肠癌相比,EOCRC具有不同的临床、病理和分子特征,且多发于左半结肠和直肠。然而,EOCRC的发生、发展是一个多因素、多阶段的演变过程,是环境、遗传和生物等因... 详细信息

全球范围内,50岁以下的早发性结直肠癌(EOCRC)的发病率不断上升。与晚发性结直肠癌相比,EOCRC具有不同的临床、病理和分子特征,且多发于左半结肠和直肠。然而,EOCRC的发生、发展是一个多因素、多阶段的演变过程,是环境、遗传和生物等因素共同作用的结果,涉及生命体多层次的调控机制。近年来,随着高通量测序技术的快速发展和完善,利用多层次多组学技术的整合分析已经成为解析复杂疾病发病机制和个体化治疗方案的重要发展方向。本文将对EOCRC在多组学层面的研究进行综述,以期为结直肠癌的早期诊断和精准治疗提供重要科学依据。

关键词：结直肠肿瘤,早发性多组学研究整合分析

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胰岛素瘤分子遗传学研究进展

中华医学杂志 2013年第28期93卷 2250-2252页

作者：魏美林肖元元韩俊峰魏丽上海交通大学医学院附属第六人民医院内分泌代谢科上海市糖尿病研究所 200233

胰岛素瘤是最常见的胰腺内分泌肿瘤，占后者总数的70％～75％，发生率为4／100万；多发于40-50岁的青壮年，男：女为2：1；绝大多数为良性，恶性比例仅为4％～16％。病理表现为胰岛B细胞形成的腺瘤或癌（少数为增生），南于胰岛素不适... 详细信息

胰岛素瘤是最常见的胰腺内分泌肿瘤，占后者总数的70％～75％，发生率为4／100万；多发于40-50岁的青壮年，男：女为2：1；绝大多数为良性，恶性比例仅为4％～16％。病理表现为胰岛B细胞形成的腺瘤或癌（少数为增生），南于胰岛素不适当的分泌，临床上常导致患者反复发作低血糖，部分伴有神经精神表现。手术切除肿瘤是性一的根治性治疗方法、“。虽然目前对胰岛素瘤的发病机制尚不明确，但随着基因芯片技术、甲基化特异性PCR、荧光原位杂交（FISH）等技术广泛应用，一些与胰岛素瘤相关的基因突变、

关键词：胰岛素瘤分子遗传学胰腺内分泌肿瘤甲基化特异性PCR 神经精神表现基因芯片技术荧光原位杂交细胞形成

负载槲皮素的羧甲基壳聚糖水凝胶促进糖尿病大鼠创面愈合

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中国组织工程研究 2024年

作者：董美林都海宇刘源连云港市第二人民医院(南京医科大学康达学院附属医院)烧伤整形科

背景：槲皮素具有抗炎、抗癌、抗氧化、抗衰老、抗抑郁等药理作用，具有极高的药用价值。槲皮素可以促进正常大鼠创面的愈合，但是以槲皮素为主要成分的药物研发较少，限制了其在临床的广泛应用。目的：以水凝胶材料负载槲皮素，探讨槲... 详细信息

背景：槲皮素具有抗炎、抗癌、抗氧化、抗衰老、抗抑郁等药理作用，具有极高的药用价值。槲皮素可以促进正常大鼠创面的愈合，但是以槲皮素为主要成分的药物研发较少，限制了其在临床的广泛应用。目的：以水凝胶材料负载槲皮素，探讨槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶在糖尿病大鼠创面中的应用效果。方法：(1)分别制备羧甲基壳聚糖水凝胶与槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶，表征水凝胶的微观形貌、体外释药性能。(2)细胞实验：将小鼠L929成纤维细胞分4组培养，空白对照组常规培养，纯水凝胶组、药物组、载药水凝胶组分别加入羧甲基壳聚糖水凝胶、槲皮素溶液与槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶，检测细胞增殖与迁移能力。(3)动物实验：取80只SD大鼠建立糖尿病模型，造模成功后在大鼠背部制作直径2 cm的全层皮肤缺损创面，随机分4组干预，空白对照组、纯水凝胶组、药物组、载药水凝胶组创面分别注射生理盐水、羧甲基壳聚糖水凝胶、槲皮素溶液、槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶，每组20只，无菌纱布包扎固定。术后观察创面愈合情况、创面病理形态、炎症因子表达及血管生成情况。结果与结论：(1)扫描电镜下可见两种水凝胶的微观形貌相似，均呈疏松多孔的网络结构，并且槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶具有良好的体外释药性能。(2)与空白对照组比较，其他3组细胞增殖与迁移率升高(P <0.05)；载药水凝胶组细胞增殖与迁移率高于纯水凝胶组、药物组(P <0.05)。(3)载药水凝胶组大鼠术后5,11 d的创面愈合率高于其他3组；载药水凝胶组、纯水凝胶组、药物组大鼠术后18 d的创面愈合率基本达到100%，均高于空白对照组(P <0.05)。苏木精-伊红染色显示，载药水凝胶组大鼠术后18 d创面可见完整的皮肤与皮肤附属器，空白对照组、纯水凝胶组、药物组大鼠术后25 d创面可见完整的皮肤与皮肤附属器。载药水凝胶组大鼠创面术后5,11,18 d的创面肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平均低于空白对照组(P <0.05)，术后11,18 d的创面转化生长因子β1水平低于空白对照组(P <0.05)。载药水凝胶组大鼠术后11,18 d的CD31、血管内皮生长因子α mRNA表达量均高于其他3组(P <0.05)。(4)结果表明，槲皮素-羧甲基壳聚糖水凝胶中的槲皮素可发挥调节炎症反应、促进血管新生的作用，可通过促进成纤维细胞的增殖与迁移，促进糖尿病大鼠创面的愈合。

关键词：创面愈合槲皮素敷料水凝胶糖尿病创面羧甲基壳聚糖皮肤创面成纤维细胞